Induksi Tunas Tanaman Nilam (Pogostemon cablin Benth.) Dengan Pemberian α-Benzil Amino Purina dan α-Asam Asetat Naftalena Secara In –vitro

INDUKSI TUNAS TANAMAN NILAM (Pogostemon cablin Benth.) DENGAN PEMBERIAN α- BENZIL AMINO PURINA DAN α- ASAM ASETAT NAFTALENA SECARA IN-VITRO
SKRIPSI OLEH: ROZALIANA 070307035 BDP-PEMULIAAN TANAMAN
PROGRAM AGROEKOTEKNOLOGI FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2012
Universitas Sumatera Utara

INDUKSI TUNAS TANAMAN NILAM (Pogostemon cablin Benth.)

DENGAN PEMBERIAN α- BENZIL AMINO PURINA DAN

α-

ASAM ASETAT NAFTALENA SECARA IN-VITRO

SKRIPSI
OLEH:
ROZALIANA 070307035
BDP-PEMULIAAN TANAMAN

Skripsisebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana diFakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara

PROGRAM STUDI AGROEKOTEKNOLOGI FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2012
Universitas Sumatera Utara

Judul Skripsi
Nama NIM Program Studi

: Induksi Tunas Tanaman Nilam (Pogostemon cablin Benth.) Dengan Pemberian α-Benzil Amino Purina dan α-Asam Asetat Naftalena Secara In –vitro
: Rozaliana : 070307035 : Pemuliaan Tanaman

Disetujui oleh, Komisi Pembimbing

(Luthfi Aziz Mahmud Srg, SP, MSc, PhD) Ketua

Ir. Eva Sartini Bayu, MP Anggota

Mengetahui,
Ir. T. Sabrina, M. Agr,Sc. Phd Ketua Program Studi Agroekoteknologi

Universitas Sumatera Utara

ABSTRAK
ROZALIANA: Induksi Tunas Tanaman Nilam (Pogostemon cablin Benth) Dengan Pemberian α-Benzil Amino Purina dan α-Asam Asetat Naftalena Secara In-Vitro, dibimbing oleh Luthfi A.M. Siregar dan Eva Sartini Bayu.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi zat pengatur tumbuh BAP dan NAA yang paling efektif untuk induksi tunas tanaman nilam secara in vitro.Penelitian dilakukan di Laboratorium Kultur Jaringan Tanaman, Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan, yang dimulai dari Januari 2012 hingga Juni 2012 menggunakan rancangan acak lengkap dengan 2 faktor perlakuan yaitu pemberian BAP (0, 0.5, 1 dan 1.5 mg/l) dan NAA (0, 0.2, 0.4 dan 0.6 mg/l). Parameter yang diamati adalah persentase eksplan yang hidup, persentase kontaminasi, persentase eksplan membentuk tunas, tinggi tunas, jumlah akar, panjang akar, jumlah daun, jumlah buku, waktu inisiasi, kemunculan kalus, warna kalus, dan tekstur kalus.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian BAP dan NAA berpengaruh nyata terhadap parameter waktu inisiasi dengan waktu inisiasi terbaik yaitu 7 hari (0.6 mg/l NAA dan 1.5mg/l BAP) dan jumlah akar dengan jumlah akar terbanyak yaitu 8 buah (0.2 NAA mg/l dan BAP 1.5mg/l) dan tidak berpengaruh nyata pada parameter lainnya. Media yang terbaik untuk induksi tunas belum diperoleh. kata kunci : NAA, BAP, Nilam
Universitas Sumatera Utara

ABSTRACT
ROZALIANA: The induction of nilam (Pogostemon cablin Benth) bud with giving αBenzil Amino Purin and α- Naftalena acetic acid by in-vitro methode, supervised by Luthfi. A. M. Siregar and Eva Sratini Bayu. This research aims to determinedthe concentation of the most effectivegrowth regulator for bud induction patchouli plant by in-vitro methode. The research was done in the laboratory of plant tissue culture, agriculture faculty university of north sumatra, medan from January 2012 to june 2012 using factorial completely randomized design with 2wo factors that is giving BAP (0, 0.5, 1 dan 1.5 mg/l) and NAA (0, 0.2, 0.4 dan 0.6 mg/l). The measured parameters were percentage of eksplan living, the percentage of contamination, the percentage of eksplan forming buds, bud height, roots number, root length, leaves number, noods number, time of initiation, appearance of callus, colour of callus and texture of callus. The result showed that giving BAP and NAA significantly affected on the buds initiation time parameters with the best time of initiation is 7 days ((0.6 mg/l NAA and 1.5mg/l BAP and the highest number of root that 8 pieces (0.2 NAA mg/l and BAP 1.5mg/l)and did not significanly on others parameter. The best medium for bud induction was not found yet. Key words: NAA, BAP, patchouli
Universitas Sumatera Utara

RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Medan pada tanggal 4 Juli 1988 dari ayahanda Alm. Chairuddin dan Ibunda Almh. Rosliana. Penulis merupakan putri kesembilan dari sepuluh bersaudara. Pendidikan formal yang pernah dijalani adalah SD Negri 060814/45 Medan tahun 1995-2001, SMP Negri 3 Medan tahun 2001-2004, SMA Negri 21 Medan tahun 2004-2007 dan masuk ke Fakultas Pertanian dengan program studi Pemuliaan Tanaman Universitas Sumatera Utara melalui jalur ujian tertulis Seleksi Penerimaan Mahasiswa Baru pada tahun 2007. Selama mengikuti perkuliahan, penulis aktif sebagai pengurus Badan Kenaziran Mushola (BKM) Al-Mukhlisin FP USU, Himadita Nursery, Kam Rabbani dan Tim Mentoring Agama Islam. Penulis melaksanakan praktek kerja lapangan (PKL) di Balai Penelitian Sungei Putih Pusat Penelitian Karet dari bulan Juli hingga Agustus 2010.
Universitas Sumatera Utara

KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT, Tuhan Yang Maha Kuasa atas segala rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi saya yang berjudul “Induksi Tunas Tanaman Nilam (Pogostemon cablinBenth.)Dengan Pemberian α- Benzil Amino Purina dan α- Asam Asetat NaftalenaSecara in-vitro”.
Ucapan terima kasih yang tak terhingga saya persembahkan kepada Ayahanda saya Alm. Chairuddin dan Ibunda Almh. Rosliana. Juga kepada kakak-kakak saya Nina Zahra, Khairunniza, Mira Mailina, Magdalena, Sri Rezeki, Putri Rezekidan abang-abang saya Chairul Bahzar dan Chairil azhar juga kepada adik saya Ahmad Fadli, selama penulisan ini banyak memberikan dukungan, semangat dan motivasi yang tak terhingga kepada penulis.
Pada kesempatan ini penulis menghaturkan pernyataan terima kasih sebesarbesarnya kepada Luthfi Aziz Mahmud Srg, SP, MSc, PhD dan Ir. Eva Sartini Bayu, MP selaku ketua dan anggota komisi pembimbing yang telah membimbing dan memberikan berbagai masukan berharga kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Akhir kata penulis berharap semoga Allah SWT membalas dengan memberikan rahmat Dan hidayah-Nya Dan semoga penelitian ini bermanfaat bagi pengembangan ilmu pertanian terutama dalam bidang kultur jaringan.
Medan , Desember 2012 Penulis

