Uji Efek Antidiare Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau (Cyclea barbata) Pada Tikus Dengan Metode Defekasi

Lampiran 2. Gambar tumbuhan cincau hijau (Cycle barbata Miers)

Gambar daun cincau hijau

Lampiran 3. Gambar simplisia dan serbuk daun cincau hijau (Cyclea barbata L.Miers)

Gambar simplisia daun cincau hijau

Lampiran 5. Bagan kerja penelitian 1. Pembuatan ekstrak daun cincau hijau

simplisia

ditiriskan

dipotong kecil-kecil

dikeringkan dalam lemari pengering

ditimbang (8 kg) Daun cincau hijau (10 kg)

dibersihkan dan dicuci

dihaluskan ditimbang Serbuk simplisia 1,2

dimaserasi dengan etanol 96%

hi b k d

ampas maserat

dimaserasi dengan etanol 96 maserat II

diuapkan dengan rotary

Ekstrak kering 112

dibiarkan selama 5

hari terlindung dari cahaya

Lampiran 5. (Lanjutan)

2. Pengujian karakterisasi, skrining dan antidiare Ekstrak kering 112

Karakterisasi simplisia meliputi penetapan: - - - Skrining fitokimia simplisia meliputi:

-Hasil _{Hasil Hasil}

Uji antidiare, meliputi parameter: -Saat mulai terjadi

diare

-Konsistensis feses -Frekuensi diare -Lama terjadi diare - Kadar air

- Kadar abu total - Kadar abu tidak

larut - Kadar sari

larut etanol

- Kadar sari larut air - kloroform - alkaloida -flavanoida -glikosida -tanin -steroid/terpenoi

Lampiran 6. Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun cincau hijau

1. Penetapan kadar air

a. Berat sampel = 5,0780 g Volume I = 0,2 ml Volume II = 0,5 ml

Kadar air = 0,5-0,2

5,0780� 100 % = 5,9 % b. Berat sampel = 5,1030 g

Volume I = 0,5 ml Volume II = 0,8 ml

Kadar air = 0,8-0,5

5,1030 x 100% = 5,8 % c. Berat sampel = 5,1210 g

Volume I = 0,8 ml Volume II = 2,0 ml

Kadar air = 2,0-0,8

5,1210 x 100% = 3,9 % Kadar air rata-rata = (5,9+5,8+3,9) %

3 = 5,2 %

2. Penetapan kadar sari yang larut dalam air

a. Berat sampel = 5,0780 g Berat sari = 0,1980 g

Kadar sari= Berat sari Berat Sampel x

100

20 ×100% Kadar air

=

volume II-volume I

Kadar sari = 0,1980 5,0780 x

100

20 x 100 % = 19,49 % b. Berat sampel = 5,0740 g

Berat sari = 0,2030 g Kadar sari = 0,2030

5,0740 x 100

20 x 100 % = 20,01 % c. Berat sampel = 5,0700 g

Berat sari = 0,2270 g Kadar sari = 0,2270

5,0700 x 100

20 x 100 % = 22,38 % Kadar sari rata-rata = (19,49+20,01+22,38) %

3 = 20,63 %

3. Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

a. Berat sampel = 5,0510 g Berat sari = 0,1850 g Kadar sari = 0,1850

5,0510 x 100

20 x 100 % = 18,31 % b. Berat sampel = 5,0460 g

Berat sari = 0,1740 g Kadar sari = 0,1740

5,0460 x 100

20 x 100 % = 17,24 % c. Berat sampel = 5,0400 g

Berat sari = 0,1630 g Kadar sari = 0,1630

5,0400 x 100

20 x 100 % = 16,17 %

Kadar sari = Berat sari Berat Sampel x

100

Kadar sari rata-rata = (18,31+17,24+16,17) %

3 = 17,24 %

4. Penetapan kadar abu total

a. Berat sampel = 2,0280 g Berat abu = 0,3110 g Kadar abu = 0,3110

2,0280�100 % = 15,33 %

b. Berat sampel = 2,0220 g Berat abu = 0,2680 g Kadar abu = 0,2680

2,0220� 100 % = 13,25 %

c. Berat sampel = 2,0200 g Berat abu = 0,2880 g Kadar abu = 0,2880

2,0200 x 100 % = 14,26 %

Kadar abu total rata-rata = (15,33+13,25+14,26) %

3 = 14,28 % 5. Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam Kadar abu yang tidak larut dalam asam = Berat Abu

Berat Sampel x 100 % Sampel I Berat sampel = 2,0280 g

Berat abu = 0,0130 g Kadar abu = 0,0130

2,0280 x 100 % = 0,64 % Sampel II Berat sampel = 2,0220 g

Berat abu = 0,0090 g

Kadar abu total = Berat Abu

Kadar abu = 0,0090

2,0220 x 100 % = 0,44 % Sampel III Berat sampel = 2,0200 g

Beratabu = 0,0110 g Kadar abu = 0,0110

2,0200� 100 % = 0,54 %

Kadar abu yang tidak larut dalam asam rata-rata= (0,64+0,44+0,54) %

Lampiran 8. Gambar alat yang digunakan

Spuit dan oral sonde

Lampiran 9. Gambar konsistensi feses tikus

Feses tikus

Feses tikus lembek

Lampiran 10. Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada hewan

uji (Mulyono, 1984)

Jenis hewan uji Volume maksimum (ml) sesuai jalur pemberian

i.v. i.m. i.p. s.c. p.o.

Mencit (20-30 g) 0,5 0,05 1,0 0,5-1,0 1,0

Tikus (200 g) 1,0 0,1 2-5 2-5 5,0

Hamster (50 g) - 0,1 1-2 2,5 2,5

Marmot (300 g) - 0,25 2-5 5,0 10,0

Kelinci (2,5 kg) 5-10 0,5 10-20 5-10 20,0

Kucing (3 kg) 5-10 1,0 10-20 5-10 50,0

Anjing (5 kg) 10-20 5,0 20-50 10,0 100,0

Lampiran 11. Konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia (Laurance dan Bacharach, 1964)

Mencit

20 g

Tikus 200 g

Marmot 400 g

Kelinci 1,5 kg

Kera 4 kg

Anjing 12 kg

Manusia 70 kg Mencit

20 g 1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,3 387,9 Tikus

200 g 0,14 1,0 1,74 3,0 9,2 17,8 56,0

Marmot

400 g 0,008 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5 Kelinci

1,5 kg 0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2

Kera

4 kg 0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1

Anjing

12 kg 0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1 Manusia

Lampiran 12. Perhitungan konversi dosis

1. Perhitungan konversi dosis loperamid HCl (tablet Imodium®) dari manusia ke tikus :

Dosis manusia (berat 70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari Dosis tikus (berat 200 g) = 0,018 x (16 mg) = 0,2 mg

Lampiran 13. Perhitungan pembuatan suspensi loperamid HCl (table imodium®) Dosis manusia (70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari

Dosis tikus (200 g) setelah dikonversikan = 1 mg/kg bb

Tablet Imodium ditimbang sebanyak 20 tablet (berat = 1126 mg) 20 tablet Imodium mengandung Loperamid HCl sebanyak 40 mg Loperamid HCl yang digunakan = 1 mg

Serbuk Imodium yang diambil = 1 mg 40 mg

x 1126 mg = 28,15 mg

Jadi serbuk Imodium sebanyak 56,3 mg mengandung Loperamid HCl sebanyak 1 mg.

Suspensi loperamid HCl yang akan dibuat adalah 28,15 mg serbuk imodium® dilarutkan dalam 25 ml suspensi CMC 1 %.

Lampiran 14. Perhitungan dosis pemberian ekstrak etanol daun cincau hijau (EEDCH) dan loperamid HCl (tablet Imodium®)

Konsentrasi EEDCH = 4 % = 4 g/100 ml = 40 mg/ml a. EEDCH yang diberikan untuk dosis 50 mg/kg bb

Berat badan tikus = 200 g

maka, dosis = 200g 10mg g 1000 mg 50 = ×

dosis pemberian = 1ml 0,25ml / tikus mg 40 mg 10 = ×

b. EEDCH yang diberikan untuk dosis 100 mg/kg bb Berat badan tikus = 200 g

maka, dosis = 200g 20mg g 1000 mg 100 = ×

dosis pemberian = 1ml 0,5ml / tikus mg 40 mg 20 = ×

c. EEDCH yang diberikan untuk dosis 150 mg/kg bb Berat badan tikus = 200 g

maka, dosis = 200g 30mg g 1000 mg 150 = ×

dosis pemberian = 1ml 0,75ml / tikus mg 40 mg 30 = ×

d. Konsentrasi Loperamid = 1,13mg/ml ml

25 mg 28,15

=

Loperamid yang diberikan untuk dosis 1 mg/kg bb Berat badan tikus = 200 g

maka, dosis = 200g 0,2mg

g 1000 mg 1 = ×

dosis pemberian = 1ml 3,7ml / tikus mg 0,3 mg 1,13 = ×

Lampiran 15. Hasil pengamatan saat mulai terjadinya diare setelah pemberian oleum ricini

Keterangan:

OR : Oleum ricini

EEDCH : Ekstrak etanol daun cincau hijau

Perlakuan

Hewan

Jumlah Rata-rata (menit)

1 2 3 4 5

OR + CMC

1% bb 56 55 60 58 56 285 57

OR + Loperamid

HCl 1 mg/kg bb 114 114 85 92 90 495 99

OR + EEDCH

50 mg/kg bb 60 59 60 88 57 324 64,8

OR + EEDCH

100 mg/kg bb 87 90 119 114 90 500 100

OR + EEDCH

Lampiran 16. Hasil pengamatan konsistensi feses setelah pemberian oleum ricini Berlendir

Perlakuan Diameter serapan

air (cm)

Berat feses (g)

OR + CMC 1% bb 2,92 3,09

OR + Loperamid HCl 1 mg/kg bb 2,27 2,37

OR + EEDCH 50 mg/kg bb 2,96 3,08

OR + EEDCH100 mg/kg bb 2,34 2,38

OR + EEDCH150 mg/kg bb 2,08 2,04

Lembek

Perlakuan Diameter serapan

air (cm)

Berat feses (g)

OR + CMC 1% bb 1,42 1,51

OR + Loperamid HCl 1 mg/kg bb 1,05 0,88

OR + EEDCH 50 mg/kg bb 1,19 1,13

OR + EEDCH 100 mg/kg bb 1,09 0,98

OR + EEDCH150 mg/kg bb 1,04 0,89

Normal Keterangan:

OR : Oleum ricini

EEDCH : Ekstrak etanol daun cincau hijau

Lampiran 17. Hasil pengamatan frekuensi diare setelah pemberian oleum ricini

Perlakuan Diameter serapan

air (cm)

Berat feses (g)

OR + CMC 1% bb 0,24 0,21

OR + Lop.HCl 1 mg/kg bb 0,12 0,14

OR + EEDCH 50 mg/kg bb 0,22 0,21

OR + EEDCH 100 mg/kg bb 0,12 0,15

Perlakuan Hewan Jumlah Rata-rata

1 2 3 4 5

OR + CMC 1% bb _{7 6 8 7 7 35 7,0}

OR + Loperamid HCl

1 mg/kg bb 3 3 4 4 3 17 3,4

OR + EEDCH 50

mg/kg bb 5 7 6 5 6 30 6

OR + EEDCH 100

mg/kg bb 3 4 4 3 4 18 3,6

OR + EEDCH 150

mg/kg bb 2 3 3 2 2 12 2,4

Keterangan:

OR : Oleum ricini

EEDCH : Ekstrak etanol daun cincau hijau

Lampiran 18. Hasil pengamatan lama terjadinya diare setelah pemberian oleum ricinis

Keterangan:

OR : Oleum ricini

EEDCH :Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau

Lampiran 25. Hasil Analisis Statistik Duncan

Perlakuan

Hewan

Jumlah Rata-rata

1 2 3 4 5

T2-T1 T2-T1 T2-T1 T2-T1 T2-T1

OR + CMC

1% bb 303 299 276 284 302 1464 292,8

OR +Loperamid

HCl 1 mg/kg bb 170 182 158 180 165 855 171

OR + EEDCH

50 mg/kg bb 261 298 272 245 274 1350 270

OR + EEDCH

100 mg/kg bb 180 187 190 172 182 911 182,2

OR + EEDCH

Saat mulai terjadinya diare waktudiare

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

CMC 5 57.00

dosis 50 5 64.80

loperamid 5 99.00

dosis 100 5 99.80

dosis 150 5 114.60

Sig. .284 .911 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Konsistensi feses (diameter serapan air) berlendir

diameter

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2

dosis150 5 2.0800

loperamid 5 2.2200

dosis 100 5 2.2960

CMC 5 2.9200

dosis50 5 2.9740

Sig. .071 .622

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

diameter

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

dosis150 5 1.0400

loperamid 5 1.0500

dosis 100 5 1.0902

dosis50 5 1.1920

CMC 5 1.4080

Sig. .299 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

normal diameter

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2

dosis150 5 .1000

loperamid 5 .1200

dosis 100 5 .1200

dosis50 5 .2200

CMC 5 .2400

Sig. .579 .557

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Berlendir berat

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

dosis150 5 2.0400

loperamid 5 2.3220

dosis100 5 2.3500

dosis50 5 3.0860

CMC 5 3.1020

Sig. 1.000 .811 .892

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

lembek beratfeses

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

loperamid 5 .8780

dosis150 5 .8940

dosis100 5 .9620

dosis50 5 1.1260

CMC 5 1.4960

Sig. .190 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

berat

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2

loperamid 5 .1440

dosis150 5 .1460

dosis100 5 .1540

dosis50 5 .2100

CMC 5 .2140

Sig. .661 .852

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Frekuensi diare frekuensi

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

dosis 150 5 2.40

dosis 100 5 3.20

loperamid 5 3.40

dosis 50 5 5.60

CMC 5 7.00

Sig. 1.000 .582 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Lamaterjadidiare

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

Tukey HSDa dosis 150 5 99.20

loperamid 5 171.00

dosis 100 5 182.20

dosis 50 5 270.00

CMC 5 292.80

Sig. 1.000 .608 .056

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Waktu diare berlendir

waktu

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

dosis50 5 81.100

CMC 5 100.160

loperamid 5 104.500 104.500

dosis100 5 107.400 107.400

dosis150 5 116.600

Sig. 1.000 .285 .080

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

waktu

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

dosis150 5 164.500

dosis100 5 175.400

loperamid 5 177.700

dosis50 5 213.240

CMC 5 249.040

Sig. .405 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

normal waktu

Duncana

kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

dosis150 5 214.400

loperamid 5 270.000

dosis100 5 282.000

dosis50 5 334.800

CMC 5 349.400

Sig. 1.000 .234 .151

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

DAFTAR PUSTAKA

Ahmadu, A.A. (2007). Anti-Diarrheal Activity of the Leaf Extracts of Daniella oliveri. Afcrican Journal of Traditional, Complementary and Alternative Medicines. 4(4): 524.

Anief, M. (1999). Ilmu Meracik Obat, Teori Dan Praktik. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Halaman 107,169.

Budi, N., Nugroho., dan Sundari, Dian. (2006). Efek Antidiare Jus Temu Putih (Curcuma zedoaria Rosc.) dan Temu Mangga (Curcuma mangga Val. Et. Zipp.) pada Tikus Putih. Media Litbang Kesehatan. 1(16): 29-34.

Budiarti, S. (1997). Attachment to the Hep-2 cells and diversity of Escherichia coli serotype O isolates enterophatogenic Indonesia. Jurnal Berkala Ilmu Kedokteran. 4(29): 106.

Clinton, C.N.D. (2009). Plant tannins: A novel approach to the treatment of ulcerative colitis. Natural Medicine Journal. 2(13): 1-3.

Depkes RI. (1979). Materia Medika Indonesia. Jilid III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 155-171.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Edisi Keenam. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 300-306, 323-325.

Depkes RI. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 9,33,649,696.

Di Carlo, G., Autore, G., Izzo, A.A., Maiolino, P., Mascolo, N., Viola, P., Diurno, M.V., dan Capasso, F. (1993). Inhibition of Intestinal Motility and Secretory by Flavonoids in Mice and Rats: Structure Activity Relationships. Journal of Pharmacy and Pharmacology. 45(12): 1054-1059.

Farnsworth, N.R. (1966). Biologycal and Phytochemical Screening of Plants. Journal of Pharmaceutical Science. 55(3): 262-264.

Fauci, A.S. (2008). Harrison’s principle of internal medicine. Edisi XVII. USA: Mc Graw Hill. Halaman 249-250.

Friedman, S.L., Kenneth, Mc R.Q., Grendell, J.H. (2003). Current Diagnostic & Treatment in Gastroenterology. Edisi II. USA: Mc Graw Hill. Halaman 301-308.

Goodman, S.L., dan Gilman, A. (1996). The Pharmacological Basis of Therapeutics. Edisi kesembilan. USA: Mc Graw-Hill. Halaman 927.

Harbone, J.B. (1987). Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan. Penerjemah Kosasih Padmawinata. Edisi Kedua. Bandung: ITB Press. Halaman 147-148, 281.

Harmida, Vivin, F.Y., dan Sarno. (2011). Studi Etnofitomedika di Desa Lawang Agung Kecamatan Mulak Ulu Kabupaten Lahat Sumatera Selatan. Jurnal Penelitian Sains. 14(1): 14, 110.

Ikawati, Z. (2008). Pengantar Farmakologi Molekuler. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Halaman 50, 78-81.

Jeejeebhoy, K. N. (1977). Symposium on Diarrhea Definition and Mechanisms of diarrhea. Scientific Section. CMA Journal. 24(116): 737-739.

Kumar, R. (1983) Chemical and Biochemical Nature of Fodder Tree Tannins. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 31(17): 1364-1366.

Lutterodt, G.D. (1989). Inhibition of Gastrointestinal Release of Acetylcholine by Quercetin as a Possible Mode of Action of Psidium guajava leaf Extracts in the Treatment of Acute Diarrhea Disease. Journal Ethnopharmacology. 8(23): 235-247.

McPhee, S.J., Papadakis, M.A. (2007). Current Medical Diagnosis & Treatment. Edisi XLVI. USA: Mc Graw Hill. Halaman 559-560.

Nurdjanah, N. dan Christina, W. (2005). Peluang Tanaman Rempah dan Obat Sebagai Sumber Pangan Fungsional. Jurnal Litbang Pertanian. 24(2): 47-55.

Otshudi, L.A., Vercruysse, A., dan Foriers A. (2000). Contribution to the Ethnobotanical, Phytochemical and Pharmacological Studies of Traditionally Used Medicinal Plant in the Treatment of Dysentery and Diarrhea in Lomela Area, Democratic Republik of Congo (DRC), Journal of Ethnopharmacology. 71(3): 411-23.

Prasetyo, D., dan Fadlyana, E. (2004). Hubungan Antara Pemberian Air Susu Ibu dan Kejadian Diare pada Masa Bayi. Majalah Kedokteran Bandung. 2(36): 3.

Rachmini, M. (2001) Mempelajari Efek Penghambatan Ekstrak Tanaman Cincau Hijau (Cyclea barbata L.Miers) terhadap Reaksi Alergi pada Mencit. Skripsi. Bogor: Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor. Halaman 7-9.

Robert, M.K., dan Nelson, W.E. (2007). Nelson textbook of pediatrics.Edisi XVIII. Philadelphia: Sauders. Halaman 1613-1616.

Sari., L.O.R.K. (2006). Pemanfaatan Obat Tradisional Dengan Pertimbangan Manfaat dan Keamanan. Majalah Ilmu Kefarmasian. 3(1): 1-7.

Tjay, H.T., dan Rahardja, K. (2007) Obat-Obat Penting, Khasiat, Penggunaan dan Efek Sampingnya, Edisi Keempat. Jakarta: PT. Elex Media Computindo. Halaman 288-289, 296-297.

WHO. (1992). Quality Control Methods For Medical Plant Materials. Geneva: World Health Organization. Halaman 31-33.

Winda G.E. (2010). Uji Efek Antidiare Ekstrak Etanol Kulit Batang Salam (Syzygium polyanthum (Wight) Walp.) Terhadap Mencit Jantan. Medan. Fakultas Farmasi USU. Halaman 8-12, 45-50.

BAB III

METODE PENELITIAN

Penelitian ini dilakukan secara eksperimental berdasarkan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Penelitian meliputi pengumpulan sampel, identifikasi sampel, pengolahan sampel, karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak, penyiapan hewan percobaan, dan pengujian efek antidiare secara oral pada tikus. Data hasil penelitian dianalisis secara ANAVA (analisis variansi) dan dilanjutkan dengan uji beda rata-rata Duncan menggunakan program SPSS versi 17.

3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat

Alat-alat gelas, pisau, lemari pengering, seperangkat alat maserasi, seperangkat alat destilasi, oven listrik (Fischer scientific), neraca hewan (Presica Geniweigher GW-1500), neraca listrik (Vibra AJ), ayakan, pipet tetes, desikator (Fischer Scientific), mortir dan stamper, krus porselin, kaca objek (object glass), kaca penutup (deck glass), rotary evaporator, blender (National), cawan porselen, cawan porselen berdasar rata, alumunium foil, kertas saring, spatula, stopwatch, kandang hewan, oral sonde, pot plastik, wadah pengamatan.

3.1.2 Bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi bahan baku dan bahan kimia. Bahan yang digunakan adalah daun cincau hijau, minyak jarak, CMC Na, Loperamid HCl (tablet Imodium®), kloralhidrat, toluen, kloroform, asam klorida 2N, besi (III) klorida, natrium hidroksida, timbal (II) asetat, asam

asetat anhidrat, asam asetat pekat, natrium klorida, kalium iodida, iodium, α -naftol, asam nitrat, bismuth nitrat, etil asetat, isopropanol, natrium sulfat anhidrat, serbuk seng, serbuk magnesium, metanol, eter, etanol 96 %, air suling.

3.2 Pembuatan Pereaksi 3.2.1 Pereaksi mayer

Dilarutkan 1,36 g raksa (II) klorida P dalam 60 ml air, tambahkan pada larutan 5 g larutan kalium iodida P dalam 10 ml air, dilarutkan dalam air suling hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.2.2 Pereaksi dragendroff

Dilarutkan 8 g bismuth nitrat P dilarutkan asam nitrat 20 ml kemudian dicampur dengan larutan kalium iodida 27,2 g dalam 50 ml air suling. Campuran didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan jernih diambil dan diencerkan dengan air secukupnya hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.2.3 Pereaksi bouchardat

Dilarutkan 2 g iodium P dan 4 g kalium iodida P dalam air secukupnya hingga diperoleh 100 ml larutan (Depkes RI, 1995).

