HASIL DAN PEMBAHASAN Kealergenikan Serbuk Sari Indonesia pada Manusia

4. HASIL DAN PEMBAHASAN

Serbuk sari adalah gametofit jantan tumbuhan berbunga yang berperan dalam proses pembuahan, dan merupakan salah satu sumber alergen yang dapat mencetuskan penyakit alergi pada manusia Faegri et al. 1964, Gossage 2000. Untuk mengetahui serbuk sari yang dapat menimbulkan alergi pada manusia, perlu dilakukan penangkapan dan identifikasi serbuk sari yang tumbuh di suatu daerah di Indonesia. Serbuk sari yang akan diuji diekstraksi proteinnya dan untuk melihat kealergenikannya pada manusia, maka dilakukan uji klinis dengan cara uji tusuk kulit Church Holgate 1995. Sebagian besar serbuk sari adalah protein yang bobot molekulnya dapat diukur dengan analisis SDS-PAGE. Bobot molekul BM protein serbuk sari juga dapat membantu mengkonfirmasi serbuk sari yang berpotensi alergenik Puc 2003; Jiang et al. 2005. Dari berbagai laporan, diketahui bahwa serbuk sari rumput-rumputan paling banyak menyebabkan alergi pada manusia, seperti Rye grass, Timothy grass, Bermuda grass, dan alang-alang Jelks 1987, Singh Kumar 2003. Rye grass dan Timothy grass tidak ada di Indonesia, sehingga penelitian untuk mengetahui serbuk sari rumput-rumputan apa saja di Indonesia yang menyebabkan alergi pada manusia perlu dilakukan. Pada penelitian awal tahun 2005, hasil tangkapan serbuk sari di daerah Darmaga Bogor, didapatkan serbuk sari padi Oryza sativa, jagung Zea mays, alang-alang Imperata cylindrica, dan rumput gajah Pennisetum purpureum. Serbuk sari rumput gajah tidak diteliti lebih lanjut dalam penelitian ini, karena laporan tentang alergi akibat serbuk sari rumput gajah tidak banyak. Mengingat uji klinis akan dilakukan terhadap pasien yang berdomisili di wilayah Daerah Khusus Ibukota DKI Jakarta, maka penangkapan serbuk sari juga dilakukan di wilayah Jakarta. Sebagai daerah penelitian penangkapan serbuk sari dengan alat Burkard, dipilih lokasi di Lebak Bulus berbatasan dengan Bogor yang masih banyak ditanami pohon-pohonan, rumput-rumputan, dan tumbuhan lainnya. Alat Burkard dipasang selama satu tahun dari bulan Januari sampai Desember 2006, serbuk sari yang tertangkap adalah serbuk sari akasia, kelapa genjah, pinus, dan rumput-rumputan yang terbanyak tumbuh adalah alang-alang, serta didapatkan pula jenis jamur Curvularia dan Alternaria. Berdasarkan Laporan Tahunan Data Angka Kesakitan dari berbagai Puskesmas Kecamatan di DKI Jakarta kejadian kasus Infeksi Saluran Pernapasan Atas ISPA termasuk rinitis paling tinggi 18,06 adalah di Kecamatan Pasar Minggu, Jakarta Selatan DKK DKI Jakarta 2006. Data dari Dinas Tata Kota DKI Jakarta 2005 menunjukkan bahwa Kecamatan Pasar Minggu memiliki area penghijauan yang sangat luas dengan berbagai tanaman seperti tanjung, pinus, akasia, cempaka, dadap merah, jagung, pisang, kelapa sawit, kelapa genjah, rumput-rumputan terbanyak alang-alang, rambutan, jambu, dan mangga. Dengan demikian kemungkinan tingginya kasus ISPA tersebut diduga berkaitan dengan banyaknya serbuk sari yang beterbangan di udara Pasar Minggu. Dari alat penangkap serbuk sari yang dipasang di Kecamatan Pasar Minggu dan sekitarnya Kecamatan Jagakarsa, tertangkap serbuk sari akasia, kelapa genjah, kelapa sawit, pinus, jagung, dan rumput- rumputan terbanyak alang-alang. Di negara-negara Asia, diketahui bahwa serbuk sari tanaman akasia dan kelapa sawit alergenik bagi penduduk Singapura Lee et al. 1995; Chew et al. 2000, kelapa sawit bagi penduduk Malaysia Kimura et al. 2002, alang-alang bagi penduduk India Singh Kumar 2003. Serbuk sari tanaman jagung, padi, Bermuda grass, alang-alang, dan akasia dilaporkan merupakan serbuk sari alergenik bagi penduduk Filipina Cua-Lim et al. 2006. Di Thailand dilaporkan hasil uji tusuk kulit serbuk sari penyebab alergi pada manusia meliputi akasia 19, kelapa genjah 12, dan Bermuda grass 17 Visitsunthorn Vichyanond 2006. Pada penelitian lain oleh Damayanti 2008 yang menggunakan hewan percobaan tikus Wistar, penyuntikan subkutan ekstrak serbuk sari kelapa genjah, kelapa sawit, jagung, dan pinus berhasil mencetuskan reaksi alergi pada tikus tersebut, sehingga diduga ekstrak serbuk sari tanaman-tanaman tersebut dapat juga menimbulkan reaksi alergi pada manusia. Oleh karena itu, pada penelitian ini keempat serbuk sari tersebut serta serbuk sari akasia A. auriculiformis, alang- alang I. cylindrica, dan padi O. sativa dipilih untuk pengujian pada manusia. Hasil tangkapan serbuk sari diidentifikasi di bawah mikroskop cahaya dan SEM. Identifikasi Serbuk Sari Identifikasi serbuk sari dilakukan dengan menggunakan mikroskop cahaya dan SEM. Serbuk sari akasia. Termasuk