Uji Efek Antidiare Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau (Cyclea barbata) Pada Tikus Dengan Metode Defekasi
Lampiran 1. Hasil identifikasi sampel
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Gambar tumbuhan cincau hijau (Cycle barbata Miers)
Gambar daun cincau
hijau
51
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Gambar simplisia dan serbuk daun cincau hijau (Cyclea barbata
L.Miers)
Gambar simplisia daun cincau hijau
Gambar serbuk simplisia daun cincau hijau
52
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Ethical Clearance
53
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Bagan kerja penelitian
1. Pembuatan ekstrak daun cincau hijau
Daun cincau hijau (10 kg)
dibersihkan dan dicuci
ditiriskan
dipotong kecil-kecil
ditimbang (8 kg)
dikeringkan dalam lemari
pengering
simplisia
dihaluskan
ditimbang
Serbuk simplisia 1,2
dimaserasi dengan etanol
96%
hi
b k 5d
dibiarkan
selama
hari terlindung dari
cahaya
disaring
ampas
maserat
dimaserasi
dengan etanol 96
maserat II
diuapkan dengan
rotary
Ekstrak kering 112
54
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. (Lanjutan)
2. Pengujian karakterisasi, skrining dan antidiare
Ekstrak kering 112
Karakterisasi
simplisia meliputi
penetapan:
- Kadar air
- Kadar abu total
-- Kadar abu tidak
larut
- Kadar sari
larut etanol
- Kadar sari larut air
- kloroform
Hasil
Skrining fitokimia
simplisia meliputi:
- -alkaloida
- flavanoida
- glikosida
- tanin
-- steroid/terpenoi
-
Hasil
Uji antidiare,
meliputi parameter:
- Saat mulai terjadi
diare
- Konsistensis feses
- Frekuensi diare
- Lama terjadi diare
Hasil
55
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol
daun cincau hijau
1. Penetapan kadar air
=
Kadar air
a.
berat sampel
Berat sampel
= 5,0780 g
Volume I
= 0,2 ml
Volume II
= 0,5 ml
Kadar air
= 5,0780 � 100 % = 5,9 %
b. Berat sampel
c.
volume II-volume I
0,5-0,2
= 5,1030 g
Volume I
= 0,5 ml
Volume II
= 0,8 ml
Kadar air
= 5,1030 x 100% = 5,8 %
Berat sampel
= 5,1210 g
Volume I
= 0,8 ml
Volume II
= 2,0 ml
Kadar air
= 5,1210 x 100% = 3,9 %
Kadar air rata-rata
� 100 %
0,8-0,5
2,0-0,8
=
(5,9+5,8+3,9) %
3
= 5,2 %
2. Penetapan kadar sari yang larut dalam air
Kadar sari=
Berat sari
100
x
×100%
Berat Sampel 20
a. Berat sampel = 5,0780 g
Berat sari
= 0,1980 g
56
Universitas Sumatera Utara
Kadar sari
0,1980
= 5,0780 x
100
20
x 100 % = 19,49 %
b. Berat sampel = 5,0740 g
Berat sari
= 0,2030 g
Kadar sari
= 5,0740 x
0,2030
100
20
x 100 % = 20,01 %
c. Berat sampel = 5,0700 g
Berat sari
= 0,2270 g
Kadar sari
= 5,0700 x
Kadar sari rata-rata
0,2270
=
100
20
x 100 % = 22,38 %
(19,49+20,01+22,38) %
3
= 20,63 %
3. Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
Kadar sari =
Berat sari
100
x
× 100 %
Berat Sampel
20
a. Berat sampel = 5,0510 g
Berat sari
= 0,1850 g
Kadar sari
= 5,0510 x
0,1850
100
20
x 100 % = 18,31 %
b. Berat sampel = 5,0460 g
Berat sari
= 0,1740 g
Kadar sari
= 5,0460 x
0,1740
100
20
x 100 % = 17,24 %
c. Berat sampel = 5,0400 g
Berat sari
= 0,1630 g
Kadar sari
= 5,0400 x
0,1630
100
20
x 100 % = 16,17 %
57
Universitas Sumatera Utara
Kadar sari rata-rata
=
(18,31+17,24+16,17) %
3
= 17,24 %
4. Penetapan kadar abu total
Kadar abu total =
Berat Abu
