Efek hepatoprotektif infusa daun macaranga tanarius L. pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

  EFEK HEPATOPROTEKTIF INFUSA DAUN Macaranga tanarius L. PADA TIKUS JANTAN GALUR WISTAR TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

  Program Studi Farmasi Oleh:

  Nanda Chris Nurcahyanti NIM : 098114079

FAKULTAS FARMASI

  

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA 2013

HALAMAN PERSEMBAHAN

  

“ Sebab TUHAN, Dia sendiri akan berjalan di depanmu, Dia

sendiri akan menyertai engkau, Dia tidak akan membiarkan engkau

dan tidak akan meninggalkan engkau; janganlah takut dan

janganlah patah hati.”

  (Ulangan 31 : 8) Karya ini kupersembahan kepada :

  Yesus Kristus, Juruselamat dan tempatku berseru Papa Mamaku tercinta,dan Cyntia adikku,serta keluarga besarku yang selalu mendukungku dalam doa

  Sahabat-sahabatku yang selalu mengisi keceriaan dan semangat Mas, Mbak, dan Kawan sepelayanku yang tersayang

  Serta Almamterku tercinta

  

PRAKATA

  Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Kasih atas berkat dan rahmat-Nya yang melimpah, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif Infusa Daun Macaranga Tanarius

  L. Pada Tikus Jantan Galur Wistar Terinduksi Karbon Tetraklorida

  ” ini dengan baik. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  Penulis menyadari bahwa dalam penyelesaian skripsi ini tentunya tidak lepas dari bantuan dan campur tangan dari berbagai pihak, baik secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, penulis hendak mengucapkan terimakasih kepada:

  1. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  2. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dosen Pembimbing dan Dosen Penguji pada skripsi ini atas segala kesabaran, bantuan, bimbingan, serta motivasi dan masukan kepada penulis dalam pengerjaaan skripsi ini.

  3. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji skripsi yang telah banyak member perhatian, masukkan dan saran kepada penulis.

  4. Bapak Prof. Dr. C.J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji skripsi yang telah banyak memberi perhatian, masukkan dan saran kepada penulis.

  5. Ibu Rini Dwiastuti, M.Si., Apt selaku Kepala Penanggungjawab Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan semua fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian skripsi ini

  6. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., yang telah memberikan bantuan dalam determinasi tanaman M. tanarius

  7. Bapak Heru, Bapak Parjiman, Bapak Kayat, Bapak Wagiran selaku laboran laboratorium Fakultas Farmasi dan Ibu Hartini serta Bapak Arzan selaku pengurus taman Universitas Sanata Dharma Kampus III yang telah banyak memberikan bantuan selama proses pelaksanaan penelitian.

  8. Rekan-rekan tim Macaranga 2012, Theresia Garri W., M.R. Biri Kony Tiala, Fransisca Devita R.W., Christine Herdyana F., Bernadetta Amilia R., A.M.

  Inggrid Silli, dan Luluk Rahendra M. atas segala kerjasama, bantuan dan dukungan dalam pengerjaan skripsi.

  9. Sahabat-sahabatku Veronika Dita A., Niken Ambar S., Novia Sarwoningtyas, Nugroho Kristanto dan Hanung Dwi N., atas motivasi, doa, kebersamaan dan persahabatannya.

  10. Seluruh dosen dan teman-teman FSM B 09, FKK B 09 serta seluruh angkatan 2009 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

  11. Semua pihak yang penulis tidak dapat menyebutkan satu-persatu yang telah ikut membantu selama penyusunan skripsi ini.

  Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna. Oleh karena itu, penulis membuka dan mengharapkan kritik, saran dan masukan yang

  

DAFTAR ISI

  Halaman HALAMAN JUDUL ............................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ........................................ ii HALAMAN PENGESAHAN .................................................................. iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................... v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA

  ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ................................... vi PRAKATA .............................................................................................. vii DAFTAR ISI ........................................................................................... x DAFTAR TABEL ................................................................................... xv DAFTAR GAMBAR ............................................................................... xvii DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xix

  INTISARI ................................................................................................ xx

  ABSTRACT .............................................................................................. xxi BAB I. PENGANTAR .............................................................................

  1 A. Latar Belakang ..................................................................................

  1 1. Perumusan masalah ......................................................................

  3 2. Keaslian penelitian .......................................................................

  3 3. Manfaat penelitian ........................................................................

  4 B. Tujuan Penelitian ..............................................................................

  4 1. Tujuan umum ...............................................................................

  4

  2. Tujuan khusus ..............................................................................

  14 2. Tes eskretori hepatik .....................................................................

  18 5. Morfologi .....................................................................................

  18 4. Penyebaran ...................................................................................

  17 3. Taksonomi....................................................................................

  17 2. Nama lain .....................................................................................

  17 1. Sinonim ........................................................................................

  16 G. Macaranga tanarius L. .....................................................................

  16 F. ALT dan AST ...................................................................................

  15 4. Analisis histologik kerusakan hati .................................................

  15 3. Perubahan kandungan kimia hati ..................................................

  14 1. Tes enzim serum ...........................................................................

  5 BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ......................................................

  10 E. Metode Pengujian Hepatoprotektif ....................................................

  10 D. Karbon Tetraklorida (CCl 4 ) ...............................................................

  10 2. Hepatotoksin tipe B (tak teramalkan) ............................................