suku Leguminoceae, ukurannya berkisar 20-70 µm, dapat terdiri dari 8, 16, atau 32 sel yang disebut polyad, dindingnya tektat dengan ornamentasi skabrat Gambar 7 a,b,c. Gambar 7 Serbuk sari akasia dilihat di bawah mikroskop cahaya a dan SEM b,c Serbuk sari kelapa genjah dan kelapa sawit. Serbuk sari kelapa genjah PalmaeArecaceae, berukuran sekitar 60 µm, bersifat monad, monokolpat dengan ornamentasi psilat Gambar 8 a,b,c. Serbuk sari kelapa sawit Arecaceae, berukuran sekitar 30 µm, bersifat monad, trikolpat dengan ornamentasi psilat Gambar 8 d,e,f. Gambar 8 Serbuk sari kelapa genjah atas dan kelapa sawit bawah dilihat di bawah mikroskop cahaya a,d dan SEM b,c,e,f Serbuk sari pinus. Termasuk suku Pinaceae, ukurannya berkisar antara 20-35 µm, mempunyai dua kantong udara sehingga bentuknya menyerupai Mickey Mouse. Berbentuk sferoidal, berstruktur dinding tektat dengan ornamentasi psilat atau vesikulat dan inaperturat. Gambar 9a serbuk sari pinus dilihat dengan mikroskop cahaya. Gambar 9b dan 9c yang diamati dengan SEM. Gambar 9 Serbuk sari pinus dilihat di bawah mikroskop cahaya a dan SEM b, c Serbuk sari alang-alang, jagung dan padi. Termasuk suku Poaceae, mempunyai sifat yang sama; monoporat, monad, bentuk steroidal Gambar 10 Gambar 10 Serbuk sari alang-alang atas, jagung tengah, dan padi bawah dilihat di bawah mikroskop cahaya a,d,g dan SEM b,c,e,f,h,i Pada penampakan SEM tampak struktur dindingnya tektat dengan ornamentasi psilat dan porus yang jelas pada ketiga jenis serbuk sari suku Poaceae Gambar 10. Khusus untuk serbuk sari jagung, ukurannya berkisar antara 90-110 µm Gambar 10 d,e,f, sedangkan serbuk sari suku Poaceae lainnya memiliki rentang ukuran antara 20-60 µm Weber 1998; Taylor et al. 2002. Analisis Bobot Molekul BM Protein Serbuk Sari Pengukuran BM polipeptida protein serbuk sari dapat dipakai untuk mengetahui apakah protein tersebut termasuk protein alergenik. Analisis SDS- PAGE dapat menduga BM polipeptida suatu protein. Ekstrak protein serbuk sari dari tujuh tanaman dianalisis dengan SDS-PAGE pewarnaan CBB Gambar 11 dan perak nitrat Gambar 12. Gambar 11 SDS-PAGE protein serbuk sari dengan pulasan CBB. Lajur 1 dan 9: Marker LMW, 2: Kelapa sawit, 3: Jagung, 4: Kelapa genjah, 5: Pinus 6: Akasia, 7: Alang-alang, 8: Padi Gambar 12 SDS-PAGE protein serbuk sari dengan pulasan perak nitrat. Lajur 1 dan 6: Marker LMW, 2: Kelapa sawit, 3: Jagung, 4: Kelapa genjah, 5: Pinus, 7: Akasia, 8: Alang-alang, 9: Padi Pita polipeptida menunjukkan protein dalam keadaan terdenaturasi. Pada kedua gambar tersebut tampak tanda panah yang menunjukkan pita protein yang selalu muncul disetiap lajur protein serbuk sari yang dianalisis dengan BM 31 kD. BM kelapa sawit. Elektroforesis ekstrak serbuk sari kelapa sawit menghasilkan beberapa pita antara 15-67 kD. Intensitas terkuat tampak pada pita dengan BM sekitar 26 dan 31 kD yang terlihat pada lajur 2 Gambar 11, 12. Purifikasi ekstrak kelapa sawit mendapatkan glikoprotein dengan BM 31 kD yang bereaksi terhadap IgE dari pasien polinosis kelapa sawit Kimura 2002. BM kelapa genjah. Elektroforesis ekstrak serbuk sari kelapa genjah menghasilkan beberapa pita dengan intensitas pulasan terkuat pada BM 15 dan 25 kD yang tampak pada lajur 4 Gambar 11, 12. BM jagung. Pada SDS-PAGE serbuk sari jagung, terdapat delapan pita, intensitas terkuat tampak pada pita berukuran sekitar 24 kD dan 35 kD terlihat pada lajur 3 Gambar 11, 12. Penelitian Western blot serbuk sari jagung menghasilkan pita reaktif IgE yang kuat pada BM 35 kD dan 55 kD Petersen 2006. Kedua pita tersebut sesuai dengan alergen protein Zea m 1 dan Zea m 13. Perbandingan imunologis dan biokimiawi memperlihatkan bahwa alergen dari serbuk sari jagung mengandung empat grup alergen serbuk sari rumput- rumputan, yaitu grup 1, 3, 12, dan 13. Namun, hanya dua grup alergen yang paling kuat mencetuskan reaksi IgE, yaitu grup 1 dan 13. Zea m 1 adalah glikoprotein yang merupakan alergen grup 1 dan merupakan 4 dari seluruh protein yang diekstrak dari serbuk sari. Glikoprotein ini cepat disekresi ketika serbuk sari terhidrasi dan memiliki aktivitas wall-loosening yang spesifik untuk dinding sel rumput Cosgrove 1997; Li 2003. Zea m 1 mewakili kelompok protein yang disebut expansin, yaitu protein yang terlibat dalam peregangan dinding sel dalam pertumbuhan tabung serbuk sari ketika fertilisasi Cosgrove 1997. Alergen Zea m 13 diketahui berfungsi sebagai poligalaturonase Niogret 1991; Suck 2000. BM alang-alang. Elektroforesis protein serbuk sari alang-alang pada lajur 7 Gambar 11 hanya menampakkan pita-pita di bawah 33 kD dengan pewarnaan CBB, sedangkan dengan pewarnaan perat nitrat