Uji Antidiare Ekstrak Etanol Kulit Batang Sikkam (Bischofia javanica Blume) Dengan Metode Defekasi Pada Tikus

Lampiran 2. Gambar tumbuhan sikkam (Bischofia javanica Blume)

pohon sikkam

Lampiran 3. Gambar simplisia dan serbuk kulit batang sikkam (Bischofia

javanica Blume)

Simplisia batang sikkam

Lampiran 4. Bagan kerja penelitian

1. Pembuatan ekstrak kulit batang sikkam

serbuk simplisia 1,2 kg

dimaserasi dengan etanol 80% hingga serbuk terendam

maserat ampas

maserat

diuapkan dengan rotary evaporator

dikeringkan dengan freeze dryer

ekstrak kering 112 g

dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya

dicuci dengan etanol 80% dan dibiarkan selama 2 hari

disaring

ampas

Lampiran 4. (Lanjutan)

2. Pengujian karakterisasi, skrining dan antidiare

Ekstrak kering 112 g

Karakterisasi simplisia dan ekstrak, meliputi penetapan:

Skrining fitokimia simplisia dan ekstrak meliputi:

Hasil _{Hasil Hasil}

Uji antidiare, meliputi parameter:

-Saat mulai terjadi diare

-Konsistensis feses -Frekuensi diare -Lama terjadi diare -Kadar air

-Kadar abu total -Kadar sari larut air -Kadar sari larut

etanol

-Kadar abu tidak larut asam

- alkaloida -flavanoida

-glikosida -tanin -saponin

Lampiran 5. Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol

kulit batang sikkam

1.Penetapan kadar air

% Kadar air =volume air (ml)

berat (g) x 100 % Kadar air simplisia:

1. % Kadar air = 0,2 ml

5,0025 g x 100 % = 3,99% 2. % Kadar air = 0,3 ml

5,0022 g x 100 % = 5,99% 3. % Kadar air = 0,4 ml

5,0025 g x 100 % = 7,99%

3,99% + 5,99% + 7,99%

3

Kadar air ekstrak:

1. % Kadar air ekstrak = 0,4 ml

5,0048 g x 100 % = 7,99%

2. % Kadar air ekstrak = 0,4 ml

5,0044 g x 100 % = 7,99% 3. % Kadar air ekstrak = 0,3 ml

5,0050 g x 100 % = 5,99% 7,7,99% + 7,99% + 5,99%

` 3

No. berat (g) volume awal (ml) volume akhir (ml) simplisia ekstrak Simplisia ekstrak simplisia ekstrak

1. 5,0025 5,0048 2,0 2,0 2,2 2,4

2. 5,0022 5,0044 2,2 2,4 2,5 2,8

3. 5,0025 5,0050 2,5 2,8 2,9 3,1

= 5,99% % Kadar air rata-rata

% Kadar air rata-rata

Lampiran 5. (Lanjutan)

2. Penetapan kadar sari larut air

% Kadar sari yang larut dalam air =berat sari (g) berat (g) x

100

20 x 100 % Kadar sari larut air simplisia:

1. % Kadar sari yang larut dalam air = 0,1863 g 5,0047 g x

100

20 x 100 % = 18,61%

2. % Kadar sari yang larut dalam air = 0,1668 g 5,0042 g x

100

20 x 100 % = 16,66%

3. % Kadar sari yang larut dalam air = 0,1722 g 5,0022 g x

100

20 x 100 % = 17,21%

18,61% + 16,66% + 17,49 %

3

Kadar sari larut air ekstrak:

1. % Kadar sari yang larut dalam air = 0,3358 g 5,0047 g x

100

20 x 100 % = 33,548% 2. % Kadar sari yang larut dalam air = 0,3211 g

5,0042 g x 100

20 x 100 % = 32,07% 3. % Kadar sari yang larut dalam air = 0,3315 g

5,0039 g x 100

20 x 100 % = 33,12%

33,54% + 32,07% + 33,12% 3

No. berat (g) berat cawan kosong (g) berat cawan sari (g) simplisia ekstrak simplisia ekstrak simplisia Ekstrak 1. 5,0047 5,0047 49,5950 51,9458 49,7813 52,2816 2. 5,0042 5,0042 48,0379 49,9262 48,2047 50,2347 3. 5,0022 5,0039 49,6782 46,2146 49,8504 46,5461

% Kadar sari yang larut dalam air = = 17,49%

Lampiran 5. (Lanjutan)

3. Penetapan kadar sari larut etanol

% Kadar sari yang larut dalam etanol =berat sari (g) berat (g) x

100

20 x 100 % Kadar sari larut etanol simplisia:

1. % Kadar sari yang larut dalam etanol = 0,1161 g 5,0052 g x

100

20 x 100 % = 11,59%

2. % Kadar sari yang larut dalam etanol =0,1167 g 5,0053 g x

100

20 x 100 % = 11,65%

3. % Kadar sari yang larut dalam etanol = 0,1230 g 5,0069 g x

100

20 x 100 % = 12,28%

= 11,59% + 11,65% + 12,28%

3

Kadar sari larut etanol ekstrak:

1. % Kadar sari yang larut dalam etanol = 0,2330 g 5,0055 g x

100

20 x 100 % = 23,27 %

2. % Kadar sari yang larut dalam etanol =0,2401 g 5,0049 g x

100

20 x 100 % = 23,98 %

3. % Kadar sari yang larut dalam etanol =0,2254 g 5,0041 g x

100

20 x 100 % = 22,52 %

= 23,27% + 23,98% + 22,52 %

3

No. Berat (g) Berat cawan kosong(g) Berat cawan sari (g) simplisia ekstrak Simplisia ekstrak simplisia ekstrak 1. 5,0052 5,0055 49.5842 49,5937 49,7003 49,8267 2. 5,0053 5,0049 48,0292 48,0401 49,1459 48,2802 3. 5.0069 5,039 49,6795 46,3641 49,8025 46,5895

= 11,84% % Kadar sari yang larut

dalam etanol rata-rata

% Kadar sari yang larut dalam etanol rata-rata

Lampiran 5. (Lanjutan)

4. Penetapan kadar abu total

% Kadar abu total = berat abu (g)

berat (g) x 100%

Kadar abu total simplisia:

1. % Kadar abu total =0,0961 g

2,0235 g x 100 % = 4,74% 2. % Kadar abu total =0,0776 g

2,0128 g x 100 % = 3.85% 3. % Kadar abu total =0,0731 g

2,0132 g x 100 % = 3,63%

= 4,74% + 3.85% + 3,63 % 3

Kadar abu total ekstrak:

1. % Kadar abu total = 0,0095 g

2,0812 g x 100 % = 0,45% 2. % Kadar abu total =0,0118 g

2,0352 g x 100% = 0,57% 3. % Kadar abu total = 0,0083 g

2,0458 g x 100% = 0,40%

= 0,45% + 0,57% + 0,40% 3

No. berat (g) berat abu (g)

simplisia Ekstrak simplisia ekstrak

1. 2,0235 2,0812 0,0961 0,0095

2. 2,0128 2,0352 0,0776 0,0118

3. 2,0132 2,0458 0,0731 0,0083

= 4,07% % Kadar abu total rata-rata

Lampiran 5. (Lanjutan)

5. Penetapan kadar abu tidak larut asam

% Kadar abu tidak larut asam =berat abu (g)

berat (g) x 100 % Kadar abu tidak larut asam simplisia:

1. % Kadar abu tidak larut asam =0,0645 g

2,0235 g x 100 % = 6,45% 2. % Kadar abu tidak larut asam =0,1226 g

2,0128 g x 100 % = 6,09% 3. % Kadar abu tidak larut asam =0,1140 g

2,0132 g x 100 % = 5,66%

% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 6,45% + 6,09% + 5,66% 3

Kadar abu tidak larut asam ekstrak:

1. % Kadar abu tidak larut asam =0,0001 g

2,0812 g x 100 % = 0,01%

2. % Kadar abu tidak larut asam =0,0003 g

2,0352 g x 100% = 0,01%

3. % Kadar abu tidak larut asam =0,0002 g

2,0476 g x 100% = 0,01%

% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 0,01% + 0,01% + 0,01%

3

No. berat (g) berat abu (g)

simplisia Ekstrak Simplisia ekstrak

1. 2,0235 2,0812 0,1306 0,0001

2. 2,0128 2,0352 0,1226 0,0002

3. 2,0132 2,0476 0,1140 0,0003

= 6,06%

Lampiran 6. Gambar konsistensi feses tikus

Feses tikus normal

Feses tikus lembek

Lampiran 7. Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada hewan uji (Mulyono, 1984)

Jenis hewan uji Volume maksimum (ml) sesuai jalur pemberian

i.v. i.m. i.p. s.c. p.o.