× 100 %
Berat Sampel
a. Berat sampel = 2,0280 g
Berat abu
= 0,3110 g
Kadar abu
= 2,0280 �100 % = 15,33 %
0,3110
b. Berat sampel = 2,0220 g
Berat abu
= 0,2680 g
Kadar abu
= 2,0220 � 100 % = 13,25 %
0,2680
c. Berat sampel = 2,0200 g
Berat abu
= 0,2880 g
Kadar abu
= 2,0200 x 100 % = 14,26 %
0,2880
Kadar abu total rata-rata =
(15,33+13,25+14,26) %
3
= 14,28 %
5. Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam
Berat Abu
Kadar abu yang tidak larut dalam asam
Sampel I
Sampel II
= Berat Sampel x 100 %
Berat sampel = 2,0280 g
Berat abu
= 0,0130 g
0,0130
Kadar abu
= 2,0280 x 100 %
= 0,64 %
Berat sampel = 2,0220 g
Berat abu
= 0,0090 g
58
Universitas Sumatera Utara
Sampel III
0,0090
= 2,0220 x 100 %
= 0,44 %
Berat sampel = 2,0200 g
Beratabu
= 0,0110 g
0,0110
Kadar abu
= 2,0200 � 100 %
= 0,54 %
Kadar abu
Kadar abu yang tidak larut dalam asam rata-rata=
(0,64+0,44+0,54) %
3
= 0,54 %
59
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Gambar tikus saat pengamatan
60
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Gambar alat yang digunakan
Spuit dan oral sonde
Neraca hewan
61
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. Gambar konsistensi feses tikus
Feses tikus
Feses tikus lembek
Feses tikus berlendir
62
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10. Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada
hewan
uji (Mulyono, 1984)
Jenis hewan uji
Volume maksimum (ml) sesuai jalur pemberian
i.v.
i.m.
i.p.
s.c.
p.o.
Mencit (20-30 g)
0,5
0,05
1,0
0,5-1,0
1,0
Tikus (200 g)
1,0
0,1
2-5
2-5
5,0
Hamster (50 g)
-
0,1
1-2
2,5
2,5
Marmot (300 g)
-
0,25
2-5
5,0
10,0
Kelinci (2,5 kg)
5-10
0,5
10-20
5-10
20,0
Kucing (3 kg)
5-10
1,0
10-20
5-10
50,0
Anjing (5 kg)
10-20
5,0
20-50
10,0
100,0
63
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. Konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia (Laurance dan
Bacharach, 1964)
Mencit
20 g
Tikus
200 g
Marmot
400 g
Kelinci
1,5 kg
Kera
4 kg
Anjing
12 kg
Manusia
70 kg
Mencit
20 g
Tikus
200 g
Marmot Kelinci
400 g
1,5 kg
Kera
4 kg
Anjing Manusia
12 kg
70 kg
1,0
7,0
12,25
27,8
64,1
124,3
387,9
0,14
1,0
1,74
3,0
9,2
17,8
56,0
0,008
0,57
1,0
2,25
5,2
10,2
31,5
0,04
0,25
0,44
1,0
2,4
4,5
14,2
0,016
0,11
0,19
0,42
1,0
1,9
6,1
0,008
0,06
0,10
0,22
0,52
1,0
3,1
0,0026
0,018
0,031
0,07
0,16
0,32
1,0
64
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. Perhitungan konversi dosis
1. Perhitungan konversi dosis loperamid HCl (tablet Imodium®) dari manusia ke
tikus :
Dosis manusia (berat 70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari
Dosis tikus (berat 200 g) = 0,018 x (16 mg) = 0,2 mg
Maka dosis loperamid HCl untuk tikus = 1 mg/kg bb
65
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. Perhitungan pembuatan suspensi loperamid HCl (table imodium®)
Dosis manusia (70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari
Dosis tikus (200 g) setelah dikonversikan = 1 mg/kg bb
Tablet Imodium ditimbang sebanyak 20 tablet (berat = 1126 mg)
20 tablet Imodium mengandung Loperamid HCl sebanyak 40 mg
Loperamid HCl yang digunakan = 1 mg
Serbuk Imodium yang diambil = 1 mg x 1126 mg = 28,15 mg
40 mg
Jadi serbuk Imodium sebanyak 56,3 mg mengandung Loperamid HCl sebanyak
1 mg.
