3. 7. Prosedur Penelitian
3. 7. 1. Tahap Persiapan
1.
Pengambilan Sampel
Prosedur pengambilan sampel diawali proses administratif dengan mengurus perizinan dari pihak rumah sakit untuk
mengambil sampel. Setelah itu melakukan inform consent dengan keluarga atau wali pasien serta memberi penjelasan
mengenai tindakan yang akan dilakukan.
Pengambilan sampel sekret bronkus melalui suction yang dilakukan oleh tenaga perawat di ICU. Pengambilan sampel
dilakukan dengan cara memasukan selang kateter suction steril pada lubang ETT lalu dilakukan penghisapan dengan gerakan
memutar kemudian selang kateter ditarik keluar, siapkan pot steril lalu selang dipotong untuk dimasukan ke dalam pot steril
bermulut besar dan bertutup screw cap medium dan dibawa ke
Laboratorium Mikrobiologi
Fakultas Kedokteran
Universitas Lampung untuk pemeriksaan identifikasi bakteri dan sensitivitasnya Musrifatul Hidayat, 2008.
2.
Sterilisasi Alat
Sterilisasi adalah tindakan untuk membebaskan alat atau media dari jasad renik. Alat-alat yang akan disterilkan dicuci terlebih
dahulu kemudian dikeringkan. Kemudian cawan petri
dibungkus dengan kertas perkamen. Sedangkan alat-alat gelas seperti tabung reaksi ditutup dengan menggunakan kapas lalu
dibalut dengan kassa dan dibungkus dengan kertas perkamen. Kemudian disterilisasi dengan menggunakan autoklaf pada
suhu 120
o
C selama 30 menit atau dengan oven pada suhu 150
o
C selama 1 jam. Ose disterilisasi dengan cara dibakar pada nyala api lampu bunsen hingga terlihat merah berpijar, dimulai
dari pangkal kawat ke ujung ose Putranto et al, 2014.
3. 7. 2. Tahap Pengujian
1. Isolasi dan Identifikasi Mikroorganisme
Sampel diambil dengan menggunakan kapas steril kemudian dioleskan ke dalam nutrient agar sebagai media perbenihan
dan diinkubasi dalam suhu 37 C selama 24 jam. Setelah itu
dilakukan identifikasi sifat bakteri dengan pewarnaan gram. Hasil perwarnaan gram diperiksa dibawah mikroskop untuk
mengetahui sifat bakteri merupakan gram positif atau gram negatif. Setelah diketahui sifat bakteri, dilakukan penanaman
dimana bakteri gram positif ditanam pada media selektif agar darah dan gram negatif pada agar Mac Conkey dilanjutkan
dengan inkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam. Setelah
ditemukan koloni tertentu dari media selektif, dilakukan uji biokimia Harti, 2015; Lagier et al, 2015
Kategori