  10 1. Hepatotoksin tipe A (teramalkan) .................................................

  9 C. Hepatotoksin .....................................................................................

  9 3. Sirosis .........................................................................................

  8 2. Nekrosis .......................................................................................

  8 1. Steatosis (Perlemakan hati) ...........................................................

  6 B. Kerusakan Hati .................................................................................

  6 A. Hati ...................................................................................................

  18

  6. Kandungan kimia .........................................................................

  19 7. Khasiat dan kegunaan ...................................................................

  20 H. Infusa ...............................................................................................

  20 1. Definisi ........................................................................................

  20 2. Cara pembuatan ............................................................................

  20 I. Landasan Teori .................................................................................

  21 J. Hipotesis ..........................................................................................

  22 BAB III. METODE PENELITIAN ..........................................................

  23 A. Jenis dan Rancangan Penelitian .........................................................

  23 B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ....................................

  23 1. Variabel penelitian .......................................................................

  23 2. Definisi operasional ......................................................................

  24 C. Bahan Penelitian ...............................................................................

  25 1. Bahan utama .................................................................................

  25 2. Bahan kimia .................................................................................

  25 D. Alat Penelitian ..................................................................................

  27 1. Alat pembuatan serbuk daun M. tanarius ......................................

  27 2. Alat pembuatan infusa daun M. tanarius .......................................

  27 3. Alat pengukuran kadar ALT-AST serum ......................................

  27 E. Tata Cara Penelitian ..........................................................................

  28 1. Determinasi tanaman ....................................................................

  28 2. Pengumpulan bahan uji.................................................................

  28 3. Pembuatan serbuk.........................................................................

  28

  4. Penetapan kadar air simplisia serbuk kering daun M. tanarius ......

  34 1. Penetapan dosis infusa daun M. tanarius ......................................

  46

  44 3. Kontrol negatif infusa daun M. tanarius dosis 10 g/kgBB ............

  2. Kontrol hepatotoksin CCl 4 2 ml/kgBB ..........................................

  42

  39 1. Kontrol negatif (olive oil 2 ml/kgBB) ...........................................

  38 C. Hasil Efek Hepatoprotektif Infusa daun M. tanarius dengan Kajian kadar ALT-AST serum......................................................................

  35 4. Penetapan lama praperlakuan infusa daun M. tanarius .................

  35 3. Penetapan waktu pencuplikan darah .............................................

  34 2. Penetapan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida .........................

  33 B. Uji Pendahuluan ................................................................................

  28 5. Pembuatan infusa daun M. tanarius ..............................................

  33 2. Penetapan kadar air serbuk kering M. tanarius .............................

  33 1. Hasil determinasi tanaman ............................................................

  33 A. Penyiapan Bahan Uji ........................................................................

  32 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................

  31 F. Tata Cara Analisis Hasil ....................................................................

  31 10. Pengukuran aktivitas ALT-AST serum .......................................

  30 9. Pembuatan serum .........................................................................

  29 8. Pengelompokan hewan uji ............................................................

  29 7. Uji pendahuluan ...........................................................................

  29 6. Pembuatan larutan karbon tetraklorida 50% ..................................

  4. Kelompok perlakuan infusa daun M. tanarius dosis 2,5; 5 dan

  10 g/kgBB pada tikus jantan galur Wistar terinduksi CCl

  4 2 ml/kgBB ...........................................................................

  47 D. Rangkuman Pembahasan ...................................................................

  53 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................

  55 A. Kesimpulan .......................................................................................

  55 B. Saran .................................................................................................

  55 DAFTAR PUSTAKA ..............................................................................

  56 LAMPIRAN ............................................................................................

  58 BIOGRAFI PENULIS .............................................................................

  84

  

DAFTAR TABEL

  Halaman Tabel I. Peningkatan kadar beberapa enzim serum pada pemejanan beberapa senyawa toksik ........................................................... 17 Tabel II. Komposisi reagen serum ALT diasys ........................................ 26 Tabel III. Komposisi reagen serum AST diasys ........................................ 26 Tabel IV. Purata aktivitas ALT-AST serum tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada penetapan waktu pencuplikan darah (n=5) ........................................................... 36

  Tabel V. Hasil uji Scheff aktivitas ALT-serum tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada penetapan waktu pencuplikan darah .......................................... 37

  Tabel VI. Hasil uji Mann-Whitney aktivitas AST-serum tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada penetapan waktu pencuplikan darah .......................................... 37

  Tabel VII. Purata + aktivitas ALT-AST serum tikus setelah praperlakuan pemberian infusa daun M. tanarius selama 6 hari dan pada hari ke-7diberi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ................................................................................... 39

  Tabel VIII. Hasil uji Tamhane aktivitas ALT-serum tikus setelah praperlakuan pemberian infusa daun M. tanarius selama 6 hari dan pada hari ke-7diberi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ................................................................................... 41

  Tabel IX. Hasil uji Scheff aktivitas AST-serum tikus setelah praperlakuan pemberian infusa daun M. tanarius selama 6 hari dan pada hari ke-7diberi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ................................................................................... 41