Mencit (20-30 g) 0,5 0,05 1,0 0,5-1,0 1,0

Tikus (200 g) 1,0 0,1 2-5 2-5 5,0

Hamster (50 g) - 0,1 1-2 2,5 2,5

Marmot (300 g) - 0,25 2-5 5,0 10,0

Kelinci (2,5 kg) 5-10 0,5 10-20 5-10 20,0 Kucing (3 kg) 5-10 1,0 10-20 5-10 50,0 Anjing (5 kg) 10-20 5,0 20-50 10,0 100,0

Lampiran 8. Konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia (Laurance dan Bacharach, 1964)

Mencit

20 g

Tikus 200 g

Marmot 400 g

Kelinci 1,5 kg

Kera 4 kg

Anjing 12 kg

Manusia 70 kg Mencit

20 g 1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,3 387,9 Tikus

200 g 0,14 1,0 1,74 3,0 9,2 17,8 56,0

Marmot

400 g 0,008 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5 Kelinci

1,5 kg 0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2 Kera

4 kg 0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1

Anjing

12 kg 0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1 Manusia

Lampiran 10. Gambar alat yang digunakan

Spuit dan oral sonde

Lampiran 11. Perhitungan konversi dosis

1. Perhitungan konversi dosis loperamid HCl (tablet Imodium®

Dosis manusia (berat 70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari Dosis tikus (berat 200 g) = 0,018 x (16 mg) = 0,2 mg

Maka dosis loperamid HCl untuk tikus = 1 mg/kg bb

) dari manusia ke tikus :

2. Perhitungan konversi dosis EEKBS dari tikus ke manusia : Dosis yang digunakan dalam penelitian adalah :

- 75 mg/kg bb atau sama dengan 15 mg/200 g bb - 100 mg/kg bb atau sama dengan 20 mg/200 g bb - 125 mg/kg bb atau sama dengan 25 mg/200 g bb - 150 mg/kg bb atau sama dengan 30 mg/200 g bb Dosis optimal EEKBS pada tikus adalah 25 mg/200 g bb. Faktor konversi dosis tikus = 56,0

Dosis manusia = dosis pada tikus x faktor konversi = 25 mg x 56,0

= 1400 mg/ 70 kg bb = 1,4 g/ 70 kg bb

3. Rendemen = 100% simplisia

berat

ekstrak berat

× = 100% 9,33%

g 1200

g 112

=

×

Maka pemakaian ekstrak etanol kulit batang sikkam (EKKBS) 125 mg/kg bb pada tikus setara dengan 1500 mg simplisia kulit batang sikkam.

Lampiran 12. Perhitungan Kadar Loperamid HCl dari Tablet Imodium®

Dosis manusia (70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari Dosis tikus (200 g) setelah dikonversikan = 1 mg/kg bb

Tablet Imodium ditimbang sebanyak 20 tablet (berat = 2400 mg) 20 tablet Imodium mengandung Loperamid HCl sebanyak 40 mg Loperamid HCl yang digunakan = 15 mg

Serbuk Imodium yang diambil = 15 mg x 2400 mg = 900 mg 40 mg

Lampiran 13. Perhitungan dosis pemberian ekstrak etanol kulit batang sikkam

(EEKBS) dan loperamid HCl (tablet imodium® a. Perhitungan EEKBS dosis 75 mg/kg bb

)

Konsentrasi EEKBS = 2,25 % = 2,25 g/100 ml = 22,5 mg/ml Berat badan tikus = 200 g

maka, dosis = 75mg 15mg g 1000 g 200 = ×

dosis pemberian = 1ml 0,667ml/tikus mg 22,5 mg 15 = ×

b. Perhitungan EEKBS dosis 100 mg/kg bb Konsentrasi EEKBS = 3 % = 3 g/100 ml = 30 mg/ml Berat badan tikus = 200 g

maka, dosis = 100mg 20mg g 1000 g 200 = ×

dosis pemberian = 1ml 0,667ml/tikus mg 30 mg 20 = ×

c. Perhitungan EEKBS dosis 125 mg/kg bb

Konsentrasi EEKBS = 3,75 % = 3,75 g/100 ml = 37,5 mg/ml Berat badan tikus = 200 g

maka, dosis = 125mg 25mg g 1000 g 200 = ×

dosis pemberian = 1ml 0,667ml/tikus mg 37,5 mg 25 = ×

d. Perhitungan EEKBS dosis 150 mg/kg bb

Konsentrasi EEKBS = 4,5 % = 4,5 g/100 ml = 45 mg/ml Berat badan tikus = 200 g

maka, dosis = 150mg 30mg g

1000 g 200

= ×

dosis pemberian = 1ml 0,667ml/tikus mg

45 mg 30

= ×

e. Loperamid HCl yang diberikan untuk dosis 1 mg/kg bb Konsentrasi Loperamid HCl = 0,03 % = 0,03 g/100 ml = 0,3 mg/ml Berat badan tikus = 200 g

maka, dosis = 1mg 0,2mg g

1000 g 200

= ×

dosis pemberian = 1ml 0,667ml/tikus mg

0,3 mg 0,2

= ×

Lampiran 14. Hasil orientasi dosis bahan uji terhadap saat mulai terjadinya diare

setelah pemberian oleum ricini.