Suspensi loperamid HCl yang akan dibuat adalah 28,15 mg serbuk imodium®
dilarutkan dalam 25 ml suspensi CMC 1 %.
66
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. Perhitungan dosis pemberian ekstrak etanol daun cincau hijau
(EEDCH) dan loperamid HCl (tablet Imodium®)
Konsentrasi EEDCH = 4 % = 4 g/100 ml = 40 mg/ml
a. EEDCH yang diberikan untuk dosis 50 mg/kg bb
Berat badan tikus = 200 g
maka, dosis
=
dosis pemberian =
50 mg
× 200 g = 10mg
1000 g
10 mg
× 1 ml = 0,25ml / tikus
40 mg
b. EEDCH yang diberikan untuk dosis 100 mg/kg bb
Berat badan tikus = 200 g
maka, dosis
=
dosis pemberian =
100 mg
× 200 g = 20 mg
1000 g
20 mg
× 1 ml = 0,5 ml / tikus
40 mg
c. EEDCH yang diberikan untuk dosis 150 mg/kg bb
Berat badan tikus = 200 g
maka, dosis
=
150 mg
× 200 g = 30mg
1000 g
dosis pemberian
=
30 mg
× 1 ml = 0,75 ml / tikus
40 mg
d. Konsentrasi Loperamid =
28,15 mg
= 1,13 mg/ml
25 ml
Loperamid yang diberikan untuk dosis 1 mg/kg bb
Berat badan tikus
= 200 g
maka, dosis
=
dosis pemberian =
1 mg
× 200 g = 0,2mg
1000 g
1,13 mg
× 1 ml = 3,7 ml / tikus
0,3 mg
67
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 15. Hasil pengamatan saat mulai terjadinya diare setelah pemberian
oleum ricini
Hewan
Perlakuan
Jumlah
Rata-rata
(menit)
1
2
3
4
5
OR + CMC
1% bb
56
55
60
58
56
285
57
OR + Loperamid
HCl 1 mg/kg bb
114
114
85
92
90
495
99
OR + EEDCH
50 mg/kg bb
60
59
60
88
57
324
64,8
OR + EEDCH
100 mg/kg bb
87
90
119
114
90
500
100
OR + EEDCH
150 mg/kg bb
113
119
118
116
107
573
114,6
Keterangan:
OR
EEDCH
: Oleum ricini
: Ekstrak etanol daun cincau hijau
68
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 16. Hasil pengamatan konsistensi feses setelah pemberian oleum ricini
Berlendir
Perlakuan
OR + CMC 1% bb
OR + Loperamid HCl 1 mg/kg bb
OR + EEDCH 50 mg/kg bb
OR + EEDCH100 mg/kg bb
OR + EEDCH150 mg/kg bb
Diameter serapan
air (cm)
2,92
2,27
2,96
2,34
2,08
Berat feses
(g)
3,09
2,37
3,08
2,38
2,04
Lembek
Diameter serapan
air (cm)
1,42
1,05
1,19
1,09
1,04
Perlakuan
OR + CMC 1% bb
OR + Loperamid HCl 1 mg/kg bb
OR + EEDCH 50 mg/kg bb
OR + EEDCH 100 mg/kg bb
OR + EEDCH150 mg/kg bb
Berat feses
(g)
1,51
0,88
1,13
0,98
0,89
Normal
Keterangan:
OR
EEDCH
: Oleum ricini
: Ekstrak etanol daun cincau hijau
Perlakuan
Diameter serapan
air (cm)
0,24
0,12
0,22
0,12
0,1
OR + CMC 1% bb
OR + Lop.HCl 1 mg/kg bb
OR + EEDCH 50 mg/kg bb
OR + EEDCH 100 mg/kg bb
OR +. EEDCH150 mg/kg bb
Berat feses
(g)
0,21
0,14
0,21
0,15
0,15
Lampiran 17. Hasil pengamatan frekuensi diare setelah pemberian oleum ricini
69
Universitas Sumatera Utara
Perlakuan
Hewan
1
2
3
4
5
OR + CMC 1% bb
7
6
8
7
OR + Loperamid HCl
1 mg/kg bb
3
3
4
OR + EEDCH 50
mg/kg bb
5
7
OR + EEDCH 100
mg/kg bb
3
OR + EEDCH 150
mg/kg bb
2
Keterangan:
OR
EEDCH
Jumlah
Rata-rata
7
35
7,0
4
3
17
3,4
6
5
6
30
6
4
4
3
4
18
3,6
3
3
2
2
12
2,4
: Oleum ricini
: Ekstrak etanol daun cincau hijau
Lampiran 18. Hasil pengamatan lama terjadinya diare setelah pemberian oleum
ricinis
Hewan
1
2
T2T2-T1
T1
Perlakuan
3
4
5
T2-T1
T2-T1
T2-T1
Jumlah
Rata-rata
OR + CMC
1% bb
303
299
276
284
302
1464
292,8
OR +Loperamid
HCl 1 mg/kg bb
170
182
158
180
165
855
171
OR + EEDCH
50 mg/kg bb
261
298
272
245
274
1350
270
OR + EEDCH
100 mg/kg bb
180
187
190
172
182
911
182,2
OR + EEDCH
150 mg/kg bb
97
110
