Pengaruh Sari Kukusan Brokoli (Brassica oleracea L. var italica) terhadap Kadar interleukin-8 Serum pada Mencit Model Kolitis.

(1)

ABSTRAK

PENGARUH SARI KUKUSAN BROKOLI

(Brassica oleracea L. var. italica) TERHADAP KADAR

INTERLEUKIN-8 SERUM PADA MENCIT MODEL KOLITIS

Francisca Andina Sjahli, 2015

Pembimbing 1: Lukas Mulyono Samuel, dr., SpPD- KGEH

Pembimbing 2: Khie Khiong, dr., M.Si, M.Pharm.Sc.,Ph.D, PA(K)

Latar belakang Kolitis ulserativa (KU) adalah peradangan usus yang terjadi

pada kolon dan rektum. Pada KU terjadi peningkatan kadar mediator inflamasi, salah satunya adalah interleukin-8 (IL-8) yang merupakan kemoatraktan utama untuk sel radang polymorphonuclear (PMN), menyebabkan peradangan semakin parah. Brokoli (Brassica oleraceae L. var. italica) mengandung sulphoraphane yang dapat menghambat nuclear factor kappa B (NF-ĸB) sehingga terjadi penurunan IL-8.

Tujuan Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh sari kukusan

brokoli terhadap kadar interleukin-8 serum pada mencit model kolitis.

Metode Penelitian ini adalah penelitian eksperimental laboratorium

sungguhan dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Hewan percobaan yang digunakan adalah mencit galur Balb/c sebanyak 28 ekor dan dibagi menjadi 4 kelompok perlakuan. Kadar IL-8 serum diukur dengan menggunakan metode

enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Analisis data dilakukan dengan

menggunakan analisis varian (ANOVA) satu arah, dilanjutkan dengan uji multiple

comparisons Tukey HSD (ɑ = 0,05) dan p  0,05.

Hasil Rerata kadar IL-8 yang paling tinggi terdapat pada kelompok kontrol

positif. Penelitian ini juga menunjukkan perbedaan yang sangat signifikan (p = 0,00) kadar IL-8 antara kelompok kontrol positif dan kelompok terapi brokoli.

Simpulan Sari kukusan brokoli dapat menurunkan kadar interleukin-8 serum

pada mencit model kolitis.

Kata kunci : Kolitis ulserativa, sulforaphane, interleukin-8

(2)

ABSTRACT

THE EFFECT OF BROCCOLI (Brassica oleracea L. var italica)

STEAM JUICE TOWARDS INTERLEUKIN 8 SERUM LEVEL IN

COLITIS MICE MODEL

Francisca Andina Sjahli, 2015 1st Advisor : Lukas Mulyono Samuel, dr., SpPD- KGEH

2nd Advisor: Khie Khiong, dr., M.Si, M.Pharm.Sc.,Ph.D, PA(K)

Background Ulcerative colitis is a inflammation disease which occurs only in

colon and rectum. There is an increase of inflammatory mediator in UC, including interleukin 8 (IL-8) which is a major chemoattractant for polymorphonuclear cell (PMN), causing more severe inflammation. Broccoli (Brassica oleraceae L. var. italica) contains sulphoraphane which could suppress nuclear factor kappa B (NF-ĸB) and then supressed IL-8 serum level.

Aim The aim of this research is to evaluate the effect of broccoli steam juice

toward IL-8 serum level in colitis mice model.

Methods This research was true experimental study with completely

randomized design. Balb/c mice was used as experimental animal. 28 mice was divided into 4 groups and treated differently. IL-8 serum level was measured by using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method. Data was analyzed with one way ANOVA, continued with multiple comparison test Tukey HSD (ɑ = 0,05)

Result The highest level of IL-8 serum found in the positive control group. This

researh also shown there was highly significant difference (p = 0,00) of IL-8 level between positive control group and broccoli treated group.

Conclussion Broccoli steam juice decreased the interleukin-8 serum level in

colitis mice model.