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR ISI
ABSTRAK .................................................................................................................... i ABSTRACT ................................................................................................................. ii DAFTAR RIWAYAT HIDUP.....................................................................................iii KATA PENGANTAR ................................................................................................. iv DAFTAR ISI................................................................................................................. v DAFTAR TABEL....................................................................................................... vii DAFTAR GAMBAR .................................................................................................viii DAFTAR LAMPIRAN................................................................................................ ix
PENDAHULUAN Latar Belakang .............................................................................................................. 1 Tujuan penelitian........................................................................................................... 3 Hipotesa Penelitian ....................................................................................................... 3 Kegunaan Penelitian ..................................................................................................... 4
TINJAUAN PUSTAKA Botani Tanaman ............................................................................................................ 5 Kultur Jaringan.............................................................................................................. 5 Eksplan.......................................................................................................................... 7 Media Kultur ................................................................................................................. 7 Lingkungan in-vitro ...................................................................................................... 8 Zat Pengatur tumbuh ..................................................................................................... 9
BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian ..................................................................................... 13 Bahan dan Alat............................................................................................................ 13 Metode Penelitian ....................................................................................................... 13
PELAKSANAAN PENELITIAN Sterilisasi Alat ............................................................................................................. 16 Pembuatan Larutan Stok ............................................................................................. 16 Pembuatan Media........................................................................................................ 17 Persiapan Eksplan ....................................................................................................... 17 Sterilisasi Eksplan ....................................................................................................... 17 Pemotongan Eksplan................................................................................................... 18
Universitas Sumatera Utara

Penanaman Eksplan .................................................................................................... 18 Pemeliharaan ............................................................................................................... 18 Pengamatan Parameter ................................................................................................ 18 Parameter kualitatif ..................................................................................................... 18
Persentase Eksplan Hidup (%)............................................................................. 18 Persentase Kontaminasi (%) ................................................................................ 19 Persentase Eksplan Membentuk Tunas (%)......................................................... 19 Jumlah Tunas (buah)............................................................................................ 19 Tinggi Tunas (cm)................................................................................................ 19 Jumlah Akar (buah).............................................................................................. 19 Panjang Akar (cm) ............................................................................................... 19 Jumlah Daun (helai) ............................................................................................. 19 Jumlah Buku ........................................................................................................ 20 Waktu Inisiasi (hari)............................................................................................. 20 Parameter Kuantitatif .................................................................................................. 20 Kemunculan Kalus dan Tunas Adventif ............................................................. 20 Warna Kalus......................................................................................................... 20 Tekstur Kalus ...................................................................................................... 20
HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil ............................................................................................................................ 21
Parameter kualitatif ................................................................................................ 21 Persentase Eksplan Hidup (%) .......................................................................... 21 Persentase Kontaminasi (%) .............................................................................. 22 Persentase Eksplan Membentuk Tunas (%) ...................................................... 23 Jumlah Tunas (buah) ......................................................................................... 23 Tinggi Tunas (cm) ............................................................................................. 24 Jumlah Akar (buah) ........................................................................................... 25 Panjang Akar (cm)............................................................................................. 26 Jumlah Daun (helai)........................................................................................... 26 Jumlah Buku ...................................................................................................... 27 Waktu Inisiasi (hari) .......................................................................................... 28
Parameter Kuantitatif ............................................................................................. 28 Kemunculan Kalus dan Tunas Adventif ........................................................... 28 Warna Kalus ...................................................................................................... 30 Tekstur Kalus .................................................................................................... 31
Pembahasan................................................................................................................. 32
KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan ................................................................................................................. 35 Saran............................................................................................................................ 35
DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN
Universitas Sumatera Utara

ABSTRAK
ROZALIANA: Induksi Tunas Tanaman Nilam (Pogostemon cablin Benth) Dengan Pemberian α-Benzil Amino Purina dan α-Asam Asetat Naftalena Secara In-Vitro, dibimbing oleh Luthfi A.M. Siregar dan Eva Sartini Bayu.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi zat pengatur tumbuh BAP dan NAA yang paling efektif untuk induksi tunas tanaman nilam secara in vitro.Penelitian dilakukan di Laboratorium Kultur Jaringan Tanaman, Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan, yang dimulai dari Januari 2012 hingga Juni 2012 menggunakan rancangan acak lengkap dengan 2 faktor perlakuan yaitu pemberian BAP (0, 0.5, 1 dan 1.5 mg/l) dan NAA (0, 0.2, 0.4 dan 0.6 mg/l). Parameter yang diamati adalah persentase eksplan yang hidup, persentase kontaminasi, persentase eksplan membentuk tunas, tinggi tunas, jumlah akar, panjang akar, jumlah daun, jumlah buku, waktu inisiasi, kemunculan kalus, warna kalus, dan tekstur kalus.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian BAP dan NAA berpengaruh nyata terhadap parameter waktu inisiasi dengan waktu inisiasi terbaik yaitu 7 hari (0.6 mg/l NAA dan 1.5mg/l BAP) dan jumlah akar dengan jumlah akar terbanyak yaitu 8 buah (0.2 NAA mg/l dan BAP 1.5mg/l) dan tidak berpengaruh nyata pada parameter lainnya. Media yang terbaik untuk induksi tunas belum diperoleh. kata kunci : NAA, BAP, Nilam
Universitas Sumatera Utara

ABSTRACT
ROZALIANA: The induction of nilam (Pogostemon cablin Benth) bud with giving αBenzil Amino Purin and α- Naftalena acetic acid by in-vitro methode, supervised by Luthfi. A. M. Siregar and Eva Sratini Bayu. This research aims to determinedthe concentation of the most effectivegrowth regulator for bud induction patchouli plant by in-vitro methode. The research was done in the laboratory of plant tissue culture, agriculture faculty university of north sumatra, medan from January 2012 to june 2012 using factorial completely randomized design with 2wo factors that is giving BAP (0, 0.5, 1 dan 1.5 mg/l) and NAA (0, 0.2, 0.4 dan 0.6 mg/l). The measured parameters were percentage of eksplan living, the percentage of contamination, the percentage of eksplan forming buds, bud height, roots number, root length, leaves number, noods number, time of initiation, appearance of callus, colour of callus and texture of callus. The result showed that giving BAP and NAA significantly affected on the buds initiation time parameters with the best time of initiation is 7 days ((0.6 mg/l NAA and 1.5mg/l BAP and the highest number of root that 8 pieces (0.2 NAA mg/l and BAP 1.5mg/l)and did not significanly on others parameter. The best medium for bud induction was not found yet. Key words: NAA, BAP, patchouli
Universitas Sumatera Utara

PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara penghasil minyak nilam terbesar di dunia yang memenuhi kebutuhan minyak nilam dunia dengan pangsa pasar 90%. Pada tahun 2004, ekspor nilam Indonesia mencapai 2074 ton atau senilai US$ 27,137 juta. Namun, beberapa tahun terakhir posisinya mulai terancam oleh negara Cina, India, dan Vietnam (Ditjenbun, 2006). Minyak nilam Indonesia sangat digemari pasar Amerika dan Eropa terutama digunakan untuk bahan baku industri pembuatan minyak wangi, kosmetika, farmasi dan industri yang lainnya. Minyak nilam (patchouli oil) diperoleh dari proses penyulingan daun nilam (Pogostemoncablin Benth). Dalam industri parfum, minyak nilam digunakan sebagai bahan fixative (pengikat wewangian) yang sampai saat ini belum dapat disintesis (Wikardi, dkk, 1990).
Di Indonesia, P. cablin tidak dapat berbunga, sehingga bentukan-bentukan genotip baru hasil persilangan alami tidak dapat terjadi. Akibatnya, keragaman genetiknya relative sempit, terutama untuk kandungan minyak (Mariska dan Lestari, 2003).
Minyak nilam merupakan salah satu jenis minyak atsiri yang memiliki permintaan cukup tinggi. Negara pengimpor terbesar minyak nilam adalah Amerika Serikat yakni tidak kurang dari 210 ton minyak nilam dibutuhkan rata-rata per tahun. Negara pengimpor lainnya antara lain Inggris, Francis, Swis, Jerman dan Belanda. Mengingat begitu besar prospek dari hasil tanaman nilam, maka perlu diupayakan pembibitan yang menghasilkan kualitas tanaman yang baik. Dalam rangka
Universitas Sumatera Utara

pengembangan pemanfaatan tanaman nilam maka usaha penyediaan bibit yang bermutu dan bebas penyakit mutlak diperlukan. Teknik untuk memenuhi permintaan tersebut yang tepat adalah teknik propagasi secara in vitro (kultur- Jaringan) (Bowo,dkk., 2007).
Patchouli alcohol adalah komponen utama minyak nilam (ada sekitar 40%) yang digunakan sebagai standar mutu minyak nilam. Komponen penting lainnya dalam minyak nilam ialah α,β, γ patchoulen dan α-buinesen. Produksi minyak nilam melalui kultur jaringan sebagai pilihan lain cara produksi menarik untuk dipelajari. Beberapa laporan menyatakan bahwa kultur sel / kalus tidak memproduksi minyak atsiri, kalaupun ada biasanya tidak sama dengan komponen-komponen minyak atsiri dari tanaman utuh (Tjondronegoro dkk, 1997).
Tanaman nilam merupakan tanaman perdu wangi berdaun halus dan berbatang segiempat. Daun kering tanaman ini disuling untuk mendapatkan minyak nilam (Patchouli oil) yang banyak digunakan di berbagai kegiatan industri. Fungsi utama minyak nilam sebagai bahan baku pengikat (fiksatif) komponen kandungan utamanya, yaitu patchouli alkohol (C15H26) dan sebagai bahan eteris untuk parfum agar aroma keharumannya bertahan lebih lama. Selain itu minyak nilam digunakan sebagai bahan campuran produk kosmetika (diantaranya untuk pembuatan sabun), pasta gigi, sampo, lotion dan deodorant), kebutuhan industri makanan diantaranya pembuatan obat anti radang, anti fungi, anti serangga, afrodisiak, anti – inflamasi, anti depresi, anti flogistik serta dekongestan), kebutuhan aromaterapi serta berbagai kebutuhan industri lainnya. Minyak nilam dapat dicampur secara baik dengan minyak atsiri lainnya seperti minyak cengkeh, geranium, akar wangi, minyak cassia. Aroma

Universitas Sumatera Utara

minyak nilam sangat kaya, terkesan rasa manis, hangat dan menyengat. Aroma tetap terasa manis sampai seluruh minyak menguap (Sobardini dkk, 2006).
Salah satu permasalahan pada tanaman nilam adalah menurunnya kadar Patchouli alkohol yang diperoleh setelah beberapa kali dilakukan pemanenan. Hal ini disebabkan karena tidak tersedianya bibit unggul tanaman nilam yang memiliki kadar minyak terutama patchouli alkohol yang tinggi. Produksi metabolit sekunder melalui teknik kultur jaringan telah terbukti memberikan hasil peningkatan kadar metabolit sekunder dengan waktu produksi yang relatif singkat dan kondisi yang aseptik (Nurlelasari., dkk, 2007).
Selain dengan mengumpulkan berbagai klon, peningkatan keragaman genetik pada tanaman yang selalu dibiakkan secara vegetatif dapat dilakukan melalui variasi somaklonal. Variasi ini dapat terjadi akibat ketidakstabilan selama pengkulturan. Ketidakstabilan tersebut dapat disebabkan antara lain oleh perubahan struktur atau jumlah kromosom, penggunaan zat pengatur tumbuh yang aktivitasnya kuat seperti 2,4 D, komposisi media kultur yang tidak serasi, faktor genetik eksplan atau lamanya periode pengkulturan (Hobir dan Seswita, 2002).
Bahan tanaman nilam yang hanya dapat diperbanyak secara vegetatif (stek) digunakan petani adalah asalan diambil dari kebun tetangga tanpa diketahui dengan pasti mutunya yang antara lain potensi produksi, rendemen minyak, kadar alkohol, indeks bias, kadar asam, ketahanan terhadap hama dan penyakit, sehingga untuk mengantisipasi efek perdagangan global yang ditandai oleh kompetisi yang semakin ketat, diperlukan usaha yang intensif untuk memacu penemuan varietas unggul tanaman nilam ini penting dan sangat strategis, selain itu produksi bibit dalam jumlah
Universitas Sumatera Utara