103
86
100
496
99,2
Keterangan:
OR
EEDCH
: Oleum ricini
:Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau
Lampiran 25. Hasil Analisis Statistik Duncan
70
Universitas Sumatera Utara
Saat mulai terjadinya diare
waktudiare
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
CMC
5
57.00
dosis 50
5
64.80
loperamid
5
99.00
dosis 100
5
99.80
dosis 150
5
114.60
Sig.
.284
.911
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Konsistensi feses (diameter serapan air)
berlendir
diameter
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
dosis150
5
2.0800
loperamid
5
2.2200
dosis 100
5
2.2960
CMC
5
2.9200
dosis50
5
2.9740
Sig.
.071
.622
Means for groups in homogeneous subsets are
displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
lembek
71
Universitas Sumatera Utara
diameter
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
dosis150
5
1.0400
loperamid
5
1.0500
dosis 100
5
1.0902
dosis50
5
CMC
5
3
1.1920
1.4080
Sig.
.299
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
normal
diameter
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
dosis150
5
.1000
loperamid
5
.1200
dosis 100
5
.1200
dosis50
5
.2200
CMC
5
.2400
Sig.
.579
.557
Means for groups in homogeneous subsets are
displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Konsistensi feses (berat)
72
Universitas Sumatera Utara
Berlendir
berat
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
dosis150
5
2.0400
loperamid
5
2.3220
dosis100
5
2.3500
dosis50
5
3.0860
CMC
5
3.1020
Sig.
1.000
.811
.892
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
lembek
beratfeses
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
loperamid
5
.8780
dosis150
5
.8940
dosis100
5
.9620
dosis50
5
CMC
5
Sig.
3
1.1260
1.4960
.190
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
normal
73
Universitas Sumatera Utara
berat
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
loperamid
5
.1440
dosis150
5
.1460
dosis100
5
.1540
dosis50
5
.2100
CMC
5
.2140
Sig.
.661
.852
Means for groups in homogeneous subsets are
displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Frekuensi diare
frekuensi
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
dosis 150
5
dosis 100
5
3.20
loperamid
5
3.40
dosis 50
5
CMC
5
Sig.
4
2.40
5.60
7.00
1.000
.582
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Lama terjadi diare
74
Universitas Sumatera Utara
Lamaterjadidiare
Subset for alpha = 0.05
kelompok
a
Tukey HSD
N
1
2
3
dosis 150
5
99.20
loperamid
5
171.00
dosis 100
5
182.20
dosis 50
5
270.00
CMC
5
292.80
Sig.
1.000
.608
.056
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Waktu diare
berlendir
waktu
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
dosis50
5
CMC
5
100.160
loperamid
5
104.500
104.500
dosis100
5
107.400
107.400
dosis150
5
Sig.
81.100
116.600
1.000
.285
.080
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
lembek
75
Universitas Sumatera Utara
waktu
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
dosis150
5
164.500
dosis100
5
175.400
loperamid
5
177.700
dosis50
5
CMC
5
3
213.240
249.040
Sig.
.405
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
normal
waktu
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
dosis150
5
loperamid
5
270.000
dosis100
5
282.000
dosis50
5
334.800
CMC
5
349.400
Sig.