  Tabel X. Purata + aktivitas ALT- serum tikus sebelum dan sesudah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB......................................... 42 Tabel XI. Purata + aktivitas AST- serum tikus sebelum dan sesudah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB......................................... 42

  

DAFTAR GAMBAR

  Halaman Gambar 1. Struktur mikroskopik hati ......................................................... 7 Gambar 2. Struktur molekul karbon tetraklorida (CCl

  4 ) .............................. 10

  Gambar 3. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida ............................................................................... 12 Gambar 4. Senyawa yang terkandung pada daun M. tanarius ..................... 19 Gambar 5. Diagram batang purata aktivitas ALT-serum tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada penetapan waktu pencuplikan darah .......................................... 36

  Gambar 6. Diagram batang purata aktivitas AST-serum tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada penetapan waktu pencuplikan darah .......................................... 36

  Gambar 7. Diagram batang purata aktivitas ALT-serum tikus setelah praperlakuan pemberian infusa daun M. tanarius selama 6 hari dan pada hari ke-7diberi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ................................................................................... 40

  Gambar 8. Diagram batang purata aktivitas AST-serum tikus setelah praperlakuan pemberian infusa daun M. tanarius selama 6 hari dan pada hari ke-7diberi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ................................................................................... 40

  Gambar 9. Diagram batang purata aktivitas ALT-serum tikus sebelum dan sesudah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB ..................... 43

  Gambar 10.Diagram batang purata aktivitas AST-serum tikus sebelum dan sesudah pemberian olive oil dosis 2 ml/kgBB ..................... 43

  

DAFTAR LAMPIRAN

  Halaman Lampiran 1. Foto daun M. tanarius .......................................................... 59 Lampiran 2. Foto infusa daun M. tanarius ................................................ 59 Lampiran 3. Hasil uji Anova waktu cuplikan darah .................................. 60 Lampiran 4. Hasil uji Kolmogorov Smirnov, ANOVA oneway, ALT- serum tikus jantan setelah praperlakuan infusa daun M.

  tanarius selama 6 hari .......................................................... 64

  Lampiran 5. Hasil uji Kolmogorov Smirnov, ANOVA oneway, AST- serum tikus jantan setelah praperlakuan infusa daun M.

  tanarius selama 6 hari .......................................................... 67

  Lampiran 6. Hasil uji kontrol negatif olive oil .......................................... 71 Lampiran 7. Perhitungan efek hepatoprotektif .......................................... 78 Lampiran 8. Perhitungan penetapan peringkat dosis infusa daun M.

  tanarius pada kelompok perlakuan ....................................... 78

  Lampiran 9. Perhitungan konversi dosis untuk manusia ........................... 79 Lampiran 10. Penetapan kadar air serbuk daun M. tanarius ........................ 80 Lampiran 11. Hasil validitas dan reabilitas pengukuran alat

  Mikrovitalab ........................................................................ 80 Lampiran 12. Surat determinasi tanaman M. tanarius ................................. 82 Lampiran 13. Surat Ethical Clearence Penelitian ....................................... 83

  

INTISARI

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian infusa daun M. tanarius pada penurunan aktivitas ALT-AST serum pada tikus terinduksi CCl 4 , sehingga dapat digunakan sebagai hepatoprotektor.

  Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni rancangan acak pola searah yang menggunakan 30 ekor tikus jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan, dan berat badan + 150-250 gram. Tikus dibagi menjadi enam kelompok. Kelompok I (kontrol negatif) diberi olive oil dengan dosis 2 ml/kgBB. Kelompok

  II (kontrol hepatotoksin) diberi larutan CCl

  4 50% 2 ml/kgBB. Kelompok III

  (kontrol infusa) diberi infusa daun M. tanarius dosis 10 g/kgBB selama enam hari berturut-turut. Kelompok IV-VI tikus diberi infusa daun M. tanarius berturut-turut

  dengan dosis 2,5 g/kgBB; 5 g/kgBB; dan 10 g/kgBB sekali sehari selama 6 hari.

  Pada hari ke-7 semua perlakuan diberi larutan CCl

  4 50% 2 ml/kgBB. Sesuai

  waktu cuplikan darah yang ditentukan darah diambil dari sinus orbitalis mata tikus untuk diukur aktivitas ALT-AST serumnya. Kadar ALT-AST dianalisis dengan metode Kolmogorov Smirnov untuk melihat distribusi data tiap kelompok. Jika didapatkan distribusi data yang normal maka dilanjutkan dengan analisis pola searah (One Way ANOVA) dengan taraf kepercayaan 95% dan dilanjutkan dengan uji Scheffe atau Tamhane untuk melihat perbedaan antar kelompok bermakna (signifikan) (p<0,05) atau tidak bermakna (tidak signifikan) (p>0,05).

  Berdasarkan hasil penelitian dari data ALT serum yang diperoleh, dari tatacara analisis hasil yang digunakan, infusa daun M. tanarius memberikan efek hepatoprotektif pada dosis 2,5 g/kgBB; 5 g/kgBB; dan 10 g/kgBB secara berturut- turut sebesar 44,1%, 39,6%, dan 58,1%.

