yang lebih besar dan hewan bertahan hidup pada dosis tertentu juga akan tetap bertahan hidup pada dosis yang lebih rendah. Kematian kumulatif diperoleh dengan menambahkan
secara suksesif ke bawah dan hidup kumulatif diperoleh dengan menambahkan secara suksesif ke atas. Persen hidup dari dosis-dosis yang berdekatan dengan LD
50
dihitung. Penetuan LD
50
didapatkan berdasarkan persamaan berikut : Persentase tepat di atas 50 - hidup dibawah 50
P.D = Persentase tepat di atas 50 - tepat dibawah 50
Sehingga nilai LD
50
didapatkan, Log 10 LD50 = - 7 + P.Dx – 10
Dimana : P.D = Jarak proporsional
P = Proporsi peningkatan dosis
d. Metode Karber
Metode Karber mulai digunakan pada tahun 1931 Anonimous 2006. Perhitungan nilai LD
50
berdasarkan metode Karber menggunakan rata-rata dari jumlah kematian hewan pada tiap kelompok dan perbedaan antar dosis untuk interval yang sama. Hasil-
hasil dari dosis yang lebih besar dari dosis yang menyebabkan kematian seluruh hewan dalam sekelompok dosis dan dosis yang lebih rendah yang dapat ditolerir oleh seluruh
hewan dalam suatu kelompok, tidak digunakan. Jumlah perkalian diperoleh dari hasil kali beda dosis dengan rata-rata kematian pada interval yang sama. Nilai LD
50
, didapatkan dari dosis terkecil yang menyebabkan kematian seluruh hewan dalam satu kelompok,
dikurangi dengan jumlah perkalian dibagi jumlah hewan dalam tiap kelompok. Apabila dijabarkan dalam bentuk rumus adalah seperti berikut.
Rumus : LD 50 = a – bc
Dimana : a = Dosis terkecil yang menyebabkan kematian tertinggi dalam satu kelompok dosis
b = Jumlah perkalian antara beda dosis dengan rata-rata kematian pada interval sama. c = Jumlah hewan dalam satu kelompok.
e. Metode Perhitungan Secara Grafik Litchfield dan Wilcoxon
Metode Litchfield dan Wilcoxon mulai digunakan pada tahun 1949. Metode ini merupakan salah satu metode yang sering dipakai dalam penetuan efektif dosis
Anonimous 2006. Metode ini terdiri dari tingkat data dan range data dosis yang digunakan. Tingkat data akan dibandingkan dengan suatu nilai untuk melihat diterima
atau tidaknya hipotesis yang digunakan EPA 2002. Metode ini menggunakan banyak tabel dan beberapa monogram. Heterogenitas data ditentukan dengan uji chi kuadrat.
a. Metode Thomson dan Weil
Metode Thomson dan Weil mulai digunakan pada tahun 1952. Metode Thomson dan Weil memiliki kelebihan dari pada metode-metode sebelumnya. Metode Thomson
dan Weil mempunyai tingkat kepercayaan yang cukup tinggi Anonimous 2006. Metode ini merupakan metode yang sering digunakan karena tidak memerlukan hewan percobaan
yang cukup banyak. Perhitungan LD
50
tidak menggunakan kertas probit logaritma. Uji heterogenitas data tidak dilakukan dalam metode Thomson dan Weil Anonimous 2006.
Metode ini menggunakan daftar perhitungan LD
50
sehingga hasil lebih akurat. Bentuk rumus dari metode Thomson dan Weil adalah sebagai berikut
Log LD
50
= Log D + d f + 1
Keterangan. D = dosis terkecil yang digunakan
d = logaritma kelipatan f = suatu faktor pada daftar perhitungan LD
50
Weil 1952, dimana r adalah jumlah kematian hewan dalam satu kelompok uji
n adalah jumlah hewan percobaan per kelompok k adalah jumlah hewan percobaan -1
Kisaran nilai LD
50
dihitung dengan rumus
Log kisaran = Log LD
50
± 2 d δf
Dimana
δf = suatu nilai pada tabel yang tergantung pada nilai n dan k
BAB III BAHAN DAN METODE