3.2.4 Pereaksi molish

Dilarutkan 3 g α-naftol dalam asam nitrat 0,5 N secukupnya hingga

diperoleh 100 ml larutan (Depkes RI, 1995). 3.2.5 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1%

Dilarutkan 1 g besi (III) klorida dalam air suling hingga diperoleh 100 ml larutan kemudian disaring (Depkes RI, 1995).

Dilarutkan 15,17 g timbal (II) asetat dengan air suling bebas CO2 hingga diperoleh 100 ml larutan (Depkes RI, 1995).

3.2.7 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2 N

Dilarutkan 8,001 g natrium hidroksida dalam air suling hingga diperoleh 100 ml larutan (Depkes RI, 1995).

3.2.8 Larutan pereaksi kloralhidrat

Dilarutkan 50 g kloralhidrat P dalam 20 ml air (Depkes RI, 1995). 3.2.9 Larutan pereaksi asam sulfat 2 N

Sebanyak 10 ml asam sulfat pekat diencerkan dengan air suling hingga diperoleh 100 ml larutan (Depkes RI, 1979).

3.2.10 Larutan pereaksi asam klorida 2 N

Sebanyak 17 ml asam klorida pekat diencerkan dengan air suling hingga diperoleh 100 ml larutan (Depkes RI, 1979).

3.3 Pengumpulan dan Pengolahan Sampel 3.3.1 Pengumpulan sampel

Pengumpulan tumbuhan dilakukan secara purposif, yaitu berdasarkan pertimbangan peneliti. Pengambilan tumbuhan dilakukan dengan memilih daun yang telah dewasa dan tanpa membandingkan dengan daerah lain. Tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah cincau hijau (Cyclea barbata L.Miers) yang diambil dari Dipokusumo Farm di Rasamala, Semarang, Jawa Tengah.

3.3.2 Identifikasi sampel

Determinasi sampel dilakukan di Pusat Penelitian Biologi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor.

3.3.3 Pengolahan tumbuhan

Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah daun cincau hijau yang masih segar. Daun dicuci sampai bersih dan ditiriskan, kemudian ditimbang sebagai berat basah. Daun kemudian dikeringkan pada lemari pengering pada temperatur ± 40oC hingga kering. Setelah kering, simplisia diserbuk hingga halus menggunakan blender. Disimpan dalam wadah plastik yang tertutup rapat.

3.4 Pemeriksaan Karakteristik

Dilakukan pemeriksaan karakteristik simplisiadaun cincau hijau yang meliputi pemeriksaan makroskopik, mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari yang larut dalam air, penetapan kadar sari yang larut dalam etanol, penetapan kadar abu total dan penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam (Depkes RI, 1995; WHO, 1992).

3.4.1 Makroskopik

Pemeriksaan makroskopik dilakukan terhadap simplisia daun cincau hijau meliputi bentuk, bau, warna dan rasa.

3.4.2 Mikroskopik

Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia daun cincau hijau. Serbuk simplisia ditabur diatas kaca objek yang telah ditetesi dengan klorahidrat dan ditutup dengan kaca penutup kemudian diamati di bawah mikroskop.

3.4.3 Penetapan kadar air

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluen). Alat terdiri dari alas bulat 500 ml, alat penampung, pendingin, tabung penyambung, dan tabung penerima 10 ml.

a. Penjenuhan toluen

Sebanyak 200 ml toluena dan 2 ml air suling dimasukkan ke dalam labu alas bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml.

b. Penetapan kadar air

Ke dalam labu tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama, labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes untuk tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO, 1992).

3.4.4 Penetapan kadar sari larut air

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling 1000 ml) dalam labu bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, dibiarkan selama 18 jam,

kemudian disaring. Diuapkan 20 ml filtrat sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).

3.4.5 Penetapan kadar sari larut etanol

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Kemudian disaring, 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan berdasar rata yang telah ditara dan sisanya dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar sari larut dalam etanol dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).

3.4.6 Penetapan kadar abu total

Sebanyak 2 g serbuk simplisia ditimbang seksama dimasukkan dalam krus platina atau krus silikat yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pemijaran dilakukan pada suhu 600oC selama 3 jam. Kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).

3.4.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam

Abu yang telah diperoleh dalam penetapan abu didinginkan dengan 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring dengan kertas masir atau kertas saring bebas abu, cuci dengan air panas, dipijarkan sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan

ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bobot yang dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).

3.5 Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia serbuk simplisia daun cincau hijau meliputi: pemeriksaan senyawa golongan alkaloid, flavonoid, glikosida, tanin, saponin dan steroid/triterpenoid (Depkes RI, 1995).

3.5.1 Pemeriksaan alkaloida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat yang diperoleh dipakai untuk uji alkaloida: diambil 3 tabung reaksi, lalu kedalamnya dimasukkan 0,5 ml filtrat.

Pada masing-masing tabung reaksi; 1. ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer 2. ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat 3. ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff

Alkaloida positif jika terjadi endapan atau kekeruhkan pada paling sedikit dua dari tiga percobaan diatas (Depkes RI, 1995).

3.5.2 Pemeriksaan flavonoid

Sebanyak 10 g serbuk simplisia ditambahkan 100 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas. Filtrat yang diperoleh kemudian diambil 5 ml lalu ditambahkan 0,1 g serbuk Mg dan 1 ml HCl pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok, dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah, kuning, jingga pada lapisan amil alkohol (Fransworth, 1966).

3.5.3 Pemeriksaan glikosida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 3 g, lalu disari dengan 30 ml campuran etanol 95% dengan air (7:3) dan 10 ml asam klorida 2 N, direfluks selama 2 jam, didinginkan dan disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4M, dikocok, didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:3), dilakukan berulang sebanyak 3 kali. Sari air dikumpulkan dan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 50٥C. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sisa digunakan untuk percobaan berikut: 0,1 ml larutan percobaan dimasukan dalam tabung reaksi dan diuapkan diatas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molish. Kemudian secara perlahan-lahan ditambahkan 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuknya cincin berwarna ungu pada batas kedua cairan menunjukkan ikatan gula (Depkes RI, 1995).

3.5.4 Pemeriksaan tanin

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia disari dengan 10 ml air suling lalu disaring, filtratnya diencerkan sampai tidak berwarna. Larutan diambil sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi warna biru kehitaman atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Harbone, 1987). 3.5.5 Pemeriksaan saponin

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia dimasukkan kedalam tabung reaksi ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudian dikocok selama 10 detik. Jika terbentuk buih yang mantap setinggi 1-10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan satu tetes asam klorida 2 N menunjukkan adanya saponin (Depkes RI, 1995).

3.5.6 Pemeriksaan steroid/triterpenoid

Sebanyak 1 g serbuk simplisia dimaserasi dengan 20 ml eter selama 2 jam, disaring, filtrat diuapkan dalam cawan penguap dan pada sisanya ditambahkan 2 tetes pereaksi Lieberman-Bourchard. Apabila terbentuk warna ungu atau merah yang berubah menjadi biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroid/triterpenoid (Depkes RI, 1995).

3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau

Pembuatan ekstrak daun cincau hijau dilakukan secara maserasi menggunakan etanol 96% (Depkes RI, 1979).

Cara kerja:

Sebanyak 500 g serbuk simplisia daun cincau hijau dimasukkan ke dalam wadah kaca berwarna gelap, kemudian dituangi dengan 1500 ml etanol 96%. Ditutup dan dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk, diserkai dan diperas. Ampas dicuci dengan 1500 ml etanol 96%, dipindahkan ke dalam bejana tertutup, dibiarkan di tempat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari, selanjutnya disaring. Maserat etanol yang diperoleh diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator pada temperatur ± 40oC sampai diperoleh ekstrak kental (Depkes RI, 1979).

3.7 Percobaan Efek Antidiare

Percobaan efek antidiare meliputi penyiapan hewan percobaan, penyiapan bahan uji, kontrol, obat pembanding (Loperamid HCl), induktor diare (oleum ricini), dan pengujian efek antidiare.

3.7.1 Penyiapan hewan coba

Hewan percobaan yang digunakan adalah tikus jantan putih dengan berat badan 160-200 g sebanyak 25 ekor, dibagi dalam 5 kelompok dimana setiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus.

Dua minggu sebelum pengujian dilakukan hewan percobaan harus dipelihara dan dirawat dengan sebaik-baiknya pada kandang yang mempunyai ventilasi baik dan selalu dijaga kebersihannya. Hewan yang sehat ditandai dengan pertumbuhan normal dan suhu badan normal (Depkes RI, 1979).

3.7.2 Penyiapan bahan

Bahan yang digunakan meliputi suspensi CMC Na sebagai kontrol, suspensi Loperamid HCl (Imodium®) sebagai pembanding, suspensi ekstrak etanol daun cincau hijau sebagai bahan uji dan oleum ricini sebagai induktor diare.

3.7.2.1 Pembuatan suspensi CMC Na 1% (b/v)

Sebanyak 1 g CMC Na ditaburkan kedalam lumpang yang berisi air suling panas sebanyak 20 ml, ditutup dan dibiarkan selama 30 menit hingga diperoleh massa yang transparan, digerus lalu diencerkan dengan air suling hingga 100 ml (Anief M, 1999).

3.7.2.2 Pembuatan suspensi Loperamid HCl dari tablet Imodium®

Tablet Imodium mengandung 2 mg Loperamid HCl, ditimbang sebanyak 20 tablet. Tablet digerus dan diambil serbuk sebanyak 28,15 mg. Serbuk dimasukkan kedalam lumpang, kemudian ditambahkan suspensi CMC 1% sedikit demi sedikit sambil digerus homogen lalu diencerkan dengan suspensi CMC 1% hingga 25 ml hingga diperoleh konsentrasi 1,126 mg/ml.

3.7.2.3 Pembuatan suspensi Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau konsentrasi 4% (b/v)

Ekstrak etanol daun cincau ditimbang sebanyak 1 g, kemudian digerus di dalam lumpang, lalu ditambahkan CMC Na 1% sedikit demi sedikit lalu diencerkan dengan CMC Na1% sampai 25 ml.

3.7.3 Pengujian efek antidiare

Dosis ekstrak etanol daun cincau hijau ditentukan berdasarkan orientasi pada hewan percobaan terhadap parameternya. Dosis yang digunakan yaitu dosis, 25, 50, 75, 100, 125, 150 mg/kg bb. Hasil orientasi dipilih variasi dosis sebanyak tiga dosis. Dosis I 50 mg/kg bb, dosis II 100 mg/kg bb dan dosis III 150 mg/kg bb. Sebagai pembanding suspensi Loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb dan kontrol suspensi CMC Na1%.

Tikus yang telah dipuasakan 18 jam sebelum penelitian, dikelompokkan menjadi 5 kelompok dan kemudian diberikan oleum ricini sebanyak 2 ml setiap ekornya (Budi, et.al., 2006). Satu jam setelah pemberian oleum ricini masing-masing kelompok diberi perlakuan yaitu kelompok kontrol diberikan suspensi CMC dosis 1% bb, kelompok pembanding diberikan suspensi Loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb dan kelompok bahan uji diberikan suspensi EEDCH yang terdiri dari tiga dosis yaitu 50, 100 dan 150 mg/kg bb,lalu tikus ditempatkan dalam wadah pengamatan. Pengamatan dimulai 30 menit setelah pemberian oleum ricini dilakukan selama 6 jam. Parameter yang diamati meliputi saat mulai terjadi defekasi, lama terjadinya defekasi, konsistensi feses dan frekuensi defekasi.