214.400
1.000
.234
.151
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
76
Universitas Sumatera Utara
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Gambar tumbuhan cincau hijau (Cycle barbata Miers)
Gambar daun cincau
hijau
51
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Gambar simplisia dan serbuk daun cincau hijau (Cyclea barbata
L.Miers)
Gambar simplisia daun cincau hijau
Gambar serbuk simplisia daun cincau hijau
52
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Ethical Clearance
53
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Bagan kerja penelitian
1. Pembuatan ekstrak daun cincau hijau
Daun cincau hijau (10 kg)
dibersihkan dan dicuci
ditiriskan
dipotong kecil-kecil
ditimbang (8 kg)
dikeringkan dalam lemari
pengering
simplisia
dihaluskan
ditimbang
Serbuk simplisia 1,2
dimaserasi dengan etanol
96%
hi
b k 5d
dibiarkan
selama
hari terlindung dari
cahaya
disaring
ampas
maserat
dimaserasi
dengan etanol 96
maserat II
diuapkan dengan
rotary
Ekstrak kering 112
54
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. (Lanjutan)
2. Pengujian karakterisasi, skrining dan antidiare
Ekstrak kering 112
Karakterisasi
simplisia meliputi
penetapan:
- Kadar air
- Kadar abu total
-- Kadar abu tidak
larut
- Kadar sari
larut etanol
- Kadar sari larut air
- kloroform
Hasil
Skrining fitokimia
simplisia meliputi:
- -alkaloida
- flavanoida
- glikosida
- tanin
-- steroid/terpenoi
-
Hasil
Uji antidiare,
meliputi parameter:
- Saat mulai terjadi
diare
- Konsistensis feses
- Frekuensi diare
- Lama terjadi diare
Hasil
55
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol
daun cincau hijau
1. Penetapan kadar air
=
Kadar air
a.
berat sampel
Berat sampel
= 5,0780 g
Volume I
= 0,2 ml
Volume II
= 0,5 ml
Kadar air
= 5,0780 � 100 % = 5,9 %
b. Berat sampel
c.
volume II-volume I
0,5-0,2
= 5,1030 g
Volume I
= 0,5 ml
Volume II
= 0,8 ml
Kadar air
= 5,1030 x 100% = 5,8 %
Berat sampel
= 5,1210 g
Volume I
= 0,8 ml
Volume II
= 2,0 ml
Kadar air
= 5,1210 x 100% = 3,9 %
Kadar air rata-rata
� 100 %
0,8-0,5
2,0-0,8
=
(5,9+5,8+3,9) %
3
= 5,2 %
2. Penetapan kadar sari yang larut dalam air
Kadar sari=
Berat sari
100
x
×100%
Berat Sampel 20
a. Berat sampel = 5,0780 g
Berat sari
= 0,1980 g
56
Universitas Sumatera Utara
Kadar sari
0,1980
= 5,0780 x
100
20
x 100 % = 19,49 %
b. Berat sampel = 5,0740 g
Berat sari
= 0,2030 g
Kadar sari
= 5,0740 x
0,2030
100
20
x 100 % = 20,01 %
c. Berat sampel = 5,0700 g
Berat sari
= 0,2270 g
Kadar sari
= 5,0700 x
Kadar sari rata-rata
0,2270
=
100
20
x 100 % = 22,38 %
(19,49+20,01+22,38) %
3
= 20,63 %
3. Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
Kadar sari =
Berat sari
100
x
× 100 %
Berat Sampel
20
a. Berat sampel = 5,0510 g
Berat sari
= 0,1850 g
Kadar sari
= 5,0510 x
0,1850
100
20
x 100 % = 18,31 %
b. Berat sampel = 5,0460 g
Berat sari
= 0,1740 g
Kadar sari
= 5,0460 x
0,1740
100
20
x 100 % = 17,24 %
c. Berat sampel = 5,0400 g
Berat sari
= 0,1630 g
Kadar sari
= 5,0400 x
0,1630
100
20
x 100 % = 16,17 %
57
Universitas Sumatera Utara
Kadar sari rata-rata
=
(18,31+17,24+16,17) %
3
= 17,24 %
4. Penetapan kadar abu total
Kadar abu total =
Berat Abu
× 100 %
Berat Sampel
