Efek Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona Muricata L.) Terhadap Kadar Kreatinin Dan Urea Serum Tikus Yang Diinduksi Gentamisin

Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Gambar tumbuhan sirsak

Tumbuhan sirsak ( Annona muricata L. )

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. (lanjutan)

a

b
Keterangan : a. Daun sirsak (Annona muricata folium)
b. Simplisia Daun Sirsak (Annonae muricatae folium)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. (Lanjutan)


Serbuk Simplisia Daun Sirsak

Keterangan: 1. Epidermis atas
5. Serabut
2. Jaringan palisade
6. Rambut penutup
3. Stomata tipe anomositik
7. Pembuluh kayu dengan penebalan
4. Parenkim bernoktah
tangga
Hasil mikroskopik simplisia daun sirsak perbesaran 10x40.

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakteristisasi Simplisia

1. Perhitungan Penetapan Kadar Air
Kadar air simplisia =


Volume air
× 100%
Berat Sampel

a. Berat sampel = 5,009 g
Volume air

= 0,35 ml

Kadar air

= 5,009 � 100% = 6,99%

0,35

b. Berat sampel = 5,003 g
Volume air

= 0,35 ml
0,35


Kadar air = 5,003 � 100% = 6,99%

c. Berat sampel = 5,002 g
Volume air

= 0,35 ml
0,35

Kadar air = 5,002 x 100% = 6,99%

Kadar air rata-rata

=

(6,99+6,99+6,99)%
3

= 6,99%


Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. (Lanjutan)
a. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air
Berat sari
100
x
× 100%
Berat Sampel
20

Kadar sari =

a. Berat sampel = 5,013 g
Berat sari

= 0,195 g

Kadar sari


= 5,013 �

100

0,195

20

b. Berat sampel = 5,008 g
Berat sari

� 100% = 19,5%

= 0,192 g
0,192

Kadar sari = 5,008 �

100
20


c. Berat sampel = 5,009 g

� 100% = 19,2%

Berat sari = 0,192 g
0,192

Kadar sari = 5,009 x

Kadar sari rata-rata

=

100
20

x 100% = 19,2%

(19,5+19.2+19.2)%

3

= 19,3%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. (Lanjutan)
b. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol
Berat sari
100
x
× 100%
Berat Sampel
20

Kadar sari =

a. Berat sampel = 5,001 g
Berat sari


= 0,235 g

Kadar sari

= 5,001 �

100

0,235

20

b. Berat sampel = 5,005 g
Berat sari

� 100% = 23,5%

= 0,238 g
0,238


Kadar sari = 5,005 �

100
20

c. Berat sampel = 5,011 g

� 100% = 23,8%

Berat sari = 0,238 g
0,238

Kadar sari = 5,011 x

Kadar sari rata-rata

=

100
20


x 100% = 23,8%

(23,5+23,8+23,8)%
3

= 23,7%

Lampiran 3. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

c. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total
Kadar abu total =

Berat Abu
× 100%
Berat Sampel

a. Berat sampel = 2,012 g

Berat abu

= 0,061 g

Kadar abu

= 2,012 � 100% = 3,03%

0,061

b. Berat sampel = 2,003 g
Berat abu

= 0,060 g

Kadar abu

= 2,003 � 100% = 2,99%

0,060

c. Berat sampel = 2,021 g
Berat abu

= 0,061 g

Kadar abu

= 2,021 x 100% = 3,02%

0,061

Kadar abu total rata-rata =

(3,03+2,99+3,02)%
3

= 3,01%

Lampiran 3. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

d. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
Kadar abu tidak larut asam =

Berat Abu
× 100%
Berat Sampel

a. Berat sampel = 2,012 g
Berat abu

= 0,18 g

Kadar abu

= 2,012 � 100% = 0,89%

0,18

b. Berat sampel = 2,003 g
Berat abu

= 0,021 g
0,021

Kadar abu = 2,003 � 100% = 1,05%

c. Berat sampel = 2,021 g
Berat abu
Kadar abu

= 0,020 g
0,020

= 2,021 x 100% = 0,99%

Kadar abu total rata-rata =

(0,89+1,05+0,99)%
3

= 0,98%

Lampiran 4. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakteristisasi Ekstrak