  

Kata kunci : Macaranga tanarius, hepatoprotektif, infusa, ALT, AST,

karbon tetraklorida

  

ABSTRACT

  The research has purpose to get information about effect the aqueous extract of M. tanarius leaf ’s for decreased activity of serum ALT-AST in rats induced by CCl

  4 , so it can be used as hepatoprotector.

  The research was pure experimental with direct sampling design using 30 male Wistar strain rats, age 2-3 month, and the weight + 150-250 grams. The rats were divided into six groups. Rats in group I (negative control) were given 2 ml/kgBB doses of olive oil continually in 6 days. Group II (hepatotoxin control) rats were given 2 ml/kgBB doses of CCl

  4 solution 50%. Group III (control of

  aqueous extract) rats were given 10 g/kgBB doses of M. tanarius leaf’s aqueous extract in 6 days as a negative. In group IV- VI, the rats were given 2,5 g/kgBB; 5 g/kgBB; 10 g/kgBB doses of M. tanarius leaf’s aqueous extract continually in 6 days and on the 7th day, the rats were given 2 ml/kgBB doses of CCl

  4 . The level

  of ALT-AST serum was analyzed with Kolmogorov Smirnov to see distribution of each group. If got normal distribution then continue analyzed with One Way

  

ANOVA with trust level 95% and continue with Scheffe or Tamhane test to see

difference among each group, significant (p<0,05) or not significant (p>0,05).

  Based of the result of the research from level of ALT serum, from the analyzer that used, the aqueous extract of M. tanarius leaf’s give hepatoprotective effect in 2,5 g/kgBB; 5 g/kgBB; dan 10 g/kgBB doses continues 44,1%, 39,6%, and 58,1%.

  

Keywords : Macaranga tanarius, hepatoprotective, the aqueous extract,

ALT, AST, carbon tetracloride

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Hati merupakan organ yang mempunyai peranan penting bagi manusia,

  karena hati berperan dalam metabolisme dan mengeluarkan hasil produksi dari makanan (Wibowo dan Paryana, 2009). Jika hati mengalami kerusakan maka dapat mengganggu proses-proses di dalam tubuh dan dapat berakibat fatal. Kerusakan hati dapat disebabkan karena induksi suatu senyawa kimia dan infeksi virus. Telah dilaporkan kasus kerusakan hati terutama perlemakan hati terjadi 29 per 1000 orang per tahun, sedangkan di Jepang angka kejadiannya mencapai 31- 86 per 1000 orang per tahun (Kalbe Medical Dept., 2012).

  Penelitian obat baru untuk mengatasi kerusakan hati di Indonesia sampai saat ini masih sangat terbatas, oleh sebab itu perlu dilakukan penelitian mengenai obat baru dari kekayaan alam Indonesia. Macaranga tanarius L. (M. tanarius) merupakan salah satu tanaman yang dikembangkan di daerah tropis dan salah satunya merupakan tanaman asli Indonesia (World Agroforestry Centre, 2002). Pada penelitian Matsunami, Takamori, Shinzato, Aramoto, Kondo, Otsuka, dan Takeda (2006), M. tanarius dilaporkan mempunyai kandungan glikosida diantaranya macarangiosida A, macarangiosida B, macarangiosida C, macarangiosida D, dan malofenol B. Pada penelitian Matsunami, Otsuka, Kondo, Shinzato, Kawahata, Yamaguchi, dan Takeda (2009) melaporkan adanya senyawa glikosida yaitu (macarangiosida A-C dan malofenol B) yang diisolasi dari ekstrak

  2 methanol M. tanarius menunjukkan aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH. Pada penelitian Mahendra dan Hendra (2011); Nugraha dan Hendra (2011) serta Kurniawati, Adrianto, dan Hendra (2011) dilaporkan bahwa ekstrak metanol- air daun M. tanarius mempunyai efek antiinflamasi, selain itu infusa dan ekstrak metanol-air daun M. tanarius mempunyai efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi parasetamol. Oleh sebab itu, pada penelitian ini akan dilihat pengaruh pemberian infusa daun M. tanarius pada tikus jantan yang terinduksi karbon tetraklorida (CCl

  4 )

  Karbon tetraklorida (CCl

  4 ) merupakan cairan jernih yang mudah

  menguap dan mudah larut dalam eter. Senyawa ini biasanya digunakan untuk sintesis senyawa kimia. Telah diketahui bahwa karbon tetraklorida merupakan salah satu senyawa hepatotoksin. Senyawa ini akan menghasil radikal bebas triklorometil dengan katalis enzim sitokrom P-450 yang dapat menimbulkan peroksidasi lipid. Hasil ini dapat menyebabkan kerusakan sel berupa perlemakan hati (steatosis) (Timbrell, 2008). Spektrum efek toksik karbon tetraklorida pada hati inilah sehingga karbon tetraklorida digunakan sebagai model dalam menggambarkan kerusakan hati yang terjadi pada penelitian ini.

  Pada penelitian ini digunakan bentuk sediaan infusa didasarkan pada penelitian Matsunami, dkk (2009) dilaporkan bahwa dengan pelarut yang bersifat polar dapat menarik senyawa antioksidan dari daun M. tanarius. Oleh sebab itu, diharapkan dengan pelarut air senyawa antioksidan dapat tertarik juga. Selain itu, pemilihan infusa sebagai sediaan pada penelitian ini adalah karena pembuatan

  3 infusa sesuai standart pembuatan sediaan herbal relatif mudah sehingga dalam aplikasi di masyarakat dapat diterapkan.