Keywords: Ulcerative colitis, sulforaphane, interleukin-8

(3)

viii

DAFTAR ISI

Judul ... (i)

Lembar Persetujuan ... (ii)

Surat Pernyataan ... (iii)

Abstrak ... (iv)

Abstract ... (v)

Kata Pengantar... (vi)

Daftar Isi ... (vii)

Daftar Tabel ... (xi)

Daftar Gambar ... (xii)

Daftar Diagram ... (xii)

Daftar Lampiran ... (xiv)

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ...1

1.2 Identifikasi Masalah ...3

1.3 Maksud dan Tujuan ...3

1.4 Manfaat Karya Tulis Ilmiah ...3

1.4.1 Manfaat akademik ...3

1.4.2 Manfaat praktis ...3

1.5 Kerangka Pemikiran ...3

1.6 Hipotesis ...5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Anatomi Usus Besar (Intestinum Crassum) ...6

2.2 Histologi Colon ...8

2.3 Fisiologi Usus Besar ...9

2.3.1 Motilitas Usus Besar ...9

2.3.2 Absorbsi pada Usus Besar ... 10

2.3.2.1 Absorbsi dan Sekresi Elektrolit dan Cairan ... 10

(4)

2.3.2.2 Komposisi Feses ... 11

2.3.3 Defekasi ... 11

2.3.3.1 Reflek Defekasi ... 11

2.3.3.2 Diare ... 12

2.4 Inflammatory Bowel Disease ... 13

2.4.1 Kolitis Ulserativa ... 14

2.5 Patogenesis ... 15

2.6 Gejala Klinik ... 17

2.7 Dextran Sulphate Sodium ... 19

2.8 Brokoli... 20

2.8.1 Taksonomi ... 21

2.8.2 Kandungan ... 22

2.8.3 Sulforaphane ... 23

BAB III BAHAN DAN METODE PENELITIAN 3.1 Alat dan Bahan / Subjek Penelitian ... 25

3.1.1 Alat dan Bahan ... 25

3.1.2 Subjek Penelitian ... 26

3.2 Metode Penelitian... 26

3.2.1 Desain Penelitian ... 26

3.2.2 Variabel Penelitian ... 27

3.2.2.1 Definisi Konsepsional Variabel ... 27

3.2.2.2 Definisi Operasional Variabel ... 27

3.2.3 Besar Sampel Penelitian ... 28

3.2.4 Prosedur Kerja ... 29

3.2.4.1 Persiapan Bahan Uji ... 29

3.2.4.2 Persiapan Hewan Coba ... 29

3.2.4.3 Sterilisasi Alat... 30

3.2.5 Prosedur Penelitian ... 30

3.2.6 Cara Pemeriksaan ... 31

3.2.7 Metode Analisis ... 33

(5)

3.2.8 Hipotesis Statistik ... 33

3.2.9 Kriteria Uji ... 33

3.3 Aspek Etik ... 33

3.4 Lokasi dan Waktu Penelitian ... 34

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian ... 35

4.1.1 Kadar IL-8 Serum ... 35

4.1.2 Analisis Statistik ... 36

4.1.2.1 Hipotesis ... 36

4.2 Pembahasan ... 38

4.3 Uji Hipotesis... 40

BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ... 42

5.2 Saran ... 42

DAFTAR PUSTAKA ... 43

LAMPIRAN ... 47

RIWAYAT HIDUP ... 54

(6)

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Perbedaan Kolitis Ulserativa dan Chron’s Disease ... 19 Tabel 4.1 Rerata Kadar IL-8 Setelah Diberi Perlakuan ...35 Tabel 4.2 ANOVA Pengaruh Sari Kukusan Brokoli terhadap Kadar IL-8...36 Tabel 4.3 Kadar IL-8 Berdasarkan Hasil Uji Beda Rata-Rata Metode

Tukey-HSD...37

(7)

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1.1 Bagan Kerangka Pemikiran ...5

Gambar 2.1 Anatomi Usus Besar ...6

Gambar 2.2 Histologi Colon ...9

Gambar 2.3 Patogenesis Inflammatory Bowel Disease... 16

Gambar 2.4 Brokoli (Brassica oleracea L. var. italica) ... 20

Gambar 2.5 Perbandingan Kandungan Brokoli yang dimasak dengan Brokoli mentah ... 22

Gambar 2.6 Metabolisme Glucoraphanin... 23

(8)

xiii

DAFTAR DIAGRAM

Diagram 4.1 Diagram Perbandingan Rata-rata Kadar IL- 8 ...38

(9)