Saat mulai terjadi diare diamati setelah pemberian EEDCH dan feses keluar dengan kosistensi berlendir. Lama terjadinya diare ditentukan dari saat

tikus mulai diare dengan konsistensi berlendir sampai konsitensi kembali normal. Konsistensi feses dibagi tiga kelompok yaitu : berlendir, lembek dan normal. Ketiga kelompok tersebut ditentukan dengan melihat diameter dan berat feses. Frekuensi feses ditentukan dengan menghitung jumlah total diare selama waktu pengamatan (Winda, 2010).

3.8 Pengumpulan Data

Data yang diperoleh kemudian dirata-ratakan untuk masing-masing kelompok dan nilai dari masing-masing kelompok tersebut dibandingkan.

3.9 Analisis Data

Data hasil pengamatan konsistensi feses dianalisis secara statistik dengan metode analisis variansi (ANAVA) pada tingkat kepercayaan 95% dilanjutkan dengan uji beda rata-rata Duncan untuk melihat perbedaan nyata antar kelompok perlakuan. Analisis statistik ini menggunakan program SPSS (Statistical Product and Service Solution) versi 17.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Sampel

Identifikasi sampel yang dilakukan di Herbarium Bogoriense, Bidang Botani Pusat, Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor menunjukkan bahwa sampel adalah benar daun cincau hijau (Cyclea barbata L.Mier). Hasil identifikasi sampel dapat dilihat pada Lampiran 1 halaman 37.

4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia 4.2.1 Pemeriksaan makroskopik

Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia daun cincau hijau adalah daun berwarna hijau kecoklatan berbentuk jantung, panjang daun 5,5 cm sampai 9 cm,lebar daun 5,5 cm sampai 9,5 cm. Ujung daun runcing, tepi daun tidak rata, berambut halus, pangkal daun tumpul, tangkai daun panjang nya 2,5 cm sampai 4,5 cm.

4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik

Daun cincau hijau pada penampang melintang melalui tulang daun tampak epidermis atas terdiri dari satu lapis sel berbentuk empat persegi panjang, kutikula tipis, rambut penutup terdiri dari satu sel berbentuk kerucut panjang. Epidermis bawah terdiri dari satu lapis sel, kutikula tebal, rambut penutup terdiri dari satu sel berbentuk kerucut panjang, lebih banyak daripada epidermis atas. Mesofil meliputi jaringan palisade terdiri dari dua lapis sel, batas lapisannya tidak jelas. Jaringan bunga karang terdiri dari beberapa lapis sel berbentuk tidak beraturan,

banyak rongga udara. Berkas pembuluh tipe korateral. Pada epidermis bawah terdapat stomata tipe anomositik.

4.2.3 Pemeriksaan karakteristik

Karakteristik serbuk simplisia daun cincau hijau yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 4.1, dan hasil perhitungan karakterisasi dapat dilihat pada Lampiran 5 halaman .

Tabel 4.1 Hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun cincau hijau

Berdasarkan hasil pada tabel di atas, karakteristik simplisia daun cincau hijau memenuhi persyaratan umum pada Materia Medika Indonesia (MMI).

Tujuan dari penetapan kadar air adalah untuk mengetahui besarnya kandungan air dalam simplisia. Hal ini terkait dengan kemurnian dan adanya kontaminan dalam simplisia tersebut. Penghilangan kadar air hingga jumlah tertentu berguna untuk memperpanjang daya tahan selama penyimpanan. Penetapan kadar sari larut air dilakukan untuk mengetahui banyaknya sari larut dalam pelarut air. Senyawa-senyawa yang dapat larut dalam air adalah glikosida, gula, gom, protein, enzim, zat warna, dan asam organik. Penetapan kadar sari larut etanol digunakan untuk mengetahui banyaknya sari terlarut dalam pelarut polar. Senyawa-senyawa yang dapat larut dalam etanol adalah glikosida, steroida, flavonoida, klorofil, dan dalam jumlah sedikit yang larut yaitu lemak. Penetapan

No. Karakteristik Hasil(%) MMI

1. 2. 3. 4. 5. Kadar air

Kadar sari larut air Kadar sari larut etanol Kadar abu total

Kadar abu tidak larut asam

5,2 20,63 17,24 14,28 0,54 <10% >18% >6,3% <10% <2,6%

kadar abu merupakan cara untuk mengetahui sisa yang tidak menguap dari suatu simplisia pada pembakaran. Pada penetapan kadar abu total, abu dapat berasal dari bagian jaringan tanaman sendiri atau pengotor lain misalnya pasir atau tanah. (Depkes RI, 1979).

4.3 Hasil Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia dilakukan terhadap serbuk simplisia daun cincau hijau yang hasilnya menunjukkan bahwa daun cincau hijau mengandung senyawa kimia golongan flavanoida, glikosida, tanin dan triterpenoid.

Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia daun cincau hijau

No. Pemeriksaan Hasil

1 Alkaloida +

+ + - + + 2 Flavanoida

3 Glikosida 4 Saponin

5 Tanin

6 Steroida/Triterpenoida Keterangan:

(+) positif : mengandung golongan senyawa (-) negatif : tidak mengandung golongan senyawa

4.4 Hasil Pengujian Efek Antidiare

Pengujian efek antidiare dari suspensi ekstrak etanol daun cincau hijau (EEDCH) diawali dengan melakukan orientasi dosis. Dosis orientasi yang digunakan yaitu dosis 25, 50, 75, 100, 125 dan 150 mg/kg bb. Dari keenam dosis yang diuji, dosis 50, 100, 150 mg/kg bb dipilih untuk digunakan dalam penelitian karena memberikan efek terhadap penurunan diare. Sedangkan dosis 25 mg/kg bb

tidak digunakan dalam penelitian karena tidak memberikan efek yang signifikan terhadap penurunan diare.

Tikus yang telah dipuasakan 18 jam sebelum penelitian, dikelompokkan menjadi 5 kelompok dan kemudian diberikan oleum ricini sebanyak 2 ml setiap ekornya. Satu jam setelah pemberian oleum ricini masing-masing kelompok diberi perlakuan yaitu kelompok kontrol diberikan suspensi CMC dosis 1% bb, kelompok pembanding diberikan suspensi Loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb dan kelompok bahan uji diberikan suspensi EEDCH yang terdiri dari tiga dosis yaitu 50, 100 dan 150 mg/kg bb. Penentuan efek antidiare dari ekstrak etanol daun cincau hijau dilakukan dengan cara mengamati saat mulai terjadinya diare, konsistensi feses, frekuensi diare dan lama terjadinya diare.

4.4.1 Penentuan saat mulai terjadinya diare

Saat mulai terjadi diare diamati setelah pemberian EEDCH dan feses keluar dengan konsistensi berlendir. Hubungan antara dosis dan rata-rata waktu mulai terjadinya diare pada hewan uji setelah pemberian EEDCH sebagai antidiare dapat dilihat pada Tabel 4.3.

Tabel 4.3 Hasil data saat mulai terjadinya diare

Keterangan:

OR : Oleum Ricini

EEDCH : Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau

Kel Perlakuan Saat mulai terjadinya diare (menit ke-)±SD

1 OR + CMC 1% bb 57 ± 2,0

2 OR + Loperamid. 1 mg/kg bb 99 ± 13,93

3 OR + EEDCH50 mg/kg bb 64,8 ± 13,03

4 OR + EEDCH 100 mg/kg bb 99,8 ± 15,39

Pada pemberian CMC diperoleh waktu saat mulai diare pada menit 57±2,0, namun setelah pemberian EEDCH dengan dosis yang bervariasi terlihat adanya perubahan waktu mulai terjadinya diare. Hal ini memperlihatkan bahwa EEDCH dosis 150 mg/kg bb (114,6 ± 4,83) memiliki waktu mulai terjadi diare paling la1ma dibandingkan dengan EEDCH dosis 100 mg/kg bb (99,8 ± 15,39) dan dosis 50 mg/kg bb (64,8 ± 13,03). Grafik saat mulai terjadi diare dapat dilihat pada gambar 4.1 di bawah ini:

Gambar 4.1 Grafik saat mulai terjadi diare

Dari Gambar 4.1 dapat dilihat perbedaan grafik dari masing-masing kelompok perlakuan. Pemberian loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb menyebabkan perubahan waktu yang sangat berarti yaitu pada menit 99 ± 13,93, sehingga waktu mulai terjadinya diare lebih lama dibanding dengan EEDCH dosis 50 dan 100 mg/kg bb. Berdasarkan uji statistik ANAVA (P < 0,05) dilanjutkan uji beda rata-rata Duncan, EEDCH dosis 100 mg/kg bb tidak berbeda signifikan dengan loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb, tetapi berbeda signifikan terhadap kelompok dosis 150 mg/kg bb. Sedangkan jika dibandingkan dengan kelompok kontrol, semua kelompok EEDCH memberikan perbedaan yang signifikan (P > 0,05).

0 20 40 60 80 100 120 140

CMC 1% bb Lop. HCl 1 mg/kg bb EEDCH 50 mg/kb bb EEDCH 100 mg/kg bb EEDCH 150 mg/kg bb w a k tu ( m e n it)

Sampel uji dinyatakan memiliki efek antidiare, jika waktu mulai terjadi diare yang diperoleh lebih lama daripada kontrol dan semakin cepat terjadinya diare maka efek antidiare akan semakin lemah. Hasil penentuan saat mulai terjadinya diare dapat dilihat pada analisis Duncan Lampiran 24 halaman .

4.4.2 Penentuan konsistensi feses

Penentuan konsistensi feses dilakukan dengan cara melihat bentuk feses yang terjadi, dapat dikategorikan ke dalam tiga kelompok yaitu konsistensi berlendir (BL) dengan diameter serapan air lebih besar dari 2 cm, konsistensi lembek (L) dengan diameter serapan air antara 1-2 cm dan konsistensi normal (N) dengan diameter serapan air lebih kecil dari 1 cm (Winda, 2010).

Tabel 4.4 Hasil data diameter serapan air

Tabel 4.5 Hasil data berat feses

Keterangan:

OR : Oleum Ricini

EEDCH : Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau

Kel Perlakuan

Diameter serapan air berlendir

(cm) ± SD

lembek (cm) ± SD

normal (cm) ± SD 1 OR + CMC 1% bb 2,92 ± 0,64 1,42 ± 0,34 0,24 ± 0,05 2 OR + Loperamid 1 mg/kg bb 2,27 ± 0,27 1,05 ± 0,08 0,12 ± 0,04 3 OR + EEDCH 50 mg/kg bb 2,96 ± 0,38 1,19 ± 0,19 0,22 ± 0,08 4 OR + EEDCH 100 mg/kg bb 2,34 ± 0,31 1,09 ± 0,08 0,12 ± 0,04 5 OR + EEDCH 150 mg/kg bb 2,08 ± 0,08 1,04 ± 0,05 0,1 ± 0

Kel Perlakuan

Berat feses berlendir

(g)± SD

lembek (g) ± SD

normal (g) ± SD 1 OR + CMC 1% bb 3,09 ± 0,71 1,51 ± 0,40 0,21 ± 0,02 2 OR + Loperamid 1 mg/kg bb 2,37 ± 0,30 0,88 ± 0,15 0,14 ± 0,04 3 OR + EEDCH50 mg/kg bb 3,08 ± 0,43 1,13 ± 0,30 0,21 ± 0,03 4 OR + EEDCH 100 mg/kg bb 2,38 ± 0,24 0,95 ± 0,18 0,15 ± 0,05

Gambar 4.2 Grafik konsistensi feses

Pada Tabel 4.4, 4.5 dan Gambar 4.2 diatas dapat dilihat hubungan antara dosis, diameter serapan air dan berat feses hewan uji setelah pemberian EEDCH seperti yang terlihat pada Lampiran 15 halaman .

