SINTESIS SENYAWA N-(4-HIDROKSIFENIL) PROPIONAMIDA DAN UJI AKTIVITAS ANALGESIK PADA MENCIT (Mus musculus)
SKRIPSI
GITTA ASRINA
SINTESIS SENYAWA N-(4-HIDROKSIFENIL)
PROPIONAMIDA DAN UJI AKTIVITAS
ANALGESIK PADA MENCIT (Mus musculus)
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2016
ii
KATA PENGANTAR
Bismillahirrahmanirrahim,
Puji syukur kehadirat Allah SWT yang tiada hentinya memberikan nikmat,
karunia, hidayah kepada penulis, salah satunya nikmat yang telah tercurahkan
sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Sintesis Senyawa N(4-Hidroksifenil) propionamida dan Uji Aktivitas Analgesik Pada Mencit (Mus
musculus)” guna untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi
Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang. Shalawat serta
salam tetep terlimpahkan kepada Nabi Muhammad SAW.
Ucapan terima kasih yang tulus penulis haturkan kepada :
1.
Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan hidayah-Nya sehingga
penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.
2.
Kedua orang tua penulis, ayahanda Drs. H. Syamsuardi, M. AP. dan ibunda
Hj. Siti Erma, S.Sos., M. AP. yang penulis cintai yang telah memberikan
dukungan serta moral, materi dan spritual.
3.
Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang. Atas
kesempatan mengikuti pendidikan di Program Studi Farmasi kepada penulis
untuk menamatkan program pendidikan sarjana.
4.
Fakultas Farmasi Universitas Airlangga yang telah memberikan kesempatan
kepada penulis untuk melakukan penelitan dan pengamatan data guna
terselesaikannya penelitian ini.
5.
Bapak Dr. Bambang Tri Purwanto, Apt., MS. selaku pembimbing I yang
senantiasa memberikan semangat, nasihat dan bukan hanya sekedar menjadi
dosen bagi penulis tetapi menjadi ayah kedua bagi penulis karena telah
membagikan banyak waktu, ilmu dan pengalaman.
6.
Ibu Sovia Aprina Basuki, S.Farm., M.Si., Apt. selaku pembimbing II. Teima
kasih atas bimbingannya dan memberikan pengalaman yang luar biasa kepada
penulis agar tidak mudah menyerah dan selalu berusaha.
iv
7.
Bapak Drs. H. Achmad Inoni, Apt. selaku dosen penguji I dan Drs. Uswatun
Chasanah M.Kes., Apt. selaku penguji II yang memberikan dukungan untuk
menyelesaikan skripsi penulis dengan sebaik-baiknya.
8.
Ibu Arina Swastika selaku dosen wali yang telah memberikan arahan,
pandangan dan semangat yang tidak pernah henti kepada penulis.
9.
Bapak dan ibu dosen dan seluruh staf pengajar Program Studi Farmasi atas
wawasan keilmuan selama mengikuti pendidikan di Fakultas Ilmu Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Malang
10. Adik penulis Faza ayyasi serta keluarga besar yang tiada henti memanjatkan
doa dan dukungan moral kepada penulis.
11. Sang kekasih Gatut Ari Suseno yang tiada henti memberikan semangat,
menemani saat berjuang skripsi, mendengarkan keluh kesah dan senantiasa
memberikan dorongan doa dan motivasi setiap saat kepada penulis.
12. Sahabat skripsi kimia medisinal yang penulis cintai yaitu Della Fibrilia dan
Fitriansyah Bachruddin yang telah memberikan semangat, merawat saya sakit
selama penelitian serta setia kepada penulis selama menempuh pendidikan
sarjana di Program Studi
Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang.
Terima kasih telah berjuangan bersama untuk menyelesaikan skripsi ini.
13. Teman penelitian skripsi kimia medisinal Anita Racmawati dan Fathimatus
K. yang telah berjuang bersama menyelesaikan penilitian skripsi.
Malang, 2016
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ……………………………………………………..…………….....
i
LEMBAR PENGESAHAN ……………………………......…………….....
ii
LEMBAR PENGUJIAN ................................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...................................................................................
iv
RINGKASAN ................................................................................................
vi
ABSTRAK .....................................................................................................
vii
ABSTRACT ...................................................................................................
viii
DAFTAR ISI …………………………………………………...……….......
ix
DAFTAR GAMBAR ……………….......………………….......……….......
xiii
DAFTAR TABEL …………………………...………………………...........
xiv
DAFTAR LAMPIRAN …………………………………………………......
xv
BAB I PENDAHULUAN ………………………………………………......
1
1.1 Latar Belakang ………………....…………………………….................
1
1.2 Rumusan Masalah ……………………………………………................
6
1.3 Tujuan Penelitian ……………...………………………………..............
6
1.4 Hipotesis …………………………………….....……………….............
7
1.5 Manfaat Penelitian ……………………...……………………................
7
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ………………………………...………....
8
2.1 Tinjauan Tentang Nyeri ……………………...………….……...............
8
2.1.1 Definisi Nyeri …………………...……………….……..................
8
2.1.2 Klasifikasi Nyeri ……………………………….………................
8
2.1.3 Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Nyeri …….……….................
9
2.1.4 Fisiologi Nyeri ….………………...……………………................
9
2.1.5 Mekanisme Nyeri ………………………………………................
10
2.2 Tinjauan Tentang Analgetika ….………………………………..............
11
2.2.1 Pembagian Analgetika …….………………………...…................
11
2.3 Tinjauan Tentang Bahan ………….…………………........….................
12
2.3.1 p-aminofenol ……………….….......…………………...................
12
2.3.2 Propionil Klorida …………….…….......…………….....................
13
ix
2.4 Tinjauan Tentang Asilasi …………….…………...………….................
13
2.5 Tinjauan Tentang Kemurnian dan Identifikasi Senyawa ….....................
14
2.5.1 Tinjauan Tentang Titik Leleh ………...………………...................
14
2.5.2 Tinjauan Tentang Kromatografi Lapis Tipis ...………....................
14
2.5.3 Tinjauan Tentang Identifikasi Senyawa dengan Spektrofotometer
Ultraviolet ….……………....………...............................................
15
2.5.4 Tinjauan Tentang Identifikasi Senyawa dengan Fourier
Transform-Infra Red Spectroscopy (FT-IR) atau Spektrofotometer
Inframerah (IR) ……....……………................................................
15
2.5.5 Tinjauan Tentang Identifikasi Senyawa dengan Spektrometer
Resonansi Magnetik inti (1H-NMR) …............................................
15
2.6 Tinjauan Tentang Metode Pengujian Aktivitas Analgesik …..................
16
2.6.1 Metode Stimulasi Panas ……………………………......................
16
2.6.2 Metode Stimulasi Listrik ………………………….........................
17
2.6.3 Metode Stimulasi Tekanan …………………………......................
17
2.6.4 Metode Stimulasi Kimiawi ………………………….....................
17
2.7 Tinjauan Linearitas ……………………………………...........................
17
2.8 Tinjauan Tentang ED50 …………………………………….....................
18
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL …………………………….….......
19
3.1 Kerangka Konseptual Penilitian ………………………….….................
19
3.2 Skema Kerangka Konseptual …………………………………...............
21
BAB IV BAHAN, ALAT DAN METODE PENELITIAN ……….……......
22
4.1 Bahan Penelitian ……………………………………….…….................
22
4.1.1 Bahan Kimia …………………………………….….......................
22
4.1.2 Hewan Coba ………………………….....……….……..................
22
4.2 Alat Penelitian ………………………………………….….....................
22
4.3 Tempat dan Waktu Penelitian ………………………….…….................
23
4.4 Metode Penelitian …………………………………….………...............
23
4.4.1 Prosedur Sintesis Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida .....
23
4.5 Analisis Hasil Senyawa Preparasi …………….......…..………...............
24
4.5.1 Pemeriksaan Organoleptis ……………………..…….....................
24
4.5.2 Pemeriksaan Jarak Lebur ………………….…….……..................
24
x
4.5.3 Identifikasi dengan Kromatografi Lapis Tipis .….……..................
25
4.6 Identifikasi Struktur Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida …......
25
4.6.1 Identifikasi Struktur dengan Spektrofotometer UV-Vis .................
25
4.6.2 Identifikasi Struktur dengan Spektrofotometer IR ..........................
26
4.6.3 Identifikasi Struktur dengan Spektrofotometer Resonansi Magnet
Inti (1H-NMR) ………….................................................................
26
4.7 Uji Aktivitas Analgesik ……………………………………....................
26
4.7.1 Persiapan Hewan Coba …………………………...........................
26
4.7.2 Pembuatan Larutan Asam Asetat 0.6% v/v dan CMC-Na 0,5%
b/v …....………………………………………................................
27
4.7.2.1 Pembuatan Larutan Asam Asetat 0,6% v/v ........................
27
4.7.2.2 Pembuatan Larutan CMC-Na 0,5% b/v ……......................
27
4.7.3 Pengaturan Dosis ……………………………....…….....................
27
4.7.4 Pembuatan Sediaan Uji …………………………....…...................
27
4.7.5 Pemberian Sediaan Uji pada Mencit …………………...................
28
4.7.6 Pelaksanaan Uji Aktivitas ……………………………...................
28
4.8 Analisis Data …………………………………………………................
28
4.8.1 Analisis Statistik ANOVA ……………………………..................
28
4.8.2 Penentuan Hambatan Nyeri …………………………….................
29
4.8.3 Kerangka Operasional ………………………………….................
31
BAB V HASIL PENELITIAN ...................................………………….......
33
5.1 Senyawa Hasil Sintesis ……………………….....……...........................
33
5.1.1 Persentase Senyawa Hasil Sintesis ..................................................
33
5.2 Analisis Kualitatif Sentawa Hasil Sintesis ..………….……....................
33
5.2.1 Analisis Kualitatif dengan Pemeriksaan Organoleptis ...................
33
5.2.2 Anailisis Kualitatif dengan Pemeriksaan Jarak Lebur ...................
33
5.2.3 Analisis Kualitatif dengan Kromatografi Lapis Tipis.....................
34
5.3 Identifikasi Struktur Senyawa Hasil Sintesis ...........................................
35
5.3.1 Identifikasi Struktur Senyawa Hasil dengan Spektrofotometer
UV-Vis .............................................................................................