yang besar dalam waktu yang relatif singkat perbanyakan tanaman dapat dilakukan melalui kultur jaringan. Perbanyakan tanaman nilam telah dilakukan secara kultur jaringan yang meliputi kegiatan laboratorium (inisiasi, multiplikasi tunas dan perakaran) dan kegiatan di rumah kaca (aklimatisasi). Bibit yang dihasilkan melalui kultur jaringan mempunyai kelebihan diantaranya bebas penyakit dan proses produksi lebih cepat serta faktor multiplikasi cukup tinggi yaitu (1: 50 – 100) per bulan (Sobardini, 1997).
Sumber bahan tanaman diperoleh dari Aceh. Nilam Aceh (Pogostemon cablin Benth atau Pogostemon patchouli) merupakan tanaman standar ekspor yang direkomendasikan karena memiliki aroma khas dan rendemen minyak daun keringnya tinggi, yaitu 2.5 – 5% dibandingkan dengan jenis lain (Sobardini, 1997). Tujuan Penelitian
Untuk mengetahui kombinasi konsentrasi zat pengatur tumbuh BAP dan NAA yang paling efektif untuk induksi tunas tanaman nilam secara in-vitro. Hipotesis Penelitian
Adanya perbedaan dan interaksi pertumbuhan eksplan nilam pada berbagai kombinasi konsentrasi zat pengatur tumbuh BAP dan NAA. Kegunaan Penelitian
Penelitian ini berguna untuk mendapatkan data penyusunan skripsi yang merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana di Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan serta sebagai bahan informasi bagi pihak yang membutuhkan.
Universitas Sumatera Utara

TINJAUAN PUSTAKA Nilam termasuk salah satu warga familia Lamiaceae. Menurut Gembong (2000) secara lengkap sistematika tumbuhan ini adalah divisio: Spermatophyta, subdivisio: Angiospermae, classis: Dicotyledonae, subclassis: Sympetale, ordo: Solanales / Tubiflorae / Personatae, familia:Lamiaceae / Labiatae, genus: Pogostemon; dan species: Pogostemon sp Di Indonesia terdapat tiga jenis nilam yaitu Pogostemon cablin Benth. (nilam Aceh), Pogostemon hortensis Backer. (nilam Jawa), dan Pogostemon heyneanus Benth. (nilam hutan). Nilam Aceh diduga berasal dari Philipina, mula-mula ditanam di Jawa pada tahun 1895 dan mulai ditanam di Aceh pada tahun 1909. Nilam hutan berasal dari India, tumbuh liar di Sumatera dan Jawa. Nilam ini jarang dibudidayakan, disebut ‘dilem kembang’ karena hanya jenis ini yang berbunga (Kardinan, 2005 ).
Gambar 1. Tanaman nilam Nilam mempunyai akar serabut dengan bentuk daun bulat dan lonjong. Daun
yang masih muda berwarna hijau muda, sedangkan daun yang sudah tua berwarna hijau tua dengan panjang 6,33 - 7,64cm dan lebar 5,34 - 6,25cm. Batang berkayu,
Universitas Sumatera Utara

berdiameter 10 - 20mm, dan berbentuk persegi. Permukaan batang kasar, berwarna hijau ketika muda, dan hijau kecoklatan ketika sudah tua (Kardinan dan Mauludi, 2004 ). Kultur jaringan
Kultur jaringan sebagai salah satu teknik yang digunakan untuk memperbanyak tanaman dengan menggunakan potongan kecil jaringan atau organ tanaman yang dipelihara dalam suatu medium dan dikerjakan seluruhnya dalam keadaan aseptik. Potongan kecil jaringan atau organ itu disebut eksplan. Sebagai respon terhadap hormon, baik endogen maupun eksogen akan muncul kalus. Kalus dapat juga terbentuk pada bagian yang tidak mengalami luka akibat irisan dan sering muncul dari bagian ibu tulang daun atau tulang daun, bila helaian daun digunakan sebagai eksplan (Bowo,dkk., 2007).
Teknik budidaya in vitro ini bisa mengatasi kendala yang sering dijumpai pada masalah seputar penyediaan bibit, misalnya: bisa menyediakan bibit yang seragam, dalam waktu yang relatif singkat, tidak tergantung pada musim, serta bebas penyakit. Di samping itu dalam kondisi in vitro produksi metabolit sekunder seperti yang dikandung oleh tanaman nilam akan lebih menguntungkan, karena kondisinya terkontrol, dapat diperbanyak pembentukannya yaitu dengan memanipulasi medium dan hasilnya relatif konstan. Kultur jaringan sebagai salah satu teknik yang digunakan untuk memperbanyak tanaman dengan menggunakan potongan kecil jaringan atau organ tanaman yang dipelihara dalam suatu medium dan dikerjakan seluruhnya dalam keadaan aseptik Potongan kecil jaringan atau organ itu disebut eksplan (Bowo,dkk., 2007).
Universitas Sumatera Utara

Pada tanaman herba, eksplan diambil baik dari pucuk apikal maupun lateral yang mengambil jaringan meristematik namun sering kali digunakan mata tunas yang diharapkan akan berkembang membentuk daun dan batang sempurna. Bagian tanaman yang digunakan sebagai eksplan adalah tunas lateral atau terminal yang panjangnya kurang lebih 20 mm. Pengaruh dominansi apikal dapat dihilangkan dengan menambahkan zat pengatur tumbuh (terutama sitokinin) kedalam medium. Sebagai hasilnya adalah tunas dengan jumlah cabang yang banyak (Wattimena, 1992). Eksplan
Sebagai respon terhadap hormon, baik endogen maupun eksogen akan muncul kalus. Kalus dapat juga terbentuk pada bagian yang tidak mengalami luka akibat irisan dan sering muncul dari bagian ibu tulang daun atau tulang daun, bila helaian daun digunakan sebagai eksplan. Faktor-faktor yang mempengaruhi keberhasilan kultur in vitro antara lain: factor eksplan, komponen medium dan lingkungan kultur (Bowo,dkk., 2007).
Sumber asal eksplan dapat mempengaruhi pertumbuhan dan potensial morfogenetiknya. Eksplan yang berasal dari satu jenis organ misalnya, juga diketemukannya adanya keragaman dan regenerasinya. Perbedaan regeneratif ini sering terjadi pada jaringan tua. Sel-sel yang berasal dari permukaan daun yang berbeda kadang-kadang memiliki daya regenerasi yang berbeda. Ukuran eksplan untuk dikulturkan juga mempengaruhi keberhasilan. Ukuran yang terlampau kecil akan kurang daya tahannya bila dikulturkan, sementara bila terlampau besar akan
Universitas Sumatera Utara