pada lajur 8 Gambar 12 memperlihatkan tiga pita utama berukuran sekitar 16 kD, 33 kD, dan 67 kD. Pemeriksaan imunoblot ekstrak serbuk sari alang-alang menghasilkan 7 protein alergenik utama dengan BM 16, 28, 40, 43, 57, 62 dan 85 kD Kumar et al. 1998. BM padi. Hasil elektroforesis protein serbuk sari padi Gambar 11, 12 menunjukkan pita protein yang dominan pada BM 16 dan 32 kD. Penelitian Tsai 1990 dengan pemeriksaan darah immunoblot pada pasien alergi menghasilkan 3 pita polipeptida utama serbuk sari padi dengan BM 16, 26, dan 32 kD. BM akasia. Elektroforesis protein serbuk sari akasia memperlihatkan dua pita protein dominan berukuran 16 kD dan 30 kD pada Gambar 12 lajur 7. BM pinus. Elektroforesis serbuk sari pinus menghasilkan beberapa pita dan terkuat pada BM 26 dan 31 kD seperti tampak pada lajur 5 Gambar 11, 12 Secara keseluruhan, BM protein dari 7 tanaman serbuk sari yang diteliti, didapatkan BM berkisar antara 10-70 kD yang menunjukkan bahwa protein dalam kisaran tersebut merupakan protein alergenik Puc 2003; Jiang 2005. Uji Klinis Sensitivitas terhadap Serbuk Sari Pengujian ini mempergunakan ekstrak serbuk sari sebagai alergen dalam uji tusuk kulit. Hasil reaksi positif terhadap alergen yang diuji, ditentukan dengan munculnya bentol histamin pada kulit yang berukuran ≥ 3 mm dibandingkan dengan kontrol negatif. Sensitivitas terhadap serbuk sari akasia. Hasil penelitian pada kelompok riwayat alergi, derajat sensitivitas terhadap akasia didapatkan 7 orang positif 1, 3 orang positif 2 dan hanya 1 orang positif 3, sedangkan kelompok tanpa riwayat alergi, didapatkan 8 orang positif 1, 3 orang positif 2, dan tidak didapatkan positif 3 Gambar 13. Walaupun persentase reaksi positif terhadap serbuk sari akasia tidak berbeda pada kedua kelompok, tetapi derajat sensitivitasnya berbeda. Pada kelompok riwayat alergi, terdapat variasi derajat positif 1 sampai 3, sedangkan pada kelompok tanpa riwayat alergi terutama didapatkan positif 1 dan tidak didapatkan positif 3. Ada kemungkinan alergen ini telah menimbulkan hipersensitivitas yang tidak disadari oleh orang tanpa riwayat alergi, karena gejala klinisnya yang ringan, seperti bersin-bersin, yang dapat dianggap sebagai penyakit flu biasa common cold oleh orang tersebut. Berdasarkan temuan diatas, identifikasi reaksi hipersensitivitas terhadap serbuk sari pohon peneduh jalan perlu dipertimbangkan dalam pemilihan jenis pohon selanjutnya, jika pohon akasia akan diganti dengan pohon lain. Hal ini penting dilakukan guna memilih pohon peneduh yang tepat dan aman dari pajanan alergen, mengingat pohon-pohon tersebut biasanya berada di pinggir-pinggir jalan dan disekitar pemukiman penduduk. Gambar 13 Perbedaan sensitivitas kedua kelompok terhadap serbuk sari akasia Hasil temuan lain yang memperkuat yaitu uji tusuk kulit di Singapura mendapatkan sensitivitas sebesar 27,7 untuk serbuk sari akasia Chew 2000. Penelitian di Bengal India, pada tahun 2000 mendapatkan uji tusuk kulit positif terhadap serbuk sari akasia Boral Bhattacharya 2000, dan pada tahun 2004 sebesar 20,4 dari 147 orang pasien alergi pernapasan yang diperiksa dengan derajat sensitivitas pada umumnya adalah positif 1 17,8 Boral et al. 2004. Spesies akasia lainnya telah dilaporkan menyebabkan asma, yaitu Acacia melanoxylon di Tasmania Wood-Baker 1997 dan Acacia floribunda di Mediteranea Ariano 1991. Akasia merupakan genus yang besar dan meliputi lebih dari 1000 spesies. Pohon A.auriculiformis adalah tumbuhan asli Australia, Indonesia dan Papua New Guinea Sornsathapornkul Owens 1998. Selama ini belum ada alergen serbuk sari akasia yang diketahui karakteristiknya. Namun, dapat terjadi reaktivitas silang antara serbuk sari akasia dan serbuk sari rumput rye Howlett 1982. Penelitian lain, serbuk sari akasia juga menunjukkan reaksi 1 2 3 4 5 6 7 8 Frekuensi kasus Positif 1 Positif 2 Positif 3 Derajat Sensitivitas riwayat alergi tanpa riwayat alergi positif juga pada uji tusuk kulit di negara Thailand Pumhirun et al. 1997 dan Arab Saudi Suliaman et al. 1997. Sensitivitas terhadap serbuk sari alang-alang. Reaksi positif terhadap serbuk sari alang-alang pada kelompok alergi menunjukkan persentase tertinggi dibandingkan terhadap serbuk sari yang diteliti lainnya. Derajat sensitivitas terhadap serbuk sari alang-alang pada kelompok riwayat alergi terutama adalah positif 2, sedangkan pada kelompok tanpa riwayat alergi kebanyakan positif 1 Gambar 14. Alang-alang merupakan tumbuhan liar yang tidak ditanam dan tersebar luas hampir di seluruh wilayah Jabotabek. Hal ini merupakan salah satu dasar pemilihan serbuk sari alang-alang untuk pemeriksaan kealergenikannya. Gambar 14 Perbedaan derajat sensitivitas kedua kelompok terhadap serbuk sari alang-alang Alang-alang pada umumnya mudah tumbuh dimana-mana, serbuk sarinya ringan, mudah disebarkan angin sehingga orang lebih berisiko untuk terpajan pada waktu musim berbunga Bijli 2003. Alang-alang juga banyak terdapat di wilayah bersuhu panas di Asia, Afrika Selatan dan Australia. Penelitian di India mendapatkan bahwa alang-alang secara klinis lebih kuat mencetuskan reaksi alergi pada pasien atopik dibandingkan suku Poaceae lainnya Sridhara et al. 1995. Penelitian klinis selanjutnya mendapatkan sensitivitas uji tusuk kulit positif pada 8,9 dari 303 pasien alergi pernapasan Kumar 1998. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Frekuensi kasus Positif 1 Positif 2 Positif 3 Derajat sensitivitas riwayat alergi tanpa riwayat alergi Tampak bahwa serbuk sari alang-alang merupakan alergen dengan tingkat sensitivitas tertinggi pada kelompok riwayat alergi, sehingga berpotensi dimasukkan dalam panel pemeriksaan uji tusuk kulit. Sensitivitas terhadap serbuk sari jagung. Derajat sensitivitas terhadap serbuk sari jagung pada kelompok riwayat alergi terutama adalah positif 2, sedangkan pada kelompok tanpa riwayat alergi terutama didapatkan positif 1 Gambar 15 Gambar 15 Perbedaan sensitivitas kedua kelompok terhadap serbuk sari jagung Alergi terhadap serbuk sari jagung telah dilaporkan di Filipina Cua Lim et al. 2006, tetapi belum pernah dilaporkan di Indonesia. Pada penelitian ini tingkat sensitivitas terhadap serbuk sari jagung tergolong sedang, baik pada kelompok riwayat alergi maupun kelompok tanpa riwayat alergi 7,2, kemungkinan disebabkan karena perbedaan wilayah penangkapan serbuk sari dan tempat tinggal responden penelitian. Penangkapan serbuk sari dilakukan di Darmaga Bogor, sedangkan responden penelitian tinggal di Jakarta. Oleh karena itu, tidak tertutup kemungkinan bahwa tingkat sensitivitas yang lebih tinggi akan ditemukan pada penduduk di wilayah perkebunan jagung atau pada komunitas petani jagung. Diperlukan penelitian lanjutan untuk mengetahui potensi alergenik serbuk sari tanaman jagung khusus di wilayah perkebunan jagung. Sensitivitas terhadap serbuk sari kelapa genjah. Pada kelompok riwayat alergi, derajat sensitivitas terhadap serbuk sari kelapa genjah, didapatkan 4 orang positif 1 dan 3 orang positif 2. Pada kelompok tanpa riwayat alergi hanya ditemukan 1 2 3 4 Frekuensi kasus Positif 1 Positif 2 Positif 3 Derajat sensitivitas riwayat alergi tanpa riwayat alergi positif 1 sebanyak 6 orang Gambar 16. Persentase tingkat sensitivitas serbuk sari kelapa genjah 10,1 pada kelompok riwayat alergi dan 8,7 pada kelompok tanpa riwayat alergi, menunjukkan bahwa alergen tersebut berada di udara bebas wilayah Jakarta yang terbawa oleh angin. Serbuk sari tanaman kelapa genjah merupakan serbuk sari alergenik bagi penduduk negara India Sridhara et al. 1995; Mandal et al. 2008. Gambar 16 Perbedaan sensitivitas kedua kelompok terhadap serbuk sari kelapa genjah Sensitivitas terhadap serbuk sari kelapa sawit. Uji sensitivitas terhadap serbuk sari kelapa sawit mendapatkan 4 orang riwayat alergi positif 1 dan 1 orang positif 2, sedangkan pada kelompok tanpa riwayat alergi hanya ditemukan 2 orang yang masing-masing terdiri dari positif 1 dan 2 Gambar 17. Tingkat sensitivitas yang didapat dari penelitian ini tidak terlalu tinggi pada kelompok riwayat alergi dan bahkan tergolong rendah pada kelompok tanpa riwayat alergi. Tanaman kelapa sawit banyak ditanam di Jakarta sebagai pohon peneduh dan elemen pertamanan kota serta real estate besar, sehingga ada kemungkinan pajanan serbuk sari kelapa sawit sudah terjadi pada penduduk Jakarta. Adapun areal perkebunan kelapa sawit yang sangat luas di Indonesia, terdapat di Pulau Sumatera dan Kalimantan. Sebagai perbandingan, sensitivitas terhadap serbuk sari kelapa sawit dilaporkan sebesar 39,8 dan merupakan alergen luar rumah yang tertinggi di Singapura Chew 2000. Diduga serbuk sari 1 2 3 4 5 6 Frekuensi kasus Positif 1 Positif 2 Positif 3 Derajat sensitivitas riwayat alergi tanpa riwayat alergi tersebut terbawa angin dari Malaysia di mana terdapat perkebunan kelapa sawit yang luas sekali. Gambar 17 Perbedaan derajat sensitivitas kedua kelompok terhadap serbuk sari kelapa sawit Penelitian sebelumnya mendapatkan komponen alergenik multipel dari serbuk sari kelapa sawit Lee et al. 1995. Perlu penelitian lebih lanjut apakah tingkat sensitivitas protein serbuk sari kelapa sawit lebih tinggi pada penduduk di areal perkebunan kelapa sawit di Indonesia. Sensitivitas terhadap serbuk sari padi. Derajat sensitivitas positif 1 terhadap serbuk sari