21 dkk, 2007. Diagram alir pembuatan minuman sinbiotik ekstrak cincau hijau
dengan kombinasi sari buah jambu biji dan sari buah nanas dapat dilihat pada Gambar 6. Sebanyak 2 bv susu skim ditambah ekstrak cincau hijau sebanyak
0,5 bv, dilakukan penambahan sari buah jambu biji dan sari buah nanas ke dalam masing-masing fermentor dengan konsentrasi 0, 5, 10, 15, 20 bv,
selanjutnya dilakukan penambahan aquades hingga volumenya menjadi 120 ml kemudian campuran ini diaduk hingga rata menggunakan spatula kaca selama 30
detik, kemudian dipasteurisasi 76
o
C selama 15 menit, selanjutnya didinginkan hingga suhu 37
o
C. Kultur kerja Lactobacillus casei diinokulasi sebanyak 4 vv dan diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37
o
C selama 48 jam.
2. Penelitian Tahap II
Pengujian in vivo menggunakan mencit Mus musculus L. jantan umur 2 sampai
3 bulan dengan berat rata-rata 20 g sampai 30 g. Mencit yang digunakan untuk uji in vivo diperoleh dari Balai Penyidik dan Pengujian Veteriner BPPV Regional
III Bandar Lampung. Pakan mencit berupa pellet ayam diperoleh dari CV. Sanusi Taufik Bandar Lampung. Sedangkan air minum yang diberikan adalah air
mineral merk Aqua. Sebelum diberi perlakuan, mencit diadaptasi selama 7 hari pada kandang percobaan dengan diberi pakan pellet ayam dan air minum secara
ad libitum agar dapat menyesuaikan diri dengan lingkungannya. Setelah 7 hari adaptasi, dilakukan penimbangan berat badan mencit, selanjutnya mencit dibagi
dalam 3 kelompok yaitu kelompok 1 kontrol Aquades, kelompok II minuman sinbiotik ekstrak cincau hijau, dan kelompok 3 minuman sinbiotik ekstrak cincau
hijau yang dikombinasikan sari buah dengan aktivitas antioksidan tertinggi.
22 Dosis anjuran untuk susu fermentasi bagi manusia dengan berat badan 70 kg yaitu
sekitar 100-200 mlhari Riyanto, 2011, serta berdasarkan anjuran konsumsi minuman probiotik komersial yaitu 100 ml per orang per hari. Konversi berat
badan mencit 20 g dengan berat badan manusia 70 kg adalah 0,0026 Amalina, 2009 seperti disajikan pada Tabel 5. Berdasarkan tabel konversi, contoh
perhitungan untuk penentuan dosis minuman sinbiotik ekstrak cincau hijau pada mencit, dosis anjuran untuk susu fermentasi bagi manusia dengan berat badan 70
kg yaitu sekitar 100-200 mlhari, bila dikonversi ke mencit dengan berat badan 20 gram adalah sebagai berikut : 0,0026 x 100 ml aquades = 0,26 ml aquades, 0,0026
x 100 ml minuman sinbiotik ekstrak cincau hijau = 0,26 ml minuman sinbiotik ekstrak cincau hijau. 0,0026 x 100 ml minuman sinbiotik ekstrak cincau hijau
dengan penambahan sari buah = 0,26 ml minuman sinbiotik ekstrak cincau hijau dengan penambahan sari buah. Dosis perlakuan yang diberikan pada mencit
dikonversi sesuai berat badan mencit setiap harinya. Uji status antioksidan hati menggunakan 27 ekor mencit, masing-masing
kelompok terdiri dari 9 ekor mencit. Aquades, minuman sinbiotik ekstrak daun cincau hijau, dan minuman sinbiotik ekstrak cincau hijau yang dikombinasikan
sari buah dengan aktivitas tertinggi yang telah didapat berdasarkan tahap I, diberikan secara oral dengan menggunakan spuit volume 1 ml yang ditumpulkan
sebagai alat perlakuan secara oral pada mencit sesuai dengan dosis perlakuan selama 30 hari. Selama 30 hari perlakuan, mencit tetap diberi pakan pellet ayam
dan air minum secara ad libitum. Proses pengambilan hati mencit melalui cara pembedahan.
Sebelum proses
pembedahan, diberi
perlakuan anestesi
menggunakan dietyl eter. Bagian perut mencit dibedah, kemudian diambil bagian
23 hati. Selanjutnya, hati di letakkan pada alumunium foil dan dibungkus hingga
rapat. Alumunium foil yang berisi hati dimasukkan ke dalam box ice yang telah berisi es dengan tujuan agar hati tidak mengalami kerusakan sebelum dilakukan
pengujian MDA. Secara keseluruhan, diagram alir proses pengujian tahap kedua secara keseluruhan disajikan pada Gambar 7.
Gambar 6. Diagram alir pembuatan minuman sinbiotik ekstrak daun cincau hijau dengan kombinasi sari buah jambu biji dan sari buah nanas
Sumber : Nurdin, dkk. 2007 yang telah dimodifikasi Ditambahkan
ekstrak daun cincau hijau 0,5 bv
Ditambahkan aquades hingga volumenya mencapai 120 ml
Sari buah jambu biji atau sari buah nanas masing-masing dimasukkan ke dalam botol fermentasi berkonsentrasi
0, 5, 10, 15, 20 vv
Ditambahkan susu skim 2 bv
Dihomogenkan 30 detik
Diinkubasi suhu 37 C selama 48
Dipasteurisasi 76 C, 15 menit
Didinginkan sampai suhu 37 C
Diinokulasi kultur kerja 4 vv
Lactobacillus casei
Minuman Sinbiotik ekstrak cincau hijau sari buah jambu biji atau sari buah nanas