sulit mendapatkan eksplan yang steril. Setiap jenis tanaman maupun organ memiliki ukuran eksplan yang optimim untuk dikulturkan (Wattimena, 1992). Media kultur
Keberhasilan dalam teknologi serta metode in-vitro terutama disebabkan oleh pengetahuan yang lebih baik tentang kebutuhan hara sel dan jaringan yang dikulturkan. Komposisi formulasi dari suatu media secara umum harus mengandung nutrien esensial makro dan mikro serta sumber tenaga dimana zat-zat tersebut bisa dicampur sendiri dari bahan dasarnya, atau diperoleh sudah dalam bentuk campuran. Biasanya ditambah zat pengatur tumbuh, seperti hormon-hormon dan zat penyangga misalnya agar. Tiap tanaman membutuhkan 6 elemen makronutrien : nitrogen, kalium, magnesium, kalsium, belerang, dan fosfor serta tujuh elemen mikro nutrien yaitu besi, mangan, seng, tembaga, boron, molibden, dan klor dalam bentuk ikatan kimia dan perbandingan yang sesuai. Banyak formulasi media yang digunakan, diantaranya yang dikembangkan oleh Murashiege dan Skoog (MS) dan medium B5 yang dikembangkan di Prairie Regional Laboratory. Keistimewaan medium MS ini adalah kandungan nitrat, kalium dan amoniumnya yang tinggi. Baik medium MS maupun medium B5 tampaknya mengandung jumlah hara anorganik yang layak untuk memenuhi kebutuhan banyak jenis sel tanaman dalam kultur (Nurlelasari.,dkk, 2007).
Volume medium kultur diduga ada interaksi dengan kepadatan eksplan dalam memepengaruhi pertumbuhan dan perkembangan kultur. Interkasi ini diduga
Universitas Sumatera Utara

berhubungan dengan menurunnya senyawa inhibitor dalam medium (Wattimena, 1992).
Medium padat digunakan untuk menghasilkan kalus yang selanjutnya diinduksi membentuk tanaman yang lengkap (planlet), sedangkan medium cair biasanya digunakan untuk kultur sel. Medium yang digunakan mengandung lima komponen utama yaitu senyawa anorganik, sumber karbon, vitamin, zat pengatur tumbuh dab suplemen organik (Yuwono, 2008). Lingkungan in-vitro
Eksplan yang dikulturkan menghendaki suhu ruang tumbuh yang optimum agar tetap segar. Suhu optimum untuk proses morfogenesis juga bervariasi antar spesies. Suhu tinggi diduga dapat menghambat produksi kinetin yang mendorong pertunasan pembentukan akar dari kultur juga dipengaruhi oleh suhu ruang tumbuh. Kelembaban relatif ruang tumbuh kultur jaringan kurang lebih 70%, didalam botol menghendaki kelembaban yang lebih tinggi. Respon kultur terhadap cahaya tergantung pada asal eksplan. Sumber cahaya buatan untuk ruang inkubasi dalam kultur in vitro dilaporkan bahwa cahaya fluorescent yang berasal dari lampu TL memnerikan cahaya dengan panjang gelombang yang dibutuhkan untuk morfogenesis. Multiplikasi tunas dan pembentukan tunas in vitro umumnya menghendaki cahaya dengan intensitas 500-3000 lux (Wattimena, 1992).
Faktor-faktor lingkungan yang berpengaruh dalam kultur in vitro adalah: cahaya, temperatur dan pH medium. Selama dalam kultur in vitro sel tumbuhan tidak melakukan fotosintesis secara efisien dan urnumnya dalam keadaan non autotrof. Meskipun seluruh kebutuhan energi untuk pertumbuhan secara in vitro sudah
Universitas Sumatera Utara

dipenuhi dari gula tetapi untuk menghasilkan plantlet hijau dengan daun normal diperlukan cahaya (Bowo,dkk., 2007). Zat pengatur tumbuh
Zat pengatur tumbuh terdiri dari golongan sitokinin dan auksin. Auksin mempunyai peran ganda tergantung pada struktur kimia, konsentrasi, dan jaringan tanaman yang diberi perlakuan. Pada umumnya auksin digunakan untuk menginduksi pembentukan kalus, kultur suspensi, dan akar, yaitu dengan memacu pemanjangan dan pembelahan sel di dalam jaringan kambium. Untuk memacu pembentukan kalus embriogenik dan struktur embrio somatik seringkali auksin diperlukan dalam konsentrasi yang relatif tinggi (Lestari, 2011).
Zat pengatur tumbuh tanaman berperan penting dalam mengontrol proses biologi dalam jaringan tanaman. Perannya antara lain mengatur kecepatan pertumbuhan dari masingmasing jaringan dan mengintegrasikan bagian-bagian tersebut guna menghasilkan bentuk yang kita kenal sebagai tanaman. Aktivitas zat pengatur tumbuh di dalam pertumbuhan tergantung dari jenis, struktur kimia, konsentrasi, genotipe tanaman serta fase fisiologi tanaman. Dalam proses pembentukan organ seperti tunas atau akar ada interaksi antara zat pengatur tumbuh eksogen yang ditambahkan ke dalam media dengan zat pengatur tumbuh endogen yang diproduksi oleh jaringan tanaman. Penambahan auksin atau sitokinin ke dalam media kultur dapat meningkatkan konsentrasi zat pengatur tumbuh endogen di dalam sel, sehingga menjadi “faktor pemicu” dalam proses tumbuh dan perkembangan jaringan. Untuk memacu pembentukan tunas dapat dilakukan dengan memanipulasi dosis auksin dan sitokinin eksogen(Lestari, 2011).
Universitas Sumatera Utara

Adapun hormon pertumbuhan yang digunakan ada dua jenis yaitu auksin dan sitokinin. Hormon-hormon lain, diantaranya giberelin dan zat pengatur tumbuh sintetik juga sering digunakan. Auksin, sitokinin, dan giberellin adalah hormonhormon yang mempunyai peran ganda karena mempunyai kemampuan untuk merangsang pertumbuhan eksplan dan mempengaruhi pertumbuhan akar. Kemampuan untuk mensintesa atau merombak serta kepekaan terhadap zat-zat tersebut bila berada dalam media, untuk setiap spesies dan masing- masing bagian tanaman, sangat bervariasi sehingga bagi usaha propagasi invitro dari suatu tanaman yang belum pernah dikerjakan sebelumnya, perlu dilakukan percobaan dengan berbagai jenis dan kadar dari hormon-hormon tersebut (Nurlelasari, dkk, 2007).
Sitokinin penting dalam pengaturan pembelahan sel, morfogenesis dan banyak berperan dalam mengatur organogenesis, pembentukan tunas, mendorong proliferasi meristem ujung, menghambat pembentukan akar, mendorong pembentukan klorofil. Jenis sitokinin yang digunakan dalam kultur jaringan, yaitu kinetin (6-furfuryl amino purine), zeatine (4-hydroxyl-3-metyltrans- 2-butenyl amino purine), BAP/BA (6-benzyl amino purine/6-benzyl adenine) (Sobardini dkk, 2006).
Selain sitokinin, auksin merupakan zat pengatur tumbuh yang juga sering ditambahkan ke dalam medium kultur jaringan untuk menginduksi pertumbuhan kalus dan untuk mengatur morfogenesis diantaranya pembentukan akar, tunas dan embriogenesis. Salah satu auksin sintetis yang sering digunakan dalam kultur jaringan adalah NAA (Naphthalene Acetic Acid) (George and Sherrington, 1984).
Universitas Sumatera Utara

