telah diencerkan dengan akuades 1:1. Didiamkan selama 2 menit, kemudian ditambahkan 7,5 ml Na
2
CO
3
1,9 M, dicampurkan sampai volume 50,0 ml dengan akuades. Operating Time diukur dengan spektrofotometer visibel.
Pengukuran dilakukan pada panjang gelombang teoritis hasil reaksi floroglusinol dengan reagen Folin Ciocalteau 750 nm.
c. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum λ
maks
Pipet 0,5 ml larutan intermediet 0,01; 0,03; dan 0,06 ppm dan masukkan ke dalam labu takar 50,0 ml yang mengandung 2,5 ml pereaksi fenol Folin
Ciocalteau yang telah diencerkan dengan akuades 1:1. Didiamkan selama 2 menit, kemudian ditambahkan 7,5 ml Na
2
CO
3
1,9 M, dicampurkan sampai volume 50,0 ml dengan akuades. Campuran tersebut diinkubasi pada suhu
kamar selama OT pada 15 menit pertama dan 15 menit kedua, campuran tersebut divortex selama 30 detik. Kemudian campuran reaksi disentrifus
dengan kecepatan 4000 rpm selama 5 menit. Kemudian ketiga larutan tersebut di-scanning pada rentang panjang gelombang 400-900 nm dengan
spektrofotometer visibel untuk melihat panjang gelombang maksimumnya.
6. Estimasi Kadar Polifenol Total dalam Fraksi Etil Asetat Alga Hijau Ulva
sp. a. Perlakuan pada larutan standar floroglusinol
Pipet 0,5 ml untuk masing-masing larutan intermediet dan masukkan ke dalam labu takar 50,0 ml yang mengandung 2,5 ml pereaksi fenol Folin
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Ciocalteau yang telah diencerkan dengan akuades 1:1. Didiamkan selama 2 menit, kemudian ditambahkan 7,5 ml Na
2
CO
3
1,9 M, dicampurkan sampai volume 50,0 ml dengan akuades. Campuran tersebut diinkubasi
pada suhu kamar selama OT untuk menyempurnakan reaksi sampai terbentuk warna biru pada 15 menit pertama dan 15 menit kedua,
campuran tersebut divortex selama 30 detik. Kemudian campuran reaksi disentrifus dengan kecepatan 4000 rpm selama 5 menit dan diukur
absorbansinya pada panjang gelombang maksimum hasil scanning λ
maks
menggunakan spektrofotometer visibel.
b. Perlakuan fraksi etil asetat alga hijau Ulva sp.
Pipet 5,0 ml larutan sampel alga hijau dan dimasukkan ke dalam labu takar
50,0 ml yang mengandung 2,5 ml pereaksi fenol Folin Ciocalteau yang telah diencerkan dengan akuades 1:1. Didiamkan selama 2 menit,
kemudian ditambahkan 7,5 ml Na
2
CO
3
1,9 M, dicampurkan sampai volume 50,0 ml dengan akuades. Campuran tersebut diinkubasi pada suhu
kamar selama OT jam untuk menyempurnakan reaksi sampai terbentuk warna biru pada 15 menit pertama dan 15 menit kedua, campuran tersebut
divortex selama 30 detik. Kemudian, campuran reaksi disentrifus dengan kecepatan 4000 rpm selama 5 menit dan diukur absorbansinya pada
panjang gelombang maksimum hasil scanning λ
maks
menggunakan spektrofotometer visibel. Konsentrasi polifenol total dihitung ekivalen
dengan floroglusinol mg PGEg fraksi. Prosedur ini dilakukan sebanyak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3 kali replikasi dengan masing-masing replikasi ditetapkan sebanyak 2 kali dengan cara 2 kali pemipetan duplo.
F. Analisis Hasil 1. Uji Kualitatif untuk Tanin dan Polifenol