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Keputusan Komisi Etik ... 48

Lampiran 2. Perhitungan Statistik ... 49

Lampiran 3. Perhitungan Dosis ... 50

Lampiran 4. Dokumentasi ... 51

(10)

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah

Inflamatory bowel disease (IBD) mewakili suatu kondisi inflamasi kronik usus

yang idiopatik. IBD terdiri atas dua jenis penyakit, yaitu Crohn's disease (CD) dan kolitis ulserativa (KU). Patogenesis dari kedua penyakit ini masih belum sepenuhnya dipahami. Faktor genetik dan faktor lingkungan seperti bakteri usus dan perubahan permeabilitas usus memegang peranan penting dalam disregulasi imunitas usus yang menyebabkan trauma pada saluran cerna (Bernstein et al., 2009).

KU merupakan bentuk yang paling sering ditemukan pada pasien IBD. KU adalah penyakit yang mengenai mukosa, dapat disembuhkan dan jarang terjadi komplikasi karena tingkat keparahan penyakit ini umumnya sedang. Insidensi KU di seluruh dunia mencapai 1,2 - 20,3 kasus per 100.000 orang per tahun, sedangkan insidensi CD hanya 0,03 - 15,6 kasus per 100.000 orang per tahun. Insidensi dan prevalensi dari IBD tertinggi didapatkan di Amerika dan Eropa Utara, sedangkan insidensi dan prevalensi terendah terdapat di Asia, akan tetapi berdasarkan data yang ada, terdapat peningkatan angka kejadian IBD di Asia. Hal ini berhubungan dengan keadaan lingkungan dan gaya hidup di negara barat yang dapat mencetuskan terjadinya IBD seperti, merokok, diet tinggi lemak, gula, stress, obat-obatan tertentu, dan tingginya status sosio-ekonomi (Danese & Fiocchi, 2011; da Silva et al., 2014). Data dari unit endoskopi pada beberapa rumah sakit di Jakarta didapatkan kasus IBD dengan diare kronik sebanyak 12,2%, IBD dengan hematochezia sebanyak 3,9%, IBD dengan nyeri perut sebanyak 2,8%, dan IBD dengan diare kronik, hematochezia dan nyeri perut sebanyak 25,9% (Rani et al., 2011).

Patogenesis KU sering dikaitkan dengan adanya peningkatan mediator inflamasi, stress oksidatif, adanya ketidakseimbangan flora normal colon, abnormalitas glycosamionglicans pada mukosa usus, peningkatan permeabilitas

(11)

mukosa usus, dan peningkatan metilasi (Head & Jurenka., 2003). Pada CD, terdapat lesi genetik pada gen NOD2 yang mengaktivasi jalur nuclear

factor-kappa B (NF-ĸB) dan mitogen activated protein (MAP) sebagai respon terhadap peptidoglikan dari bakteri (Nagahori et al., 2010). NF-ĸB merupakan regulator sitokin dan kemokin pro inflamasi. Salah satu kemokin utamanya adalah interleukin 8 (IL-8) (Roebuck, 1999).

Penelitian yang dilakukan Mahida et al, mengemukakan bahwa kadar IL-8 pada mukosa usus pasien KU lebih tinggi dibandingkan dengan pada pasien CD (Mahida et al., 1992). Peningkatan IL-8 sesuai dengan tingkat keparahan penyakit secara histopatologi (Mazzucchelli et al., 1994). IL-8 merupakan kemoatraktan utama pada CD dan KU (Mitsuyama et al., 1994; Banks et al., 2003; Atreya & Neurath, 2010).

Brokoli (Brassica oleracea var. Italica) termasuk dalam famili Brassicaceae. Brokoli mengandung zat fitokimia tipikal yang merupakan senyawa mengandung sulfur seperti glucosinolate, dithiolthiones, senyawa indol, glucoraphanin, isothiocyanate, S-methyl cysteine sulfoxide, dan indole-3-carbinol. Sulforaphane (SFN) yang terdapat pada brokoli memiliki manfaat proteksi terhadap bakteri, kanker, dan diabetes. (Jahan et al., 2010).