Keterangan:

OR : oleum ricini

EEKBS : ekstrak etanol kulit batang sikkam

Grafik hasil orientasi dosis

56,8 100,7 58,3 61,7 68,2 76,8 98,5 118,7 0,0 20,0 40,0 60,0 80,0 100,0 120,0 140,0 CMC 1% bb Lop. HCl 1 mg/kg bb EEKBS 25 mg/kg bb EEKBS 50 mg/kg bb EEKBS 75 mg/kg bb EEKBS 100 mg/kg bb EEKBS 125 mg/kg bb EEKBS 150 mg/kg bb S a a t m u la i d e fe k a si ( m e n it k e -)

Perlakuan Saat mulai terjadinya diare

(menit)

OR + CMC 1% bb 56,8

OR + loperamid HCl 1 mg/kg bb 100,7

OR + EEKBS 25mg/kg bb 58,3

OR + EEKBS 50mg/kg bb 61,7

OR + EEKBS 75mg/kg bb 68,2

OR + EEKBS 100 mg/kg bb 76,8

OR + EEKBS 125 mg/kg bb 98,5

Lampiran 15. Hasil pengamatan saat mulai terjadinya diare setelah pemberian

oleum ricini

Keterangan:

OR : oleum ricini

EEKBS : ekstrak etanol kulit batang sikkam Perlakuan

Hewan

Jumlah

Rata-rata (menit)

1 2 3 4 5 6

OR + CMC

1% bb 56 54 60 58 56 57 341 56,8

OR + loperamid

HCl 1 mg/kg bb 114 114 87 89 90 110 604 100,7 OR + EEKBS

75 mg/kg bb 60 59 60 88 57 85 409 68,2 OR + EEKBS

100 mg/kg bb 86 83 60 87 59 86 461 76,8 OR + EEKBS

125 mg/kg bb 89 90 119 114 89 90 591 98,5 OR + EEKBS

Lampiran 16. Hasil pengamatan konsistensi feses setelah pemberian oleum ricini Berlendir

Lembek

Normal

Keterangan:

OR : oleum ricini

EEKBS : ekstrak etanol kulit batang sikkam

Perlakuan Diameter serapan

air (cm)

Berat feses (g)

OR + CMC 1% bb 2,93 3,15

OR + loperamid HCl 1 mg/kg bb 2,18 2,30

OR + EEKBS 75 mg/kg bb 2,88 3,07

OR + EEKBS 100 mg/kg bb 2,60 2,73

OR + EEKBS125 mg/kg bb 2,25 2,37

OR + EEKBS150 mg/kg bb 2,08 2,07

Perlakuan Diameter serapan

air (cm)

Berat feses (g)

OR + CMC 1% bb 1,14 1,52

OR + loperamid HCl 1 mg/kg bb 1,05 0,87

OR + EEKBS 75 mg/kg bb 1,19 1,13

OR + EEKBS 100 mg/kg bb 1,11 1,06

OR + EEKBS125 mg/kg bb 1,05 0,95

OR + EEKBS150 mg/kg bb 1,03 0,89

Perlakuan Diameter serapan

air (cm)

Berat feses (g)

OR + CMC 1% bb 0,23 0,21

OR + loperamid HCl 1 mg/kg bb 0,11 0,14

OR + EEKBS 75 mg/kg bb 0,20 0,20

OR + EEKBS 100 mg/kg bb 1,33 0,17

OR +lEEKBS 125 mg/kg bb 1,11 0,15

Lampiran 17. Hasil pengamatan frekuensi diare setelah pemberian oleum ricini

Perlakuan Hewan Jumlah Rata-rata

1 2 3 4 5 6

OR + CMC 1% bb _{7 7 7 7 7 7 42 7,0}

OR + loperamid

HCl 1 mg/kg bb 3 3 4 4 3 2 19 3,17

OR + EEKBS 75

mg/kg bb 5 7 5 5 6 5 33 5,5

OR +. EEKBS 100

mg/kg bb 5 4 4 4 4 4 25 4,1

OR + EEKBS 125

mg/kg bb 3 3 3 3 4 3 19 3,17

OR + EEKBS 150

mg/kg bb 2 3 3 2 2 3 15 2,5

Keterangan:

OR : oleum ricini

Lampiran 18. Hasil pengamatan lama terjadinya diare setelah pemberian oleum ricini

Keterangan:

OR : oleum ricini

EEKBS : ekstrak etanol kulit batang sikkam Perlakuan

Hewan

Jumlah Rata-rata

1 2 3 4 5 6

T2-T1

T2-T1

T2-T1

T2-T1

T2-T1

T2-T1 OR + CMC

1% bb 303 299 266 284 302 295 1746 291 OR +loperamid

HCl 1 mg/kg bb 120 124 149 161 153 126 828 138 OR + EEKBS

5 mg/kg bb 261 293 269 242 274 241 1578 263 OR + EEKBS

100 mg/kg bb 185 168 208 172 189 188 1110 185 OR + EEKBS

125 mg/kg bb 149 163 116 121 152 147 1224 141 OR + EEKBS

Lampiran 19. Hasil deskriptif data Saat mulai terjadi diare

Perlakuan

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

Susp.CMC 1% bb 6 56.8333 2.04124 .83333 54.6912 58.9755 54.00 60.00 Susp.Lop HCL1mg/kg

bb 6 1.0067E2 13.26147 5.41397 86.7496 114.5837 87.00 114.00 Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 68.1667 14.27469 5.82762 53.1863 83.1470 57.00 88.00 Susp.EEKBS 100

mg/kg bb 6 76.8333 13.49691 5.51009 62.6692 90.9975 59.00 87.00 Susp.EEKBS 125

mg/kgbb 6 98.5000 14.03923 5.73149 83.7667 113.2333 89.00 119.00 Susp.EEKBS 150

mg/kg bb 6 1.1867E2 1.50555 .61464 117.0867 120.2466 116.00 120.00 Total 36 86.6111 23.88099 3.98016 78.5309 94.6913 54.00 120.00

Lampiran 19. (Lanjutan)

Konsistensi feses (diameter serapan air)

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower Bound Upper Bound Konsistensi feses berlendir

Susp.CMC 1% bb 6 2.9733 .24977 .10197 2.7112 3.2355 2.57 3.26 Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 2.1833 .18619 .07601 1.9879 2.3787 2.00 2.45 Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 2.9550 .18960 .07741 2.7560 3.1540 2.70 3.15 Susp.EEKBS 100

mg/kg bb 6 2.6083 .14634 .05974 2.4548 2.7619 2.45 2.85 Susp.EEKBS 125

mg/kg bb 6 2.2500 .17889 .07303 2.0623 2.4377 2.00 2.45 Susp.EEKBS 150

mg/kg bb 6 2.0833 .07528 .03073 2.0043 2.1623 2.00 2.20 Total 36 2.5089 .40117 .06686 2.3732 2.6446 2.00 3.26 Konsistensi

feses lembek

Susp.CMC 1% bb 6 1.4283 .12875 .05256 1.2932 1.5634 1.30 1.60 Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 1.0333 .04082 .01667 .9905 1.0762 1.00 1.10 Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 1.1800 .04517 .01844 1.1326 1.2274 1.13 1.26 Susp.EEKBS 100

mg/kg bb 6 1.1133 .03830 .01563 1.0731 1.1535 1.05 1.15 Susp.EEKBS 125

mg/kg bb 6 1.0833 .02582 .01054 1.0562 1.1104 1.05 1.10 Susp.EEKBS 150

mg/kg bb 6 1.0333 .04082 .01667 .9905 1.0762 1.00 1.10 Total 36 1.1453 .15004 .02501 1.0945 1.1960 1.00 1.60 Konsistensi

feses normal

Susp.CMC 1% bb 6 .2333 .05164 .02108 .1791 .2875 .20 .30 Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 .1167 .04082 .01667 .0738 .1595 .10 .20 Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 .2000 .08944 .03651 .1061 .2939 .10 .30 Susp.EEKBS 100

mg/kg bb 6 .1333 .05164 .02108 .0791 .1875 .10 .20 Susp.EEKBS 125

mg/kg bb 6 .1167 .04082 .01667 .0738 .1595 .10 .20 Susp.EEKBS 150

mg/kg bb 6 .1000 .00000 .00000 .1000 .1000 .10 .10 Total 36 .1500 .06969 .01162 .1264 .1736 .10 .30

Lampiran 19. (Lanjutan) Konsistensi feses (berat)

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower Bound Upper Bound Konsistensi feses berlendir Susp.CMC 1%

bb 6 3.1733 .26830 .10953 2.8918 3.4549 2.76 3.50 Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 2.3050 .17604 .07187 2.1203 2.4897 2.09 2.57 Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 3.0717 .23575 .09624 2.8243 3.3191 2.77 3.37 Susp.EEKBS

100 mg/kg bb 6 2.7217 .14825 .06052 2.5661 2.8772 2.56 2.99 Susp.EEKBS

125 mg/kgbb 6 2.3750 .18887 .07710 2.1768 2.5732 2.10 2.59 Susp.EEKBS

150 mg/kg bb 6 2.0733 .12580 .05136 1.9413 2.2054 1.89 2.24 Total 36 2.6200 .44823 .07470 2.4683 2.7717 1.89 3.50 Konsistensi

feses lembek

Susp.CMC 1%

bb 6 1.5200 .12554 .05125 1.3883 1.6517 1.39 1.67 Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 .8733 .07659 .03127 .7930 .9537 .77 .95 Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 1.1350 .03271 .01335 1.1007 1.1693 1.09 1.18 Susp.EEKBS