Universitas Sumatera Utara

1. Perhitungan Penetapan Kadar Air
Kadar air simplisia =

Volume air
× 100%
Berat Sampel

a. Berat sampel = 5,014 g
Volume air

= 0,1 ml

Kadar air

= 5,014 � 100% = 1,99%

0,1

b. Berat sampel = 5,002 g
Volume air

= 0,1 ml
0,1

Kadar air = 5,002 � 100% = 2%

c. Berat sampel = 5,001 g
Volume air

= 0,1 ml
0,1

Kadar air = 5,001 x 100% = 2%

Kadar air rata-rata

=

(1,99+2+2)%
3

= 1,99%

Lampiran 4. (Lanjutan)
a. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total

Universitas Sumatera Utara

Kadar abu total =

Berat Abu
× 100%
Berat Sampel

a. Berat sampel = 2,001 g
Berat abu

= 0,042 g

Kadar abu

= 2,001 � 100% = 2,1%

0,042

b. Berat sampel = 2,021 g
Berat abu

= 0,051 g

Kadar abu

= 2,021 � 100% = 2,52%

0,051

c. Berat sampel = 2,058 g
Berat abu

= 0,045 g

Kadar abu

= 2,058 x 100% = 2,19%

0,045

Kadar abu total rata-rata =

(2,1+2,52+2,19)%
3

= 2,27%

Lampiran 4. (Lanjutan)
d. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
Kadar abu tidak larut asam =

Berat Abu
× 100%
Berat Sampel
Universitas Sumatera Utara

a. Berat sampel = 2,001 g
Berat abu

= 0,013 g

Kadar abu

= 2,001 x 100%=0,65%

0,013

b. Berat sampel = 2,021 g
Berat abu

= 0,016 g
0,016

Kadar abu = 2,021 x 100% = 0,79%
c. Berat sampel = 2,058 g
Berat abu
Kadar abu

= 0,022 g
0,022

= 2,058 x 100% = 1,07%

Kadar abu total rata-rata =

(0,65+0,79+1,07)%
3

= 0,84%

Lampiran 5. Bagan Alur Penelitian
Daun Sirsak Dibersihkan

dari pengotor

Universitas Sumatera Utara

Dicuci sampai bersih, ditiriskan .,
ditimbang
Berat basah
1728 g
Dikeringkan pada suhu ± 40oC
Berat kering 604 g

Dihaluskan
Ditimbang
563 g serbuk simplisia

Karakterisasi Simplisia
(± 100 g)





Pemeriksaan
skrining fitokimia

Ekstraksi
(400g)

(

Pemeriksaan makroskopik
Pemeriksaan mikroskopik
Penetapan kadar abu total
Penetapan kadar abu tidak
larut dalam asam
• Penetapan kadar air
• Penetapan kadar sari larut
dalam air
• Penetapan kadar sari larut
dalam etanol

Maserat I

Dimaserasi menggunakan etanol
96 % yang telah didestilasi (3 L)
selama 5 hari
Ampas
Dimaserasi menggunakan
etanol 96 % yang telah
didestilasi (1 L) selama 2 jam
sambil diaduk-aduk

Maserat II

Ampas
Diuapkan menggunakan
rotary evaaporator

Ekstrak kental 74,6 g
Uji pengaruh terhadap kreatinin dan urea serum
Hasil

Lampiran 6. Gambar Alat dan Bahan

Universitas Sumatera Utara

a

b

Keterangan :

a. Spektrofotometer UV-Visible (Shimadzu)
b. Oral sonde + Spuit

Lampiran 6. (lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

a
Keterangan: a. Reagen Kreatinin dan Reagen Urea

Lampiran 7. Gambar Hewan Percobaan

Universitas Sumatera Utara

a
Keterangan: a. Tikus Jantan Berat ±200 g

Lampiran 8. Contoh Perhitungan Dosis

Universitas Sumatera Utara

a.