Penelitian di New Zealand menunjukkan konsumsi sayuran dari famili

Brassicaceae memberikan dampak positif terhadap kesehatan seperti peningkatan

sistem imun, kekuatan dan kesehatan tulang, juga efek anti inflamasi dan anti kanker terutama pada pasien dengan CD. Salah satu jenis sayuran dari famili

Brassicaceae yang sering dikonsumsi adalah brokoli (Campbell et al., 2012).

Penelitian terdahulu menunjukkan bahwa pemberian brokoli kepada mencit dapat memberikan efek preventif terhadap induksi kolitis oleh DSS berupa perbaikan derajat diare dan clinical score (Khiong et al., 2011). SFN yang terkandung dalam brokoli dapat menurunkan konsentrasi sitokin proinflamasi yang dihasilkan oleh makrofag pada model mencit yang diinfeksi bakteri (Mueller et al,. 2013).

Berdasarkan hal-hal di atas, penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui peranan sari kukusan brokoli dalam mengurangi reaksi inflamasi pada model mencit kolitis.

(12)

1.2 Identifikasi Masalah

Berdasarkan latar belakang tersebut, dapat dirumuskan identifikasi masalah sebagai berikut:

Apakah sari kukusan brokoli dapat menurunkan kadar IL-8 serum pada mencit model kolitis.

1.3 Maksud dan Tujuan Penelitian

Maksud penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh brokoli terhadap mencit model kolitis.

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengukur kadar IL-8 serum pada mencit model kolitis yang diberi terapi sari kukusan brokoli

1.4 Manfaat Penelitian

 Manfaat akademik

- Mengetahui manfaat pemberian brokoli pada kolitis ulserativa. - Menjadi dasar bagi penelitian selanjutnya.

 Manfaat praktis

Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi tambahan referensi yang dapat digunakan sebagai terapi pendamping dalam pengobatan kolitis .

1.5 Kerangka Pemikiran

KU adalah peradangan yang terjadi hanya pada usus besar dan kolon (Friedman, 2010). Komplikasi yang paling ditakuti dari KU adalah kanker dikarenakan kemungkinan terjadinya displasia pada daerah yang mengalami peradangan akibat kerusakan DNA dan instabilitas genom (Kumar et al., 2010).

(13)

Peranan kemokin dalam imunopatogenesis IBD telah diteliti sejak ekspresi IL-8 ditemukan pada biopsi rectum pasien IBD. Ekspresi IL-8 yang meningkat ini dikaitkan dengan keparahan inflamasi. Selain itu, terdapat korelasi antara ekspresi IL-8 dengan kadar IL-1B dan TNF-ɑ. Hal ini menunjukkan adanya keterlibatan IL-8 sebagai kemoaktraktan pada colon yang mengalami inflamasi (Atreya & Neurath., 2010).

Mencit yang diinduksi dengan Dextran Sodium Sulfat (DSS) melalui air minum, dapat menyebabkan KU yang serupa dengan pada manusia. Mekanisme terjadinya inflamasi ini diduga karena kerusakan pada epitel mukosa usus sehingga terjadi pengeluaran sitokin-sitokin proinflamasi seperti IL-1, TNF-ɑ,

IL-6, dan IL-8 (Chassaing et al.,2015).

Glucoraphanine adalah glucosinolate yang terdapat dalam kadar tinggi pada

sayuran Brokoli. Glucosinolate harus dihidrolisis secara enzimatik terlebih dahulu agar dapat mengaktifkan isothiocyanate. Sulphoraphane (SFN) adalah

isothiocyanate aktif yang diproduksi ketika Glucoraphanine dihidrolisis oleh

enzim myrozinase (Mithen, 2001). Pemberian SFN selama 7 hari sebelum menginduksi mencit menggunakan DSS, memperlihatkan penurunan kerusakan akibat reaksi inflamasi, baik secara colonoskopi maupun histopatologi. Efek kemopreventif SFN juga membantu menurunkan sejumlah sitokin pro inflamasi (Wagner et al., 2013).