Berdasarkan hasil analisis statistik ANAVA (P < 0,05) dilanjutkan uji beda rata-rata Duncan konsistensi feses berlendir, diameter serapan air yang dihasilkan dosis 150 mg/kg bb, 100 mg/kg bb serta kelompok pembanding memiliki efek berbeda signifikan (P > 0,05) terhadap kelompok dosis 50 mg/kg bb dan kelompok kontrol. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol dan dosis 50 mg/kg bb. Sedangkan pada berat feses yang dihasilkan kelompok dosis 150 mg/kg bb berbeda signifikan (P > 0,05) dengan masing-masing kelompok.

Pada uji beda rata-rata Duncan feses lembek, diameter serapan air dan berat feses yang dihasilkan kelompok kontrol berbeda signifikan terhadap semua kelompok EEDCH dan pembanding. Sedangkan diameter serapan air dan berat

CMC Loperamid EEDCH 50 mg/kg bb EEDCH 100 mg/kg bb EEDCH 150 mg/kg bb 0,21 0,14 _0,21 0,15 0,15 1,51 0,88 1,13 0,95 0,89 3,09 2,37 3,08 2,38 2,04 Normal Lembek Berlendir be rat ( g )

feses kelompok dosis150 mg/kg bb, dosis 100 mg/kg bb dan kelompok pembanding tidak berbeda signifikan.

Hasil uji Duncan feses normal, diameter serapan air yang dihasilkan kelompok kontrol dan dosis 50 mg/kg bb berbeda signifikan terhadap kelompok pembanding, dosis 100 mg/kg bb dan 150 mg/kg bb. Dilihat dari berat feses yang dihasilkan, antara kelompok pembanding, dosis 100 dan 150 mg/kg bb tidak berbeda signifikan, demikian juga antara kelompok dosis 50 dengan kelompok kontrol.

Dari uraian di atas, semakin besar diameter serapan air maka feses yang terbentuk semakin berat maka diare semakin parah dan efek antidiare EEDCH semakin lemah. Hasil penentuan saat mulai terjadinya diare dapat dilihat pada analisis Duncan Lampiran 24 halaman .

EEDCH dosis 150 mg/kg bb dapat membentuk konsistensi feses normal yang berbeda signifikan (P > 0,05) dengan masing-masing kelompok. Dari hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa semakin cepat terbentuk konsistensi feses normal, maka semakin kuat efek anti diare yang dimilikinya.

4.4.3 Penentuan frekuensi diare

Frekuensi diare ditentukan dengan menghitung jumlah total diare tikus selama waktu pengamatan.

Tabel 4.6 Hasil data frekuensi diare

Keterangan:

OR : Oleum Ricini

EEDCH : Ekstrak Daun cincau hijau

Kel Perlakuan frekuensi ± SD

1 OR + CMC 1% bb 7,00 ± 0,00

2 OR + Loperamid. 1 mg/kg bb 3,40 ± 0,55

3 OR +EEDCH50 mg/kg bb 5,60 ± 0,89

4 OR + EEDCH 100 mg/kg bb 3,20 ± 0,45

Hasil pengujian EEDCH menunjukkan adanya perbedaan yang nyata (P > 0,05) terhadap frekuensi diare bila dibandingkan dengan frekuensi yang dihasilkan oleh kelompok kontrol (7,0 ± 0,00 kali). Pemberian dosis 100 mg/kg bb menyebabkan penurunan frekuensi diare (3,20 ± 0,45 kali) yang sebanding dengan kelompok pembanding (3,40 ± 0,55 kali) lebih sedikit daripada kelompok dosis 50 mg/kg bb (5,60 ± 0,89 kali) dan dengan pemberian dosis 150 mg/kg bb frekuensi diare yang ditimbulkan lebih sedikit daripada kelompok pembanding yaitu 2,40 ± 0,55. Grafik frekuensi diare dapat dilihat pada Gambar 4.3 di bawah ini:

Gambar 4.3 Grafik frekuensi diare

Berdasarkan hasil analisis statistik ANAVA (P < 0,05) dilanjutkan uji beda rata-rata Duncan frekuensi diare menunjukkan bahwa kelompok kontrol berbeda signifikan dengan masing-masing kelompok, sedangkan antara kelompok pembanding dan dosis 100 mg/kg bb tidak berbeda secara signifikan Hasil penentuan saat mulai terjadinya diare dapat dilihat pada analisis Duncan Lampiran 24 halaman .

7 3,4 5,6 3,2 2,4 0 1 2 3 4 5 6 7 8

CMC Loperamid Dosis 50 Dosis 100 Dosis 150

F R E KUE NS I

4.4.4 Penentuan lama terjadinya diare

Lama terjadinya diare ditentukan dari saat tikus mulai diare dengan konsistensi berlendir sampai kembali membentuk feses dengan konsistensi normal.

Tabel 4.7 Hasil data lama terjadinya diare

Keterangan:

OR : Oleum Ricini

EEDCH : Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau

Pada Tabel 4.7 dan Gambar 4.4, terlihat hubungan antara dosis dengan lama terjadinya diare pada hewan uji setelah pemberian EEDCH seperti yang terlihat pada Lampiran .

Pemberian oleum ricini dan CMC menghasilkan lama terjadi diare 292,8 ± 12,11 menit, namun setelah pemberian EEDCH dengan dosis yang bervariasi mengakibatkan waktu lama terjadinya diare menjadi berkurang. EEDCH dosis 150 mg/kg bb (99,2 ± 8,81 menit) memiliki waktu lama terjadi diare tersingkat jika dibandingkan kelompok dosis 50 mg/kg bb (270 ± 19,43 menit), dosis 100 mg/kg bb (182,2 ± 6,94 menit) dan kelompok pembanding (292,8 ± 12,11 menit). Grafik waktu lama terjadinya diare dapat dilihat pada Gambar 4.4 di bawah ini:

Kel Perlakuan Lama terjadi diare (menit) ± SD

1 OR + CMC 1% bb 292,8 ± 12,11

2 OR + Loperamid. 1 mg/kg bb 171 ± 10,10

3 OR + EEDCH 50 mg/kg bb 270 ± 19,43

4 OR + EEDCH 100 mg/kg bb 182,2 ± 6,94

Gambar 4.4 Grafik lama terjadi diare

Dari hasil analisis statistik ANAVA (P < 0,05) dilanjutkan uji beda rata-rata Duncan lama terjadinya diare menunjukkan bahwa kelompokdosis 150 mg/kg bb berbeda signifikan (P > 0,05) terhadap masing-masing kelompok sedangkan kelompok kontrol dan dosis 50 mg/kg tidak berbeda secara signifikan. Efek yang ditimbulkan kelompok dosis 100 mg/kg bb dengan pembanding juga tidak berbeda signifikan. Semakin singkat waktu terjadinya diare maka semakin kuat efek antidiare yang dimiliki. Hasil penentuan saat mulai terjadinya diare dapat dilihat pada analisis Duncan Lampiran 24 halaman .

Dari parameter yang telah diamati, efek antidiare dosis 50mg/kg bb mempunyai efektivitas yang lebih lemah dibanding kelompok kontrol lemah (Gambar 4.4); dosis 100 mg/kg bb mempunyai efektifitas yang sebanding atau sama dengan pembanding (Gambar 4.3); dosis 150mg/kg bb (Gambar 4.1) mempunyai efek yang lebih kuat daripada pembanding.

Hasil penelitian terdahulu melaporkan bahwa kandungan senyawa aktif dari beberapa tanaman obat seperti golongan tanin, flavonoid, alkaloid, saponin dan steroid/triterpenoid memiliki khasiat antidiare. Beberapa senyawa turunan

292,8 171 270 182,2 99,2 0 50 100 150 200 250 300 350

CMC Loperamid dosis 50 dosis 100 dosis 150

W AKT U ( M E NI T )

tanin dan flavonoid memiliki aktivitas sebagai antimotilitas, antisekretori dan antibakteri (Otshudi, et.al., 2000). Berdasarkan skrining fitokimia yang dilakukan menunjukkan bahwa daun cincau hijau mengandung tanin. Diduga tanin di dalam sampel inilah yang memberikan aktivitas antidiare. Tanin dapat mengurangi intensitas diare dengan cara menciutkan selaput lendir usus dan mengecilkan pori sehingga akan menghambat sekresi cairan dan elektrolit (Tjay dan Rahardja, 2002). Selain itu, sifat adstringen tanin akan membuat usus halus lebih tahan (resisten) terhadap rangsangan senyawa kimia (toksin bakteri dan castor oil ) yang mengakibatkan diare (Kumar, 1983).

Beberapa penelitian juga telah melaporkan mengenai flavonoid sebagai antidiare. Mekanisme flavonoid dalam menghentikan diare yang diinduksi oleh castor oil adalah dengan menghambat motilitas usus sehingga mengurangi sekresi cairan dan elektrolit (Di Carlo, et.al., 1993). Aktivitas flavonoid yang lain adalah dengan menghambat pelepasan asetilkolin di saluran cerna (Lutterodt, 1989). Penghambatan pelepasan asetilkolin akan menyebabkan berkurangnya aktivasi reseptor asetilkolin nikotinik yang memperantarai terjadinya kontraksi otot polos dan teraktivasinya reseptor asetilkolin muskarinik (khususnya Ach-M3) yang mengatur motilitas gastrointestinal dan kontraksi otot polos (Ikawati, 2008). Efek antisekretori EEDCH kemungkinan juga disebabkan oleh peranan senyawa aktif golongan steroid/triterpenoid yang ada dalam daun cincau hijau. Senyawa ini dapat meningkatkan absorpsi air dan elektrolit dalam usus, sehingga mengakibatkan absorbsi air dan elektrolit dalam usus normal kembali (Goodman dan Gilman, 1996).

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:

1. Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia daun cincau hijau memenuhi syarat MMI dimana kadar air 5,2%, kadar sari larut air 20,63%, kadar sari larut etanol 17,24%, kadar abu total 14,28% dan kadar abu tidak larut asam 0,54%. Hasil skrining fitokimia menunjukkan serbuk simplisia daun cincau hijau mengandung senyawa kimia golongan alkaloida, flavanoida, glikosida, tanin, steroida/triterpenoida.

2. Ekstrak etanol daun cincau hijau dosis 50, 100, dan 150 mg/kg bb mempunyai efek sebagai antidiare yang diberikan pada tikus yang diinduksi dengan oleum ricini menggunakan metode defekasi. Pemberian dosis 100 mg/kg bb menunjukkan efek yang setara dengan obat pembanding loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb.

5.2 Saran

Disarankan pada peneliti selanjutnya untuk mengisolasi senyawa aktif daun cincau hijau yang berkhasiat sebagai antidiare.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan

Di IndonesiacincauhijauyangbernamalatinCycleabarbataMiers banyak ditemui di berbagai tempat, mulai dari pasar tradisional sampaisupermarket.Di beberapadaerah,tanamaninidikenaldengan

namacamcao(Jawa),camcauh(Sunda),juju, kepleng,krotok,tahulu, tarawalu,telor,terungkemau(Melayu).Bagi masyarakatIndonesia cincau hijau dikonsumsi sebagai campuran minuman yang menyegarkan.Ada empatjeniscincauyangdikenalmasyarakat,yaitu cincau hijau, cincau hitam dan cincau minyak serta cincau perdu. Bentukfisikkeempattanamanini sangatberbedasatusamalainnya.