a. Berat sampel = 2,0280 g
Berat abu
= 0,3110 g
Kadar abu
= 2,0280 �100 % = 15,33 %
0,3110
b. Berat sampel = 2,0220 g
Berat abu
= 0,2680 g
Kadar abu
= 2,0220 � 100 % = 13,25 %
0,2680
c. Berat sampel = 2,0200 g
Berat abu
= 0,2880 g
Kadar abu
= 2,0200 x 100 % = 14,26 %
0,2880
Kadar abu total rata-rata =
(15,33+13,25+14,26) %
3
= 14,28 %
5. Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam
Berat Abu
Kadar abu yang tidak larut dalam asam
Sampel I
Sampel II
= Berat Sampel x 100 %
Berat sampel = 2,0280 g
Berat abu
= 0,0130 g
0,0130
Kadar abu
= 2,0280 x 100 %
= 0,64 %
Berat sampel = 2,0220 g
Berat abu
= 0,0090 g
58
Universitas Sumatera Utara
Sampel III
0,0090
= 2,0220 x 100 %
= 0,44 %
Berat sampel = 2,0200 g
Beratabu
= 0,0110 g
0,0110
Kadar abu
= 2,0200 � 100 %
= 0,54 %
Kadar abu
Kadar abu yang tidak larut dalam asam rata-rata=
(0,64+0,44+0,54) %
3
= 0,54 %
59
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Gambar tikus saat pengamatan
60
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Gambar alat yang digunakan
Spuit dan oral sonde
Neraca hewan
61
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 9. Gambar konsistensi feses tikus
Feses tikus
Feses tikus lembek
Feses tikus berlendir
62
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 10. Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada
hewan
uji (Mulyono, 1984)
Jenis hewan uji
Volume maksimum (ml) sesuai jalur pemberian
i.v.
i.m.
i.p.
s.c.
p.o.
Mencit (20-30 g)
0,5
0,05
1,0
0,5-1,0
1,0
Tikus (200 g)
1,0
0,1
2-5
2-5
5,0
Hamster (50 g)
-
0,1
1-2
2,5
2,5
Marmot (300 g)
-
0,25
2-5
5,0
10,0
Kelinci (2,5 kg)
5-10
0,5
10-20
5-10
20,0
Kucing (3 kg)
5-10
1,0
10-20
5-10
50,0
Anjing (5 kg)
10-20
5,0
20-50
10,0
100,0
63
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. Konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia (Laurance dan
Bacharach, 1964)
Mencit
20 g
Tikus
200 g
Marmot
400 g
Kelinci
1,5 kg
Kera
4 kg
Anjing
12 kg
Manusia
70 kg
Mencit
20 g
Tikus
200 g
Marmot Kelinci
400 g
1,5 kg
Kera
4 kg
Anjing Manusia
12 kg
70 kg
1,0
7,0
12,25
27,8
64,1
124,3
387,9
0,14
1,0
1,74
3,0
9,2
17,8
56,0
0,008
0,57
1,0
2,25
5,2
10,2
31,5
0,04
0,25
0,44
1,0
2,4
4,5
14,2
0,016
0,11
0,19
0,42
1,0
1,9
6,1
0,008
0,06
0,10
0,22
0,52
1,0
3,1
0,0026
0,018
0,031
0,07
0,16
0,32
1,0
64
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. Perhitungan konversi dosis
1. Perhitungan konversi dosis loperamid HCl (tablet Imodium®) dari manusia ke
tikus :
Dosis manusia (berat 70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari
Dosis tikus (berat 200 g) = 0,018 x (16 mg) = 0,2 mg
Maka dosis loperamid HCl untuk tikus = 1 mg/kg bb
65
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 13. Perhitungan pembuatan suspensi loperamid HCl (table imodium®)
Dosis manusia (70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari
Dosis tikus (200 g) setelah dikonversikan = 1 mg/kg bb
Tablet Imodium ditimbang sebanyak 20 tablet (berat = 1126 mg)
20 tablet Imodium mengandung Loperamid HCl sebanyak 40 mg
Loperamid HCl yang digunakan = 1 mg
Serbuk Imodium yang diambil = 1 mg x 1126 mg = 28,15 mg
40 mg
Jadi serbuk Imodium sebanyak 56,3 mg mengandung Loperamid HCl sebanyak
1 mg.