1. Perumusan masalah

  a. Apakah pemberian infusa daun M. tanarius mempunyai efek hepatoprotektif dengan menurunkan kadar ALT-AST serum pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida?

  b. Berapakah dosis efektif infusa daun M. tanarius yang memberikan pengaruh penurunan kadar ALT-AST serum pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida? 2.

   Keaslian penelitian

  Penelitian yang menggunakan M. tanarius sebelumnya adalah Matsunami, dkk (2006, 2009) dan Phommart, Pakawade, Nitirat, Somsak, dan Somyote (2005). Matsunami dkk, (2006, 2009) melaporkan adanya macarangiosida A, macarangiosida B, macarangiosida C, dan malofenol B pada tanaman M. tanarius yang mempunyai aktivitas antioksidan. Phommart dkk (2005) melaporkan kandungan tanaman M. tanarius berupa tanariflavanon B,

  tanariflavanon

  C, tanariflavanon D, nymphaeol A, nymphaeol B, nymphaeol C,

  

blumenol A dan blumenol B. Penelitian lain yang menggunakan M. tanarius

  adalah penelitian Puteri dan Kawabata (2010), yang melaporkan bahwa terdapat 5 senyawa baru yang dapat diisolasi dan diidentifikasi dari ekstrak EtOAc daun M.

  

tanarius , yaitu mallotinic acid, corilagin, chebulagic acid, macatannin A dan

macatannin

B. Senyawa-senyawa tersebut diidentifikasi dapat menghambat enzim α-glucosidase (α-glucosidase inhibitor, AGIs).

  4 Selain itu Mahendra dan Hendra (2011) serta Nugraha dan Hendra (2011) telah melakukan penelitian tentang efek hepatoprotektif infusa daun M.

  

tanarius pada tikus jantan terinduksi parasatamol. Selain kedua penelitian itu juga

  telah ada penelitian mengenai efek inflamasi dan efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada tikus jantan terinduksi parasetamol (Kurniawati, Andrianto, dan Hendra 2011). Berdasarkan penelitian tentang M. yang telah dilakukan, maka penelitian mengenai pengaruh infusa daun

  tanarius

M. tanarius pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida belum pernah

  dilakukan.

3. Manfaat penelitian

  a. Manfaat teoritis Penelitian ini diharapkan bermanfaatkan bagi perkembangan ilmu pengetahuan dalam bidang farmasi mengenai pengaruh infusa daun M. tanarius pada kadar ALT-AST serum.

  b. Manfaat praktis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai pengobatan alternatif pada kerusakan hati.

B. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum

  Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan bahwa pemberian infusa daun M. tanarius mempunyai efek hepatoprotektif dengan menurunkan kadar ALT-AST serum pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida.

  5

2. Tujuan khusus

  Penelitian ini khususnya bertujuan untuk mengetahui dosis paling efektif dari infusa daun M. tanarius untuk berpengaruh menurunkan kadar ALT-AST serum.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Hati Hati merupakan organ atau kelenjar terbesar dalam tubuh. Hati disebut

  kelenjar karena menghasilkan empedu dan mengeluarkan hasil produksi dari makanan. Selain itu hati juga berperan dalam metabolisme. Hati mempunyai dua facies yaitu facies diaphragmatica dan facies visceralis. Facies diafragmatica letaknya di sebelah atas dengan bentuk sesuai lengkung diapfragma dengan permukaan yang halus. Permukaan ini terdiri dari bagian anterior dan posterior. Sedangkan facies visceralis menghadap ke bawah dan ke belakang sehingga permukaannya ireguler (Wibowo dan Paryana, 2009).

  Hati terbagi menjadi dua lobus (lobus kanan dan lobus kiri). Lobus kanan terbagi menjadi daerah superior dan posterior dibatasi oleh fisura segmentalis.

  Lobus kiri dibagi menjadi segmen medial dan lateral oleh ligamentum falsiformis. Setiap lobus hati terdapat struktur yang disebut lobulus. Lobulus terdiri dari lempeng-lempeng sel hati yang berbentuk kubus dan mengelilingi vena sentralis (Gambar 1). Di antara lempeng-lempeng sel hati tersebut terdapat kapiler-kapiler yang disebut sinusoid yang merupakan cabang dari vena porta dan arteri hepatica.

  Antar sinusoid dibatasi oleh sel Kupffer yang mempunyai fungsi untuk memfagosit bakteri dan benda asing lain dalam saluran darah (Price dan Wilson, 2005).

  7

  Gambar 1. Struktur mikroskopik hati (Ganong dan McPhee, 2011).

  Hati menerima darah dari vena portae hepatis (70%) dan arteri hepatica (30%). Arteri hepatica membawa darah yang berisi oksigen yang berasal arteria

  

hepatica communis , di sebelah kiri ductus choledocus dan di depan vena portae

  (Wibowo dan Paryana, 2009). Vena porta membawa darah vena dari usus halus yang kaya akan nutrien yang baru diserap, obat, dan racun langsung ke hati. Vena porta membentuk jalinan khusus yang memungkinkan setiap hepatosit terbasahi langsung oleh darah yang terbawa dalam vena porta (Ganong dan McPhee, 2011).