100 mg/kg bb 6 1.0683 .12592 .05141 .9362 1.2005 .90 1.20 Susp.EEKBS

125 mg/kgbb 6 .9517 .08424 .03439 .8633 1.0401 .85 1.10 Susp.EEKBS

150 mg/kg bb 6 .8917 .10381 .04238 .7827 1.0006 .76 1.08 Total 36 1.0733 .24077 .04013 .9919 1.1548 .76 1.67 Konsistensi

feses normal

Susp.CMC 1%

bb 6 .2150 .01871 .00764 .1954 .2346 .19 .24

Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 .1417 .03430 .01400 .1057 .1777 .11 .19 Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 .2050 .03332 .01360 .1700 .2400 .16 .24 Susp.EEKBS

100 mg/kg bb 6 .1717 .02229 .00910 .1483 .1951 .15 .20 Susp.EEKBS

125 mg/kgbb 6 .1533 .04320 .01764 .1080 .1987 .11 .22 Susp.EEKBS

150 mg/kg bb 6 .1433 .01506 .00615 .1275 .1591 .13 .17 Total 36 .1717 .04011 .00668 .1581 .1852 .11 .24

Lampiran 19. (Lanjutan) Waktu defekasi

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower Bound Upper Bound Feses berlendir

CMC 1%bb 6 61.7500 4.04660 1.65202 57.5034 65.9966 57.00 67.50 Loperamid 1

mg/kg bb 6 1.0533E2 9.26643 3.78300 95.6088 115.0579 90.00 114.00 EEKBS 75

mg/kg bb 6 84.3333 14.67538 5.99120 68.9325 99.7342 68.00 100.50 EEKBS 100

mg/kg bb 6 93.0000 11.79407 4.81491 80.6229 105.3771 79.00 110.50 EEKBS 125

mg/kg bb 6 1.0467E2 10.48650 4.28110 93.6618 115.6716 90.00 119.00 EEKBS 150

mg/kg bb 6 1.1867E2 1.50555 .61464 117.0867 120.2466 116.00 120.00 Total 36 94.6250 20.52294 3.42049 87.6810 101.5690 57.00 120.00 Feses

lembek

CMC 1%bb 6 2.5188E2 18.59656 7.59202 232.3674 271.3992 228.66 278.33 Loperamid 1

mg/kg bb 6 1.6992E2 8.86237 3.61805 160.6162 179.2172 159.50 183.50 EEKBS 75

mg/kg bb 6 2.1612E2 10.47006 4.27438 205.1340 227.1093 202.66 230.66 EEKBS 100

mg/kg bb 6 1.9367E2 9.14148 3.73199 184.0733 203.2601 183.00 209.50 EEKBS 125

mg/kg bb 6 1.7758E2 38.96590 15.90776 136.6911 218.4755 122.00 233.00 EEKBS 150

mg/kg bb 6 1.6842E2 14.47901 5.91103 153.2219 183.6115 148.00 183.50 Total 36 1.9626E2 35.29750 5.88292 184.3218 208.2077 122.00 278.33 Feses

normal

CMC 1%bb 6 3.4833E2 12.50067 5.10338 335.2147 361.4520 326.00 359.00 Loperamid 1

mg/kg bb 6 2.3950E2 5.99166 2.44609 233.2121 245.7879 234.00 250.00 EEKBS 75

mg/kg bb 6 3.2700E2 3.74166 1.52753 323.0734 330.9266 321.00 331.00 EEKBS 100

mg/kg bb 6 2.6183E2 10.83359 4.42279 250.4642 273.2025 248.00 274.00 EEKBS 125

mg/kg bb 6 2.3983E2 6.82398 2.78588 232.6720 246.9947 235.00 253.00 EEKBS 150

mg/kg bb 6 2.1200E2 11.47170 4.68330 199.9612 224.0388 199.00 230.00 Total 36 2.7142E2 50.81416 8.46903 254.2236 288.6097 199.00 359.00

Lampiran 19. (Lanjutan)

Frekuensi diare

Lama terjadi diare Perlakuan

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max

Lower Bound

Upper Bound

CMC 1% bb 6 7.0000 .00000 .00000 7.0000 7.0000 7.00 7.00 Loperamid HCl

1 mg/kg bb 6 3.1667 .75277 .30732 2.3767 3.9567 2.00 4.00 EEKBS 75

mg/kg bb 6 5.5000 .83666 .34157 4.6220 6.3780 5.00 7.00

EEKBS 100

mg/kg bb 6 4.1667 .40825 .16667 3.7382 4.5951 4.00 5.00

EEKBS 125

mg/kg bb 6 3.1667 .40825 .16667 2.7382 3.5951 3.00 4.00

EEKBS 150

mg/kg bb 6 2.5000 .54772 .22361 1.9252 3.0748 2.00 3.00

Total 36 4.2500 1.66261 .27710 3.6875 4.8125 2.00 7.00

Perlakuan

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

CMC 1% bb 6 2.9150E2 14.26534 5.82380 276.5294 306.4706 266.00 303.00 Loperamid HCl 1