Zat pengatur tumbuh sangat diperlukan sebagaikomponen media bagi pertumbuhan dan diferensiasikalus. Tanpa penambahan zat pengatur tumbuhdalam media, pertumbuhan akan terhambat bahkanmungkin tidak tumbuh sama sekali. Pembentukankalus dan organ-organ ditentukan oleh penggunaanyang tepat dari zat pengatur tumbuh tersebut. Pengaruh rangsangan auksin terhadap jaringan berbedabeda. Rangsangan yang paling kuat terutama terhadap sel-sel meristem apikal batang dan koleoptil. Pada kadar yang tinggi, auksin lebih bersifat menghambat daripada merangsang pertumbuhan (Sriyanti dan Wijayani, 1994).
Menurut Khrisnamoorthy (1981) dan Wattimena (1990), yang dikutip dari Sobardini, dkk., 2006, pemberian auksin pada konsentrasi yang tinggi akan menghambat pertumbuhan akar dan tunas. Pemberian auksin pada konsentrasi terlalu tinggi dapat memacu produksi hormon etilen yang merupakan hormon penghambat pertumbuhan akar, daun dan bunga tergantung pada speciesnya. Respon auksin berhubungan dengan konsentrasinya. Konsentrasi yang tinggi bersifat menghambat pertumbuhan tunas.
Menurut pendapat Evans dkk (1986) yang dikutip oleh Sobardini dkk (2006) menyatakan bahwa tunas yang sedang berkembang dapat memproduksi auksin dalam jumlah yang cukup untuk perakaran maka penambahan auksin eksogen tidak diperlukan. Jadi tanpa pemberian NAA pun, eksplan dapat menginisiasi pertumbuhan akar.
Universitas Sumatera Utara

BAHAN DAN METODE PENELITIAN
Tempat dan Waktu penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Tanaman, Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan, yang dimulai dari bulan Januari 2012 hingga Juni 2012.
Bahan dan Alat

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tunas nilam, larutan stok media MS, ZPT (BAP dan NAA), iodine 10%, benlathe, tween 20, agar-agar, NaOH 1N, HCl 1N, pH meter/kertas lakmus, aluminium foil dan aquades, alkohol 96%.
Alat-alat yang digunakan adalah autoklaf, laminar Air Flow (LAF), botol kultur, erlenmeyer, pipet skala, gelas ukur, Petridis, scalpel, gunting, bunsen, timbangan analitik, hotplate, batang pengaduk, lemari es, kertas milimeter, pinset, oven, dan alat-alat lain yang mendukung penelitian ini. Metode Penelitian
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 2 faktor perlakuan yaitu: Faktor I: Tingkat konsentrasi pemberian NAA yang terdiri dari 4 taraf, yaitu:
A0= 0 mg/l (kontrol) A1= 0,2 mg/l A2= 0,4 mg/l A3= 0,6 mg/l
Universitas Sumatera Utara

Faktor II: Tingkat konsentrasipemberian BAP yang terdiri dari 4 taraf, yaitu:

B0= 0 mg/l (kontrol)

B1= 0,5 mg/l

B2= 1 mg/l

B3= 1,5 mg/l

Sehingga diperoleh 16 kombinasi perlakuan yaitu:

A0B0

A1B0

A2B0

A3B0

A0B1

A1B1

A2B1

A3B1

A0B2

A1B2

A2B2

A3B2

A0B3

A1B3

A2B3

A3B3

Jumlah ulangan

: 4 ulangan

Jumlah kombinasi

: 16 kombinasi

Jumlah plot

: 64 plot

Jumlah tanaman/botol

: 1 tanaman

Jumlah seluruh tanaman : 64 tanaman

Dari hasil penelitian dianalisis dengan sidik ragam dengan model linier aditif

sebagai berikut :

Yij = µ + αi + βj + (αβ)ij + εijk

i=1,2,3,4, j= 1,2,3,4 k=1,2,3,4

Yij = Hasil pengamatan pada pemberian BAP pada taraf ke-i dan pemberian

NAA pada taraf ke-j

µ = Rataan atau nilai tengah

αi = efek dari konsentrasi BAP pada taraf ke-i

Universitas Sumatera Utara

βj = Efek dari konsentrasi NAA pada taraf ke-j (αβ)ijk =Efek interaksiantara konsentrasi BAP pada taraf ke-i dengan konsentrasi
NAA pada taraf ke j pada ulangan ke k. εij =Pengaruh galat pada blok ke-i karena pemberian konsentrasi BAP pada taraf
ke-i dengan konsentrasi NAA pada taraf ke-j dan pada ulanagna ke k. Uji lanjutan yang digunakan dalam menentukan notasi bagi perlakuan yang berpengaruh nyata terhadap parameter yang diambil adalah uji BNJ pada taraf 5% (Steel dan Torrie, 1995).
Universitas Sumatera Utara

PELAKSANAAN PENELITIAN
Sterilisasi Alat Sterilisasi bermanfaat untuk membersihkan seluruh alat-alat yang digunakan
dalam kultur jaringan sehingga terbebas dari hal-hal yang dapat menimbulkan kontaminasi. Alat-alat tersebut dicuci dengan deterjen, kemudian dibilas dengan air, setelah itu dikeringkan. Kemudian alat seperti scalpel, pipet skala, pinset, dan cawan petri dibungkus dengan kertas coklat, sedang erlenmeyer dan gelas ukur permukaannya ditutup dengan aluminium foil. Setelah itu, semua botol kultur dan alat-alat dimasukkan kedalam autoklaf pada tekanan 17,5psi dengan suhu 121°C selama 60 menit. Setelah itu, di-dinginkan lalu di-keluarkan dan dimasukkan kedalam ruang kultur. Alat-alat selain botol kultur dimasukkan kedalam oven. Pembuatan Larutan Stok
Pembuatan larutan stok bertujuan untuk memudahkan pekerjaan dalam membuat media. Larutan stok yang dibuat adalah larutan stok makro (20x), mikro (20x), vitamin (10x), iron (10x) dan FeEDTA (20x) sesuai dengan komposisi media MS (Lampiran 3) yang diaduk dalam erlenmeyer dengan konsentrasi yang lebih pekat. Setelah membuat larutan stok garam-garam, perlu dibuat stok zat pengatur tumbuh biasanya dalam 100 ml. Stok harus disimpan didalam lemari es. Pembuatan Media
Media yang digunakan dalam penelitian ini adalah media MS dengan menggunakan dua zat pengatur tumbuh yaitu BAP dan NAA. Untuk pembuatan media 1 liter dilakukan dengan mengisi beker glass dengan aquades steril sebanyak
Universitas Sumatera Utara

