3.2.3 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan terdiri dari Media Lactose Broth dan Brilliant Green Lactose Broth.
3.3 Prosedur
3.3.1 Pembuatan Media
3.3.1.1 Media Lactose Broth
a. Pembuatan Media Lactose Broth Single
Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 13 gram. Dimasukkan ke dalam beker gelas, dilarutkan dalam 1 liter akuades. Dimasukkan Magnetic
stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml dalam 10 tabung.
Disterilkan di dalam oven dengan tekanan 1 atm pada suhu 121 ˚C selama 15
menit, setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.
b. Pembuatan Media Lactose Broth Double
Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 52 gram. Dimasukkan ke dalam beker gelas, dilarutkan dalam 1 liter akuades. Dimasukkan Magnetic
stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 5 ml dalam 5 tabung.
Disterilkan di dalam oven dengan tekanan 1 atm pada suhu 121 ˚ C selama 15
menit, setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.
3.3.1.2 Media Brilliant Green Lactose Broth BGLB
Ditimbang seksama media Brilliant Green Lactose Broth sebanyak 40 gram. Dimasukkan ke dalam beker gelas, dilarutkan dalam 1 liter akuades.
Dimasukkan Magnetic stirer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing
10 ml. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan 1 atm pada suhu 121 ˚C sel ama
15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.
3.3.2 Uji Perkiraan
a Siapkan 9 tabung reaksi, dibuat sebanyak tiga seri yang berisi media Lactose
Broth siap pakai, yang terdiri dari tiga tabung berisi Lactose Broth Doble dan enam tabung Lactose Broth Single dalam keadaan steril dan dimasukkan
durham ke masing-masing tabung. Tabung kemudian disusun pada rak tabung, masing-masing diberi tanda sebagai berikut:
Nomor sampel
Volume sampel
Tanggal penanganan
b Sampel dikocok terlebih dahulu agar homogen
c Dimasukkan sampel dengan menggunakan pipet volume, tiga tabung
reaksi yang berisi Lactose Broth Doble LBD dimasukkan sample sebanyak 10 ml, tiga tabung yang berisi Lactose Broth Single LBS
dimasukkan sample sebanyak 1 ml dan tiga tabung reaksi yang berisi Lactose Broth Single LBS sebanyak 0,1 ml.
Kategori