commit to user
42
BAB 4 METODE PENELITIAN
4.1 Jenis Penelitian.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental biomedik dengan pendekatan post-test only control group design.
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian
Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu LPPT Universitas Gajah Mada Jogjakarta pada Bulan April 2010.
4.3 Subyek Penelitian.
Sel kanker HeLa HPV High Risk type berasal dari American Tissue Type Culture ATCC. Sel HeLa merupakan prototype adenokarsinoma serviks
yang didapat dari seorang penderita dan yang telah diaklimatisasikan untuk kepentingan penelitian secara in vitro.
4.4 Variabel Penelitian. 4.4.1 Variabel terikat.
· Ekspresi Cyclin-E 4.4.2 Variabel bebas.
· Konsentrasi fraksi etanolik ekstrak bawang dayak.
4.5 Definisi Operasional.
a Fraksi etanolik bawang dayak adalah ekstrak umbi bawang dayak Eleutherine palmifolia L., Merr yang didapat dari umbi bawang dayak
commit to user
43
basah yang dikeringkan, dihaluskan sampai menjadi bubuk kemudian diekstraksi dengan menggunakan pelarut etanol 70 pro analis.
b Ekspresi Cyclin-E adalah jumlah sel positif dalam yang memiliki inti sel berwarna kuning keemasan hingga coklat tua yang merupakan hasil
reaksi enzimatis antara enzim peroksidase dan Di-amino benzidin DAB sebagai substrat enzim yang mengikuti reaksi imunolgis antara
Monoklonal Antibodi anti human Cyclin-E dengan antigen Cyclin-E yang ada di dalam 24 well plate.
c LC
50
Lethal Concentation aktivitas secara in vitro adalah konsentrasi ekstrak yang menyebabkan kematian 50 sel HeLa HPV High Risk type
pada kultur yang menerima perlakuan fraksi etanolik ekstrak bawang dayak Eleutherine palmifolia L., Merr.
d Kontrol - adalah hasil pengecatan Imunositokimia terhadap tingkat ekspresi Cyclin-E sel kanker serviks uteri HeLa yang tidak diberi
perlakuan apapun sehingga memiliki tingkat ekspresi Cyclin-E yang positif. Digunakan sebagai pembanding positif dalam interpretasi hasil
imunositokimia Cyclin-E. e Kontrol adalah hasil pengecatan Imunositokimia terhadap tingkat ekspresi
Cyclin-E sel kanker serviks uteri HeLa dari hasil kultur sel yang diberi perlakuan Cisplatinum konsentrasi 2µgml. LC
50
untuk Cisplatinum pada penelitian ini adalah 2,133µgml Hadibrata, 2009. Digunakan sebagai
pembanding negatif dalam interpretasi hasil Imunositokimia Cyclin-E
commit to user
44
4.6 Rancangan Penelitian.
Kategori