35
5.3.2 Identifikasi Struktur Senyawa Hasil dengan Spektrofotometer IR..
36
xi
5.3.3 Identifikasi Senyawa Hasil dengan Spektrometer Resonansi
Magnet Inti (1H-NMR) ....................................................................
38
5.4 Uji Aktivitas Analgeik .............................................................................
40
5.4.1 Penentuan Frekuensi Geliat .............................................................
40
5.4.2 Analisis Data dengan Anova ...........................................................
41
5.4.3 Perhitungan % Hambatan Nyeri ......................................................
41
5.5 Penentuan ED50 ........................................................................................
43
BAB VI PEMBAHASAN ..............................................................................
44
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................
50
7.1 Kesimpulan ..............................................................................................
50
7.2 Saran ........................................................................................................
50
DAFTAR PUSTAKA …………………………………………………........
51
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1
Surat Pernyataan ...................................................................................
56
2
Daftar Riwayat Hidup ………………………………………………...
57
3
Perhitungan Persentase Hasil ................................................................
58
4
Perhitungan Dosis Uji Aktivitas ...........................................................
59
5
Perhitungan % Hambatan Nyeri ...........................................................
62
6
Perhitungan ED50 Aktivitas Analgesik Senyawa N-(4-Hidroksifenil)
propionamida dan Senyawa Pembanding Parasetamol ......................... 63
7
Hasil Analisis Data dengan ANOVA (Oneway Anova) Antara
Kelompok Kontrol CMC Na 0,5 % dengan Antara Kelompok Dosis
Senyawa Pembanding Parasetamol Serta Antara Kelompok Dosis
Senyawa Uji N-(4-Hidroksifenil) propionamida ................................... 64
8
Tabel R ..................................................................................................
67
9
Tabel F ..................................................................................................
68
10
Skema Sintesis Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida ...............
69
11
Gambar Hasil Penelitian .......................................................................
72
12
Gambar
13
Mencit
Sebelum
Perlakuan,
Penyuntikan
Secara
Intraperitoneal dan Setelah perlakuan ..................................................
73
Jadwal Kegiatan dan Anggaran Biaya ..................................................
76
xv
DAFTAR PUSTAKA
Adeyemi, 2001. Analgesic and Anti-inflammatory Effects of The Aqueous
Extract of Leaves of Persea americana Mill. (Lauraceae). Italy: J.
Fitoterapia, 73, Elsevier, Indena, pp. 375-377. Airlangga University Press,
Surabaya. Airlangga University Press, p. 544.
Anas Tamsuri, 2006. Konsep dan Penatalaksanaan Nyeri. Penerbit Buku
Kedokteran. Jakarta : EGC.
Ardinata, D., 2007. Multidimensional nyeri, Jurnal Keperawatan Rufaidah
Sumatera Utara, Volume 2 : Universitas Sumatera Utara.
Bresnick, S., 2003. Intisari Kimia Organik. Diterjemahkan oleh Hadiah
Kontong. Jakarta : Hipokrates.
Brunner & Suddarth 2001. Buku Ajar Medikal Bedah. Volume 1, Edisi ke-8.
Jakarta : EGC.
Chan, C.C., Lam, H., Lee, Y.C., & Zhang, X.M., 2004. Analytical Method
Validation and Instrument Performance Verification, Wiley‐
Interscience, John Willey and Sons Inc., Hoboken, New Jersey.
Chemical Book, 2010. Propionyl Chloride, http://www.chemicalbook.com/
ChemicalProductProperty_EN_CB3156885.htm. Diakses tanggal 29
Oktober 2015.
ChemBioDraw Ultra Application, 2009. Chemical Structure Version 12.0.
Diakses tanggal 27 juli 2005.
Depkes RI., 2009. Sistem Kesehatan Nasional. Jakarta.
Domer, F.R., 1971. Animal Experiment in Pharmacological Analysis. Charles
Thomas Publisher, Lousiana, pp. 149-111.
Ekowati, J., Dyah, N.W., Astika, G.N., Budiati, T., 2010. Sintesis Asam ortometoksi-sinamat dari Material Awal o-metoksibenzaldehida dan Uji
Aktivitas Analge-siknya. Airlangga J. of Pharmacy, Vol. 8(2), pp. 12-17.
Fessenden. R.J., Fessenden. J.S., 1999. Kimia Organik Edisi Ke-3. Jilid kedua.
Jakarta : Erlangga.
Gandhar & Rohman, 2012. Kimia Farmasi Analisis. Pustaka Pelajar.
Yogyakarta.
Gandjar, G.I., dan Rohaman, A., 2012. Analisis Obat Secara Spektrofotometri
dan Kromatografi. Yogyakarta : Pustaka Ilmu, hal 321-284.
Ganong, W. F., 1998. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi ke-17. Jakarta :
EGC.
Ganong, W.F., 2002. Buku ajar fisiologi kedokteran. Edisi ke-20, Alih bahasa
dr H.M. Djauhari Widjajakusumah. Jakarta : EGC.
Gupta, S., Khadivar, PV., Mathur, KC., 2003. Topological Modelling of
Analgesia. Dalam : Janda, KD, Bioorganic & Medical Chemistry, Oxford
: Elsivier 11 (8).
Guyton & Hall, 2007. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran dan Mekanisme
Mekanisme Penyakit. Jakarta : EGC.
Guyton, A.C., 1995. Fisiologi manusia dan mekanisme penyakit. Terj. Dari
Human physiology and mechanisms of disease, oleh Andrianto, P.
Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta: xii = 821 hlm.
Hartwig, Mary S., Wilson, Lorraine M., 2006. Nyeri. Dalam : Price, Sylvia A.,
Wilson, Lorraine M., eds. Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses
Penyakit. Vol 1. Edisi ke-6. Jakarta : EGC. Hal 1063-1069.
Harmita, 2004. Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya.
Majalah Ilmu Kefarmasian. 1 (3). Hal 117-134. Departemen Farmasi
FMIPA. Universitas Indonesia, Jakarta
ISFI. ISO informasi spesialis obat Indonesia. Vol. 41. Jakarta : ISFI; 2006
Jakarta : EGC. Jakarta : EGC, 2005.
Kelompok Kerja Ilmiah Phyto Medica, 1993. Penapisan Farmakologi,
Pengujian
Fitokimia dan Pengujian Klinik. Jakarta : Yayasan
Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica. Hal 167-170.
Kelompok Kerja Ilmiah. 1993. Penipisan Farmaklogi, Pengujian Fitokimia,
dan Pengujian Klinik. Jakarta : Yayasan Perkembangan Obat Bahan Alam.
Hal 3-6.
Laurence, DR., Bennet PN., Brown, MJ., 1997. Clinical pharmacology. 8th ed.
New York : Churchill Livingstone.
Logan, E, D., & Rose, B, J., 2004. Gender differences in post-operative pain
and patient controlled analgesia use among adolescent surgical patients.
Manihuruk, E., 2000. Aktivitas Analgesik Daun Dewa (Gynura pseudochina L.)
(DC.) pada Mencit Dengan Metode Geliat. Bandung: Skripsi, Jurusan
Farmasi, FMIPA, Universitas Padjajaran, Jatinangor. Media
Komputindo. Medikal – Bedah. Alih Bahasa : dr. H. Y. Kuncara. Jakarta :
EGC.
ii
Martinez, V., Thakur, J.S., Mogil, Y., Tache, E.A., Mayer, 1999. Differential
Efeect of Chemicak and Mechanical Colonic Iritation on Behavioral
Pain Response to Intraperitoneal Acetic Acid in Mice.
Mulya, M., & Suharman, 1995. Analisis Instrumental. Surabaya : Airlangga
University Press.
Mutschler, E., 1991. Dinamika Obat; Buku Ajar Farmakologi dan
Toksikologi. Edisi ke-5, diterjemahkan oleh Widianto, M. B. Dan A. S.
Ranti. Bandung ; Penerbit ITB. Pp. 177-195. Patient controlled analgesia
use among adolescent surgical patients.
Payan, DG., & Katzung, BG., 1997. Obat anti inflamasi non steroid; analgesik
non opioid; obat yang digunakan pada gout. Dalam Bertram G Katzung.
Farmakologi dasar dan klinik. Jakarta : EGC.
Pavia, D.L., Lampman, G.M., Kriz, G.S.Ir., 1966. Introoduction to
Specroscopy: A Guide for Students of Organic Chemistry, 2nd ed.
Washington Departement of Chemistry, Harcourt Brace Collage Publisher,
pp. 28-29.
Potter, P.A., Perry, A.G., 2015. Buku Ajar Fundamental Keperawatan :
Konsep, Proses, Dan Praktik. Edisi ke-4. Volume 1. Alih Bahasa : Yasmin
Asih, dkk. Proses, dan Praktik. Edisi ke-4. Volume 2. Alih Bahasa : Renata
Komalasari, dkk. Jakarta : EGC. 2005.
Pudjono, 1984. Modifikasi Molekul Parasetamol Dengan Menutupi Gugus
Toksigenik (Untuk Menghambat Pembentukan Arilamin), Tesis,
Universitas Gaya Mada..
Purwanto dan Susilowati, R., 2000. Hubungan Struktur-Aktivitas Obat
Analgetika. Dalam: Siswandono., Soekardjo, B (Eds.). Kimia Medisinal
Edisi 2, Surabaya : Airlangga University Press.
Rohman, A., 2009. Kromatografi untuk Analisis Obat. Yogyakarta : Graha
Ilmu.
Setiawan, FTrisnowati, dan Dadan Hermawan, 2006. Sintesis Natrium
Pentagamavunonat Dan Uji Stabilitas menggunakan Spektrofotometer
Uv-Visible. Purwokerto : Universitas jendral Soedirman.