mg/kg bb 6 1.3883E2 17.52046 7.15270 120.4467 157.2199 120.00 161.00 EEKBS 75 mg/kg

bb 6 2.6333E2 19.92653 8.13497 242.4217 284.2449 241.00 293.00 EEKBS 100 mg/kg

bb 6 1.8500E2 14.22674 5.80804 170.0700 199.9300 168.00 208.00 EEKBS 125 mg/kg

bb 6 1.4133E2 18.59749 7.59239 121.8165 160.8502 116.00 163.00 EEKBS 150 mg/kg

bb 6 97.1667 9.94820 4.06134 86.7267 107.6067 84.00 110.00 Total 36 1.8619E2 72.33052 12.05509 161.7213 210.6676 84.00 303.00

Lampiran 20. Hasil Analisis Statistik Anava

Saat mulai terjadi diare

Konsistensi feses (diameter serapan air)

Konsistensi feses (berat)

Sum of

Squares df

Mean

Square F Sig.

Konsistensi feses berlendir

Between

Groups 5.872 5 1.174 30.367 .000

Within

Groups 1.160 30 .039

Total 7.032 35

Konsistensi feses lembek

Between

Groups 1.747 5 .349 37.150 .000

Within

Groups .282 30 .009

Total _{2.029 35}

Konsistensi feses normal

Between

Groups .030 5 .006 6.926 .000

Within

Groups .026 30 .001

Total _{.056 35}

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 16133.889 5 3226.778 25.297 .000

Within Groups 3826.667 30 127.556

Total 19960.556 35

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Konsistensi feses berlendir

Between

Groups 4.672 5 .934 29.189 .000

Within

Groups .960 30 .032

Total _{5.633 35}

Konsistensi feses lembek

Between

Groups .667 5 .133 33.259 .000

Within

Groups .120 30 .004

Total _{.788 35}

kKonsistensi feses normal

Between

Groups .087 5 .017 6.240 .000

Within

Groups .083 30 .003

Waktu defekasi

Frekuensi diare

Lama terjadi diare

Sum of Squares df

Mean

Square F Sig.

Feses berlendir Between Groups 11896.979 5 2379.396 25.093 .000

Within Groups _{2844.708 30 94.824}

Total 14741.688 35

Feses lembek Between Groups 31879.239 5 6375.848 16.310 .000 Within Groups _{11727.730 30 390.924}

Total 43606.969 35

Feses normal Between Groups 87864.250 5 17572.850 210.160 .000

Within Groups 2508.500 30 83.617

Total 90372.750 35

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 87.250 5 17.450 55.105 .000

Within Groups 9.500 30 .317

Total 96.750 35

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 175335.806 5 35067.161 135.328 .000

Within Groups _{7773.833 30 259.128}

Lampiran 21. Hasil Analisis Statistik Duncan Saat mulai terjadinya diare

Konsistensi feses (diameter serapan air)

berlendir

lembek

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Susp.CMC 1% bb _{6 56.8333}

Susp.EEKBS 75 mg/kg bb _{6 68.1667}

Susp.EEKBS 100 mg/kg bb 6 76.8333

Susp.EEKBS 125 mg/kgbb _{6 98.5000}

Susp.Lop HCL1mg/kg bb _{6 1.0067E2}

Susp.EEKBS 150 mg/kg bb 6 1.1867E2

Sig. _{.092 .194 .742 1.000}

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

EEKBS 150 mg/kg bb _{6 2.0833}

Lop HCL1mg/kg bb _{6 2.1833}

EEKBS 125 mg/kg bb 6 2.2500

EEKBS 100 mg/kg bb _{6 2.6083}

EEKBS 75 mg/kg bb _{6 2.9550}

CMC 1% bb 6 2.9733

Sig. .137 1.000 .860

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

Susp.Lop HCL1mg/kg bb 6 1.0333

Susp.EEKBS 150 mg/kg bb 6 1.0333

Susp.EEKBS 125 mg/kg bb _{6 1.0833}

Susp.EEKBS 100 mg/kg bb 6 1.1133

Susp.EEKBS 75 mg/kg bb _{6 1.1800}

Susp.CMC 1% bb _{6 1.4283}

Sig. _{.053 .078 1.000}

normal

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2

Susp.EEKBS 150 mg/kg bb _{6 .1000}

Susp.Lop HCL1mg/kg bb _{6 .1167}

Susp.EEKBS 125 mg/kg bb _{6 .1167}

Susp.EEKBS 100 mg/kg bb 6 .1333

Susp.EEKBS 75 mg/kg bb _{6 .2000}

Susp.CMC 1% bb 6 .2333

Sig. .327 .282

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Konsistensi feses (berat)

berlendir

lembek

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Susp.EEKBS 150 mg/kg bb _{6 2.0733}