500 ml. Kemudian ditambahkan larutan stok A sebanyak 50 ml/l, B 5 ml/l, C 10 ml/l, D 5 ml/l (Lampiran 3). Kemudian ditambahkan myo-inositol 0,1 gram/l dan sukrosa 30 gram/l. Setelah itu, ditambahkan aquades sampai mendekati 1000 ml. Lalu pH-nya diukur dengan menggunakan pH meter dan dilihat angkanya. Bila pH masih dibawah 5,7 maka perlu ditambah NaOH 1 N, tetapi bila pH sampai mencapai 6,0 (melebihi 5,8) maka ditambah HCl 1 N. Kemudian, ditambahkan aquades hingga volume mencapai 1000 ml. Lalu ditambahkan agar-agar sebanyak 7g/l. Diaduk dengan menggunakan stirer sampai mendidih dan agar-agarnya larut semua. Larutan dituangkan ke dalam 16 botol, masing-masing botol berisi 100 ml dan sisanya disimpan dalam lemari pendingin. Setiap botol ditambahkan zat pengatur tumbuh BAP dan NAA sesuai dengan kombinasi perlakuan. Kemudian setiap media perlakuan dituangkan ke dalam botol kultur sesuai dengan kombinasinya sehingga setiap botol kultur berisi 15 ml yang telah berlabel dan ditutup dengan aluminium foil. Media ini selanjutnya disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121°C, tekanan 17,5 psi, selama 30 menit. Setelah itu, media diletakkan kedalam media kultur. Persiapan Eksplan
Eksplan yang digunakan adalah tunas aksilar tanaman nilam yang muncul dari bagian nodus dengan panjang ±2 cm yang diambil langsung dari luar. Tunas aksilar dipotong menggunakan pisau tajam. Sterilisasi Eksplan
Tunas dicuci bersih dengan menggunakan deterjen selama 15 menit lalu dibilas sampai bersih. Lalu tunas dicuci dengan larutan benlate yang ditambahkan tween 20 selama 15 menit lalu bilas dengan aquades sebanyak 3 kali lalu dicuci
Universitas Sumatera Utara

lagidengan larutan HgCl2 selama 15 menit sambil di kocok, setelah itu dibilas dengan air aquades. Selanjutnya dicuci dengan larutan iodine 10% selama 15 menit lalu bilas dengan aquades sebanyak 3 kali. Sterilisasi ini dilakukan di LAF. Pemotongan Eksplan
Eksplan yang digunakan adalah tunas tanaman nilam. Untuk mempermudah sterilisasi eksplan, tunas dipotong dengan menggunakan scalpel. Eksplan yang selesai disterilisasi dipotong-potong di LAF dengan ukuran 0,5 cm. Penanaman Eksplan
Penanaman eksplan dilakukan di LAF yang telah disterilkan dengan alcohol 96%. Eksplan yang sudah steril diletakkan di petridis. Diambil botol media lalu didekatkan dengan api bunsen kemudian eksplan ditanam kedalam botol media sesuai dengan perlakuan, setiap botol media terdapat 1 eksplan. Setelah itu, botol media dikembalikan ke dalam ruang kultur. Pemeliharaan
Botol-botol yang telah ditanami eksplan diletakkan pada rak-rak kultur didalam ruang kultur. Setiap hari disemprot dengan alcohol 96% agar bebas dari organisme yang menyebabkan kontaminasi. Parameter Pengamatan
Parameter Kuantitatif Persentase eksplan yang hidup (%)
Pengamatan dilakukan pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah eksplan yang hidup.
Universitas Sumatera Utara

Persentase eksplan yang hidup = jumlah eksplan yang tumbuh x 100% jumlah eksplan yang ditanam
Persentase kontaminasi (%) Pengamatan dilakukan pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah
eksplan yang terkontaminasi. Persentase kontaminasi = jumlah eksplan yang kontaminasi x 100%
jumlah eksplan yang ditanam Persentase eksplan membentuk tunas (%)
Pengamatan dilakukan pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah eksplan yang membentuk tunas. Persentase eksplan membentuk tunas = jumlah eksplan membentuk tunas x 100%
jumlah eksplan yang tumbuh Jumlah tunas (buah)
Dihitung pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah tunas yang muncul. Tinggi tunas (cm)
Diukur pada akhir penelitian dengan menggunakan kertas milimeter mulai dari tempat munculnya tunas (pangkal) sampai ujung tunas tertinggi. Jumlah daun
Dihitung pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah daun yang muncul. Jumlah buku
Dihitung pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah buku yang muncul. Jumlah akar (buah)
Dihitung pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah akar yang muncul.
Universitas Sumatera Utara

Panjang akar (cm) Diukur pada akhir penelitian dengan menggunakan kertas milimeter mulai
dari tempat munculnya tunas (pangkal) sampai ujung tunas tertinggi. Jumlah daun
Dihitung pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah daun yang muncul. Jumlah buku
Dihitung pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah buku yang muncul. Waktu inisiasi tunas (hari)
Dihitung dari awal penanaman sampai eksplan mengeluarkan tunas. Parameter Kualitatif
Kemunculan kalus (+ / -) Diamati ada tidaknya kemunculan kalus pada eksplan selama penelitian. Dan
diamati dari awal penanaman sampai akhir penelitian. Warna kalus
Diamati warna kalus yang terbentuk. Diamati dari awal hingga akhir penelitian. Tekstur kalus
Diamati tekstur kalus yang terbentuk. Diamati dari awal hingga akhir penelitian.
Universitas Sumatera Utara

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil Dari analisa data yang dilakukan diperoleh hasil bahwa pemberian NAA dan BAP berpengaruh nyata terhadap parameter waktu inisiasi. Adapun interaksi antara NAA dan BAP berpengaruh nyata pada parameter jumlah akar dan waktu inisiasi tunas.
Parameter kuantitatif Persentase eksplan yang hidup (%)

Dari data pengamatan persentase eksplan yang hidup dapat dilihat pada

Lampiran 4, dapat dilihat bahwa perlakuan konsentrasi NAA, BAP dan interaksi

antara kedua perlakuan tidak berpengaruh nyata pada parameter persentase eksplan

yang hidup.

Rataan persentase eksplan yang hidup pada pemberian konsentrasi NAA dan

BAP dapat dilihat pada Tabel 1.

