Pengujian Patogenisitas Isolat Patogen Lodoh
Urutan kegiatan dalam pengujian patogenisitas isolat patogen lodoh adalah sebagai berikut :
1. Perbanyakan inokulum cendawan pato gen. Perbanyakan inokulum
cendawan patogen dilakukan pada media CMS Corn Meal Sand yang berupa campuran pasir, hancuran biji jagung, dan air 96:4:20 ggml.
Sebanyak 100 g media tersebut dimasukkan ke dalam labu erlemeyer kemudian disterilkan dalam otoklaf 121
C, 1 atm. Pada masing-masing media yang sudah steril tersebut di atas, ditanam tiga potongan koloni
patogen ∅
6 mm yang sudah berumur 5 hari dan selanjutnya diinkubasi pada suhu kamar selama 2 minggu
2. Pembuatan media tanam. Media tanam yang digunakan adalah
campuran top soil dan pasir 1:1 yang telah disterilkan. Sebanyak 100 g media tanam tersebut dimasukkan ke dalam politube.
3. Infestasi patogen ke dalam media tanam. Setelah masa inkubasi
cendawan beserta mediumnnya sebanyak 3.5 g dimasukkan ke dalam media tanam, kemudian ditambahkan 15 ml air steril. Wadah tanam
selanjutnya ditutup dengan plastik dan didiamkan selama 4 hari.
4. Penanaman benih A. mangium. Benih A. mangium ditanam pada media
tanam tersebut di atas. Untuk kontrol, benih A. mangium ditanam pad a media tanam steril tanpa isolat cendawan.
5. Pemeliharaan. Pemeliharaan dilakukan dengan cara menyiram benih dalam politube pada pagi dan sore hari selama 30 hari.
6. Pengamatan. Pengamatan dilakukan terhadap gejala penyakit lodoh
berdasarkan persentase semai mati, pada umur 2 minggu setelah sebar. Percobaan menggunakan rancangan acak lengkap RAL dengan F. solani
dan tanpa F. solani kontrol sebagai perlakuan. Masing-masing perlakuan diulang 4 kali sehingga terdapat 8 satuan percobaan, dan pada setiap satuan percobaan
dikecambahkan 10 benih A. mangium. Data yang diperoleh dianalisis sidik ragam sesuai rancangan yang
digunakan menggunakan program Statistical Analysis System SAS.
Isolasi Cendawan Antagonis
Trichoderma sp. diisolasi dari tanah tegakan A. mangium dengan metode pengenceran sebagai berikut :
1. Pembuatan suspensi. Sebanyak 10 g tanah disuspensikan dalam 90 ml