SFN telah diteliti memiliki efek anti inflamasi. SFN dapat berikatan dengan Nrf-2 sehingga terjadi pelepasan phase II enzyme dan diprodusi agen non toksik untuk menghambat proses inflamasi. Mekanisme anti inflamasi dari SFN juga berhubungan dengan penghambatan molekul sinyal pro-inflamasi NF-ĸB. Penelitian secara in vitro menunjukkan SFN mengurangi pengeluaran interleukin, dan TNF-ɑ melalui penghambatan langsung jalur NF-ĸB yang berfungsi dalam regulasi sitokin dan kemokin inflamasi (Kong et al., 2010; Khiong et al., 2011).

Hingga saat ini belum ada penelitian yang menggunakan sari kukusan brokoli sebagai terapi KU. Berdasarkan pemaparan diatas, perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui efek sari kukusan brokoli terhadap kadar IL-8 pada model mencit kolitis.

(14)

Gambar 1.1 Bagan kerangka Pemikiran

1.6 Hipotesis

Sari kukusan brokoli menurunkan kadar IL-8 serum pada mencit model kolitis.

(15)

BAB V

SIMPULAN DAN SARAN

5.1Simpulan

Sari kukusan brokoli dapat menurunkan kadar IL-8 serum pada mencit model kolitis yang diinduksi DSS.

5.2Saran

1. Diperlukan penelitian lebih lanjut mengenai pengaruh sari kukusan brokoli terhadap kadar IL-8 serum pada mencit model kolitis yang diinduksi DSS, baik dari segi dosis pemberian dan lama waktu pemberian pada subjek penelitian.

2. Diperlukan penelitian lebih lanjut menggunakan cara pengolahan brokoli yang lain.

3. Diperlukan uji toksisitas terhadap sari kukusan brokoli.

4. Perlu dilakukan uji klinis untuk mengetahui lebih lanjut efek sari kukusan brokoli dalam pengobatan kolitis ulserativa.

(16)

DAFTAR PUSTAKA

Ajuebor M.N, Swain MG. Role of Chemokines and Chemokin Receptors in The Gastrointestinal Tract. Immunology. 2002; 105

Ardizzone S. Ulcerative Colitis. Orphanet Encyclopedia, 2003

Atreya R, Neurath MF. Chemokines in Inflamatory Bowel Disease. Digestive

Disease. 2010; 28

Atreya I, Atreya R, Neurath MF, NF-ĸB in Inflammatory Bowel Disease. Journal

of Internal Medicine. 2008

Banks C, Bateman A, Payne R, Johnson P, Sheron N: Chemokine expression in IBD: mucosal chemokine expression is unselectively increased in both ulcerative colitis and Crohn’s disease. J Pathol. 2003; 199: 28–35

Bernstain C.N, Fried M, Cohen H. Inflammatory Bowel Disease: A Global Perspective. World Gastroenterology Organisation Global Guidelines.

2009

Blackwell TS, Christman JW, The Role of Nuclear Factor- ĸB in Cytokine Gene Regulation. American Journal of Respiratory cell and Molecular Biology. 1997;17

Burisch J, Munkholm P. Inflammatory bowel disease epidemiology. Curr Opin

Gastroenterol. 2013; 29: 357-362

Campbell B, Han DY, Triggs CM, et al. Brassicaseae: Nutrient Analysis and Investigation of Tolerability in People wit.h Chron's Disease in New Zealand Study. Functional Food in Health and Disease. 2012; 2 (11)

Chassaing B, Aitken JD, Malleshappa M, Kumar MV. Dextran Sulfate Sodium (DSS)- Induced Colitis in Mice. Curr Protoc Immuno, 2015; 104

Costanzo LS. 2014. Physiology. Philadelphia: Elsevier

Danese S, Fiocchi C. Ulcerative Colitis. The New England Journal of Medicine. 2011; 365 (18)

da Silva BC, Lyra AC, Rocha R, Santana GO. Epidemiology, Demographic Characteristics and Prognostic Predictors of Ulcerative Colitis. World

Journal of Gastroenterology. 2014; 20 (28)

Drake RL, Vogl W, Mitchell AWM. 2009. Gray’s Anatomy For Student. Philadelphia: Elsevier.