NamunmasyarakatIndonesiaamatmenggemarijeniscincauhijau,hal ini karenafisikdauncincauhijautipisdanlemassehinggalebihmudah diremas untukdijadikan gelatinatauagar-agar. Aromacincauhijau tidak langu. Cincau hijau yang berbentuk agar-agar berasal dari daunnyayangdiremas-remasdandicampurairmatang.Aircampuran

ituakanberwarnahijau.Setelahdisaringdandibiarkanmengendap, akan menghasilkan lapisan agar-agar berwarna hijau (Heny dan Dian, 2004).

2.1.1 Sistematika tumbuhan

Kingdom

Kelas : Dicotyledoneae

Ordo : Ranales

Famili : Menispermae Genus : Cyclea

Spesies :Cyclea barbata L. Miers (Heyne,1987).

2.1.2 Morfologi tumbuhan

Batang tanaman ini bulat, berdiameter ± 1 cm dan merambatkearahkananpadapohoninangsertatinggi/panjang ± 5-16 m. Bentuk daunnya seperti perisai atau jantung, berwarnahijau,bagianpangkalnyaberlekukdan bagiantengah melebar sertaujungnya meruncing. Tepidaunberombak dan permukaan bawahnya berbulu halus,sedang permukaan atasnyaberbulukasardanjarang.Panjangdaunbervariasi±5-16 cmdan bertulangdaunmenjari (Heny dan Dian, 2004)

Dauncincauhijauyang dipanenadalahdaunyangtidaktua dantidakterlalumuda. Pemetikan daunnya harus melihat kondisi tanaman tersebut, Bilatanamanini rimbundansubur,dedaunnyabolehdipanen banyak,tetapibilatanamanini nampakkurusdantidaksubur, makapemetikannyahanyaakanmerusaktanamancincauhijau itu sendiri. Bunga cincau hijau berbentuk kecil dan berkelompok.Bungajantanberwarnahijau mudayang panjangnya ± 30-40 mm dan mempunyai kelopak bunga sebanyak 4-5kelopak. Sedangkan bunga betinanya lebihkecildenganpanjang ±0,7-1,0mmdanmempunyai kelopakbunga sebanyak 1-2 kelopak serta sebuah

kelopak yang berbulu. Benangsari mempunyaisatutangkaidengankepalasari bergeromboldiujungnya.Setiapkepalasarimempunyaiempat sel yangakanpecahdengansendirinyajika sudahmasak.Buah tanamancincauhijaukecil-kecil,berbentukbulat dan agak berbulu.Setiapbuahmengandung1-2 bijiyangkerasberbentuk bulattelur.Akarcincauhijau dapattumbuhmembesarseperti umbidenganbentuktidakteratur.Dalamkeadaansegar,akar ini berdagingdanmengandungbanyakcairan.Padaakaryang

sudahkering,warnakulitluarnya berubah menjadi coklatke abu-abuan,mempunyaisisir-sisiryang membujur dan terlihatmenonjol (Taryono, 2003).

2.1.3 Kandungan Kimia Tumbuhan

Secaraumumkandungandauncincauhijau adalah karbohidrat, lemak, protein dan senyawa-senyawa lainnya sepertiPolifenol,Flavonoidsertamineral-mineral danvitamin- vitamin,diantaranyaKalsium, Fosfor dan Vitamin A serta Vitamin B (Hatta, 1995)

2.1.4 Kegunaan Kandungan Tumbuhan 2.1.4.1. Polifenol

Polifenol merupkan senyawa turunan fenol yang mempunyai aktivitas sebagaiantioksidan. Antioksidan fenolikbiasanyadigunakanuntuk mencegahkerusakan akibatreaksioksidasipada makanan,kosmetikdan farmasi serta plastik. Fungsi polifenol sebagai penangkap danpengikat radikal bebas darirusaknya ion-ionlogam.Kelompoktersebutsangat mudahlarut dalamair dan lemaksertadapat bereaksidengan

vitaminCdanvitaminE.Kelompok-kelompoksenyawafenolikterdiridariasam-asam fenolat dan flavonoid.Fenolmerupakanzat antioksidandarigolongan antioksidasipemutusrantaiyang akan memotong perbanyakanreaksi berantaisehinggaakan mengendalikan dan mengurangi peroksidasi lipid manusiadimanaperoksidasilipid merupakanreaksi rantaidenganberbagaiefek

yangberpotensialmerusak danjugamerupakan

sumberradikalbebas.Efekdariradikalbebas adalah perusakanjaringanin vivosehinggamenimbulkan penyakitkanker,proses penuaan,peradangan, aterosklerosisdan lain sebagainya (Raharjo, 2004).

2.1.4.2. Flavanoid

Senyawaflavonoidmempunyaiikatangula yang disebut aglikon yang berikatan dengan berbagai gula dansangatmudahterhidrolisis ataumudahlepasdari gugus gulanya.Flavonoidmerupakanantioksidanyang potensialuntuk mencegahpembentukanradikalbebas. Senyawatersebut mempunyai sifat anti bakteri dananti viral (Raharjo, 2004)

2.1.4.3 Glikosida

Glikosida adalah suatu senyawa, bila dihidrolisis akan terurai menjadi gula (glikon) dan senyawa lain (aglikon atau genin). Glikosida yang gulanya berupa glukosa disebut glukosida. Glikosida dibedakan menjadi α- glikosida dan β -glikosida. Pada tanaman, glikosida biasanya terdapat dalam bentuk beta. Pembagian glikosida paling banyak berdasarkan aglikonnya. Umumnya glikosida mudah terhidrolisis oleh asam mineral atau enzim. Hidrolisis oleh asam memerlukan panas hidrolisis oleh enzim tidak memerlukan panas (Sirait, dkk.,

2007).

2.1.4.4 Tanin

Tanin terdapat luas dalam tumbuhan berpembuluh, dalam angiospermae terdapat khusus dalam jaringan kayu. Menurut batasannya, tanin dapat bereaksi dengan protein membentuk kopolimer mantap yang tak larut dalam air. Sebagian besar tumbuhan yang banyak bertanin dihindari oleh hewan pemakan tumbuhan karena rasanya yang sepat. Kita menganggap salah satu fungsi utama tanin dalam tumbuhan ialah sebagai penolak hewan pemakan tumbuhan (Robinson, 1995). 2.1.4.5 Steroida/Triterpenoid

Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari enam satuan isopren dan secara biosintesis diturunkan dari hidrokarbon C30 asiklik, yaitu skualen. Senyawa tersebut mempunyai struktur siklik yang relatif kompleks, kebanyakan merupakan suatu alkohol, aldehid atau asam karboksilat (Harbone, 1987).

Triterpenoid adalah senyawa tanpa warna, berbentuk kristal, sering kali bertitik leleh tinggi dan aktif optik, dapat dibagi atas 4 kelompok senyawa yaitu triterpen sebenarnya, steroid, saponin, dan glikosida jantung. Sebagian senyawa triterpenoid juga merupakan komponen aktif dalam tumbuhan obat, yang berkhasiat sebagai anti diabetes, gangguan menstruasi, gangguan kulit kerusakan hati dan malaria. Uji kualitatif yang banyak digunakan ialah reaksi Liebermann-Burchard yang kebanyakan triterpena dan steroida memberikan warna hijau biru (Harbone, 1987; Robinson, 1995).

2.2 Simplisia dan Ekstrak 2.2.1 Simplisia

Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dikatakan lain, berupa bahan yang telah dikeringkan. Simplisia dibedakan simplisia nabati, simplisia hewani dan simplisia pelikan (mineral). Simplisia nabati adalah simplisia yang berupa tumbuhan utuh, bagian tumbuhan atau eksudat tumbuhan (DepKes, 2000). 2.2.2 Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari simplisia nabati atau hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (DepKes, 2000).

Pembuatan sediaan ekstrak dimaksudkan agar zat berkhasiat yang terdapat di simplisia terdapat dalam bentuk yang mempunyai kadar yang tinggi dan hal ini memudahkan zat berkhasiat dapat diatur dosisnya (Anief, 1999).

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan zat aktif dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut dapat dibagi kedalam dua cara yaitu:

a. Cara dingin, yaitu:

1. Maserasi, adalah proses pengekstraksi simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar). Secarap teknologi termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pencapaian konsentrasi pada keseimbangan. Maserasi

kinetik berarti dilakukan pengadukan yang kontinu (terus-menerus). Remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat pertama dan seterusnya.

2. Perkolasi, adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna (exhaustive extraction) yang umunya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak) terus menerus sampai diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan.

b. Cara Panas

1. Refluks adalah ektraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umunya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna.

2. Soxhlet, adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik. 3. Digesti, adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada

temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50oC.

4. Infus, adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur 96-98oC) selama waktu tertentu (15-20 menit).

5. Dekok, adalah infus pada waktu yang lebih lama (≥30 oC) dan temperatur sampai titik didih air (DepKes, 2000).

2.3 Uraian Usus Halus

Bagian saluran cerna tempat berlangsungnya pencernaan dan penyerapan makanan adalah usus halus. Usus halus mulai dari pylorus dan berlingkar-lingkar dalam rongga perut sampai ke usus besar. Garis tengah usus halus kira-kira 2,5 cm dan panjangnya sekitar 6,35 m. Secara anatomi usus halus dibagi dalam tiga bagian, yaitu duodenum (kira-kira 25cm), yeyenum (kira-kira 2,5 cm), dan ileum (kira-kira 3,6 m) (Anwar, 2000).

2.3.1 Histologi

Secara histologik, usus halus terdiri atas beberapa lapisan melingkar, berupa lapisan otot (musculus) dan lampisan lender (mukosa). Lapisan yang paling dalam (lapisan mukosa) sangat berperan pada proses penyerapan obat (Aiache, dkk., 1993)

Gambar 2.1 Irisan melintang saluran cerna

Lapisan submukosa terdiri atas anyaman jaringan fibrosa yang rapat dan kuat, mengandung pembuluh darah besar, jaringan saraf (pleksus Meissner) dan

kelenjar penghasil alkali. Dua lapis otot polos, yaitu otot sirkular (bentuk spiral yang rapat) berperan dalam mengkontraksi usus dan otot longitudinal (spiral panjang) berperan dalam memendekkan usus. Di dalam lapisan otot ini terdapat jaringan saraf (pleksus Mienterikus). Lapisan serosa merupakan lapisan terluar yang melapisi usus dan juga dinding rongga abdomen dimana usus terletak (Asih, 1996).

2.3.2 Gerakan Usus

Agar proses yang terjadi di dalam usus halus berjalan baik dan lancar, dinding usus harus mencampuradukkan bubur makanan yang diterima dari lambung dengan cairan usus, dan memaparkan bubur ini kepada permukaan mukosa usus dan menggerakkan bubur isi usus ke bawah sepanjang usus ke arah kolon (Anwar, 2000).

