Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Dari Ekstrak Metanol dan Fraksi Kloroform Daun Sirsak (Annona muricata L.)

Lampiran 1. Identifikasi tumbuhan

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Gambar tumbuhan sirsak (Annona muricata L.)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Gambar simplisia daun sirsak dan serbuk simplisia daun sirsak

a. Gambar simplisia daun sirsak (Annona muricata L.)

b. Gambar serbuk simplisia daun sirsak

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4.Bagan pembuatan ekstrak secara maserasi dan fraksinasi
Serbuk simplisia
Dimasukkan ke dalam wadah
Ditambahkan metanol sampai serbuk
terendam sempurna

Dibiarkan selama 5 hari terlindung
dari
cahaya sambil sesekali diaduk
Dipisahkan
Ampas
Dicuci dengan
pelarut metanol
Maserat
Ampas
Diuapkan dengan rotary evaporator pada suhu 40˚C
Dikeringkan dengan freeze dryer
Ekstrak
metanol
Dilarutkan dengan pelarut metanol sambil diaduk sampai
homogen
Dipindahkan ke dalam corong pisah dan
ditambahkandengan akuades
Difraksinasi dengan n-heksana

Fraksi n-heksana

Fraksi air
Difraksinasi

dengan
kloroform
Fraksi kloroform

Fraksi air

Diuapkan di atas penangas air
Fraksi kloroform kental

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Bagan pengujian aktivitas antibakteri

Stok kultur
Diambil 1 ose
Disuspensikan ke dalam 10 ml media

Nutrient Broth
Diukur kekeruhan pada panjang
gelombang 580 nm sampai diperoleh
transmitan 25%
Inokulum bakteri

Dimasukkan 0,1 ml inokulum kedalam
cawan petri
Ditambahkan 20 ml media nutrient agar
kedalam cawan petri
Dihomogenkan
Dibiarkan hingga memadat
Media padat
Diletakkan cakram kertas yang telah
direndam ke dalam larutan uji dengan
berbagai konsentrasi
Diinkubasi pada suhu 36-37˚C selama 1824 jam
Diukur diameter daerah hambatan
disekitar cakram kertas dengan
menggunakan jangka sorong

Hasil

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
bakteri Staphylococcus aureusdan Escherichia coli oleh ekstrak
metanol daun sirsak

300

Diameter daerah hambatan (mm)
Staphylococcus aureus
Escherichia coli
D1
D2
D3
D*
D1
D2
D3

16,3
16,4 16,5 16,4
15,3
15,0
15,5

D*
15,3

250

15,6

15,5

15,0

15,4

14,8

14,6

14,0

14,5

200

15,4

14,0

14,5

14,7

14,2

14,0

13,0

13,8

150

14,9

13,6

13,6

14,1

13,6

13,0

12,7

13,1

100

13,1

13,4

12,7

13,1

13,1

12,0

11,8

12,3

50

12,6

12,0

12,0

12,2

11,6

11,6

11,2

11,5

25

11,4

11,3

10,8

11,2

11,4

10,0

10,6

10,7

10

10,5

10,0

8,8

9,8

10,1

8,0

8,0

8,7

5

9,7

8,0

8,0

8,6

8,0

8,0

8,0

8,0

Blanko

-

-

-

-

-

-

-

-

Konsentrasi
(mg/ml)

Keterangan: (D*) = Diameter hambatan rata-rata, (-) = tidak terdapat daerah
hambatan, (blanko) = DMSO

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
bakteri Staphylococcus aureusdan Escherichia coli oleh fraksi
kloroform daun sirsak

300

Diameter daerah hambatan (mm)
Staphylococcus aureus
Escherichia coli
D1
D2
D3
D*
D1
D2
D3
12,8
12,0 11,5 12,1
12,4
11,5
10,5

D*
11,5

250

12,4

11,0

11,0

11,5

12,0

10,0

10,0

10,7

200

11,6

10,3

9,4

10,5

11,4

9,0

9,0

9,8

150

10,8

9,8

9,1

9,9

10,4

8,8

8,4

9,2

100

10,3

8,5

9,1

9,3

9,6

8,4

8,2

8,8

50

9,8

8,0

8,5

8,8

9,4

7,8

7,6

8,3

25

-

-

-

-

-

-

-

-

10

-

-

-

-

-

-

-

-

5

-

-

-

-

-

-

-

-

Blanko

-

-

-

-

-

-

-

-

Konsentrasi
(mg/ml)

Keterangan: (D*) = Diameter hambatan rata-rata, (-) = tidak terdapat daerah
hambatan, (blanko) = DMSO

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
bakteri Staphylococcus aureusdan Escherichia coli oleh ekstrak
etanol, fraksi etil asetat dan fraksi n-heksana daun sirsak
penelitian Andrisa, (2012)

Konsentrasi
(mg/ml)

Ekstrak etanol

Diameter Daerah Hambat
(mm)*
Fraksi etil asetat
Fraksi n-heksana

S.aureus

E.coli

S.aureus

E.coli

S.aureus

E.coli

300

15,8

15,0

18,6

17,5

-

-

250

15,0

14,0

17,5

16,4

-

-

200

14,5

13,5

16,0

15,5

-

-

150

13,6

12,4

16,6

14,0

-

-

100

13,2

12,0

14,8

12,8

-

-

50

12,0

11,6

13,6

12,2

-

-

25

11,0

10,5

13,0

11,6

-

-

10

9,5

9,0

12,8

11,0

-

-

5

9,0

8,6

12,5

10,0

-

-

Blanko

-

-

-

-

-

-

Keterangan: (*) = hasil rata-rata tiga kali pengukuran, (-) = tidak ada
hambatan

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak metanol daun sirsak
terhadap Staphylococcus aureus

S. aureus

200 mg/ml
250 mg/ml

300 mg/ml

S. aureus

100 mg/ml

150 mg/ml

50 mg/ml

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. (lanjutan)

S. aureus

25 mg/ml
5 mg/ml

10 mg/ml

S. aureus

Blanko

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak metanol daun sirsak
terhadap Escherichia coli

E.coli

200 mg/ml
250 mg/ml

300 mg/ml

E.coli

150 mg/ml

100 mg/ml

50 mg/ml

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. (lanjutan)

E.coli

50 mg/ml
10 mg/ml

5 mg/ml

E.coli

Blanko

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi kloroform daun sirsak
terhadap Staphylococcus aureus

S.aureus

200 mg/ml
250 mg/ml

300 mg/ml

S.aureus

150 mg/ml
100 mg/ml

50 mg/ml

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. (lanjutan)

S.aureus

25 mg/ml
10 mg/ml

5 mg/ml

S.aureus

Blanko

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi kloroform daun sirsak
terhadap Escherichia coli

E.coli

200 mg/ml
250 mg/ml

300 mg/ml

E.coli

100 mg/ml

150 mg/ml

50 mg/ml

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. (lanjutan)

E.coli

25 mg/ml
10 mg/ml

5 mg/ml

E.coli

Blanko

Universitas Sumatera Utara