Elbarbry F, Elrody N. Potential Health Benefits of Sulforaphane: A Review of The Experimental, Clinical and Epidemiological Evidences and Underlying Mechanisms. Journal of Medicinal Plants Research. 2011; 5(4)

Fahey JW, Zalcmann AT, Talalay P. The Chemical Diversity and Distribution of Glucosinolates and Isothiocyanates among Plants. Phytochemistry. 2001;56

Friedman S, Blumberg RS. Inflamatory Bowel Disease. Dalam: Longo DL Fauci AS, Penyunting Harisson’s Gastroenterology and Hepatology. 17th edition. United States: The Mc Graw-Hill Companies, 2010;16: 174-95

(17)

Geisel J, Bruck J, Glovoca I, et al. Sulforaphane Protects from T Cell-Mediated Autoimmune Disease by Inhibition of IL-23 and IL-12 in Dendritic Cells.

The Journal of Immunology. 2014

Goldman L, Schafer AI. 2012. Goldman’s Cecil Medicine. USA: Elsevier

Guyton AC and Hall JE. 2006. Text Book of Medical Physiology 11th Edition. Philadelphia: Elsevier

Head KA, Jurenka JS. Inflammatory Bowel Disease Part I: Ulcerative Colitis– Pathophysiology and Conventional and Alternative Treatment Options.

Alternative Medicine Review. 2003; 8(3)

Heiss E, Herhaus C, Klimo K, Bartsch H, Gerhauser C. Nuclear Factor Kappa B is A Molecular Target for Sulforaphane Mediated Anti-Inflammatory Mechanisms. J Biol Chem. 2001;276

Hou JK, El-Serag H, Thirumurthi S. Distribution and Manifestations of Inflammatory Bowel Disease in Asians, Hispanics, and African Americans: a systematic review. Am. J. Gastroenterol. 2009; 104: 2100–9 Hung C.N, Huang H.P, Wang C.J, Liu K.L, Lii C.K. Sulforaphane Inhibits

TNF-a-Induced Adhesion Molecule Expression Through the Rho A/ROCK/NF-jB Signaling Pathway. Journal of Medicinal Food. 2014; 17 (10)

Jahan IA, Mostafa M, Nimmi I, Hossain MH, Ahsan M, Chowdhury JU. Chemical and Antioxidant Properties of Broccoli Growing in Bangladesh.

Dhaka Univ. J. Pharm. Sci. 2010; 9 (1)

Jahangir M, Kim HK, Choi, YH, Verpoorte R. Health-Affecting Compounds in Brassicaceae. Compr. Rev. Food Sci. Food Saf. 2009, 8, 31-43

Kappelman M.D, Rifas-Shiman S.L, Kleinman K, Ollendorf D, Bousvaros A, Grand RJ, et al. The Prevalence and Geographic Distribution of Crohn’s Disease and Ulcerative Colitis in the United States. Clin. Gastroenterol.

Hepatol. 2007; 5: 1424–9

Kawada M, Arihiro A, Mizoguchi E. Insights From Advances in Research of Chemically Induced Experimental Models of Human Inflammatory Bowel Disease. World J Gastroenterol. 2007, 13(42):5581–5593

Khiong K, Darsono L, Yolanda R. Sulforaphane Prevents Colitis-associated Cancer by Inducing Phase II Enzymes Activity of Liver Detoxification.

JKM, 2011; 11 (1)

Kong JS, Yoo SA, Kim HS,.Inhibition of Synovial Hyperplasia, Rheumatoid T Cell Activation, and Experimental Arthritis in Mice by Sulforaphane, a Naturally Occurring Isothiocyanate. Arthritis Rheum. 2010; 62

Mahida YR, Ceska M, Effenberger F, Kurlak L, Lindley I, Hawkey CJ. Enhanced Synthesis of Neutrophil-Activating Peptide-1/Interleukin-8 in Active Ulcerative Colitis. Clin Sci (Lond). 1992;82:273-275.

Marrero JA, Matkowskyj KA, Yung K, Hecht G, Benya RV. Dextran Sulfate Sodium-Induced Murine Colitis Activates NF-kB and Increases Galanin-1 Receptor Expression. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2000; 278 Mazzucchelli L, Hauser C, Zgraggen K, Wagner H, Hess M, Laissue JA, Mueller

C: Expression of Interleukin-8 Gene In Inflammatory Bowel Disease is

(18)

Related to The Histological Grade of Active Inflammation. Am J Pathol. 1994; 144: 997–1007

Mithen R. Glucosinolates – Biochemistry, Genetics, and Biological Activity.