Saraf parasimpatik yang intrinsik membebaskan asetilkolin yang memulai kontraksi usus. Sedangkan saraf-saraf simpatik akan membebaskan noradrenalin yang akan merelaksasi dinding usus. Saraf parasimpatik yang ekstrinsik merupakan cabang-cabang dari saraf vagus. Zat-zat kimia endogen yang dapat menambah gerakan usus adalah gastrin, cholecystokinin, dan angiotensin II. Adrenalin, noradrenalin dan secretin akan merelaksasi dinding usus. Zat-zat kimia yang dibebaskan setempat yang dapat menambah gerakan usus adalah histamin, prostaglandin dan serotonin, namun peran zat-zat kimia ini dalam pengendalian gerakan usus yang normal tidak jelas (Anwar, 2000).

2.4 Uraian Diare

Diare adalah suatu kondisi yang menunjukkan frekuensi dan konsistensi buang air besar yang meningkat dibandingkan dengan individu dalam kondisi

pencernaan yang normal. Frekuensi dan konsistensi berbeda-beda pada tiap individu. Sebagai contoh, beberapa individu defekasi tiga kali sehari, sedangkan yang lainnya hanya dua atau tiga kali seminggu (Wells, dkk, 2006).

Secara normal makanan yang terdapat di dalam lambung dicerna menjadi bubur (chymus), kemudian diteruskan ke usus halus untuk diuraikan lebih lanjut oleh enzim-enzim. Setelah terjadi resorpsi, sisa chymus tersebut yang terdiri dari 90% air dan sisa-sisa makanan yang sukar dicernakan, diteruskan ke usus besar (colon). Bakteri-bakteri yang biasanya selalu berada di colon mencerna lagi sisa-sisa (serat-serat) tersebut, sehingga sebagian besar dari sisa-sisa-sisa-sisa tersebut dapat diserap pula selama perjalanan melalui usus besar. Airnya juga direabsorpsi kembali sehingga akhirnya isi usus menjadi lebih padat. Tetapi kadang terjadi peristaltik usus yang meningkat sehingga pelintasan chymus sangat dipercepat dan masih mengandung banyak air pada saat meninggalkan tubuh sebagai tinja. Penyebab utamanya adalah bertumpuknya cairan di usus akibat terganggunya resorpsi air dan atau terjadinya hipersekresi. Pada keadaan normal, proses reabsorpsi dan sekresi dari air dan elektrolit-elektrolit berlangsung pada waktu yang sama di sel-sel epitel mukosa. Proses ini diatur oleh beberapa hormon, yaitu resorpsi oleh enkefalin, sekresi diatur oleh prostaglandin dan neurohormon V.I.P. (Vasoactive Intestinal Peptide). Biasanya reabsorpsi melebihi sekresi, tetapi karena suatu sebab sekresi menjadi lebih besar daripada reabsorpsi, oleh karena itulah diare terjadi (Tan dan Rahardja, 2002).

2.4.1. Klasifikasi diare

Berdasarkan penyebabnya diare dapat dibedakan menjadi berikut: 1. Diare karena infeksi, meliputi :

a. Diare akibat virus, misalnya influenza perut dan travelers diarrhea yang disebabkan antara lain oleh rotavirus dan adenovirus.

b. Diare akibat bakteri (invasif), dapat disebabkan oleh Salmonella, Shigella, Campylobacter, dan jenis Coli tertentu.

c. Diare parasiter, dapat disebabkan oleh Entamooeba Hystolitica, Giardia Lambia, Cryptosporidium dan Cyclospora yang terutama terjadi didaerah tropis.

d. Diare akibat enterotoksin, penyebabnya adalah kuman-kuman yang membentuk enterotoksin, yang terpenting adalah E.Coli dan Vibrio Cholerae dan yang jarang adalah Shigella, Salmonella, Campylobacter dan Entamoeba Hystolitica (Tjay dan Rahardja, 2002).

2. Klasifikasi berdasarkan organ yang terkena infeksi:

a. Diare infeksi enternal atau diare karena infeksi di usus (bakteri, virus, parasit).

b. Diare infeksi parenteral atau diare karena infeksi di luar usus (otitis, media, infeksi saluran pernafasan, infeksi saluran urin, dan lainnya).

3. Klasifikasi diare berdasarkan lamanya diare:

a. Diare akut atau diare karena infeksi usus yang bersifat mendadak, dan bisa berlangsung terus selama beberapa hari. Diare ini disebabkan oleh karena infeksi usus sehingga dapat terjadi pada setiap umur dan bila menyerang umumnya disebut gastroenteritis infantile.

b. Diare kronik merupakan diare yang berlangsung lebih dari dua minggu, sedangkan diare yang sifatnya menahun diantara diare akut dan diare kronik disebut diare sub akut (Suharyono, 1991).

2.4.2 Obat-obat diare

Obat-obat yang digunakan dalam pengobatan diare dikelompokkan menjadi beberapa kategori, yaitu:

1. Kemoterapeutik, untuk terapi kausal yakni memberantas bakteri penyebab diare, seperti antibiotik, sulfonamid, kinolon dan furazolidon.

2. Obstipansia, yang dibagi menjadi:

a. zat-zat penekan peristaltik, candu dan alkaloidanya, derivat petidin (difenoksilat dan loperamid), dan antikolinergik (atropine dan ekstrak belladonna).

b. adstringen, yang menciutkan selaput lendir usus, misalnya asam samak (tanin) dan tanalbumin, garam-garam bismuth dan aluminium.

c. adsorbensia, misalnya carbo adsorbens yang pada permukaannya dapat menyerap zat-zat beracun yang dihasilkan oleh bakteri. Yang termasuk juga dalam golongan ini, antara lain adalah pektin, garam-garam bismuth dan aluminium.

3. Spasmolitik, yakni zat-zat yang dapat melepaskan kejang-kejang otot yang sering kali menyebabkan nyeri perut pada diare (Tjay dan Rahardja, 2002).

Obat antimotilitas (penekan peristaltik) secara luas digunakan sebagai terapi simtomatis pada diare akut ringan sampai sedang. Opioid seperti morfin. difenoksilat dan kodein menstimulasi aktivitas reseptor μ pada neuron mienterikus dan menyebabkan hiperpolarisasi dengan meningkatkan konduktasi kaliumnya. Hal tersebut menghambat pelepasan asetilkolin dari pleksus mienterikus dan menurunkan motilitas usus. Loperamid adalah opioid yang paling tepat untuk efek lokal pada usus karena tidak menembus ke dalam sawar otak. Oleh karena itu

loperamid tidak dapat menyebabkan ketergantungan. Antibiotik, berguna hanya pada infeksi spesifik tertentu, misalnya pada penyakit kolera dan disentri basiler yang dapat diterapi dengan tetrasiklin. Kuinolon adalah obat yang lebih baru yang tampaknya efektif melawan patogen diare yang paling penting (Neal, 2006). 2.5 Loperamid Hidrokloridum

Loperamid merupakan derivat difenoksilat dengan khasiat obstipasi yang dua sampai tiga kali lebih kuat tetapi tanpa khasiat terhadap susunan saraf pusat sehingga tidak menimbulkan ketergantungan. Zat ini mampu menormalkan keseimbangan resorpsi-sekresi dari sel-sel mukosa, yaitu memulihkan sel-sel yang berada dalam keadaan hipersekresi ke keadaan resorpsi normal kembali (Tjay dan Rahardja, 2002).

Loperamid tidak diserap dengan baik melalui pemberian oral dan penetrasinya ke dalam otak tidak baik, sifat-sifat ini menunjang selektifitas kerjanya. Kadar puncak dalam plasma dicapai dalam waktu 4 jam sesudah minum obat. Masa laten yang lama ini disebabkan oleh penghambatan motilitas saluran cerna dan karena obat mengalami sirkulasi enterohepatik (Sardjonodkk., 2004). Loperamid memperlambat motilitas saluran cerna dengan mempengaruhi otot sirkuler dan longitudinalis usus. Obat ini berikatan dengan reseptor opioid sehingga diduga efek konstipasinya diakibatkan oleh ikatan loperamid dengan reseptor tersebut. Waktu paruh 7-14 jam (Marcellus, 2001). Kurang dari 2% dieliminasi renal tanpa diubah, 30% dieliminasi fekal tanpa

diubah dan sisanya dieliminasi setelah mengalami metabolisme dalam hati sebagai glukoroid ke dalam empedu (Bircher dan Lotterer, 1993).

Oleum ricini atau castor oil atau minyak jarak berasar dari biji Ricinus communis suatu trigliserida risinoleat dan asam lemak tidak jenuh. Di dalam usus halus minyak jarak dihidrolisis oleh enzim lipase menjadi gliserol dan asam risinoleat. Asam risinoleat inilah yang merupakan bahan aktif sebagai pencahar. Minyak jarak juga bersifat emolien. Sebagai pencahar obat ini tidak banyak digunakan lagi karena banyak obat yang lebih aman. Minyak jarak menyebabkan kolik, dehidrasi yang disertai gangguan elektrolit. Obat ini merupakan bahan induksi diare pada penelitian diare secara eksperimental pada hewan percobaan (Teke, et al., 2007).

Menurut Katzung (2001), asam risinoleat hasil hidrolisis castor oil, merupakan iritan lokal yang dapat meningkatkan motilitas usus. Mula kerjanya cepat dan berlangsung terus sampai senyawa ini diekskresi melalui kolon. Dosis oleum ricini adalah 2 sampai 3 sendok makan (15 sampai 30 ml), diberikan sewaktu perut kosong. Efeknya timbul 1 sampai 6 jam setelah pemberian, berupa pengeluaran buang air besar berbentuk encer (Anwar, 2000).

2.7 Metode-metode Pengujian Antidiare

Ada 3 metode yang biasa digunakan untuk pengujian antidiare, yaitu (Vogel, 2002) :

1. Metode margens (pengamatan lintas norit)

Sampel dan norit diberikan pada hewan uji yang telah dibuat diare. Kemudian dalam rentang waktu tertentu hewan dikorbankan, diukur panjang usus keseluruhan. Hitung persentase lintasan norit dengan cara membandingkan panjang lintasan norit dengan panjang usus. Jika persentase yang didapat lebih

kecil dari kontrol bahwa dapat disimpulkan bahwa sampel uji memiliki efek antidiare.

2. Metode pola defekasi

Pada metode ini diamati frekuensi buang air besar, konsistensi feses, massa feses dan waktu terjadinya diare. Semuanya diamati dalam jangka waktu tertentu. Jika frekuensi buang air besar lebih kecil, konsistensi feses lebih padat, massa feses lebih banyak dan waktu diare lebih lama dibandingkan kontrol, maka dapat disimpulkan bahwa yang diuji memiliki efek sebaga anti diare.

3. Secara in vitro

Metode ini digunakan untuk melihat apakah sampel uji dapat membunuh mikroorganisme penyebab diare. Bisa dilakukan dengan metode cakram atau tabung. Sampel uji dioleskan pada media yang sudah ditanami mikroba. Jika terlihat adanya hambatan mikroba uji, maka disimpulkan bahwa sampel uji memiliki efek antidiare dengan cara membunuh atau menghambat pertumbuhan mikroba penyebab diare.

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang

Gangguan terhadap saluran pencernaan (gastroenteritis) bervariasi dari yang ringan hingga yang berat, serta dapat pula menyebabkan kematian bila tidak ditangani dengan benar. Salah satu contoh gangguan terhadap saluran pencernaan adalah diare (Prasetyo dan Fadlyana, 2004).