Silverstein, R.M., Bassler, GC., and Morril, T.C., 2005. Spekctrofotometric
Identification of Organic Compound. Fifth edition, New York : John
Willey and Sons, pp. 898-809.
Siswandono dan B. Soekardjo., 2008. Kimia Medisinal 2. Surabaya : Airlangga
University Press.
iii
Siswandono dan Soekardjo, B., 2000, Kimia Medisinal, Edisi ke-1, hal 283-308.
Siswandono dan Soekardjo, 1995. Kimia Medisinal. Surabaya : Penerbit.
Siswandono dan Susilowati, R., 2000, Hubungan Kuantitatif Struktur
Aktivitas. In: Siswandono & Soekardjo, B. (Eds.), Kimia Medisinal 1, ed.
2, Airlangga University Press, Surabaya, pp. 261-273.
Siswandono dan Bambang Soekardjo, 1995. Kimia Medisinal. Airlangga
University Press. Surabaya.
Siswandono, 2000. Kimia Medicinal. Surabaya: Airlangga University Press.
Halaman 124.
Smeltzer, C., Suzanne, Bare, G., Brenda., 2002. Buku Ajar Keperawatan.
Smeltzer, B.C., and Barre, B.G., 2004. Buku ajar medikal bedah Bruner &
sudart. Edisi ke-8, Vol 1, Alih Bahasa : Kuncoro Monica Ester. Jakarta :
EGC.
Sukandar, E. Y., Andrajati, R., Sigit, J. I., Adnyana, I. K., Setiadi, A. A., &
Kusnandar, 2009. ISO Farmakoterapi. Jakarta: PT.ISFI Penerbitan.
Susilowati, S.S., dan Chasani, M., 2003. Sintesis Senyawa Turunan p-aminofenol
Serta Uji Aktivitas Analgetika dan Antiinflamasinya Pada Mencit dan Tikus
Putih. Purwokerto: Laporan Penelitian SPP/DPP Universitas Jenderal
Soedirman.
Susilowati, S. S., dan Handayani, N., 2006. Sintesis dan Uji Aktivitas
Analgetika-Antiinflamasi Senyawa N-(4t-ButilBenzoil)-p-Aminofenol,
Molekul, Vol 1, No 1.
Tamsuri Anas, 2007. Konsep dan Penatalaksanaan Nyeri. Jakarta : EGC.
Tan, T. H., dan Kirana, 2002. Obat-obat Penting Khasiat Penggunaan dan
Efek-efek Sampingnya. Edisi V. Jakarta : PT. Elex Media Komputindo.
Hal. 295-297.
Tjay, T.H., dan Rahardja, K., 2002. Obat – Obat Penting, Khasiat,
Penggunaan,dan Efek Sampingnya, Edisi V, Cetakan kedua, hal 270-279,
Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Tjay, Tan Hoan, Drs. Rahardja, Kirana, 2002. Obat-obat Penting. Jakarta :
Gramedia.
Tjay, Tan Hoan dan K. Rahardja, 2007. Obat-obat Penting. Jakarta : PT
Gramedia
iv
Utami, PM., 2014. Sintesis Senyawa 4-Hidroksifenil-3-Klorobencamida dan
Uji Aktivitas Analgesik pada Mencit (Mus musculus). Malang: Skripsi,
Jurusan Farmasi, FIKES, Universitas Muhammadiyah Malang.
Torrance, C., & Serginson. E., 1997. Surgical nursing. Bridgend, midglamorgan:
WBC Bokk Manufacturers Ltd.
Vogel, H.G., 2002. Drug Discovery and Evaluation Pharmacologycal Assays.
Vohora, S.B., and Dandiya, P.C., 1992/ Herbal Analgesic Drugs, Fitoterapia 63,
p. 202.
Vohora, S.B., and P.C. Dandiya, 1992. Herbal Analgesic Drugs. Italy: J.
Fitoterapia, LXIII (3), Elsevier, Indena. p. 202.
Willete, R.E., 1982. Analgetic Agents, dalam J.N. Delgado and W. A. Emers
(eds.) Wilson and Gisvold’s Textbook of Organic Medicinal and
harmacetical Chemistry, 8th Ed. Philadelphia : J.B. Lippincott.
Wilmana, P., Freddy, Gan Sulistia, 2007. Analgesik-Antipiretik Analgesik Antiinflamasi Nonsteroid dan Obat Gangguan Sendi Lainnya. Dalam: Gunawan,
Sulistia Gan (editor). Farmakologi dan Terapi. Edisi ke-5. Jakarta:
Departemen Farmakologi Terapeutik FK UI.
Wuryaningsih, L. E., Rarome, M. A., dan Windono, T., 1996, Uji Analgesik
Ekstrak Etanol Kering Rimpang Kencur Asal Purwodadi Pada Mencit
Dengan Metode Geliat (Writhing Reflex Test), Warta Tumbuhan Obat
Indonesia, Fakultas Farmasi Universitas Surabaya, Surabaya
Wuryaningsih, L. E., Rarome, M. A., dan Windono, T., 1996, Uji Analgesik
Ekstrak.
Wuryaningsih, L.E., M.A. Rarome, T. Windono. 1996. Uji Analgesik Ekstrak
Etanol Kering Rimpang Kencur Asal Purwodadi pada Mencit Dengan
Metode Geliat (Writhing Reflex Test), 3. Warta Tumbuhan Obat
Indonesia. hal. 24-25.
v
BAB I
PENDAHULUAN
1.1
Latar Belakang
Nyeri adalah sensasi ketidaknyamanan yang dimanifestasikan sebagai
penderitaan yang diakibatkan oleh persepsi jiwa yang nyata, ancaman, dan luka.
Nyeri itu sendiri merupakan suatu perasaan pribadi dan ambang toleransi nyeri
yang berbeda-beda bagi setiap orang (Tan dan Kirana 2002). Nyeri terjadi
bersama dengan banyak proses penyakit atau bersamaan dengan beberapa
pemeriksaan diagnostik atau pengobatan (Brunner & Suddarth 2001).
Menurut International Association for Study of Pain (IASP), nyeri adalah
pengalaman perasaan emosional yang tidak menyenangkan akibat terjadinya
kerusakan
aktual dimana kerusakan jaringan
yang sudah
terjadi
dan
mengakibatkan rasa nyeri yang tidak bisa di toleransi sehingga di butuhkan
penanganan yang lebih intensif maupun potensial merupakan kerusakan jaringan
yang masih berakibat resiko untuk timbulnya rasa nyeri, atau menggambarkan
kondisi terjadinya kerusakan (Tamsuri, 2007).
Intensitas nyeri merupakan gambaran seberapa parah nyeri yang dirasakan
individu. Pengukuran intensitas nyeri sangat subyektif dan individual, dan
kemungkinan intensitas nyeri yang dirasakan sangat berbeda setiap orang.
Pengukuran nyeri dengan pendekatan obyektif yang paling mungkin adalah
menggunakan respon fisiologik tubuh terhadap nyeri itu sendiri (Tamsuri, 2006).
Nyeri merupakan mekanisme untuk melindungi tubuh terhadap suatu
gangguan dan kerusakan di jaringan seperti peradangan, infeksi jasad renik dan
kejang otot dengan pembebasan mediator nyeri yang meliputi prostaglandin,
bradikinin, serotonin, histamin, ion kalium dan asetilkolin (Mutschler, 1991;
Guyton, 1995; Tjay dan Rahardja 2002).
Untuk mengurangi gejala nyeri diperlukan obat analgesik, yaitu obat yang
dapat mengurangi nyeri akibat sebab yang beragam seperti aspirin, parasetamol
dan morfin (Lauren et al., 1997; Payan & Katzung 1997). Analgetika atau obat
penghilang nyeri adalah zat-zat yang mengurangi atau menghalau rasa nyeri tanpa
menghilangkan kesadaran (perbedaan dengan anestetika umum) (Tjay, 2007).
1
2
Analgesik merupakan zat yang dapat menekan sistem saraf pusat secara
efektif, digunakan untuk mengubah kerja dengan meningkatkan nilai ambang
persepsi nyeri. Berdasarkan mekanisme kerja pada tingkat molekul, analgesik
dibagi menjadi dua golongan yaitu analgesik narkotik dan analgesik non narkotik.
Analgesik narkotik digunakan untuk mengurangi rasa nyeri yang berat sedangkan
analgesik non narkotik digunakan untuk mengurangi rasa nyeri ringan sampai
sedang. Berdasarkan struktur kimianya analgesik non narkotik dibagi menjadi dua
kelompok yaitu analgesik-antipiretik dan obat anti radang bukan steroid/non
steroidal antiinflammatory drug (Siswandono dan Soekardjo 2000).
Terapi nyeri dapat dilakukan dengan cara non-obat (non farmakologi) atau
dengan obat (farmakologi)(Tjay dan Rahardja 2002). Salah satu obat golongan
analgesik non narkotik adalah parasetamol. Parasetamol mempunyai aktivitas
analgesik-antipiretik sebanding dengan aspirin, tetapi tidak mempunyai efek
antiradang dan antirematik (Purwanto dan Susilowati 2000). Selain itu, tidak
mempunyai sifat sedatif ataupun psikotropik sehingga tidak menimbulkan
ketergantungan. Hal inilah yang menjadi alasan mengapa analgesik non narkotik
banyak digunakan oleh masyarakat untuk pengobatan nyeri (Mutschler, 1991).
Dari berbagai macam obat analgesik, parasetamol merupakan salah satu
pilihannya.
Walaupun merupakan obat paling populer di masyarakat, tetapi parasetamol
memiliki efek samping methemoglobin dan hepatotoksik (Purwanto dan
Susilowati 2000). Parasetamol merupakan salah satu obat analgesik dan
antipiretik yang telah banyak digunakan di seluruh dunia sejak tahun 1950. Di
Indonesia sendiri merk obat yang mengandung parasetamol dari tahun ke tahun
semakin bertambah, dan saat initelah tercatat dalam ISO 2006 terdapat 305 merk
obat yang mengandung parasetamol (ISFI. ISO informasi spesialis obat
Indonesia.Vol. 41. Jakarta: ISFI; 2006).