padi, didapatkan pada 3 orang riwayat alergi dan 1 orang tanpa riwayat alergi, sedangkan positif 2 hanya didapatkan pada 1 orang dalam masing-masing kelompok Gambar 18 Hasil penelitian menunjukkan rendahnya tingkat sensitivitas terhadap serbuk sari padi, hanya sedikit orang yang terpapar alergen serbuk sari padi. Kemungkinan disebabkan karena areal persawahan di Jakarta saat ini hampir tidak ada dan penangkapan serbuk sari padi dilakukan di Bogor. Penelitian terhadap alergi serbuk sari padi sangat jarang dilaporkan. Pada suatu penelitian di Taiwan, sebanyak 312 pasien asma anak menjalani uji tusuk kulit, dan 29 9,3 orang di antaranya menghasilkan reaksi positif dengan ukuran bentol 6 mm Tsai 1990. 1 2 3 4 Frekuensi kasus Positif 1 Positif 2 Positif 3 Derajat sensitivitas riwayat alergi tanpa riwayat alergi Gambar 18 Perbedaan sensitivitas kedua kelompok terhadap serbuk sari padi Sensitivitas terhadap serbuk sari pinus. Derajat sensitivitas terhadap serbuk sari pinus pada kelompok riwayat alergi hanya ditemukan positif 2 sebanyak 3 orang, sedangkan kelompok tanpa riwayat alergi hanya ditemukan positif 1 sebanyak 1 orang Gambar 19. Meskipun serbuk sari pinus tertangkap di wilayah Jakarta, pohon pinus bukan merupakan tanaman khas di Jakarta. Pohon pinus banyak ditanam di daerah perumahan dalam jumlah terbatas, sehingga pajanannya tidak terlalu banyak seperti tanaman lain. Gambar 19 Perbedaan sensitivitas kedua kelompok terhadap serbuk sari pinus 1 2 3 Frekuensi kasus Positif 1 Positif 2 Positif 3 Derajat sensitivitas riwayat alergi tanpa riwayat alergi 1 2 3 Frekuensi kasus Positif 1 Positif 2 Positif 3 Derajat sensitivitas riwayat alergi tanpa riwayat alergi Pohon pinus dari spesies Pinus merkusii disebut pula dengan pinus Sumatra Sumatran pine. Alergi terhadap serbuk sari pinus jarang dilaporkan dan tampaknya tidak bermakna secara klinis. Sebuah penelitian di Spanyol Selatan melaporkan adanya reaksi uji kulit positif terhadap serbuk sari cemara Australia Casuarina equisetifolia pada 6 orang dari 210 pasien non-atopi dengan riwayat rinitis, asma, atau rinitis asma hanya pada musim gugur. Lima orang di antaranya menunjukkan reaksi IgE positif dari darah dengan cara RAST Garcia 1997. Penelitian lain di Arizona, Amerika Serikat mendapatkan 12 dari 826 pasien atopik 1,5 yang menghasilkan uji kulit positif terhadap serbuk sari pohon Pinus ponderosa Freeman 1993. Belum ada laporan tentang alergi serbuk sari pohon Pinus merkusii. Sensitivitas terhadap serbuk sari Grasses mix. Uji sensitivitas terhadap serbuk sari Grasses mix pada kelompok riwayat alergi mendapatkan 18 orang positif 1 dan 7 orang positif 2, sedangkan pada kelompok tanpa riwayat alergi ditemukan 12 orang positif 1 dan 4 orang positif 2 Gambar 20. Dalam sediaan alergen 12 Grasses mix, salah satunya adalah Bermuda grass C.dactylon yang umum dijumpai di Indonesia, sehingga reaksi positif dapat terjadi karena pajanan dengan jenis rumput tersebut. Gambar 20 Perbedaan sensitivitas kedua kelompok terhadap Grasses mix 2 4 6 8 10 12 14 16 18 Frekuensi kasus Positif 1 Positif 2 Positif 3 Derajat sensitivitas riwayat alergi tanpa riwayat alergi Selain itu, diduga adanya kandungan protein yang epitopnya bagian alergen yang merangsang pembentukan antibodi IgE sama dalam Grasses mix dengan serbuk sari Poaceae lainnya, yang umum terdapat di lingkungan tempat tinggal responden. Reaksi silang sering ditemukan di antara suku Poaceae karena adanya kandungan epitop protein yang serupa Sridhara et al. 2000; Jutel 2005. Sensitivitas terhadap tungau debu rumah. Alergen tungau debu rumah merupakan alergen terbanyak yang menimbulkan reaksi uji tusuk kulit positif pada hampir semua orang di seluruh dunia, karena pada umumnya orang lebih lama berada di dalam rumah atau ruangan, sehingga lebih sering dan lama terpajan dengan tungau debu rumah Pumhirun et al. 1997, Baratawidjaja et al. 1998b. Oleh karena itu, alergen tungau debu rumah termasuk salah satu yang harus ada dalam panel uji tusuk kulit dan sebagai petunjuk ada tidaknya atopi pada seseorang. Berdasarkan uji tusuk kulit dengan alergen tungau debu rumah, diketahui bahwa atopi ditemukan pada sekitar ≥25 populasi manusia tanpa memandang riwayat alerginya Bousquet et al. 2008. Namun dalam penelitian ini, proporsi orang tanpa riwayat alergi yang terbukti atopik positif salah satu tungau jauh lebih besar, yaitu 47,8. Timbulnya reaksi positif terhadap serbuk sari yang diteliti, pada kelompok tanpa riwayat alergi diduga kelompok tersebut pernah terpajan dengan serbuk sari tersebut, tetapi tidak cukup memberikan gejala penyakit alergi. Dari hasil uji tusuk kulit pada