Lokasi dan Waktu Penelitian

OD dengan menggunakan spektrophotometer Bio Rad Smart Spec. TM. 300. Peralatan yang digunakan untuk analisis merkuri adalah tabung erlenmeyer dengan berbagai ukuran, pipet, buret, gelas ukur dan Cold Vapour Atomic Absorption Spektrofotometer CV-AAS. 3.3. Pelaksanaan Penelitian 3.3. 1. Identifikasi Bakteri Pereduksi Merkuri Tahapan penelitian yang dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Lingkungan ICBB Bogor terdiri atas: 1 isolasi, 2 seleksi, 3 identifikasi bakteri pereduksi merkuri. Analisis merkuri menggunakan AAS . Identifikasi dan karakteristik yang dilaksanakan meliputi morfologi dan fisiologi berpedoman pada Analisis Mikroba di Laboratorium Bibiana, 1994 dan Eksperimen Mikrobiologi dalam Laboratorium Tedja, 2007. Uji morfologi meliputi: bentuk sel, pewarnaan gram dan spora, serta koloni bentuk, diameter, warna, elevasi, tepian, permukaan, dan motilitas. Uji fisiologis meliputi fermentasi karbohidrat uji gula: glukosa, fruktosa, mannitol, xylose, sukrosa, laktosa, inositol, sorbitol, arabinosa, galaktosa, maltosa, dan dulsitol, respirasi karbohidrat uji oksidase, uji katalase, reduksi nitrat, uji sitrat, uji lisin, uji urease, uji indol, uji metil red, uji voges proskauer, dan uji hidrogen sulfida. Identifikasi dikerjakan hingga tingkat genus dengan berpedoman pada buku Bergey’s Mannual of Determinative Bacteriology Holt et al., 1994.

3.3.1.1. Isolasi

Isolasi bakteri pereduksi merkuri dilakukan dengan metode sebar. Sampel tanah diencerkan dengan larutan fisiologis 8.5 gr NaCl liter sampai dengan pengenceran 10 -4 . Cara pembuatan pengenceran 10 -1 yaitu memasukkan 0.5 g tanah ke dalam tabung reaksi yang berisi 4.5 ml larutan garam fisiologis, kemudian dikocok dan dibiarkan beberapa saat supaya bagian yang kasar mengendap. Untuk memperoleh pengenceran 10 -2 , maka suspensi tanah tersebut sebanyak 0.5 ml dipipet dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 4.5 ml larutan garam fisiologis, kemudian dikocok. Hal yang sama dilakukan untuk pengenceran 10 -3 dan 10 -4 . Dari pengenceran 10 -4 diambil sebanyak 0,1 ml dan disebarkan ke atas cawan petri yang