Parasetamol merupakan turunan p-aminofenol dan secara luas telah
digunakan di industri farmasi dan masyarakat sebagai obat analgesik antipiretik.
p-aminofenol diabsorpsi cepat oleh saluran cerna. Konsentrasi tertinggi dalam
plasma dicapai dalam waktu 30-60 menit dan dinonaktifkan pada hepar. Dimana
3
tidak dianjurkan untuk pemakaian jangka panjang dan dalam dosis besar (dosis
toksik), karena obat ini memiliki efek samping yang cukup berbahaya berupa
hepatotoksik dan methemoglobinemia. Efek hepatotoksik yang berbahaya terjadi
karena metabolisme p-aminofenol dalam tubuh menghasilkan metabolit reaktif
yang disebut N-asetilimidokuinon yang dapat mengikat jaringan hati secara
ireversibel sehingga menyebabkan terjadinya nekrosis (Wilmana,
2007;
Siswandono dan Soekardjo 2000).
Untuk meningkatkan efek farmakologis dari p-aminofenol dan mengurangi
efek samping, maka dibutuhkan modifikasi struktur dari p-aminofenol seperti
terlihat pada Gambar 1.1 (ChemBioDraw Ultra Application Versi 12.0).
Modifikasi molekul merupakan metode yang digunakan untuk mendapatkan obat
baru dengan aktifitas yang dikehendaki, antara lain yaitu meningkatkan aktivitas
obat, menurunkan efek samping atau toksisitas, meningkatkan selektifitas obat,
memperpanjang masa kerja obat, meningkatkan kenyamanan penggunaan obat
dan meningkatkan aspek ekonomis obat (Siswandono, 2000). Pengubahan dapat
dilakukan pada gugus amino, pada gugus hidroksi fenolik atau pada kedua gugus
amino dan hidroksi fenolik (Willette, 1982).
Gambar 1.1 Struktur p-aminofenol
Penambahan
gugus-gugus
pada
struktur
p-aminofenol
tersebut
menyebabkan perubahan sifat kimia fisika senyawa, yaitu sifat lipofilik,
elektronik dan sterik. Sifat lipofilik berperan pada kemampuan senyawa obat
untuk menembus membran biologis manusia yang sebagian besar tersusun atas
fosfolipid. Sifat elektronik berperan dalam pendistribusian senyawa obat di dalam
tubuh serta dalam proses pembentukan ikatan molekul obat dengan reseptor
spesifiknya, sedangkan efek sterik berperan dalam penentuan efisiensi interaksi
4
obat-reseptor hingga timbulnya respon biologis. Selain untuk meningkatkan
aktivitas analgesik p-aminofenol, modifikasi struktur p-aminofenol pada gugus
hidroksi juga terbukti mampu menurunkan toksisitasnya, karena penambahan
gugus
tersebut
asetilimidokuinon
akan
menghilangkan
sehingga
efek
kemampuan
hepatotoksiknya
pembentukan
menjadi
lebih
N-
rendah
(Siswandono dan Soekardjo 1995).
Keamanan, efektifitas dan stabilitas obat merupakan parameter yang
digunakan untuk menilai kualitas suatu obat. Salah satu upaya untuk
meningkatkan hal tersebut adalah dengan modifikasi struktur utama obat,
modifikasi molekul p-aminofenol sudah banyak dilakukan diantaranya adalah
gugus amina misalnya parasetamol, pengubahan gugus OH fenolik misalnya
anisidin dan fenaldin. Pengubahan pada gugus amina dan OH misalnya fenasetin
dan laktilfenetidin (Susilowati dan Chasani 2003).
Pada penelitian sebelumnya telah dilakukan suatu modifikasi struktur
golongan obat analgesik yaitu p-aminofenol menjadi senyawa 4-hidroksifenil 3klorobenzamida (Utami, PM., 2014), senyawa tersebut menunjukan aktivitas
analgesik yang lebih tinggi dari parasetamol. Dalam usaha untuk mengembangkan
senyawa baru turunan p-aminofenol, pada penelitian ini dilakukan modifikasi
struktur senyawa p-aminofenol menjadi N-(4-hidroksifenil) propionamida yang
diharapkan mempunyai aktivitas analgesik yang lebih tinggi dan optimal. Hal ini
berdasarkan data teoritis dengan menggunakan perangkat lunak Chem Draw Ultra
versi 13.02, senyawa 4-hidroksifenil 3-klorobenzamida mempunyai Log P = 3,01
dan MR (Molar Refraction) = 64,99 cm3/mol (Preti, 2014). Data tersebut
menunjukkan
terjadinya
peningkatan
harga
Log
P
4-hidroksifenil
3-
klorobenzamida terhadap parasetamol yang berarti adanya peningkatan parameter
lipofilitas.
Adanya peningkatan nilai Log P akan meningkatkan penembusan senyawa
kedalam membran biologis sehingga jumlah senyawa yang berinteraksi dengan
reseptor akan meningkat pula serta memiliki masa kerja yang lebih panjang,
sedangkan MR yang meningkat akan berpengaruh pada interaksi atau ikatan obatreseptor, sehingga akan terjadi kemungkinan adanya peningkatan aktivitas
5
interaksi obat-reseptor atau halangan ikatan obat reseptor (Siswandono dan
Soekardjo 2000). Diharapkan dengan bertambahnya lipofilisitas senyawa akan
memperbaiki efek antiinflamasinya.
Untuk mendapatkan N-(4-Hidroksifenil) propionamida dilakukan reaksi
asilasi dengan cara mereaksikan gugus asil pada propionil klorida dengan
menggunakan reaksi Schotten-Baumann yang di modifikasi. Sebagai pelarut
digunakan aseton yang merupakan pelarut semi polar yang mampu melarutkan
senyawa organik dan juga berbagai garam. Pelarut semi polar juga lebih
mendorong arah reaksi ke substitusi nukleofilik 2 karena tidak membantu
terjadinya ionisasi dibandingkan pelarut polar (air) yang mendorong reaksi
substitusi nukleofilik 1 karena membantu terjadinya ionisasi ion (Fessenden &
Fessenden 1999).
Senyawa hasil sintesis selanjutnya diidentifikasi dengan pemeriksaan
kualitatif organoleptis, uji kemurnian dengan penentuan titik lebur, uji KLT
menggunakan tiga macam fase gerak. Kemudian dilanjutkan dengan konfirmasi
struktur
senyawa
dengan
menggunakan
spektrofotometer
UV-Vis,
dan
spektrometer resonansi magnetik inti (1H-NMR).
Substitusi p-aminofenol dengan propionil klorida menghasilkan senyawa N(4-hidroksifenil) propionamida yang didapat dengan melakukan substitusi gugus
nukleofil pada atom karbonil benzoil klorida dapat dlihat pada Gambar 1.2
(ChemBioDraw Ultra Application Versi 12.0) :
+ HCl
p-aminofenol
Propionil klorida
N-(4-hidroksifenil) propionamida
Gambar 1.2 Sintesis dari N-(4-Hidroksifenil) propionamida
6
Selanjutnya untuk menguji aktivitas analgesik senyawa N-(4-hidroksifenil)
propionamida dapat dilakukan dengan metode Writhing test (metode yang
menggunakan zat kimia sebagai penginduksi nyeri). Manifestasi nyeri akibat
pemberian ransangan nyeri asam asetat intraperitonium akan menimbulkan reflek
respon geliat (Writhing Reflex) yang berupa tarikan kaki kebelakang, penarikan
kembali abdomen (retraksi) dan kejang tetani dengan membengkokkan kepala dan
kaki kebelakang. Metode ini dikenal sebagai Writhing Reflex test atau Abdominal
Constriction test (Wuryaningsih, 1996). Frekuensi gerakan ini dalam waktu
tertentu menyatakan derajat nyeri yang dirasakannya. Metode ini tidak hanya
sederhana dan dapat dipercaya tetapi juga memberikan evaluasi yang cepat
terhadap jenis analgesik perifer (Gupta et al., 2003).
Untuk mengetahui apakah suatu senyawa memiliki aktivitas analgesik pada
penelitian ini hewan coba yang digunakan adalah mencit (Mus musculus) dengan
metode Writhing test sehingga diperoleh kuantitas aktivitas analgesik. Hewan
coba ini dipilih karena mampu memberikan reaksi biologis yang mirip
kejadiannya pada manusia (Tjay, T.H., dan Rahardja, K., 2002). Aktivitas
analgesik senyawa uji ditentukan berdasarkan kemampuan menurunkan frekuensi
respon nyeri yang dihitung sebagai % hambatan nyeri pada suatu dosis tertentu.
Potensi analgesik senyawa uji dinyatakan dalam ED50.
1.2
Rumusan Masalah
Berdasarkan uraian di atas rumusan masalah pada penelitian ini adalah:
1. Apakah senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida dapat dihasilkan melalui
sintesis struktur p-aminofenol dengan propionil klorida ?
2. Apakah senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida mempunyai aktivitas
analgesik yang lebih besar dibandingkan parasetamol ?
1.3
Tujuan Penelitian
1. Mendapatkan senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida melalui sintesis
struktur antara struktur p-aminofenol dan propionil klorida.
7
2. Mengetahui aktivitas analgesik senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida
pada mencit (Mus musculus) dan membandingkan aktivitas analgesiknya
dengan parasetamol.
1.4
Hipotesis
1. Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida dapat dihasilkan melalui sintesis
struktur antara p-aminofenol dan propionil klorida.
2. Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida memiliki aktivitas analgesik pada
mencit (Mus Musculus) dan aktivitas analgesiknya lebih besar dibandingan
dengan parasetamol.
1.5
Manfaat Penelitian
Dari hasil penelitian ini diharapkan mendapatkan senyawa baru yaitu N-(4-
Hidroksifenil) propionamida golongan analgesik dalam bidang farmasi, sehingga
pengembangan sintesis struktur molekul obat akan meningkatkan usaha dalam
mendapatkan obat baru dengan aktivitas analgesik yang lebih besar dari
parasetamol sehingga dapan digunakan sebagai salah satu calon obat analgesik
yang poten dan memiliki efek samping yang rendah.