Tabel 1. Rataan persentase eksplan yang hidup (%) pada pemberian konsentrasi NAA dan BAP

perlakuan B (BAP)
B0 (kontrol) B1(BAP 0.5 mg/l) B2 (BAP 1 mg/l) B3 (BAP 1.5 mg/l)
Rataan

A0 (kontrol)
75.00 100.00 100.00 100.00 93.75

perlakuan A (NAA)

A1 (NAA 0.2 mg/l)
75.00 75.00 75.00 100.00 81.25

A2 (NAA 0.4 mg/l) 100.00
75.00 100.00 100.00 93.75

A3 (NAA 0.6 mg/l) 100.00
75.00 100.00 75.00 87.50

Rataan 87.50 81.25 93.75 93.75 89.06

Dari Tabel 1 dapat dilihat bahwa pemberian konsentrasi NAA dan BAP yang tidak berbeda nyata pada semua perlakuan, persentase eksplan yang hidup tertinggi

Universitas Sumatera Utara

pada perlakuan NAA terdapat pada perlakuan A0 dan A2 yaitu sebesar 93.75% dan

terendah pada perlakuan A1 yaitu sebesar 81.25%. Pada pemberian konsentrasi BAP,

persentase eksplan yang hidup tertinggi terdapat pada perlakuan B2 dan B3 yaitu

sebesar 93.75 dan terendah pada B1 yaitu sebesar 81.25%.

Persentase kontaminasi (%)

Dari data pengamatan persentase kontaminasi dapat dilihat pada Lampiran 5,

dapat dilihat bahwa perlakuan konsentrasi NAA, BAP dan interaksi antara kedua

perlakuan tidak berpengaruh nyata pada parameter persentase kontaminasi.

Rataan persentase kontaminasi pada pemberian konsentrasi NAA dan BAP

dapat dilihat pada Tabel 2.

Tabel 2. Rataan persentase kontaminasi (%) pada pemberian konsentrasi NAA dan BAP

perlakuan B (BAP)
B0 (kontrol) B1(BAP0.5 mg/l) B2 (BAP 1 mg/l) B3 (BAP 1.5 mg/l)
Rataan

A0 (kontrol)
25.00 0.00 0.00 0.00 6.25

perlakuan A (NAA)

A1 (NAA A2 (NAA

0.2 mg/l) 0.4 mg/l)

25.00

0.00

25.00

25.00

25.00

0.00

0.00 0.00

18.75

6.25

A3 (NAA 0.6 mg/l)
0.00 25.00 0.00 25.00 12.50

Rataan 12.50 18.75 6.25 6.25 10.94

Dari Tabel 2 dapat dilihat bahwa pemberian konsentrasi NAA dan BAP yang tidak berbeda nyata pada semua perlakuan, persentase kontaminasi tertinggi pada perlakuan NAA terdapat pada perlakuan A1 yaitu sebesar 18.75% dan terendah pada perlakuan A0 dan A2 yaitu sebesar 6.25%. Pada pemberian konsentrasi BAP, persentase kontaminasi tertinggi terdapat pada perlakuan B1 yaitu sebesar 18.75 dan terendah pada B2 dan B3 yaitu sebesar 6.25%.

Universitas Sumatera Utara

a Gambar 2 : a. kontaminasi diamati secara visual
b. kontaminasi diamati secara mikroskopik

b

Persentase eksplan membentuk tunas

Dari data pengamatan persentase eksplan membentuk tunas dapat dilihat pada

Lampiran 6, dapat dilihat bahwa perlakuan konsentrasi NAA, BAP dan interaksi

antara kedua perlakuan tidak berpengaruh nyata pada parameter persentase eksplan

membentuk tunas.

Rataan persentase eksplan membentuk tunas pada pemberian konsentrasi

NAA dan BAP dapat dilihat pada Tabel 3.

Tabel 3. Rataan persentase eksplan membentuk tunas (%) pada pemberian

konsentrasi NAA dan BAP

perlakuan B (BAP)

perlakuan A(NAA)

Rataan

A0 A1 (NAA A2 (NAA A3 (NAA

(kontrol) 0.2 mg/l) 0.4 mg/l) 0.6 mg/l)

B0 (kontrol)

75.00

75.00 100.00

75.00

81.25

B1(BAP0.5 mg/l) 100.00 75.00 75.00

75.00

81.25

B2 (BAP 1 mg/l) 100.00

75.00 100.00

100.00 93.75

B3 (BAP 1.5 mg/l) 100.00 100.00 100.00

75.00

93.75

B0 (kontrol)

93.75

81.25 93.75

81.25

87.50

Dari Tabel 3 dapat dilihat bahwa pemberian konsentrasi NAA dan BAP yang

tidak berbeda nyata pada semua perlakuan, persentase eksplan membentuk tunas

tertinggi pada perlakuan NAA terdapat pada perlakuan A0 dan A2 yaitu sebesar 93.75%

Universitas Sumatera Utara

dan terendah pada perlakuan A1 dan A3 yaitu sebesar 81.25%. Pada pemberian BAP, eksplan membentuk tunas tertinggi pada perlakuan B2 dan B3 yaitu sebesar 93.75%. dan terendah pada B0 dan B1 yaitu sebesar 81.25%. Jumlah tunas (buah)
Dari data pengamatan jumlah tunas dapat dilihat pada Lampiran 7, dapat dilihat bahwa perlakuan konsentrasi NAA, BAP dan interaksi antara kedua perlakuan tidak berpengaruh nyata pada parameter jumlah tunas.

Rataan jumlah tunas pada pemberian konsentrasi NAA dan BAP dapat dilihat pada Tabel 4. Tabel 4. Rataan jumlah tunas (buah) pada pemberian konsentrasi
NAA dan BAP 1)

perlakuan B (BAP)

perlakuan A (NAA)

A0 A1 (NAA A2 (NAA

(kontrol) 0.2 mg/l) 0.4 mg/l)

B0 (kontrol)

0.75 1.25

1.50

B1(BAP0.5 mg/l) 1.00

1.50

1.25

B2 (BAP 1 mg/l) 1.00

1.00

1.00

B3 (BAP 1.5 mg/l) 1.50

1.25

1.75

Rataan

1.06 1.25

1.38

Ket: 1) analisis menggunakan data hasil transformasi (x+0.5)1/2

A3 (NAA 0.6 mg/l)
1.75 1.50 1.50 1.25 1.50

Rataan 1.31 1.31 1.13 1.44 1.30

Dari Tabel 4 dapat dilihat bahwa pemberian konsentrasi NAA dan BAP yang

tidak berbeda nyata pada semua perlakuan, jumlah tunas terbanyak pada perlakuan

NAA adalah terdapat pada perlakuan A3 yaitu sebesar 1.50 buah dan terendah pada

perlakuan A0 yaitu sebesar 1.06 buah. Pada perlakuan BAP jumlah tunas teringgi

terdapat pada B3 yaitu sebesar 1.44 buah dan terendah terdapat pada B2 yaitu sebesar

1.13 buah.

Universitas Sumatera Utara

Tinggi tunas (cm)

Dari data pengamatan tinggi tunas (cm) dapat dilihat pada Lampiran 8, dapat

dilihat bahwa perlakuan konsentrasi NAA, BAP dan interaksi antara kedua perlakuan

tidak berpengaru