Contoh perhitungan dosis gentamisin yang akan diberikan pada tikus
secara intra peritonial (i.p.)
Dosis gentamisin yang akan diberikan adalah 80 mg/kg bb. Tiap ampul

mengandung 40 mg/ml gentamisin.
Berapa volume gentamisin yang akan diberikan pada tikus? - Mis : BB tikus = 200 g
200 g

Jumlah gentamisin dosis 80 mg/kg bb

= 1000 g x 80 mg = 16 mg

Volume larutan yang diberi

= 40 mg/ml = 0,4 ml

16 mg

b. Contoh perhitungan dosis ekstrak etanol daun Sirsak yang akan diberikan
pada tikus
Dosis suspensi ekstrak etanol daun Sirsak yang akan diberikan adalah 100 mg/kg
bb, 200 mg/kg bb, dan 300 mg/kg bb.
a. Cara pembuatan suspensi ekstrak daun sirsak:
Timbang 800 mg ekstrak daun sirsak digerus di dalam lumpang, kemudian
ditambahkan sedikit CMC 0,5% digerus sampai homogen. Dituang ke dalam labu
tentukur 10 ml, ditambah CMC 0,5% sampai batas tanda.
a. Berapa volume suspensi ekstrak daun Sirsak yang akan diberikan pada tikus? Mis : BB tikus = 200 g
8% =

8g
100 ml

=

8000 mg
100 ml

= 80 mg/ml

200 g

Jumlah EEDS dosis 100 mg/kg bb

= 1000 g x 100 mg = 20 mg

Volume larutan yang diberi

= 80 mg/ml = 0,25 ml

Jumlah EEDS dosis 200 mg/kg bb

= 1000 g x 200 mg = 40 mg

20 mg

200 g

Universitas Sumatera Utara

40 mg

Volume larutan yang diberi

= 80 mg/ml = 0,50 ml

Jumlah EEDS dosis 300 mg/kg bb

= 1000 g x 300 mg = 60 mg

Volume larutan yang diberi

= 80 mg/ml = 0,75 ml

200 g

60 mg

Lampiran 9. Komposisi reagen yang digunakan

Universitas Sumatera Utara

Reagen Kreatinin

Reagen Urea

Lampiran 10. Hasil Analisis ANAVA

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10 (lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

Universitas Sumatera Utara

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Contoh Perhitungan dan Tabel Kadar Kreatinin dalam Serum
∆Absorbansi Standar = 0,004
∆ASampel

C (mg/dL) = 2,0 x
= 2,0 x

∆AStandar

0,001
0,004

Kelompok
Kontrol

GTM

EEDS 100 mg + GTM

EEDS 200 mg + GTM

EEDS 300 mg + GTM

= 0,5 mg/dL

∆Absorbansi

Kadar (mg/dL)
0,001
0,003
0,002
0,001
0,005
0,014
0,015
0,006
0,003
0,003
0,004
0,003
0,002
0,004
0,001
0,002
0,003
0,003
0,001
0,003

0,5
1,5
1,0
0,5
2,5
7,0
7,5
3,0
1,5
1,5
2,0
1,5
1,0
2,0
0,5
1,0
1,5
1,5
0,5
1,5

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. Contoh Perhitungan dan Tabel Kadar Urea dalam Serum
Absorbansi Standar = 0,416
C (mg/dL) = 80 x
= 80 x

ASampel
AStandar

0,226
0,416

Kelompok
Kontrol

GTM

EEDS 100 mg + GTM

EEDS 200 mg + GTM

EEDS 300 mg + GTM

= 43,46153 mg/dL

∆Absorbansi
0,226
0,200
0,065
0,294
0,501
0,623
0,512
0,573
0,454
0,432
0,737
0,382
0,216
0,094
0,309
0,246
0,117
0,055
0,323
0,340

Kadar (mg/dL)
43,4615
38,4615
12,5000
56,5384
96,3461
119,8077
98,4615
110,1923
87,3076
83,0769
141,730
73,4615
41,5384
18,0769
59,4230
47,3076
22,5000
10,5769
62,1153
65,3846

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13. Panjang Gelombang Maksimum Kreatinin

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. Panjang Gelombang Maksimum Urea

Universitas Sumatera Utara

Universitas Sumatera Utara