GITTA ASRINA
SINTESIS SENYAWA N-(4-HIDROKSIFENIL)
PROPIONAMIDA DAN UJI AKTIVITAS
ANALGESIK PADA MENCIT (Mus musculus)
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2016
ii
KATA PENGANTAR
Bismillahirrahmanirrahim,
Puji syukur kehadirat Allah SWT yang tiada hentinya memberikan nikmat,
karunia, hidayah kepada penulis, salah satunya nikmat yang telah tercurahkan
sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Sintesis Senyawa N(4-Hidroksifenil) propionamida dan Uji Aktivitas Analgesik Pada Mencit (Mus
musculus)” guna untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi
Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang. Shalawat serta
salam tetep terlimpahkan kepada Nabi Muhammad SAW.
Ucapan terima kasih yang tulus penulis haturkan kepada :
1.
Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan hidayah-Nya sehingga
penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.
2.
Kedua orang tua penulis, ayahanda Drs. H. Syamsuardi, M. AP. dan ibunda
Hj. Siti Erma, S.Sos., M. AP. yang penulis cintai yang telah memberikan
dukungan serta moral, materi dan spritual.
3.
Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang. Atas
kesempatan mengikuti pendidikan di Program Studi Farmasi kepada penulis
untuk menamatkan program pendidikan sarjana.
4.
Fakultas Farmasi Universitas Airlangga yang telah memberikan kesempatan
kepada penulis untuk melakukan penelitan dan pengamatan data guna
terselesaikannya penelitian ini.
5.
Bapak Dr. Bambang Tri Purwanto, Apt., MS. selaku pembimbing I yang
senantiasa memberikan semangat, nasihat dan bukan hanya sekedar menjadi
dosen bagi penulis tetapi menjadi ayah kedua bagi penulis karena telah
membagikan banyak waktu, ilmu dan pengalaman.
6.
Ibu Sovia Aprina Basuki, S.Farm., M.Si., Apt. selaku pembimbing II. Teima
kasih atas bimbingannya dan memberikan pengalaman yang luar biasa kepada
penulis agar tidak mudah menyerah dan selalu berusaha.
iv
7.
Bapak Drs. H. Achmad Inoni, Apt. selaku dosen penguji I dan Drs. Uswatun
Chasanah M.Kes., Apt. selaku penguji II yang memberikan dukungan untuk
menyelesaikan skripsi penulis dengan sebaik-baiknya.
8.
Ibu Arina Swastika selaku dosen wali yang telah memberikan arahan,
pandangan dan semangat yang tidak pernah henti kepada penulis.
9.
Bapak dan ibu dosen dan seluruh staf pengajar Program Studi Farmasi atas
wawasan keilmuan selama mengikuti pendidikan di Fakultas Ilmu Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Malang
10. Adik penulis Faza ayyasi serta keluarga besar yang tiada henti memanjatkan
doa dan dukungan moral kepada penulis.
11. Sang kekasih Gatut Ari Suseno yang tiada henti memberikan semangat,
menemani saat berjuang skripsi, mendengarkan keluh kesah dan senantiasa
memberikan dorongan doa dan motivasi setiap saat kepada penulis.
12. Sahabat skripsi kimia medisinal yang penulis cintai yaitu Della Fibrilia dan
Fitriansyah Bachruddin yang telah memberikan semangat, merawat saya sakit
selama penelitian serta setia kepada penulis selama menempuh pendidikan
sarjana di Program Studi
Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang.
Terima kasih telah berjuangan bersama untuk menyelesaikan skripsi ini.
13. Teman penelitian skripsi kimia medisinal Anita Racmawati dan Fathimatus
K. yang telah berjuang bersama menyelesaikan penilitian skripsi.
Malang, 2016
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ……………………………………………………..…………….....
i
LEMBAR PENGESAHAN ……………………………......…………….....
ii
LEMBAR PENGUJIAN ................................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...................................................................................
iv
RINGKASAN ................................................................................................
vi
ABSTRAK .....................................................................................................
vii
ABSTRACT ...................................................................................................
viii
DAFTAR ISI …………………………………………………...……….......
ix
DAFTAR GAMBAR ……………….......………………….......……….......
xiii
DAFTAR TABEL …………………………...………………………...........
xiv
DAFTAR LAMPIRAN …………………………………………………......
xv
BAB I PENDAHULUAN ………………………………………………......
1
1.1 Latar Belakang ………………....…………………………….................
1
1.2 Rumusan Masalah ……………………………………………................
6
1.3 Tujuan Penelitian ……………...………………………………..............
6
1.4 Hipotesis …………………………………….....……………….............
7
1.5 Manfaat Penelitian ……………………...……………………................
7
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ………………………………...………....
8
2.1 Tinjauan Tentang Nyeri ……………………...………….……...............
8
2.1.1 Definisi Nyeri …………………...……………….……..................
8
2.1.2 Klasifikasi Nyeri ……………………………….………................
8
2.1.3 Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Nyeri …….……….................
9
2.1.4 Fisiologi Nyeri ….………………...……………………................
9
2.1.5 Mekanisme Nyeri ………………………………………................
10
2.2 Tinjauan Tentang Analgetika ….………………………………..............
11
2.2.1 Pembagian Analgetika …….………………………...…................
11
2.3 Tinjauan Tentang Bahan ………….…………………........….................
12
2.3.1 p-aminofenol ……………….….......…………………...................
12
2.3.2 Propionil Klorida …………….…….......…………….....................
13
ix
2.4 Tinjauan Tentang Asilasi …………….…………...………….................
13
2.5 Tinjauan Tentang Kemurnian dan Identifikasi Senyawa ….....................
14
2.5.1 Tinjauan Tentang Titik Leleh ………...………………...................
14
2.5.2 Tinjauan Tentang Kromatografi Lapis Tipis ...………....................
14
2.5.3 Tinjauan Tentang Identifikasi Senyawa dengan Spektrofotometer
Ultraviolet ….……………....………...............................................
15
2.5.4 Tinjauan Tentang Identifikasi Senyawa dengan Fourier
Transform-Infra Red Spectroscopy (FT-IR) atau Spektrofotometer
Inframerah (IR) ……....……………................................................
15
2.5.5 Tinjauan Tentang Identifikasi Senyawa dengan Spektrometer
Resonansi Magnetik inti (1H-NMR) …............................................
15
2.6 Tinjauan Tentang Metode Pengujian Aktivitas Analgesik …..................
16
2.6.1 Metode Stimulasi Panas ……………………………......................
16
2.6.2 Metode Stimulasi Listrik ………………………….........................
17
2.6.3 Metode Stimulasi Tekanan …………………………......................
17
2.6.4 Metode Stimulasi Kimiawi ………………………….....................
17
2.7 Tinjauan Linearitas ……………………………………...........................
17
2.8 Tinjauan Tentang ED50 …………………………………….....................
18
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL …………………………….….......
19
3.1 Kerangka Konseptual Penilitian ………………………….….................
19
3.2 Skema Kerangka Konseptual …………………………………...............
21
BAB IV BAHAN, ALAT DAN METODE PENELITIAN ……….……......
22
4.1 Bahan Penelitian ……………………………………….…….................
22
4.1.1 Bahan Kimia …………………………………….….......................
22
4.1.2 Hewan Coba ………………………….....……….……..................
22
4.2 Alat Penelitian ………………………………………….….....................
22
4.3 Tempat dan Waktu Penelitian ………………………….…….................
23
4.4 Metode Penelitian …………………………………….………...............
23
4.4.1 Prosedur Sintesis Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida .....
23
4.5 Analisis Hasil Senyawa Preparasi …………….......…..………...............
24
4.5.1 Pemeriksaan Organoleptis ……………………..…….....................
24
4.5.2 Pemeriksaan Jarak Lebur ………………….…….……..................
24
x
4.5.3 Identifikasi dengan Kromatografi Lapis Tipis .….……..................
25
4.6 Identifikasi Struktur Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida …......
25
4.6.1 Identifikasi Struktur dengan Spektrofotometer UV-Vis .................
25
4.6.2 Identifikasi Struktur dengan Spektrofotometer IR ..........................
26
4.6.3 Identifikasi Struktur dengan Spektrofotometer Resonansi Magnet
Inti (1H-NMR) ………….................................................................
26
4.7 Uji Aktivitas Analgesik ……………………………………....................
26
4.7.1 Persiapan Hewan Coba …………………………...........................
26
4.7.2 Pembuatan Larutan Asam Asetat 0.6% v/v dan CMC-Na 0,5%
b/v …....………………………………………................................
27
4.7.2.1 Pembuatan Larutan Asam Asetat 0,6% v/v ........................
27
4.7.2.2 Pembuatan Larutan CMC-Na 0,5% b/v ……......................
27
4.7.3 Pengaturan Dosis ……………………………....…….....................
27
4.7.4 Pembuatan Sediaan Uji …………………………....…...................
27
4.7.5 Pemberian Sediaan Uji pada Mencit …………………...................
28
4.7.6 Pelaksanaan Uji Aktivitas ……………………………...................
28
4.8 Analisis Data …………………………………………………................
28
4.8.1 Analisis Statistik ANOVA ……………………………..................
28
4.8.2 Penentuan Hambatan Nyeri …………………………….................
29
4.8.3 Kerangka Operasional ………………………………….................
31
BAB V HASIL PENELITIAN ...................................………………….......
33
5.1 Senyawa Hasil Sintesis ……………………….....……...........................
33
5.1.1 Persentase Senyawa Hasil Sintesis ..................................................
33
5.2 Analisis Kualitatif Sentawa Hasil Sintesis ..………….……....................
33
5.2.1 Analisis Kualitatif dengan Pemeriksaan Organoleptis ...................
33
5.2.2 Anailisis Kualitatif dengan Pemeriksaan Jarak Lebur ...................
33
5.2.3 Analisis Kualitatif dengan Kromatografi Lapis Tipis.....................
34
5.3 Identifikasi Struktur Senyawa Hasil Sintesis ...........................................
35
5.3.1 Identifikasi Struktur Senyawa Hasil dengan Spektrofotometer
UV-Vis .............................................................................................