Plant Growth Regul. 2001;34

Mitsuyama K, Toyunaga A, Sasaki E, Watanabe K: IL-8 as an Important Chemoattractant for Neutrophils in Ulcerative Colitis and Crohn’s Disease. Clin Exp Immunol. 1994; 96: 432–436

Meier J, Sturm A. Current Treatment of Ulcerative Colitis. World Journal of

Gastroenterology. 2011; 17(27)

Melgar S, Karlsson A, Michaelsson E. Acute Colitis Induced by Dextran Sulfate Sodium Progresses to Chronicity in C57BL/6 But Not in BALB/c Mice: Correlation Between Symptoms and Inflammation. Am J Physiol

Gastrointest Liver Physiol. 2005; 288

Mescher A.L. 2010. Junqueira’s Basic Histology 20th Edition. United States of

America: McGraw- Hill

Mueller K, Blum NM, Mueller AS. Examination of the Anti-Inflammatory, Antioxidant, and Xenobiotic-Inducing Potential of Broccoli Extract and Various Essential Oils during a Mild DSS-Induced Colitis in Rats. ISRN

Gastroenterology. 2013

Muzes G, Molnar B, Tulassay B, Sipos FChanges of Cytokine Profil in Inflammatory Bowel Disease. World Journal of Gastroenterology, 2012; 18(41)

Nagahori M, Nemoto Y,Watanabe M. Pathogenesis of Inflammatory Bowel Disease.

Ovalle W. K. and Nahirney P.C.. 2008. Netter’s Essential Histology. Philadelphia,

USA: Elsevier-Saunders. p. 304-305

Papadakis KA, Chemokines in Inflammatory Bowel Disease. Current Allergic

and Asthma Reports. 2004; 4: 83-89

Podolsky DK. Inflammatory bowel disease. N Engl J Med. 2002; 347:417-29 Prideaux L, Kamm MA, De Cruz PP, Chan FKL, Ng SC. Inflammatory bowel

disease in Asia: A systematic review. Journal of Gastroenterology and

Hepatology. 2012; 27

Qazi A, Jagannath P, Maitah M, Fulciniti M, Pelluru D, Nanjappa P, et al. Anticancer Activity of a Broccoli Derivative, Sulforaphane, in Barrett Adenocarcinoma: Potential Use in Chemoprevention and as Adjuvant in Chemotherapy. Translational Oncology. 2010; 3

Rani A, Simadibrata M, Syam AF. 2011. Buku Ajar Gastroenterologi Edisi 1. Jakarta Pusat: Interna Publishing

Roebuck KA. Regulation of interleukin-8 gene expression. J Interferon Cytokine

Res.1999

Rose WA, Sakamoto K, Leifer C. A Multifunctional role of dextran sulfate sodium for in vivo modeling of intestinal diseases. BMC Immunology. 2012; 13 (41)

Strober W, Fuss I.J, Blumberg R.S. The immunology of mucosal models of inflammation. Annu Rev Immunol. 2002, 20:495–549

(19)

Surh Y.J. NF-кB and Nrf-2 AsPotential Chemopreventive Targets of Some Anti-Inflammatory and Antioxidative Phytonutrients with Anti-inflammatory and Antioxidative Activities. Asia Pac J Clin Nutr. 2008; 17 (S1)

Wagner A.E, Will O, Strum C, Lipinski S, Rosenstiel P, Rimbach G. DSS-Induced Acute Colitis in C57BL/6 Mice is Mitigated by Sulforaphane Pre-Treatment. Journal of Nutritional Biochemistry. 2013; 24

http://plants.usda.gov/java. Classification for Kingdom Plantae Down to Variety Brassica oleracea L. var. italica Plenck. Diunduh 14 November 2015

http://ccrc.farmasi.ugm.ac.id. Brokoli (Brassica oleracea Var italica). Diunduh 14 November 2015

http://www.fns.usda.gov. Nutrition Fact Cards. Diunduh 14 November 2014

(1)