ACQ Mode : Scan
Event Time : 0,50 sec
Scan Speed : 1250
Start mz : 28
End mz : 600
3.3.4 Pengujian Sifat Antibakteri Minyak Atsiri Daun Legundi
3.3.4.1 Pembuatan Media Nutrien Agar NA
Sebanyak 7 gram media nutrient agar dimasukkan kedalam gelas lalu dilarutkan dengan 250 mL dan dipanaskan hingga semua larut. Kemudian disterilkan dalam
autoklaf pada suhu 121 °C selama 15 menit.
3.3.4.2 Pembuatan Stok Kultur Bakteri
Sebanyak 3 mL media nutrient agar steril dimasukkan kedalam tabung reaksi yang steril, didiamkan pada temperatur kamar sampai memadat pada posisi miring
membentuk sudut 30-45 °. Biakan bakteri Escherichia coli diambil dari strain
utama dengan jarum ose steril lalu diinokulasikan pada permukaan media nutrient agar miring dengan cara menggores, kemudian diinkubasi pada suhu 35 ± 2
°C selama 18-24 jam. Hal yang sama juga dilakukan pada biakan bakteri
Streptococcus mutans.
3.3.4.3 Pembuatan Media Mueller Hinton Agar MHA
Sebanyak 9.5 g serbuk Mueller Hinton Agar dimasukkan kedalam gelas lalu dilarutkan dalam 250 mL aquades dan dipanaskan hingga semua larut dan
mendidih. Kemudian disterilkan pada autoklaf pada suhu 121 °C selama 15 menit.
3.3.4.4. Penyiapan Inokulum Bakteri
Sebanyak 6,5 g nutrient broth dilarutkan dengan 250 mL aquades dalam gelas dan dipanaskan hingga semua larut, kemudian disterilkan di autoklaf 121
°C selama 15 menit dan didinginkan. Lalu koloni bakteri Escherichia coli diambil dari stok
kultur menggunakan jarum ose steril kemudian disuspensikan ke dalam 10 mL
Universitas Sumatera Utara
media nutrient broth steril dalam tabung reaksi dan diinkubasikan pada suhu 35±2
°C selama ± 3 jam, lalu dibandingkan kekeruhannya dengan kekeruhan standar Mcfarland. Hal yang sama juga dilakukan untuk koloni bakteri
Streptococcus mutans.
3.3.4.5. Pembuatan Variasi Konsentrasi Minyak Atsiri Daun Legundi Vitex
trifolia L
Minyak atsiri daun legundi dibuat dalam konsentrasi 20 dan 30 vv, dengan memipet masing-masing 1 mL dan 1.5 mL minyak atsiri dengan menggunakan
mat pipet dan dimasukkan kedam labu ukur 5 mL, kemudian ditambahkan Dimetil Sulfoksida DMSO pada masing-masing minyak atsiri hingga garis batas dan
dihomogenkan..
3.3.4.6. Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Daun Legundi