35
5.3.2 Identifikasi Struktur Senyawa Hasil dengan Spektrofotometer IR..
36
xi
5.3.3 Identifikasi Senyawa Hasil dengan Spektrometer Resonansi
Magnet Inti (1H-NMR) ....................................................................
38
5.4 Uji Aktivitas Analgeik .............................................................................
40
5.4.1 Penentuan Frekuensi Geliat .............................................................
40
5.4.2 Analisis Data dengan Anova ...........................................................
41
5.4.3 Perhitungan % Hambatan Nyeri ......................................................
41
5.5 Penentuan ED50 ........................................................................................
43
BAB VI PEMBAHASAN ..............................................................................
44
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................
50
7.1 Kesimpulan ..............................................................................................
50
7.2 Saran ........................................................................................................
50
DAFTAR PUSTAKA …………………………………………………........
51
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1
Surat Pernyataan ...................................................................................
56
2
Daftar Riwayat Hidup ………………………………………………...
57
3
Perhitungan Persentase Hasil ................................................................
58
4
Perhitungan Dosis Uji Aktivitas ...........................................................
59
5
Perhitungan % Hambatan Nyeri ...........................................................
62
6
Perhitungan ED50 Aktivitas Analgesik Senyawa N-(4-Hidroksifenil)
propionamida dan Senyawa Pembanding Parasetamol ......................... 63
7
Hasil Analisis Data dengan ANOVA (Oneway Anova) Antara
Kelompok Kontrol CMC Na 0,5 % dengan Antara Kelompok Dosis
Senyawa Pembanding Parasetamol Serta Antara Kelompok Dosis
Senyawa Uji N-(4-Hidroksifenil) propionamida ................................... 64
8
Tabel R ..................................................................................................
67
9
Tabel F ..................................................................................................
68
10
Skema Sintesis Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida ...............
69
11
Gambar Hasil Penelitian .......................................................................
72
12
Gambar
13
Mencit
Sebelum
Perlakuan,
Penyuntikan
Secara
Intraperitoneal dan Setelah perlakuan ..................................................
73
Jadwal Kegiatan dan Anggaran Biaya ..................................................
76
xv
DAFTAR PUSTAKA
Adeyemi, 2001. Analgesic and Anti-inflammatory Effects of The Aqueous
Extract of Leaves of Persea americana Mill. (Lauraceae). Italy: J.
Fitoterapia, 73, Elsevier, Indena, pp. 375-377. Airlangga University Press,
Surabaya. Airlangga University Press, p. 544.
Anas Tamsuri, 2006. Konsep dan Penatalaksanaan Nyeri. Penerbit Buku
Kedokteran. Jakarta : EGC.
Ardinata, D., 2007. Multidimensional nyeri, Jurnal Keperawatan Rufaidah
Sumatera Utara, Volume 2 : Universitas Sumatera Utara.
Bresnick, S., 2003. Intisari Kimia Organik. Diterjemahkan oleh Hadiah
Kontong. Jakarta : Hipokrates.
Brunner & Suddarth 2001. Buku Ajar Medikal Bedah. Volume 1, Edisi ke-8.
Jakarta : EGC.
Chan, C.C., Lam, H., Lee, Y.C., & Zhang, X.M., 2004. Analytical Method
Validation and Instrument Performance Verification, Wiley‐
Interscience, John Willey and Sons Inc., Hoboken, New Jersey.
Chemical Book, 2010. Propionyl Chloride, http://www.chemicalbook.com/
ChemicalProductProperty_EN_CB3156885.htm. Diakses tanggal 29
Oktober 2015.
ChemBioDraw Ultra Application, 2009. Chemical Structure Version 12.0.
Diakses tanggal 27 juli 2005.
Depkes RI., 2009. Sistem Kesehatan Nasional. Jakarta.
Domer, F.R., 1971. Animal Experiment in Pharmacological Analysis. Charles
Thomas Publisher, Lousiana, pp. 149-111.
Ekowati, J., Dyah, N.W., Astika, G.N., Budiati, T., 2010. Sintesis Asam ortometoksi-sinamat dari Material Awal o-metoksibenzaldehida dan Uji
Aktivitas Analge-siknya. Airlangga J. of Pharmacy, Vol. 8(2), pp. 12-17.
Fessenden. R.J., Fessenden. J.S., 1999. Kimia Organik Edisi Ke-3. Jilid kedua.
Jakarta : Erlangga.
Gandhar & Rohman, 2012. Kimia Farmasi Analisis. Pustaka Pelajar.
Yogyakarta.
Gandjar, G.I., dan Rohaman, A., 2012. Analisis Obat Secara Spektrofotometri
dan Kromatografi. Yogyakarta : Pustaka Ilmu, hal 321-284.
Ganong, W. F., 1998. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi ke-17. Jakarta :
EGC.
Ganong, W.F., 2002. Buku ajar fisiologi kedokteran. Edisi ke-20, Alih bahasa
dr H.M. Djauhari Widjajakusumah. Jakarta : EGC.
Gupta, S., Khadivar, PV., Mathur, KC., 2003. Topological Modelling of
Analgesia. Dalam : Janda, KD, Bioorganic & Medical Chemistry, Oxford
: Elsivier 11 (8).
Guyton & Hall, 2007. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran dan Mekanisme
Mekanisme Penyakit. Jakarta : EGC.
Guyton, A.C., 1995. Fisiologi manusia dan mekanisme penyakit. Terj. Dari
Human physiology and mechanisms of disease, oleh Andrianto, P.
Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta: xii = 821 hlm.
Hartwig, Mary S., Wilson, Lorraine M., 2006. Nyeri. Dalam : Price, Sylvia A.,
Wilson, Lorraine M., eds. Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses
Penyakit. Vol 1. Edisi ke-6. Jakarta : EGC. Hal 1063-1069.
Harmita, 2004. Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya.
Majalah Ilmu Kefarmasian. 1 (3). Hal 117-134. Departemen Farmasi
FMIPA. Universitas Indonesia, Jakarta
ISFI. ISO informasi spesialis obat Indonesia. Vol. 41. Jakarta : ISFI; 2006
Jakarta : EGC. Jakarta : EGC, 2005.
Kelompok Kerja Ilmiah Phyto Medica, 1993. Penapisan Farmakologi,
Pengujian
Fitokimia dan Pengujian Klinik. Jakarta : Yayasan
Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medica. Hal 167-170.
Kelompok Kerja Ilmiah. 1993. Penipisan Farmaklogi, Pengujian Fitokimia,
dan Pengujian Klinik. Jakarta : Yayasan Perkembangan Obat Bahan Alam.
Hal 3-6.
Laurence, DR., Bennet PN., Brown, MJ., 1997. Clinical pharmacology. 8th ed.
New York : Churchill Livingstone.
Logan, E, D., & Rose, B, J., 2004. Gender differences in post-operative pain
and patient controlled analgesia use among adolescent surgical patients.
Manihuruk, E., 2000. Aktivitas Analgesik Daun Dewa (Gynura pseudochina L.)
(DC.) pada Mencit Dengan Metode Geliat. Bandung: Skripsi, Jurusan
Farmasi, FMIPA, Universitas Padjajaran, Jatinangor. Media
Komputindo. Medikal – Bedah. Alih Bahasa : dr. H. Y. Kuncara. Jakarta :
EGC.
ii
Martinez, V., Thakur, J.S., Mogil, Y., Tache, E.A., Mayer, 1999. Differential
Efeect of Chemicak and Mechanical Colonic Iritation on Behavioral
Pain Response to Intraperitoneal Acetic Acid in Mice.
Mulya, M., & Suharman, 1995. Analisis Instrumental. Surabaya : Airlangga
University Press.
Mutschler, E., 1991. Dinamika Obat; Buku Ajar Farmakologi dan
Toksikologi. Edisi ke-5, diterjemahkan oleh Widianto, M. B. Dan A. S.
Ranti. Bandung ; Penerbit ITB. Pp. 177-195. Patient controlled analgesia
use among adolescent surgical patients.
Payan, DG., & Katzung, BG., 1997. Obat anti inflamasi non steroid; analgesik
non opioid; obat yang digunakan pada gout. Dalam Bertram G Katzung.
Farmakologi dasar dan klinik. Jakarta : EGC.
Pavia, D.L., Lampman, G.M., Kriz, G.S.Ir., 1966. Introoduction to
Specroscopy: A Guide for Students of Organic Chemistry, 2nd ed.
Washington Departement of Chemistry, Harcourt Brace Collage Publisher,
pp. 28-29.
Potter, P.A., Perry, A.G., 2015. Buku Ajar Fundamental Keperawatan :
Konsep, Proses, Dan Praktik. Edisi ke-4. Volume 1. Alih Bahasa : Yasmin
Asih, dkk. Proses, dan Praktik. Edisi ke-4. Volume 2. Alih Bahasa : Renata
Komalasari, dkk. Jakarta : EGC. 2005.
Pudjono, 1984. Modifikasi Molekul Parasetamol Dengan Menutupi Gugus
Toksigenik (Untuk Menghambat Pembentukan Arilamin), Tesis,
Universitas Gaya Mada..
Purwanto dan Susilowati, R., 2000. Hubungan Struktur-Aktivitas Obat
Analgetika. Dalam: Siswandono., Soekardjo, B (Eds.). Kimia Medisinal
Edisi 2, Surabaya : Airlangga University Press.
Rohman, A., 2009. Kromatografi untuk Analisis Obat. Yogyakarta : Graha
Ilmu.
Setiawan, FTrisnowati, dan Dadan Hermawan, 2006. Sintesis Natrium
Pentagamavunonat Dan Uji Stabilitas menggunakan Spektrofotometer
Uv-Visible. Purwokerto : Universitas jendral Soedirman.
Silverstein, R.M., Bassler, GC., and Morril, T.C., 2005. Spekctrofotometric
Identification of Organic Compound. Fifth edition, New York : John
Willey and Sons, pp. 898-809.