Diare merupakan suatu gejala penyakit yang terjadi akibat adanya penyimpangan atau gangguan terhadap sistem pencernaan makanan. Diare merupakan salah satu masalah kesehatan masyarakat yang cukup kompleks. Jika tidak ditangani dengan baik, diare dapat mempengaruhi pertahanan tubuh penderita hingga menimbulkan kematian. Diare merupakan penyebab utama kesakitan dan kematian pada anak-anak di negara yang sedang berkembang dengan perkiraan 1.3 milyar kejadian dan 3.2 juta kematian setiap tahun pada balita. Menurut laporan Departemen Kesehatan Republik Indonesia, setiap anak mengalami diare 1.6-2 kali dalam setahun (Prasetyo dan Fadlyana, 2004).

Bakteri penyebab infeksi gastroenteritis yang utama adalah famili Enterobacteriaceae termasuk koliform, terutama Escherichia coli, Salmonella, Shigella, dan Yersinia. Berdasarkan data identifikasi bakteri patogen, Escherichia coli merupakan bakteri yang paling banyak ditemukan sebagai bakteri penyebab diare. Disamping itu, Escherichia colienteropatogenik (EPEC) merupakan salah satu penyebab utama diare pada anak-anak di Indonesia, prevalensinya mencapai

55% dari anak-anak penderita diare. Oleh karena itulah, upaya pencegahan dan pengendalian diare ini menjadi sangat penting (Budiarti, 1997).

Pemanfaatan tanaman telah dilakukan manusia sejak berabad-abad lalu sebagai pengobatan. Badan Kesehatan Dunia memperkirakan sekitar 80% penduduk dunia mengandalkan obat tradisional untuk pertolongan pertama dengan pengobatan menggunakan ekstrak tanaman atau komponen aktifnya. Meningkatnya minat masyarakat untuk menggunakan obat alam dikarenakan obat sintetik memiliki beberapa kelemahan antara lain belum banyak ragamnya, harganya sangat mahal dan efek sampingnya yang tidak dikehendaki. Selain itu ada kecenderungan masyarakat untuk kembali menggunakan bahan-bahan alami baik sebagai obat maupun untuk konsumsi sehari-hari yang disebut back to nature (Rachmini, 2001).

Indonesia merupakan penghasil komoditas tanaman obat yang potensial, sebanyak 940 jenis tanaman obat yang sudah ditemukan tetapi baru 80 jenis yang sudah diproduksi untuk pembuatan obat. Selain itu tanaman obat dapat digunakan untuk bahan makanan sehingga berfungsi sebagai pangan fungsional. Cincau hijau (Cyclea barbata L.Miers) merupakan tanaman yang dapat dijadikan pangan fungsional dalam bentuk healthy dessert (Rachmini, 2001).

Secara umum, tanaman cincau hijau sudah dikenal dan telah dimanfaatkan oleh masyarakat Indonesia sebagai makanan dan obat tradisional. Daun cincau hijau sering digunakan sebagai penurun panas dalam, obat tukak lambung juga sebagai antikanker karena cincau hijau diduga mengandung senyawa yang mempunyai aktivitas antioksidan.Menurut penelitian sebelumnya, daun cincau mengandung senyawa tanin dan flavanoid. Tanin memiliki efek antidiare yang

bekerja sebagai pembeku protein/astrigen yaitu zat yang berikatan pada mukosa, kulit atau jaringan yang berfungsi membekukan protein, sehingga membran mukosa menjadi kering dan membentuk pembatas (thight junction) yang bersifat resisten terhadap inflamasi dari mikroorganisme (Clinton, 2009). Flavanoid dapat menghambat proses inisiasi dari inflamasi, seperti menghambat pelepasan histamin dan mediator inflamasi yang dapat menghambat peristaltik usus (Ahmadu,2007). Pada saat diare, kontraksi otot polos dan motilitas usus meningkat sehingga dengan diberikan cincau hijau diharapkan dapat menurunkan kondisi tersebut dari zat yang dikandungnya. Akan tetapi, data ilmiah mengenai khasiat cincau hijau belum banyak diketahui sehingga perlu dilakukan suatu penelitian untuk mendapatkan data ilmiah mengenai khasiat cincau hijau (Rachmini, 2001).

Oleh karena itu, peneliti tertarik meneliti efek antidiare ekstrak etanol daun cincau hijau terhadap tikus jantan yang diberikan secara oral dan untuk mengetahui pada dosisi berapa ekstrak dapat memberikan efek terbaik dibandingkan dengan obat sintetis.

1.2 Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang diatas, maka perumusan masalah pada penelitian ini adalah:

a. Apakah karakteristik dan skrining fitokimia simplisia daun cincau hijau memenuhi syarat MMI ?

b. Apakah ekstrak etanol daun cincau hijau mempunyai efek antidiare yang diuji menggunakan metode defekasi dan berapa dosis optimal yang sesuai bila dibandingkan dengan Loperamid HCl?

1.3 Hipotesis

Berdasarkan perumusan masalah diatas maka hipotesis pada penelitian ini adalah:

a. Karakterisasi simplisia daun cincau hijau memenuhi syarat MMI dan skrining fitokimia, simplisia daun cincau hijau mengandung senyawa alkaloid, flavanoid, glikosida, tanin dan steroid.

b. Ekstrak etanol daun cincau hijau mempunyai efek antidiare yang diuji menggunakan metode defekasi dan dosis optimal yang diperoleh sebanding dengan Loperamid HCl.

1.4 Tujuan

Adapun tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui: a. Karakterisasi dan skrining simplisiadaun cincau hijau.

b. Efek antidiare ekstrak etanol daun cincau hijau menggunakan metode defekasi dan dosis optimal bila dibandingkan dengan Loperamid HCl.

1.5 Manfaat

Manfaat yang diperoleh pada penelitian ini adalah untuk memberikan informasi dalam usaha pemanfaatan tumbuhan daun cincau hijausebagai obat antidiare bagi masyarakat Indonesia.

1.6 Kerangka Pikir Penilitian

Variabel Bebas Variabel Terikat Parameter

Gambar 1.1 Kerangka pikir penelitian Daun cincau hijau

Makroskopik, Mikroskopik, Kadar air, Kadar sari larut etanol, Kadar sari larut air, Kadar abu total, Kadar abu tidak larut asam Simplisia daun

cincau hijau

Karakteristi k simplisia

Maserasi dengan etanol

96%

alkaloida, flavanoid, glikosida, tanin, steroid/triterpenoid Skrining

fitokimia

Ekstrak etanol daun cincau

hijau

Saat mulai terjadinya diare Konsistensi feses

Status diare

Frekuensi diare Tikus + oleum

ricini

Lama terjadi diare Loperamid

3.5.4 Pemeriksaan tannin ... 14

3.5.5 Pemeriksaan saponin ... 14

3.5.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida ... 14

3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Cincau Hijau (EEDCH) . 15 3.7 Percobaan Efek Antidiare ... 15

3.7.1 Penyiapan hewan percobaan ... 15

3.7.2 Penyiapan bahan ... 16

3.7.2.1 Pembuatan suspensi CMC Na 1% (b/v) ... 16

3.7.2.2 Pembuatan suspensi loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb ... 16

3.7.2.3 Pembuatan suspensi ekstrak etanol daun cincau hijau 4% (b/v) ... 16

3.7.3 Pengujian efek antidiare ... 17

3.8 Pengumpulan Data ... 17

3.9 Analisis Data ... 17

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 19

4.1 Hasil Identifikasi Sampel ... 19

4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia ... 19

4.2.1 Pemeriksaan makroskopik ... 19

4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 19

4.2.3 Pemeriksaan karakteristik ... 20

4.3 Hasil Skrining Fitokimia ... 21

4.4 Hasil Pengujian Antidiare ... 21

4.4.3 Penentuan frekuensi diare ... 28

4.4.4 Penentuan lama terjadinya diare ... 29

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 33

5.1 Kesimpulan ... 33

5.2 Saran ... 33

DAFTAR PUSTAKA ... 34

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1 Hasil karakterisasi serbuk simplisia daun cincau hijau ... 20 Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia daun cincau hijau ... 21

Tabel 4.3 Hasil analisis data saat mulai terjadinya diare ... 22 Tabel 4.4 Hasil analisis data diameter serapan air ... 24 Tabel 4.5 Hasil analisis data berat feses ... 24 Tabel 4.6 Waktu defekasi selama 6 jam pengamatan setelah diberi

oleum ricini ... 27 Tabel 4.7 Hasil analisis data frekuensi diare ... 28 Tabel 4.8 Hasil analisis data lama terjadinya diare ... 29

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1.1 Kerangka pikir penelitian ... 6

Gambar 4.1 Grafik saat mulai terjadinya diare ... 23

Gambar 4.2 Grafik konsistensi feses ... 25

Gambar 4.3 Grafik frekuensi diare ... 29

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1 Hasil identifikasi sampel ... 37

Lampiran 2 Gambar tumbuhan daun cincau hijau (Cyclea barbata) ... 38

Lampiran 3 Gambar simplisia dan serbuk simplisia daun cincau hijau (Cyclea barbata ) ... 39

Lampiran 4 Ethical Clearance ... Lampiran 5 Bagan kerja penelitian ... 40

Lampiran 6 Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia daun cincau hijau ... 42

Lampiran 7 Gambartikus saat pengamatan ... 46

Lampiran 8 Gambar alat yang digunakan ... 47

Lampiran 9 Gambar konsistensi feses tikus ... 48

Lampiran 10 Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada hewan uji ... 49

Lampiran 11 Konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia ... 50

Lampiran 12 Perhitungan konversi dosis ... 51

Lampiran 13 Perhitungan pembuatan suspensi loperamid HCl (tablet imodium®) ... 52

Lampiran 14 Perhitungan dosis pemberian ekstrak etanol daun cincau hijau dan loperamid HCl (tablet imodium®) ... 53

Lampiran 15 Hasil pengamatan saat mulai terjadinya diare setelah pemberian oleum ricini ... 55

Lampiran 16 Hasil pengamatan konsistensi feses setelah pemberian oleum ricini ... 56

Lampiran 17 Hasil pengamatan frekuensi diare setelah pemberian oleum ricini ... 57

Lampiran 18 Hasil pengamatan lama terjadinya diare setelah pemberian oleum ricini ... 58 Lampiran 19 Konsistensi feses dengan diameter serapan air, waktu

defekasi dan berat feses selama pengamatan setelah diberi oleum ricini untuk kelompok control (suspensi CMC 1%) ... 59 Lampiran 20 Konsistensi feses dengan diameter serapan air, waktu

defekasi dan berat feses selama pengamatan setelah diberi oleum ricini untuk kelompok pembanding (suspensi loperamid HCl 1 mg/kg bb) ... 60 Lampiran 21 Konsistensi feses dengan diameter serapan air, waktu

defekasi dan berat feses selama pengamata setelah diberi oleum ricini untuk kelompok dosis I (EEDCH 50 mg/kg

bb ) ... 61 Lampiran 22 Konsistensi feses dengan diameter serapan air, waktu

defekasi dan berat feses selama pengamatan setelah diberi oleum ricini untuk kelompok dosis II (EEDCH 100 mg/kg bb) ... 62 Lampiran 23 Konsistensi feses dengan diameter serapan air, waktu

defekasi dan berat feses selama pengamatan setelah diberi oleum ricini untuk kelompok dosis III (EEDCH 150 mg/kg bb)... 63 Lampiran 24 Hasil Deskriptif Data ... 64

Lampiran 25 Hasil Analisis Statistik Duncan ... 68