penelitian ini, didapatkan hasil positif tertinggi terhadap tungau debu rumah untuk kedua kelompok dibanding dengan alergen yang lainnya, hanya saja berbeda dalam derajat sensitivitasnya. Perbedaan sensitivitas seseorang kemungkinan dapat disebabkan oleh tingginya proporsi kelompok tanpa riwayat alergi yang terbukti atopik. Secara klinis, pada umumnya diagnosis atopik antara lain dibuktikan dengan reaksi uji tusuk kulit positif terhadap Dermatophagoides pteronyssinus Der.p dan atau Dermatophagoides farinae Der.f yang merupakan alergen dalam rumah. Perbedaan hasil uji tusuk kulit antara kelompok riwayat alergi dan kelompok tanpa riwayat alergi Hasil uji tusuk kulit pada kelompok riwayat alergi menunjukkan bahwa persentase reaksi positif terhadap serbuk sari alang-alang dan akasia lebih tinggi dibanding terhadap serbuk sari lainnya Tabel 2. Persentase kelompok riwayat alergi bereaksi positif terhadap ekstrak serbuk sari alang-alang 20,3, akasia 15,9, dan kelapa genjah 10,1, sedangkan terhadap ekstrak serbuk sari yang diteliti lainnya memberikan reaksi positif kurang dari 10. Dari 7 jenis alergen serbuk sari yang diuji, perbedaan persentase sensitivitas uji tusuk kulit yang bermakna antara kelompok riwayat alergi dan tanpa riwayat alergi hanya tampak pada serbuk sari alang-alang, akan tetapi dibandingkan terhadap alergen Grasses mix, persentase kelompok riwayat alergi bereaksi positif terhadap ekstrak serbuk sari tanaman yang diteliti masih lebih rendah Tabel 2. Tabel 2 Perbedaan persentase uji tusuk kulit positif terhadap alergen berbeda antara kelompok riwayat alergi dan kelompok tanpa riwayat alergi Jenis alergen Riwayat alergi Tanpa riwayat alergi n N Akasia 11 15,9 11 15,9 Alang-alang 14 20,3 6 8,7 Jagung 5 7,2 5 7,2 Kelapa genjah 7 10,1 6 8,7 Kelapa sawit 5 7,2 2 2,9 Padi 4 5,8 2 2,9 Pinus 3 4,3 1 1,4 Campuran rumput Grasses mix 25 36,2 16 23,2 Dermatophagoides pteronisinnus Der. p 54 78,3 19 27,5 Dermatophagoides farinae Der. F 54 78,3 30 43,5 Demikian pula jika dibandingkan terhadap alergen tungau debu rumah Der. p dan Der. f kelompok riwayat alergi yang memberikan reaksi positif sangat tinggi. Kecenderungan sensitivitas terhadap alergen serbuk sari Grassess mix dan tungau debu rumah Der. p dan Der. f lebih banyak pada kelompok riwayat alergi dibandingkan tanpa riwayat alergi. Kelompok riwayat alergi ditentukan berdasarkan pada kedatangan pasien ke rumah sakit atau klinik, umur pasien yang datang berkisar 20-52 tahun, kebanyakan di bawah atau berumur 30 tahun 42. Kelompok riwayat alergi sebagian besar menderita rinitis alergi 51 orang 74, 14 orang 20 asma, dan 4 orang 6 menderita keduanya. Kelompok ini sebagian besar perempuan 51 orang. Umur kelompok riwayat alergi dalam penelitian ini serupa dengan umur pasien rinitis alergi yang dilaporkan beberapa negara di Eropa, yaitu 36 tahun dengan kisaran antara 31-42 tahun Bauchau Durham 2005. Penelitian di Thailand mendapatkan prevalensi hiperreaktivitas bronkus dan asma tertinggi pada kelompok usia 30-39 tahun Dejsomritrutai et al. 2006. Di Amerika Serikat AS prevalensi asma pada perempuan hampir dua kali lipat dari penderita laki-laki CDC 2001, gejala perbedaan penyakit alergi pada perempuan dibandingkan pada laki-laki di AS telah tampak dalam 20 tahun terakhir Anderson et al. 1992. Perbedaan ini kemungkinan karena perbedaan hormon seks Barr et al. 2004; Zimmerman et al 2000, perbedaan ukuran jalan napas dan responsivitasnya Pagtakhan et al. 1984, atau obesitas Chen et al. 2002; Thomson et al. 2003. Fluktuasi hormon perempuan estrogen dan progesteron berhubungan dengan gejala-gejala rinitis alergi musiman Stübner et al. 1999. Perubahan-perubahan di hidung diketahui terjadi selama siklus menstruasi, pubertas, dan kehamilan Kalogeromitros et al. 1995; Ellegard 2004. Reaksi positif uji tusuk kulit terhadap alergen dapat dibedakan derajat sensitivitasnya berdasarkan diameter bentol, positif 1 3-5 mm, positif 2 6-10 mm, positf 3 11-20 mm, dan positif 4 bila 20 mm. Dalam pengujian ini, pasien yang diuji tidak ada yang memperlihatkan derajat positif 4. Derajat sensitivitas masing-masing alergen pada kelompok riwayat alergi dan tanpa riwayat alergi disajikan pada Gambar 21 dan 22. Derajat sensitivitas terhadap akasia, baik pada kelompok riwayat alergi maupun tanpa riwayat alergi umumnya bereaksi positif 1 yang berarti telah terjadi pajanan serbuk sari pada kedua kelompok. Tampaknya pajanan yang terjadi pada kedua kelompok masih rendah. Derajat sensitivitas terhadap serbuk sari kelapa genjah pada kelompok riwayat alergi didapatkan positif 1 4 orang dan positif 2 3 orang. Pada kelompok tanpa riwayat alergi hanya