Siswandono dan B. Soekardjo., 2008. Kimia Medisinal 2. Surabaya : Airlangga
University Press.
iii
Siswandono dan Soekardjo, B., 2000, Kimia Medisinal, Edisi ke-1, hal 283-308.
Siswandono dan Soekardjo, 1995. Kimia Medisinal. Surabaya : Penerbit.
Siswandono dan Susilowati, R., 2000, Hubungan Kuantitatif Struktur
Aktivitas. In: Siswandono & Soekardjo, B. (Eds.), Kimia Medisinal 1, ed.
2, Airlangga University Press, Surabaya, pp. 261-273.
Siswandono dan Bambang Soekardjo, 1995. Kimia Medisinal. Airlangga
University Press. Surabaya.
Siswandono, 2000. Kimia Medicinal. Surabaya: Airlangga University Press.
Halaman 124.
Smeltzer, C., Suzanne, Bare, G., Brenda., 2002. Buku Ajar Keperawatan.
Smeltzer, B.C., and Barre, B.G., 2004. Buku ajar medikal bedah Bruner &
sudart. Edisi ke-8, Vol 1, Alih Bahasa : Kuncoro Monica Ester. Jakarta :
EGC.
Sukandar, E. Y., Andrajati, R., Sigit, J. I., Adnyana, I. K., Setiadi, A. A., &
Kusnandar, 2009. ISO Farmakoterapi. Jakarta: PT.ISFI Penerbitan.
Susilowati, S.S., dan Chasani, M., 2003. Sintesis Senyawa Turunan p-aminofenol
Serta Uji Aktivitas Analgetika dan Antiinflamasinya Pada Mencit dan Tikus
Putih. Purwokerto: Laporan Penelitian SPP/DPP Universitas Jenderal
Soedirman.
Susilowati, S. S., dan Handayani, N., 2006. Sintesis dan Uji Aktivitas
Analgetika-Antiinflamasi Senyawa N-(4t-ButilBenzoil)-p-Aminofenol,
Molekul, Vol 1, No 1.
Tamsuri Anas, 2007. Konsep dan Penatalaksanaan Nyeri. Jakarta : EGC.
Tan, T. H., dan Kirana, 2002. Obat-obat Penting Khasiat Penggunaan dan
Efek-efek Sampingnya. Edisi V. Jakarta : PT. Elex Media Komputindo.
Hal. 295-297.
Tjay, T.H., dan Rahardja, K., 2002. Obat – Obat Penting, Khasiat,
Penggunaan,dan Efek Sampingnya, Edisi V, Cetakan kedua, hal 270-279,
Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Tjay, Tan Hoan, Drs. Rahardja, Kirana, 2002. Obat-obat Penting. Jakarta :
Gramedia.
Tjay, Tan Hoan dan K. Rahardja, 2007. Obat-obat Penting. Jakarta : PT
Gramedia
iv
Utami, PM., 2014. Sintesis Senyawa 4-Hidroksifenil-3-Klorobencamida dan
Uji Aktivitas Analgesik pada Mencit (Mus musculus). Malang: Skripsi,
Jurusan Farmasi, FIKES, Universitas Muhammadiyah Malang.
Torrance, C., & Serginson. E., 1997. Surgical nursing. Bridgend, midglamorgan:
WBC Bokk Manufacturers Ltd.
Vogel, H.G., 2002. Drug Discovery and Evaluation Pharmacologycal Assays.
Vohora, S.B., and Dandiya, P.C., 1992/ Herbal Analgesic Drugs, Fitoterapia 63,
p. 202.
Vohora, S.B., and P.C. Dandiya, 1992. Herbal Analgesic Drugs. Italy: J.
Fitoterapia, LXIII (3), Elsevier, Indena. p. 202.
Willete, R.E., 1982. Analgetic Agents, dalam J.N. Delgado and W. A. Emers
(eds.) Wilson and Gisvold’s Textbook of Organic Medicinal and
harmacetical Chemistry, 8th Ed. Philadelphia : J.B. Lippincott.
Wilmana, P., Freddy, Gan Sulistia, 2007. Analgesik-Antipiretik Analgesik Antiinflamasi Nonsteroid dan Obat Gangguan Sendi Lainnya. Dalam: Gunawan,
Sulistia Gan (editor). Farmakologi dan Terapi. Edisi ke-5. Jakarta:
Departemen Farmakologi Terapeutik FK UI.
Wuryaningsih, L. E., Rarome, M. A., dan Windono, T., 1996, Uji Analgesik
Ekstrak Etanol Kering Rimpang Kencur Asal Purwodadi Pada Mencit
Dengan Metode Geliat (Writhing Reflex Test), Warta Tumbuhan Obat
Indonesia, Fakultas Farmasi Universitas Surabaya, Surabaya
Wuryaningsih, L. E., Rarome, M. A., dan Windono, T., 1996, Uji Analgesik
Ekstrak.
Wuryaningsih, L.E., M.A. Rarome, T. Windono. 1996. Uji Analgesik Ekstrak
Etanol Kering Rimpang Kencur Asal Purwodadi pada Mencit Dengan
Metode Geliat (Writhing Reflex Test), 3. Warta Tumbuhan Obat
Indonesia. hal. 24-25.
v
BAB I
PENDAHULUAN
1.1
Latar Belakang
Nyeri adalah sensasi ketidaknyamanan yang dimanifestasikan sebagai
penderitaan yang diakibatkan oleh persepsi jiwa yang nyata, ancaman, dan luka.
Nyeri itu sendiri merupakan suatu perasaan pribadi dan ambang toleransi nyeri
yang berbeda-beda bagi setiap orang (Tan dan Kirana 2002). Nyeri terjadi
bersama dengan banyak proses penyakit atau bersamaan dengan beberapa
pemeriksaan diagnostik atau pengobatan (Brunner & Suddarth 2001).
Menurut International Association for Study of Pain (IASP), nyeri adalah
pengalaman perasaan emosional yang tidak menyenangkan akibat terjadinya
kerusakan
aktual dimana kerusakan jaringan
yang sudah
terjadi
dan
mengakibatkan rasa nyeri yang tidak bisa di toleransi sehingga di butuhkan
penanganan yang lebih intensif maupun potensial merupakan kerusakan jaringan
yang masih berakibat resiko untuk timbulnya rasa nyeri, atau menggambarkan
kondisi terjadinya kerusakan (Tamsuri, 2007).
Intensitas nyeri merupakan gambaran seberapa parah nyeri yang dirasakan
individu. Pengukuran intensitas nyeri sangat subyektif dan individual, dan
kemungkinan intensitas nyeri yang dirasakan sangat berbeda setiap orang.
Pengukuran nyeri dengan pendekatan obyektif yang paling mungkin adalah
menggunakan respon fisiologik tubuh terhadap nyeri itu sendiri (Tamsuri, 2006).
Nyeri merupakan mekanisme untuk melindungi tubuh terhadap suatu
gangguan dan kerusakan di jaringan seperti peradangan, infeksi jasad renik dan
kejang otot dengan pembebasan mediator nyeri yang meliputi prostaglandin,
bradikinin, serotonin, histamin, ion kalium dan asetilkolin (Mutschler, 1991;
Guyton, 1995; Tjay dan Rahardja 2002).
Untuk mengurangi gejala nyeri diperlukan obat analgesik, yaitu obat yang
dapat mengurangi nyeri akibat sebab yang beragam seperti aspirin, parasetamol
dan morfin (Lauren et al., 1997; Payan & Katzung 1997). Analgetika atau obat
penghilang nyeri adalah zat-zat yang mengurangi atau menghalau rasa nyeri tanpa
menghilangkan kesadaran (perbedaan dengan anestetika umum) (Tjay, 2007).
1
2
Analgesik merupakan zat yang dapat menekan sistem saraf pusat secara
efektif, digunakan untuk mengubah kerja dengan meningkatkan nilai ambang
persepsi nyeri. Berdasarkan mekanisme kerja pada tingkat molekul, analgesik
dibagi menjadi dua golongan yaitu analgesik narkotik dan analgesik non narkotik.
Analgesik narkotik digunakan untuk mengurangi rasa nyeri yang berat sedangkan
analgesik non narkotik digunakan untuk mengurangi rasa nyeri ringan sampai
sedang. Berdasarkan struktur kimianya analgesik non narkotik dibagi menjadi dua
kelompok yaitu analgesik-antipiretik dan obat anti radang bukan steroid/non
steroidal antiinflammatory drug (Siswandono dan Soekardjo 2000).
Terapi nyeri dapat dilakukan dengan cara non-obat (non farmakologi) atau
dengan obat (farmakologi)(Tjay dan Rahardja 2002). Salah satu obat golongan
analgesik non narkotik adalah parasetamol. Parasetamol mempunyai aktivitas
analgesik-antipiretik sebanding dengan aspirin, tetapi tidak mempunyai efek
antiradang dan antirematik (Purwanto dan Susilowati 2000). Selain itu, tidak
mempunyai sifat sedatif ataupun psikotropik sehingga tidak menimbulkan
ketergantungan. Hal inilah yang menjadi alasan mengapa analgesik non narkotik
banyak digunakan oleh masyarakat untuk pengobatan nyeri (Mutschler, 1991).
Dari berbagai macam obat analgesik, parasetamol merupakan salah satu
pilihannya.
Walaupun merupakan obat paling populer di masyarakat, tetapi parasetamol
memiliki efek samping methemoglobin dan hepatotoksik (Purwanto dan
Susilowati 2000). Parasetamol merupakan salah satu obat analgesik dan
antipiretik yang telah banyak digunakan di seluruh dunia sejak tahun 1950. Di
Indonesia sendiri merk obat yang mengandung parasetamol dari tahun ke tahun
semakin bertambah, dan saat initelah tercatat dalam ISO 2006 terdapat 305 merk
obat yang mengandung parasetamol (ISFI. ISO informasi spesialis obat
Indonesia.Vol. 41. Jakarta: ISFI; 2006).
