25
3.6. Alur Penelitian
Persiapan alat dan bahan
Adaptasi mencit diberi pakan dan minum standar 7 hari Perizinan kode etik
Pemberian perlakuan kelompok
Kelompok II Pakan
standar +
induksi gentamisin 5 mgkgbbhari, i.p 10
hari Kelompok III
Pakan standar + induksi gentamisin
5 mgkgbbhari, i.p 10
hari Kelompok I
Pakan dan
minum standar
Pakan standar + vitamin C 100 mgkgbbhari, i.p
14 hari
Terminasi dan pembuatan preparat spermatozoa mencit hari ke-32
Pengamatan jumlah spermatozoa mencit
Pengolahan data
26
3.7. Cara Kerja Penelitian
3.7.1. Persiapan vitamin C
Bahan yang diuji pada penelitian adalah vitamin C dengan dosis 100mgkgbbhari diinjeksikan secara intraperitoneal i.p.
3.7.2. Pemeliharaan mencit jantan
Penelitian ini menggunakan mencit jantan strain DDY berjumlah 15 ekor dengan berat 20-40 gr. Mencit diadaptasikan selama 7 hari Hari ke 0-7 disertai
pemberian pakan dan minum standar.
3.7.3. Tahap Intervensi
Mencit jantan berjumlah lima belas dibagi menjadi 3 kelompok yang setiap kelompok terdapat 5 mencit, diantaranya :
Kelompok 1 K1 merupakan kelompok kontrol yang diberikan pakan dan minum standar tanpa perlakuan.
Kelompok 2 K2 merupakan kelompok yang diberikan gentamisin 5 mgkgbbhari, i.p, selama 10 hari Hari ke 7-17.
Kelompok 3 K3 merupakan kelompok yang diberi gentamisin 5mgkgbbhari, i.p, selama 10 hari hari ke 7-17, selanjutnya dilakukan pemberian vitamin C
100 mgkgbbhari, i.p, selama 14 hari hari ke 17-31. Pada hari ke-32, semua kelompok mencit diterminasi lalu diambil bagian
vesikula seminalis untuk dilakukan analisis sperma.
3.7.4. Pengamatan spermatozoa
Pada hari ke-32, mencit diterminasi dengan cara dislokasi leher.
46
Setelah diterminasi, mencit dilakukan :
Pembedahan dengan melakukan insisi longitudinal pada abdomen bawah untuk diambil bagian vesikula seminalisnya dengan menggunakan gunting bedah
minor. Vesikula seminalis diletakkan di atas kaca arloji yang berisi 1 ml NaCl 0,9 .
Vesikula seminlais diurut dengan menggunkan gunting bedah minor agar
cairan vesikula seminalis dapat tersuspensi dalam NaCl 0,9. Suspensi sperma tersebut selanjutnya dihomogenkan dengan mengambil 20 µl
dicampurkan ke dalam 980 µl larutan george.