didapatkan positif 1 sebanyak 6 orang. Terhadap serbuk sari kelapa sawit, pada kelompok riwayat alergi didapatkan 4 orang bereaksi positif 1 dan 1 orang positif 2, sedangkan pada kelompok tanpa riwayat alergi hanya ditemukan 2 orang yang masing-masing positif 1 dan 2 Gambar 21 dan 22. Seperti diketahui tanaman kelapa sawit banyak ditanam di Jakarta sebagai tanaman penghijauan dan elemen pertamanan, sehingga ada kemungkinan telah terjadi pajanan serbuk sari kelapa sawit pada penduduk Jakarta. Sensitivitas terhadap serbuk sari alang-alang bereaksi positif 2, didapatkan pada 9 orang dengan riwayat alergi dan hanya 1 orang tanpa riwayat alergi. Di India alang-alang secara klinis lebih kuat mencetuskan reaksi alergi pada pasien atopik dibandingkan spesies lain dalam suku Poaceae Sridhara et al. 1995. Penelitian klinis lebih lanjut memperlihatkan uji tusuk kulit bereaksi positif pada 8,9 dari 303 pasien alergi pernapasan Kumar et al. 1998. Serbuk sari alang- alang tampaknya merupakan alergen penyebab sensitivitas tinggi pada kelompok riwayat alergi, sehingga berpotensi sebagai bahan alergen dalam panel pemeriksaan uji tusuk kulit. Reaksi sensitivitas terhadap serbuk sari jagung bereaksi positif 2 pada kelompok riwayat alergi ada 4 orang, sedangkan pada kelompok tanpa riwayat alergi hanya 1 orang. Ekstrak serbuk sari padi menghasilkan reaksi positif 2 pada 3 orang riwayat alergi dan 1 orang tanpa riwayat alergi. Penelitian sensitivitas terhadap serbuk sari jagung dan padi menunjukkan rendahnya tingkat sensitivitas pada kedua kelompok Gambar 21 dan 22, ini dapat disebabkan orang yang terpapar hanya sedikit mengingat area ladang jagung tidak banyak dan persawahan di Jakarta hampir tidak ada. Sensitivitas terhadap serbuk sari pinus sangat sedikit, hanya ditemukan positif 2 pada tiga orang riwayat alergi dan 1 orang tanpa riwayat alergi dengan positif 1. Umumnya serbuk sari kerabat-kerabat pinus secara klinis tidak dianggap penting karena ukurannya sangat besar, antara 50-90 µ m dan bersifat antigenik lemah. Uji sensitivitas terhadap serbuk sari Grasses mix pada kedua kelompok kebanyakan menghasilkan sensitivitas positif 1, ini menyatakan banyak orang yang sudah terpapar walaupun tidak menunjukkan gejala, sedangkan terhadap tungau debu rumah sebagian besar memperlihatkan sensitivitas positif 2 pada kelompok riwayat alergi. 7 3 1 5 9 1 4 4 3 4 1 3 1 3 18 7 18 31 5 21 29 5 5 10 15 20 25 30 35 Jum la h O ra ng ya ng S ens iti f + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 Akasia Alang- alang Jagung K_genjah K_sawit Padi Pinus Grass_mix Der_p Der_f + 1 + 2 + 3 Gambar 21 Derajat sensitivitas uji tusuk kulit pada kelompok riwayat alergi 8 3 5 1 4 1 6 1 1 1 1 1 12 4 12 7 18 12 5 10 15 20 25 30 35 Jum la h O ra ng ya ng S ens tif + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 + 1 + 2 + 3 Akasia Alang- alang Jagung K_genjah K_sawit Padi Pinus Grass_mix Der_p Der_f + 1 + 2 Gambar 22 Derajat sensitivitas uji tusuk kulit pada kelompok tanpa riwayat alergi Perbedaan sensitivitas kedua kelompok terhadap serbuk sari alang-alang, akasia dan Grasses mix Reaksi positif terhadap serbuk sari alang-alang dan akasia baik pada kelompok alergi menunjukkan persentase lebih tinggi dibandingkan terhadap serbuk sari yang diteliti lainnya. Akan tetapi bila dibandingkan terhadap Grasses mix yang bereaksi positif masih lebih rendah Gambar 23. Serbuk sari alang- alang merupakan satu-satunya alergen yang memberikan perbedaan hasil bermakna pada uji klinis antara kelompok riwayat alergi dan kelompok tanpa riwayat alergi. Alang-alang merupakan tumbuhan liar yang tidak ditanam dan tersebar luas hampir di seluruh wilayah Jabotabek, ini merupakan salah satu dasar pemilihan serbuk sari alang-alang untuk diperiksa potensi kealergenikannya. Alang-alang pada umumnya mudah tumbuh di mana-mana, serbuk sarinya ringan dan mudah disebarkan angin, sehingga orang lebih berisiko untuk terpajan pada waktu musim berbunga Bijli et al. 2003. Alang-alang juga banyak terdapat di wilayah bersuhu panas di Asia, Afrika Selatan, dan Australia. Gambar 23 Perbedaan sensitivitas kedua kelompok terhadap alang-alang, akasia dan Grasses mix Walaupun persentase reaksi positif terhadap serbuk sari akasia tidak berbeda pada kedua kelompok responden, tetapi derajat sensitivitasnya berbeda. Pada kelompok riwayat alergi, bervariasi derajat sensitivitasnya positif 1 sampai 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Positif 1 Positif 2 Positif 3 Positif 1 Positif 2 Positif 3 Positif 1 Positif 2 Positif 3 Riwayat alergi Tanpa riwayat alergi Grasses mix Alang-alang Akasia 3, sedangkan pada kelompok tanpa riwayat alergi tidak ada yang positif 3. Kemungkinan alergen ini telah menimbulkan hipersensitivitas yang tidak disadari oleh orang tanpa riwayat alergi karena gejala klinis yang ringan seperti bersin- bersin, yang dapat dianggap sebagai penyakit flu biasa dan bukan alergi oleh kebanyakan orang. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa serbuk sari akasia merupakan alergen pencetus alergi pada manusia, sebaiknya dipikirkan untuk mengganti dengan pohon peneduh lain, yang telah diidentifikasi serbuk sarinya bukan penyebab alergi pada manusia. Hasil uji tusuk kulit terhadap campuran rumput Grasses mix menunjukkan persentase dari masing-masing kelompok responden lebih tinggi dari persentase serbuk sari yang diuji Gambar 21, 22, 23. Dalam sediaan alergen Grasses mix, salah satunya adalah Bermuda grass C.dactylon yang umum dijumpai di Indonesia, sehingga dapat menghasilkan reaksi positif akibat adanya pajanan. Dari hasil penelitian ini tampak bahwa serbuk sari Poaceae, Grasses mix dan alang-alang, memberikan sensitivitas yang cukup bermakna secara klinis. Artinya dalam populasi studi, pasien alergi juga memiliki risiko yang lebih tinggi untuk mengalami sensitivitas terhadap serbuk sari Poaceae dibandingkan orang tanpa riwayat alergi. Dua serbuk sari Poaceae lainnya, yaitu jagung dan padi, tidak banyak menghasilkan sensitivitas pada kelompok studi, yang kemungkinan disebabkan perbedaan antara tempat tinggal orang yang diteliti dan area penangkapan serbuk sari. Alergen serbuk sari yang digunakan dalam penelitian ini berasal dari ekstrak kasar protein serbuk sari. Alergen komersial untuk uji tusuk kulit telah diketahui susunan polipeptidanya yang menghasilkan reaksi alergenik, yaitu reaksi yang memproduksi IgE. Produksi antibodi IgE pada pasien alergi akan mengakibatkan munculnya gejala-gejala alergi dari rinitis sampai asma. Untuk pembuatan vaksin imunoterapi, perlu dilakukan analisa polipeptida yang ada dalam ekstrak kasar serbuk sari. Alang-alang, jagung, padi dan Grasses mix termasuk suku Poaceae. Antar suku Poaceae sering terjadi reaksi silang karena adanya protein yang sejenis, sehingga dapat memberikan reaksi yang serupa Weber 2003. Dari hasil penelitian ini tampak bahwa serbuk sari Grasses mix dan alang-alang, memberikan perbedaan sensitivitas yang cukup bermakna secara klinis. Artinya dalam populasi studi, pasien alergi juga memiliki risiko yang lebih tinggi untuk mengalami sensitivitas terhadap serbuk sari Poaceae dibandingkan orang tanpa riwayat alergi. Serbuk sari jagung dan padi tidak banyak menghasilkan sensitivitas pada kelompok studi, yang kemungkinan disebabkan perbedaan antara tempat tinggal responden penelitian dan area penangkapan serbuk sari. Penelitian klinis oleh Petersen et al. 2006 pada pasien polinosis rumput memperlihatkan adanya reaksi silang cross-reactivity antara alergen dari serbuk sari Timothy grass Phl p1 dan serbuk sari jagung Zea m1. Namun reaktivitas alergen Zea m1 jauh lebih rendah dibandingkan Phl p1. Hampir semua serbuk sari Poaceae memiliki reaktivitas silang derajat tinggi, karena banyak epitop yang sama di sebagian besar spesies Lieferman Gleich 1976. Komponen alergenik utama pada sebagian besar, yaitu alergen Gp1, merupakan glikoprotein yang memicu gejala-gejala alergi pada individu yang sensitif serbuk sari Poaceae. Respons uji tusuk kulit positif dapat terjadi sampai 43 pada orang tanpa gejala penyakit alergi Kerkhof et al. 1996. Studi longitudinal memperlihatkan bahwa adanya uji tusuk kulit positif pada orang tanpa gejala dapat memprediksi munculnya gejala-gejala alergi di kemudian hari, termasuk asma Horak 1985, Bodtger et al. 2003, terutama jika kadar alergen tinggi. Uji tusuk kulit positif pada orang yang tersensitisasi tanpa gejala dapat terjadi pada 1-5 alergen tunggal dan 8-30 panel aeroalergen. Ciri penting yang ditemui pada orang tersensitisasi tanpa gejala adalah kemampuan menghasilkan reaksi alergi fase dini Bodtger et al. 2003, tetapi tidak fase lambat yang ditandai dengan inflamasi eosinofilik Durham et al. 1996. Studi lain pada sampel mukosa saluran napas hidung dan bronkhus mendapatkan bahwa pada orang tanpa gejala dengan uji tusuk kulit positif terhadap tungau debu rumah, tidak terjadi proses inflamasi di saluran napas. Pada orang-orang ini, tidak tampak timbunan sel-sel eosinofil dan basofil serta tidak tampak penebalan membran basal di mukosa saluran napas. Selain itu, hitung eosinofil darah secara bermakna lebih rendah dibandingkan pasien rinitis alergi dan asma Braunsthal et al. 2003. Gejala-gejala alergi dapat muncul pada 20-60 orang setelah 2-24 tahun Bodtger 2004.

5. SIMPULAN