Parasetamol merupakan turunan p-aminofenol dan secara luas telah
digunakan di industri farmasi dan masyarakat sebagai obat analgesik antipiretik.
p-aminofenol diabsorpsi cepat oleh saluran cerna. Konsentrasi tertinggi dalam
plasma dicapai dalam waktu 30-60 menit dan dinonaktifkan pada hepar. Dimana
3
tidak dianjurkan untuk pemakaian jangka panjang dan dalam dosis besar (dosis
toksik), karena obat ini memiliki efek samping yang cukup berbahaya berupa
hepatotoksik dan methemoglobinemia. Efek hepatotoksik yang berbahaya terjadi
karena metabolisme p-aminofenol dalam tubuh menghasilkan metabolit reaktif
yang disebut N-asetilimidokuinon yang dapat mengikat jaringan hati secara
ireversibel sehingga menyebabkan terjadinya nekrosis (Wilmana,
2007;
Siswandono dan Soekardjo 2000).
Untuk meningkatkan efek farmakologis dari p-aminofenol dan mengurangi
efek samping, maka dibutuhkan modifikasi struktur dari p-aminofenol seperti
terlihat pada Gambar 1.1 (ChemBioDraw Ultra Application Versi 12.0).
Modifikasi molekul merupakan metode yang digunakan untuk mendapatkan obat
baru dengan aktifitas yang dikehendaki, antara lain yaitu meningkatkan aktivitas
obat, menurunkan efek samping atau toksisitas, meningkatkan selektifitas obat,
memperpanjang masa kerja obat, meningkatkan kenyamanan penggunaan obat
dan meningkatkan aspek ekonomis obat (Siswandono, 2000). Pengubahan dapat
dilakukan pada gugus amino, pada gugus hidroksi fenolik atau pada kedua gugus
amino dan hidroksi fenolik (Willette, 1982).
Gambar 1.1 Struktur p-aminofenol
Penambahan
gugus-gugus
pada
struktur
p-aminofenol
tersebut
menyebabkan perubahan sifat kimia fisika senyawa, yaitu sifat lipofilik,
elektronik dan sterik. Sifat lipofilik berperan pada kemampuan senyawa obat
untuk menembus membran biologis manusia yang sebagian besar tersusun atas
fosfolipid. Sifat elektronik berperan dalam pendistribusian senyawa obat di dalam
tubuh serta dalam proses pembentukan ikatan molekul obat dengan reseptor
spesifiknya, sedangkan efek sterik berperan dalam penentuan efisiensi interaksi
4
obat-reseptor hingga timbulnya respon biologis. Selain untuk meningkatkan
aktivitas analgesik p-aminofenol, modifikasi struktur p-aminofenol pada gugus
hidroksi juga terbukti mampu menurunkan toksisitasnya, karena penambahan
gugus
tersebut
asetilimidokuinon
akan
menghilangkan
sehingga
efek
kemampuan
hepatotoksiknya
pembentukan
menjadi
lebih
N-
rendah
(Siswandono dan Soekardjo 1995).
Keamanan, efektifitas dan stabilitas obat merupakan parameter yang
digunakan untuk menilai kualitas suatu obat. Salah satu upaya untuk
meningkatkan hal tersebut adalah dengan modifikasi struktur utama obat,
modifikasi molekul p-aminofenol sudah banyak dilakukan diantaranya adalah
gugus amina misalnya parasetamol, pengubahan gugus OH fenolik misalnya
anisidin dan fenaldin. Pengubahan pada gugus amina dan OH misalnya fenasetin
dan laktilfenetidin (Susilowati dan Chasani 2003).
Pada penelitian sebelumnya telah dilakukan suatu modifikasi struktur
golongan obat analgesik yaitu p-aminofenol menjadi senyawa 4-hidroksifenil 3klorobenzamida (Utami, PM., 2014), senyawa tersebut menunjukan aktivitas
analgesik yang lebih tinggi dari parasetamol. Dalam usaha untuk mengembangkan
senyawa baru turunan p-aminofenol, pada penelitian ini dilakukan modifikasi
struktur senyawa p-aminofenol menjadi N-(4-hidroksifenil) propionamida yang
diharapkan mempunyai aktivitas analgesik yang lebih tinggi dan optimal. Hal ini
berdasarkan data teoritis dengan menggunakan perangkat lunak Chem Draw Ultra
versi 13.02, senyawa 4-hidroksifenil 3-klorobenzamida mempunyai Log P = 3,01
dan MR (Molar Refraction) = 64,99 cm3/mol (Preti, 2014). Data tersebut
menunjukkan
terjadinya
peningkatan
harga
Log
P
4-hidroksifenil
3-
klorobenzamida terhadap parasetamol yang berarti adanya peningkatan parameter
lipofilitas.
Adanya peningkatan nilai Log P akan meningkatkan penembusan senyawa
kedalam membran biologis sehingga jumlah senyawa yang berinteraksi dengan
reseptor akan meningkat pula serta memiliki masa kerja yang lebih panjang,
sedangkan MR yang meningkat akan berpengaruh pada interaksi atau ikatan obatreseptor, sehingga akan terjadi kemungkinan adanya peningkatan aktivitas
5
interaksi obat-reseptor atau halangan ikatan obat reseptor (Siswandono dan
Soekardjo 2000). Diharapkan dengan bertambahnya lipofilisitas senyawa akan
memperbaiki efek antiinflamasinya.
Untuk mendapatkan N-(4-Hidroksifenil) propionamida dilakukan reaksi
asilasi dengan cara mereaksikan gugus asil pada propionil klorida dengan
menggunakan reaksi Schotten-Baumann yang di modifikasi. Sebagai pelarut
digunakan aseton yang merupakan pelarut semi polar yang mampu melarutkan
senyawa organik dan juga berbagai garam. Pelarut semi polar juga lebih
mendorong arah reaksi ke substitusi nukleofilik 2 karena tidak membantu
terjadinya ionisasi dibandingkan pelarut polar (air) yang mendorong reaksi
substitusi nukleofilik 1 karena membantu terjadinya ionisasi ion (Fessenden &
Fessenden 1999).
Senyawa hasil sintesis selanjutnya diidentifikasi dengan pemeriksaan
kualitatif organoleptis, uji kemurnian dengan penentuan titik lebur, uji KLT
menggunakan tiga macam fase gerak. Kemudian dilanjutkan dengan konfirmasi
struktur
senyawa
dengan
menggunakan
spektrofotometer
UV-Vis,
dan
spektrometer resonansi magnetik inti (1H-NMR).
Substitusi p-aminofenol dengan propionil klorida menghasilkan senyawa N(4-hidroksifenil) propionamida yang didapat dengan melakukan substitusi gugus
nukleofil pada atom karbonil benzoil klorida dapat dlihat pada Gambar 1.2
(ChemBioDraw Ultra Application Versi 12.0) :
+ HCl
p-aminofenol
Propionil klorida
N-(4-hidroksifenil) propionamida
Gambar 1.2 Sintesis dari N-(4-Hidroksifenil) propionamida
6
Selanjutnya untuk menguji aktivitas analgesik senyawa N-(4-hidroksifenil)
propionamida dapat dilakukan dengan metode Writhing test (metode yang
menggunakan zat kimia sebagai penginduksi nyeri). Manifestasi nyeri akibat
pemberian ransangan nyeri asam asetat intraperitonium akan menimbulkan reflek
respon geliat (Writhing Reflex) yang berupa tarikan kaki kebelakang, penarikan
kembali abdomen (retraksi) dan kejang tetani dengan membengkokkan kepala dan
kaki kebelakang. Metode ini dikenal sebagai Writhing Reflex test atau Abdominal
Constriction test (Wuryaningsih, 1996). Frekuensi gerakan ini dalam waktu
tertentu menyatakan derajat nyeri yang dirasakannya. Metode ini tidak hanya
sederhana dan dapat dipercaya tetapi juga memberikan evaluasi yang cepat
terhadap jenis analgesik perifer (Gupta et al., 2003).
Untuk mengetahui apakah suatu senyawa memiliki aktivitas analgesik pada
penelitian ini hewan coba yang digunakan adalah mencit (Mus musculus) dengan
metode Writhing test sehingga diperoleh kuantitas aktivitas analgesik. Hewan
coba ini dipilih karena mampu memberikan reaksi biologis yang mirip
kejadiannya pada manusia (Tjay, T.H., dan Rahardja, K., 2002). Aktivitas
analgesik senyawa uji ditentukan berdasarkan kemampuan menurunkan frekuensi
respon nyeri yang dihitung sebagai % hambatan nyeri pada suatu dosis tertentu.
Potensi analgesik senyawa uji dinyatakan dalam ED50.
1.2
Rumusan Masalah
Berdasarkan uraian di atas rumusan masalah pada penelitian ini adalah:
1. Apakah senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida dapat dihasilkan melalui
sintesis struktur p-aminofenol dengan propionil klorida ?
2. Apakah senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida mempunyai aktivitas
analgesik yang lebih besar dibandingkan parasetamol ?
1.3
Tujuan Penelitian
1. Mendapatkan senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida melalui sintesis
struktur antara struktur p-aminofenol dan propionil klorida.
7
2. Mengetahui aktivitas analgesik senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida
pada mencit (Mus musculus) dan membandingkan aktivitas analgesiknya
dengan parasetamol.
1.4
Hipotesis
1. Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida dapat dihasilkan melalui sintesis
struktur antara p-aminofenol dan propionil klorida.
2. Senyawa N-(4-Hidroksifenil) propionamida memiliki aktivitas analgesik pada
mencit (Mus Musculus) dan aktivitas analgesiknya lebih besar dibandingan
dengan parasetamol.
1.5
Manfaat Penelitian
Dari hasil penelitian ini diharapkan mendapatkan senyawa baru yaitu N-(4-
Hidroksifenil) propionamida golongan analgesik dalam bidang farmasi, sehingga
pengembangan sintesis struktur molekul obat akan meningkatkan usaha dalam
mendapatkan obat baru dengan aktivitas analgesik yang lebih besar dari
parasetamol sehingga dapan digunakan sebagai salah satu calon obat analgesik
yang poten dan memiliki efek samping yang rendah.