  Sel-sel hati mendapat suplai darah dari vena portae hepatis yang kaya nutrisi, tidak membawa oksigen, dan kadang bersifat toksik. Selain itu juga mendapat suplai darah dari arteria hepatica yang mengandung oksigen. Peredaran darah yang tidak biasa ini menyebabkan sel hati relatif kekurangan oksigen, sehingga mengakibatkan sel hati lebih rentan terhadap kerusakan dan penyakit (Wibowo dan Paryana, 2009).

  8

B. Kerusakan Hati

  Kerusakan hati yang dapat timbul dari berbagai jenis senyawa toksik adalah sebagai berikut.

1. Steatosis (Perlemakan hati)

  Perlemakan hati atau steatosis merupakan suatu kondisi dimana terjadi peningkatan kandungan lipid di dalam hati. Peningkatan kandungan lipid ini dapat mencapai 5%. Perlemakan hati dapat terjadi dari beberapa peristiwa yaitu kelebihan asam lemak bebas di dalam hati, adanya gangguan siklus trigliserida, peningkatan pola sintesis atau esterifikasi dari asam lemak, penurunan oksidasi asam lemak, penurunan sintesis apoprotein dan penurunan sintesis atau sekresi dari VLDL (Gregus dan Klaaseen, 2001). Mekanisme yang paling umum mendasari adanya perlemakan hati adalah rusaknya pelepasan trigliserid hati ke dalam plasma. Karena trigliserid hati hanya disekresi bila dalam keadaan tergabung dengan lipoprotein (Lu, 1995).

  Perlemakan hati biasanya merupakan suatu respon pemejanan dari beberapa hepatotoksin. Beberapa senyawa hepatotoksin yang menyebabkan steatosis adalah karbon tetraklorida, etanol, fialuridini, dan asam valproat (Gregus dan Klaaseen, 2001). Beberapa senyawa lain yang dapat menimbulkan lesi akut adalah etionin, fosfor, dan tetrasiklin dengan menyebabkan banyak butiran lemak kecil, sedangkan lesi kronik dapat disebabkan oleh etanol dan metotreksat dengan menyebabkan butiran lemak besar menggantikan inti. (Lu, 1995).

  9

  2. Nekrosis

  Nekrosis ditandai dengan pembengkakan sel, kebocoran, disintegrasi nukleus, dan adanya sel-sel inflamasi. Sel-sel yang telah mati dapat bertahan selama berhari-hari ketika sejumlah besar sel sel mati. Ketika terjadi nekrosis pada hepatosit, terkait adanya kebocoran membran, nekrosis dapat dideteksi dengan pengujian biokimia plasma (atau serum) untuk enzim yang dihasilkan di sitosol. Informasi utamanya adalah aktivitas tingkat enzim alanin aminotransferase (ALT) yang mendominasi enzim di hepatosit, selain itu juga dapat dideteksi dengan laktat dehidrogenase (LDH), yang ditemukan dalam banyak jaringan (Gregus dan Klaaseen, 2001).

  3. Sirosis

  Sirosis merupakan bentuk kerusakan yang terakhir, dan merupakan tahap kerusakan hati yang kronis. Sirosis ditandai dengan akumulasi sejumlah jaringan fibrosa yang luas, khususnya serabut-serabut kolagen, sebagai respon terhadap kerusakan atau terhadap peradangan. Akibat peradangan zat kimia berulang kali, sel-sel hepatik yang hancur digantikan dengan jaringan parut fibrotik. Akibat endapan kolagen yang terus-menerus, anatomi hati terganggu oleh jaringan parut fibrotik yang saling berhubungan. Ketika jaringan parut fibrotik membagi-bagi massa hati yang masih baik menjadi nodul-nodul dengan hepatosit yang masih beregenerasi, fibrosis telah berkembang menjadi sirosis dan hati memiliki kapasitas cadangan fungsional yang sangat kecil untuk menjalankan fungsi hati.

  Sirosis bersifat irreversibel, memiliki harapan hidup yang kecil, dan biasanya merupakan hasil paparan berulang zat kimia beracun (Treinen dan Moslen, 2001).

  10

C. Hepatotoksin

  Senyawa atau obat yang dapat menyebabkan kerusakan hati terbagi menjadi dua macam sebagai berikut.

  1. Hepatotoksin tipe A (teramalkan)

  Merupakan suatu senyawa atau obat jika diberikan dapat menimbulkan kerusakan hati pada sebagian besar orang yang mengkonsumsi senyawa tersebut pada dosis pemberian yang mencukupi untuk menimbulkan efek toksik. Jadi untuk menimbulkan ketoksikan hepatotoksin tipe A bergantung pada dosis.

  Contoh obat dari hepatotoksin tipe A adalah tetrasiklin, parasetamol, karbon tetraklorida, dan salisilat (Forrest, 2006).

