BAB 4 METODOLOGI PENELITIAN
4.1 Rancangan penelitian : Posttest Only Control Group Design
Jenis penelitian : Eksperimental Laboratorium
4.2 Tempat dan Waktu Penelitian 4.2.1 Tempat Penelitian
: Tropical Diseases Laboratory UNAIR 4.2.2 Waktu Penelitian
: April 2010 - September 2010 4.3 Sampel dan Besar Sampel Penelitian
4.3.1 Sampel penelitian : Suspensi E.faecalis ATCC 29212 yang telah
diisolasi dan dibiakkan dengan media Mueller Hinton Agar. 4.3.2 Besar Sampel
Konsentrasi minyak atsiri kayu manis yang diuji dimulai dari konsentrasi 8, 4, 2, 1, 0,5, 0,25. Penetapan rentang konsentrasi ditetapkan berdasarkan
penelitian sebelumnya dimana telah diketahui nilai MFC Minimal Fungicidal Concentration dari minyak atsiri kayu manis terhadap Candida albicans adalah
1.
14
Adapun penentuan besar sampel dilakukan sebagai berikut, sesuai dengan SOP Standard Operational Prosedure yang ada di Laboratorium Pusat Penyakit Tropis,
Universitas Airlangga. a. Penentuan nilai MIC
Kelompok I
: minyak atsiri 8 4 sampel
Kelompok II : minyak atsiri 4
4 sampel
Kelompok III : minyak atsiri 2 4 sampel
Universitas Sumatera Utara
Kelompok IV : minyak atsiri 1
4 sampel
Kelompok V : minyak atsiri 0,5 4 sampel
Kelompok VI : minyak atsiri 0,25
4 sampel
Kelompok VII : kontrol Mc Farland 1 sampel
Kelompok VIII: kontrol negatif minyak atsiri kayu manis tanpa diberi
suspensi Enterococcus faecalis 1 sampel
Dari masing-masing konsentrasi dilakukan dilusi pengenceran untuk mendapatkan konsentrasi minimal yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri.
Pada penentuan nilai MIC, jumlah keseluruhan sampel adalah 26 sampel b. Penentuan nilai MBC
Dari hasil penentuan nilai MIC dilanjutkan perhitungan jumlah koloni bakteri dengan metode Drop Plate Mills Mesra, adalah:
Kelompok I
: minyak atsiri 8 4 sampel
Kelompok II
: minyak atsiri 4 4 sampel
Kelompok III : minyak atsiri 2
4 sampel
Kelompok IV : minyak atsiri 1 4 sampel
Kelompok V
: minyak atsiri 0,5 4 sampel
Kelompok VI : minyak atsiri 0,25
4 sampel
Kelompok VII : kontrol Mc Farland 1 sampel
Kelompok VIII: kontrol negatif minyak atsiri kayu manis tanpa diberi
suspensi Enterococcus faecalis 1 sampel
Pada penentuan MBC, jumlah ekseluruhan sampel adalah 26 sampel
Universitas Sumatera Utara
VARIABEL TERKENDALI : •
Media pertumbuhan Mueller Hinton Agar
• Suhu inkubasi 37
C •
Stem cell E.faecalis ATCC 29212
• Waktu pembiakan E.faecalis
24 jam •
Sterilisasi alat, bahan coba dan media
• Teknik pengisolasian dan
pengkulturan •
Jumlah bahan coba yang diteteskan ke media
• Waktu pengamatan 24 jam
• Keterampilan operator
4.4. Variabel Penelitian