Suspensi loperamid HCl yang akan dibuat adalah 28,15 mg serbuk imodium®
dilarutkan dalam 25 ml suspensi CMC 1 %.
66
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. Perhitungan dosis pemberian ekstrak etanol daun cincau hijau
(EEDCH) dan loperamid HCl (tablet Imodium®)
Konsentrasi EEDCH = 4 % = 4 g/100 ml = 40 mg/ml
a. EEDCH yang diberikan untuk dosis 50 mg/kg bb
Berat badan tikus = 200 g
maka, dosis
=
dosis pemberian =
50 mg
× 200 g = 10mg
1000 g
10 mg
× 1 ml = 0,25ml / tikus
40 mg
b. EEDCH yang diberikan untuk dosis 100 mg/kg bb
Berat badan tikus = 200 g
maka, dosis
=
dosis pemberian =
100 mg
× 200 g = 20 mg
1000 g
20 mg
× 1 ml = 0,5 ml / tikus
40 mg
c. EEDCH yang diberikan untuk dosis 150 mg/kg bb
Berat badan tikus = 200 g
maka, dosis
=
150 mg
× 200 g = 30mg
1000 g
dosis pemberian
=
30 mg
× 1 ml = 0,75 ml / tikus
40 mg
d. Konsentrasi Loperamid =
28,15 mg
= 1,13 mg/ml
25 ml
Loperamid yang diberikan untuk dosis 1 mg/kg bb
Berat badan tikus
= 200 g
maka, dosis
=
dosis pemberian =
1 mg
× 200 g = 0,2mg
1000 g
1,13 mg
× 1 ml = 3,7 ml / tikus
0,3 mg
67
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 15. Hasil pengamatan saat mulai terjadinya diare setelah pemberian
oleum ricini
Hewan
Perlakuan
Jumlah
Rata-rata
(menit)
1
2
3
4
5
OR + CMC
1% bb
56
55
60
58
56
285
57
OR + Loperamid
HCl 1 mg/kg bb
114
114
85
92
90
495
99
OR + EEDCH
50 mg/kg bb
60
59
60
88
57
324
64,8
OR + EEDCH
100 mg/kg bb
87
90
119
114
90
500
100
OR + EEDCH
150 mg/kg bb
113
119
118
116
107
573
114,6
Keterangan:
OR
EEDCH
: Oleum ricini
: Ekstrak etanol daun cincau hijau
68
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 16. Hasil pengamatan konsistensi feses setelah pemberian oleum ricini
Berlendir
Perlakuan
OR + CMC 1% bb
OR + Loperamid HCl 1 mg/kg bb
OR + EEDCH 50 mg/kg bb
OR + EEDCH100 mg/kg bb
OR + EEDCH150 mg/kg bb
Diameter serapan
air (cm)
2,92
2,27
2,96
2,34
2,08
Berat feses
(g)
3,09
2,37
3,08
2,38
2,04
Lembek
Diameter serapan
air (cm)
1,42
1,05
1,19
1,09
1,04
Perlakuan
OR + CMC 1% bb
OR + Loperamid HCl 1 mg/kg bb
OR + EEDCH 50 mg/kg bb
OR + EEDCH 100 mg/kg bb
OR + EEDCH150 mg/kg bb
Berat feses
(g)
1,51
0,88
1,13
0,98
0,89
Normal
Keterangan:
OR
EEDCH
: Oleum ricini
: Ekstrak etanol daun cincau hijau
Perlakuan
Diameter serapan
air (cm)
0,24
0,12
0,22
0,12
0,1
OR + CMC 1% bb
OR + Lop.HCl 1 mg/kg bb
OR + EEDCH 50 mg/kg bb
OR + EEDCH 100 mg/kg bb
OR +. EEDCH150 mg/kg bb
Berat feses
(g)
0,21
0,14
0,21
0,15
0,15
Lampiran 17. Hasil pengamatan frekuensi diare setelah pemberian oleum ricini
69
Universitas Sumatera Utara
Perlakuan
Hewan
1
2
3
4
5
OR + CMC 1% bb
7
6
8
7
OR + Loperamid HCl
1 mg/kg bb
3
3
4
OR + EEDCH 50
mg/kg bb
5
7
OR + EEDCH 100
mg/kg bb
3
OR + EEDCH 150
mg/kg bb
2
Keterangan:
OR
EEDCH
Jumlah
Rata-rata
7
35
7,0
4
3
17
3,4
6
5
6
30
6
4
4
3
4
18
3,6
3
3
2
2
12
2,4
: Oleum ricini
: Ekstrak etanol daun cincau hijau
Lampiran 18. Hasil pengamatan lama terjadinya diare setelah pemberian oleum
ricinis
Hewan
1
2
T2T2-T1
T1
Perlakuan
3
4
5
T2-T1
T2-T1
T2-T1
Jumlah
Rata-rata
OR + CMC
1% bb
303
299
276
284
302
1464
292,8
OR +Loperamid
HCl 1 mg/kg bb
170
182
158
180
165
855
171
OR + EEDCH
50 mg/kg bb
261
298
272
245
274
1350
270
OR + EEDCH
100 mg/kg bb
180
187
190
172
182
911
182,2
OR + EEDCH
150 mg/kg bb
97
110
103
86
100
496
99,2
Keterangan:
OR
EEDCH
: Oleum ricini
:Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau
Lampiran 25. Hasil Analisis Statistik Duncan
70
Universitas Sumatera Utara
Saat mulai terjadinya diare
waktudiare
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
CMC
5
57.00
dosis 50
5
64.80
loperamid
5
99.00
dosis 100
5
99.80
dosis 150
5
114.60
Sig.
.284
.911
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Konsistensi feses (diameter serapan air)
berlendir
diameter
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
dosis150
5
2.0800
loperamid
5
2.2200
dosis 100
5
2.2960
CMC
5
2.9200
dosis50
5
2.9740
Sig.
.071
.622
Means for groups in homogeneous subsets are
displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
lembek
71
Universitas Sumatera Utara
diameter
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
dosis150
5
1.0400
loperamid
5
1.0500
dosis 100
5
1.0902
dosis50
5
CMC
5
3
1.1920
1.4080
Sig.
.299
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
normal
diameter
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
dosis150
5
.1000
loperamid
5
.1200
dosis 100
5
.1200
dosis50
5
.2200
CMC
5
.2400
Sig.
.579
.557
Means for groups in homogeneous subsets are
displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Konsistensi feses (berat)
72
Universitas Sumatera Utara
Berlendir
berat
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
dosis150
5
2.0400
loperamid
5
2.3220
dosis100
5
2.3500
dosis50
5
3.0860
CMC
5
3.1020
Sig.
1.000
.811
.892
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
lembek
beratfeses
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
loperamid
5
.8780
dosis150
5
.8940
dosis100
5
.9620
dosis50
5
CMC
5
Sig.
3
1.1260
1.4960
.190
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
normal
73
Universitas Sumatera Utara
berat
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
loperamid
5
.1440
dosis150
5
.1460
dosis100
5
.1540
dosis50
5
.2100
CMC
5
.2140
Sig.
.661
.852
Means for groups in homogeneous subsets are
displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Frekuensi diare
frekuensi
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
dosis 150
5
dosis 100
5
3.20
loperamid
5
3.40
dosis 50
5
CMC
5
Sig.
4
2.40
5.60
7.00
1.000
.582
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Lama terjadi diare
74
Universitas Sumatera Utara
Lamaterjadidiare
Subset for alpha = 0.05
kelompok
a
Tukey HSD
N
1
2
3
dosis 150
5
99.20
loperamid
5
171.00
dosis 100
5
182.20
dosis 50
5
270.00
CMC
5
292.80
Sig.
1.000
.608
.056
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Waktu diare
berlendir
waktu
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
dosis50
5
CMC
5
100.160
loperamid
5
104.500
104.500
dosis100
5
107.400
107.400
dosis150
5
Sig.
81.100
116.600
1.000
.285
.080
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
lembek
75
Universitas Sumatera Utara
waktu
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
dosis150
5
164.500
dosis100
5
175.400
loperamid
5
177.700
dosis50
5
CMC
5
3
213.240
249.040
Sig.
.405
1.000
1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
normal
waktu
a
Duncan
Subset for alpha = 0.05
kelompok
N
1
2
3
dosis150
5
loperamid
5
270.000
dosis100
5
282.000
dosis50
5
334.800
CMC
5
349.400
Sig.
214.400
1.000
.234
.151
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
76
Universitas Sumatera Utara