  2. Hepatotoksin tipe B (tak teramalkan)

  Merupakan senyawa atau obat yang sebenarnya tidak menimbulkan efek pada hati namun jika diberikan kepada orang tertentu akan menimbulkan efek toksik. Hepatotoksin tipe B ini tidak bergantung dengan dosis pemberian senyawa. Kejadian adanya toksisitas pada hepatotoksin jenis ini sangat jarang, terjadi pada 1 : 1000 orang. Contoh obat yang termasuk tipe B adalah isoniazid, halothane , dan chlorpromazine (Forrest, 2006).

  

D. )

Karbon tetraklorida (CCl

  4 Gambar 2. Struktur molekul karbon tetraklorida (CCl 4 ) (Direktorat Jenderal

Pengawasan Obat dan Makanan 1995)

  11 Karbon tetraklorida (CCl

  4 ) (Gambar 2) adalah suatu cairan jernih yang

  mudah menguap, tidak berwarna, dan dengan bau khas. Senyawa ini memiliki BM 153,82 dan sangat sukar larut dalam air (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995). Efek hepatotoksik dari karbon tetraklorida telah banyak dipelajari daripada hepatotoksin lain. Karbon tetraklorida merupakan molekul sederhana, yang jika diberikan kepada berbagai spesies, menyebabkan perlemakan hati (steatosis) dan nekrosis sentrilobular hepatik. Pemberian atau pemejanan secara kronis menyebabkan sirosis hati, tumor hati dan juga kerusakan ginjal. Hati menjadi target utama dari ketoksikan karbon tetraklorida karena ketoksikan senyawa ini bergantung pada aktivasi metabolisme oleh sitokrom P-450 (CYP2E1). Dosis rendah karbon tetraklorida hanya menyebabkan perlemakan hati dan destruksi sitokrom P-450 (Timbrell, 2008).

  Destruksi sitokrom P-450 terjadi terutama di sentrilobular dan daerah tengah hati. Senyawa ini selektif untuk isoenzim tertentu, pada tikus diketahui selektif untuk CYP2E1, sedangkan pada isoenzim lain seperti CYP1A1 tidak mempengaruhi. Destruksi CYP2E1 tampaknya dipengaruhi oleh jumlah oksigen yang tersedia (Timbrell, 2008).

  Sebagai enzim mikrosomal CYP2E1 akan mempengaruhi aktivasi metabolit yang terbentuk, hal ini dapat meningkatkan atau mengurangi sifat toksik dari senyawa induk. Dalam metabolisme karbon tetraklorida, CYP2E1 berfungsi sebagai agen pereduksi dan mengkatalis adisi elekron yang mengakibatkan

  • hilangnya satu ion klorin sehingga membentuk radikal bebas triklorometil ( CCl

  3 )

  yang merupakan metabolit reaktif (Gambar 3). Jika ada O

  2 (oksigen), radikal

  12 bebas triklorometil ini akan berubah menjadi radikal bebas triklorometilperoksi

  • ( OOCCl ) yang lebih reaksif (Gregus dan Klaaseen, 2001).

  3 Gambar 3. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida

(Timbrell, 2008)

Radikal triklorometil yang dihasilkan dapat mengalami suatu reaksi.

  Atom hidrogen yang berasal dari metilen dapat menjembatani reaksi dengan asam lemak tak jenuh atau protein yang akan menghasilkan ikatan kovalen dengan lemak mikrosomal dan protein, dan akan beraksi secara langsung dengan fosfolipid dan kolesterol yang bersifat toksik. Reaksi ini juga akan menghasilkan kloroform, yang merupakan salah satu metabolit dari karbon tetraklorida. Hasil lain dari reaksi ini adalah radikal lipid yang tidak stabil selanjutnya akan

  13 mengakibatkan peroksidasi lipid. Pembentukan peroksidasi lipid hasil dari pemecahan lemak tak jenuh dapat memberikan senyawa karbonil seperti 4-

  

hydroxyalkenal dan hydroxynonenal lainnya. Senyawa-senyawa tersebut diketahui

  memiliki efek biokimia seperti menghambat sintesis protein dan menghambat enzim glukosa-6-fosfat (Timbrell, 2008).

  Setelah pemejanan karbon tetraklorida selama satu sampai tiga jam, trigliserida menumpuk di hepatosit dan terlihat sebagai droplet lipid. Lipid dalam hati yang terbentuk ini dapat menghambat sintesis protein sehingga menurunkan produksi lipoprotein, yang merupakan senyawa yang bertanggung jawab dalam transport lipid untuk keluar dari hepatosit. Akibat menurunnya produksi lipoprotein maka transport lipid akan terhambat sehingga menyebabkan steatosis (Timbrell, 2008). Peroksidasi lipid juga dapat menyebabkan kerusakan membran sel dan kerusakan mitokondria. Kerusakan ini berupa gangguan integritas membran yang menyebabkan keluarnya berbagai isi sitoplasma, antara lain enzim ALT. Enzim ALT yang ada di dalam sel akan keluar dan masuk ke dalam peredaran darah sehingga jumlah enzim ALT meningkat (Wahyuni, 2005).

