cahaya tampak memiliki energi yang cukup untuk mempromosikan elektron pada kulit terluar ke tingkat energi yang lebih tinggi. Spektroforometri UV-Vis
biasanya digunakan untuk molekul organik di dalam larutan. Spektrumnya mempunyai daerah yang lebar dan hanya sedikit informasi tentang struktur yang
bisa didapatkan dari spektrum ini. Tetapi spektrum ini sangat berguna untuk pengukuran secara kuantitatif. Konsentrasi analit di dalam larutan bisa ditentukan
dengan mengukur absorbansi pada panjang gelombang tertentu dengan menggunakan hukum Lambert-Beer. Sinar ultraviolet berada pada panjang
gelombang 200-400 nm, sedangkan visible berada pada panjang gelombang 400- 800 nm Dachriyanus, 2004.
2.7.1 Asas Kerja
Radiasi ultraviolet dan visible diabsorbsi oleh molekul organik aromatik, molekul yang mengandung elektron-
π terkonyugasi dan atau atom yang mengandung elektron-n, menyebabkan transisi elektron di orbit terluarnya dari
tingkat energi elektron dasar ke tingkat energi elektron tereksitasi lebih tinggi. Besarnya absorbansi radiasi tersebut sebanding dengan banyaknya molekul analit
yang mengabsorbsi dan ini dapat digunakan untuk analisis kuantitatif Satiadarma, 2004.
2.7.2 Aspek Kualitatif dan Kuantitatif
Data spektrum ultraviolet dan sinar tampak tidak dikhususkan untuk identifikasi kualitatif suatu senyawa. Namun data-data spektroskopi UV-Vis
Universitas Sumatera Utara
seperti panjang gelombang maksimum, intensitas, efek pH, dan pelarut dapat digunakan untuk identifikasi kualitatif, yaitu dengan cara membandingkan data-
data yang diperoleh tersebut dengan baku pembanding maupun data yang sudah dipublikasikanpublished data Gholib, 2007.
Dalam aspek kuantitatif, suatu berkas radiasi dikenakan pada larutan sampel dan intensitas sinar radiasi yang diteruskan diukur besarnya. Radiasi yang
diserap oleh cuplikan ditentukan dengan membandingkan intensitas sinar yang diteruskan dengan intensitas sinar yang diserap jika tidak ada spesies penyerap
lainnya. Intensitas radiasi cahaya sebanding dengan sejumlah foton yang melalui suatu satuan luas penampang per detik. Serapan dapat terjadi jika fotonradiasi
yang mengenai cuplikan memiliki energi yang sama dengan energi yang dibutuhkan untuk menyebabkan terjadinya perubahan tenaga. Kekuatan radiasi
juga pengalami penurunan karena hal ini sangat kecil dibandingkan dengan proses penyerapan Gholib, 2007.
Spektrofotometer ultraviolet memiliki jenis-jenis yang beragam, tergantung dari tingkat kecanggihan perangkatnya, tetapi pada umumnya memiliki
asas kerja yang sama Munson, 1991.
2.7.3 Instrumen Spektrofotometer Ultraviolet
Pada dasarnya spektrofotometer ultraviolet terdiri atas lima komponen pokok, yaitu:
1. Sumber Radiasi
Universitas Sumatera Utara
Sumber energi radiasi yang biasa digunakan adalah sebuah lampu pijar dengan kawat terbuat dari wolfram Day, 2002.
Lampu deuterium, lampu pijar tugsten dan lampu halogen yang biasa dipakai sebagai sumber radiasi untuk daerah ultraviolet Satiadarma, 2004.
2. Monokromator
Monokromator adalah alat optis yang mengisolasi suatu berkas radiasi dari sumber radiasi, berkas radiasi yang mempunyai kemurnian spektrum yang tinggi
dengan panjang gelombang yang dapat disesuaikan dengan tujuan analisis Day, 2002.
Monokromator digunakan untuk memperoleh sumber sinar yang monokromator dengan menggunakan prisma. Kemudian cahaya yang keluar dari
prisma kemudian dilewatkan melalui celah untuk mengarahkan cahaya ke sel Khopkar, 1990.
3. Sel
Sel atau biasa disebut dengan kuvet, merupakan wadah sampel sekaligus menjadi lintasan optis dalam spektrofotometer. Sel tersebut diisi dan diletakkan
sedemikian rupa sehingga berkas cahaya menembus larutan. Berkas cahaya yang datang dari monokromator akan menembus sel yang berisi sampel, sebagian
berkas akan diserap oleh sampel dan kemudian akan diteruskan ke detektor Day, 2002.
4. Detektor
Detektor adalah alat yang menerima sinyal dalam bentuk radiasi elektromagnetik, mengubah dan meneruskannya dalam bentuk sinyal listrik
Universitas Sumatera Utara
kerangkaian sistem penguat elektronika. Dengan demikian sinyal radiasi yang terdeteksi itu dapat diukur kekuatannya Satiadarma, 2004.
5. Penguat dan Pembacaan
Menggunakan sebuah penguat dengan resistansi masukan yang tinggi sehingga rangkaian tabung foto itu tidak tersadap habis. Malah voltase yang
melintas resistor beban itu digunakan untuk mengendalikan suatu rangkaian yang menarik dayanya dari dalam suatu sumber yang tak bergantung dan yang
mempunyai suatu keluaran yang cukup besar untuk menjalankan suatu alat pengukur atau piranti baca lain Day, 2002.
2.7.4 Hukum Lambert-Beer