  Penggunaan karbon tetraklorida sebagai senyawa model hepatotoksin telah banyak dilakukan. Pada penelitian Hogade, Patil, Wadkar, Mathapati, Dhumal (2010) melaporkan bahwa aktivitas ALT dan AST serum pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida mencapai tiga dan empat kali nilai normal. Selain itu, Iniaghe, Malomo, dan Adebayo (2008) juga melaporkan bahwa aktivitas ALT serum pada tikus yang terrinduksi karbon tetraklorida melampaui tiga kali nilai

  14 normal. Hal ini menegaskan bahwa dengan adanya induksi karbon tetraklorida dapat meningkatkan aktivitas ALT-AST serum.

  Tubuh sebenarnya mempunyai sistem pertahanan untuk mengatasi radikal bebas, salah satunya adalah glutation-S-transferase (GSH) sebagai antioksidan endogen. Jika terdapat radikal bebas di dalam tubuh, GSH akan menangkap radikal bebas tersebut (Timbrell, 2008).

E. Metode Pengujian Hepatoprotektif

  Pemeriksaan kondisi kerusakan hati dapat dilakukan dengan beberapa uji di laboratorium. Pemeriksaan tersebut meliputi tes enzim serum, tes ekstkretori hepatik, perubahan kandungan kimia hati dan analisis histologik kerusakan hati (Plaa dan Charbonneau, 2001).

1. Tes enzim serum

  Dalam mengidentifikasi kerusakan hati, terdapat beberapa kategori enzim serum yang didasarkan pada spesifikasi dan sensitivitas berbagai tipe kerusakan hati. Kategori pertama adalah alkalinfosfatase, 5’-nukleotidase (5’NT), dan gamma-glutamiltranspeptidase ( -GT). Kenaikan aktivitas enzim-enzim serum tersebut memperlihatkan ada kerusakan kolestatik. Kategori kedua spesifik untuk kerusakan hati sitotoksik. Kategori kedua ini dibagi lagi menjadi beberapa kategori. Enzim yang tidak spesifik dan dapat menunjukkan kerusakan jaringan ekstrahepatik misalnya aspartat aminotransferase (AST) dan laktat dehidrogenase (LDH). Pengukuran aktivitas enzim tersebut lebih hepatospesifik, terutama penggunaan untuk penelitian senyawa-senyawa yang belum diketahui potensi

  15 kehepatoksikannya (Plaa dan Charbonneau, 2001). Enzim yang paling spesifik untuk mengukur kerusakan yang terjadi di hati adalah Alanin aminotransferase (ALT) (Timbrell, 2008).

  2. Tes ekskretori hepatik

  Beberapa senyawa kimia yang berada di sirkulasi sistemik diekskresikan oleh hati dalam bentuk tidak berubah atau diubah didalam hepatosit. Senyawa itu seperti bilirubin dan xenobiotika lainnya dapat digunakan untuk mendeteksi dan menentukan kerusakan hepatik karena berasal dari dalam hati. Apabila terjadi perubahan jumlah senyawa-senyawa tersebut di dalam sirkulasi sistemik, dapat diindikasikan terdapat kelainan di hati (Plaa dan Charbonneau, 2001).

  3. Perubahan kandungan kimia hati

  Senyawa hepatotoksin dapat menyebabkan perubahan struktur dan fungsional hepatik. Hal ini berguna untuk mendeteksi dan menetapkan tingkat kerusakan hati yang terjadi. Perubahan ini dapat mempengaruhi metabolisme suatu obat sehingga merubah efek farmakologis obat tersebut. Hal ini dapat digunakan untuk mendeteksi dan menentukan disfungsi hati, seperti pada terjadinya perpanjangan durasi efek dari pentobarbital dapat digunakan untuk menentukan hepatotoksisitas relatif haloalkana. Panjang durasi pentobarbital tergantung pada kemampuan hati memetabolisme barbiturat. Adanya kerusakan sel hati dapat menurunkan enzim pemetabolisme obat di hati, yang menyebabkan perpanjangan waktu tidur pentobarbital (Plaa dan Charbonneau, 2001).

  16

Dokumen yang terkait

Efek hepatoprotektif jangka pendek infusa biji atung (Parinarium glaberimum Hassk) pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida

0 2 66

Efek hepatoprotektif jangka waktu enam jam ekstrak etanol daun macaranga tanarius L. terhadap ALT-AST pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida.

0 2 111

Efek hepatoprotektif infusa daun macaranga tanarius L. pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida.

0 0 108

Efek hepatoprotektif jangka pendek ekstrak metanol-air daun macaranga tanarius L. terhadap tikus terinduksi karbon tetraklorida.

0 4 106

Efek hepatoprotektif jangka panjang infusa biji atung (Parinarum glaberimum Hassk.) pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida

0 0 63

Efek hepatoprotektif jangka waktu enam jam ekstrak etanol daun macaranga tanarius L. terhadap ALT AST pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida

0 1 109

Efek hepatoprotektif infusa daun Macaranga tanarius L. pada tikus jantan galur wistar terinduksi parasetamol - USD Repository

0 0 86

Efek hepatoprotektif ekstrak metanol:air (50:50) daun macaranga tanarius L. terhadap kadar ALT-AST serum pada tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

0 0 121

Efek hepatoprotektif jangka pendek ekstrak metanol-air daun macaranga tanarius L. terhadap tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

0 0 104

Efek antihepatotoksik infusa herba mimosa pigra L. terhadap tikus putih jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

0 0 143