Susp.Lop HCL1mg/kg bb _{6 2.3050}

Susp.EEKBS 125 mg/kgbb 6 2.3750

Susp.EEKBS 100 mg/kg bb _{6 2.7217}

Susp.EEKBS 75 mg/kg bb _{6 3.0717}

Susp.CMC 1% bb _{6 3.1733}

Sig. .050 .542 1.000 .378

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

Susp.Lop HCL1mg/kg bb 6 .8733

Susp.EEKBS 150 mg/kg bb _{6 .8917}

Susp.EEKBS 125 mg/kgbb _{6 .9517}

Susp.EEKBS 100 mg/kg bb _{6 1.0683}

Susp.EEKBS 75 mg/kg bb 6 1.1350

Susp.CMC 1% bb _{6 1.5200}

Sig. _{.196 .243 1.000}

normal

Waktu defekasi

berlendir

lembek

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

Susp.Lop HCL1mg/kg bb _{6 .1417}

Susp.EEKBS 150 mg/kg bb _{6 .1433}

Susp.EEKBS 125 mg/kgbb _{6 .1533}

Susp.EEKBS 100 mg/kg bb _{6 .1717}

Susp.EEKBS 75 mg/kg bb _{6 .2050}

Susp.CMC 1% bb 6 .2150

Sig. _{.117 .060 .562}

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

CMC 1%bb _{6 61.7500}

EEKBS 75 mg/kg bb 6 84.3333

EEKBS 100 mg/kg bb _{6 93.0000}

EEKBS 125 mg/kg bb _{6 1.0467E2}

Loperamid 1 mg/kg bb 6 1.0533E2

EEKBS 150 mg/kg bb _{6 1.1867E2}

Sig. _{1.000 .134 .906 1.000}

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

EEKBS 150 mg/kg bb 6 1.6842E2

Loperamid 1 mg/kg bb _{6 1.6992E2}

EEKBS 125 mg/kg bb _{6 1.7758E2}

EEKBS 100 mg/kg bb _{6 1.9367E2}

EEKBS 75 mg/kg bb 6 2.1612E2

CMC 1%bb _{6 2.5188E2}

Sig. _{.050 .058 1.000}

normal

Frekuensi diare

Lama terjadi diare

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4 5

EEKBS 150 mg/kg bb 6 2.1200E2

Loperamid 1 mg/kg bb 6 2.3950E2

EEKBS 125 mg/kg bb _{6 2.3983E2}

EEKBS 100 mg/kg bb _{6 2.6183E2}

EEKBS 75 mg/kg bb 6 3.2700E2

CMC 1%bb 6 3.4833E2

Sig. _{1.000 .950 1.000 1.000 1.000}

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Susp.EEKBS 150 mg/kg bb 6 2.5000

Susp.Lop.HCl 1 mg/kg bb _{6 3.1667}

Susp.EEKBS 125 mg/kg bb 6 3.1667

Susp.EEKBS 100 mg/kg bb 6 4.1667

Susp.EEKBS 75 mg/kg bb _{6 5.5000}

Susp.CMC 1% bb _{6 7.0000}

Sig. _{.060 1.000 1.000 1.000}

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Kelompok N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4 5

EEKBS 150 mg/kg bb _{6 97.1667}

Susp.Lop.HCl 1 mg/kg bb _{6 1.3883E2}

Susp.EEKBS 125 mg/kg bb _{6 1.4133E2}

Susp.EEKBS 100 mg/kg bb 6 1.8500E2

Susp.EEKBS 75 mg/kg bb _{6 2.6333E2}

Susp.CMC 1% bb 6 2.9150E2

Sig. 1.000 .790 1.000 1.000 1.000

DAFTAR PUSTAKA

Ahmadu, A.A., Zezi, A.A., dan Yano, A.H. (2007) Anti-Diarrheal Activity of the Leaf Extracts of Daniellia Oliveri Hutch and Dalz (Fabaceae) and Ficus Sycomorus Miq (Moraceae). African Journal. 4(4): 524-528.

Ajaib, M. dan Khan, Z.U. (2012). Bischofia javanic : A New Record To The Flora of Pakistan. Biologia (Pakistan). 58(1,2): 179-183.

Anief, M. (1999). Ilmu Meracik Obat, Teori Dan Praktik. Cet. 5. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Hal. 107,169.

Anwar, H.J. (2000). Farmakologi dan Terapi Obat-obatan Saluran Cerna. Jakarta: Penerbit Hipokrates. Hal. 15-17.

Bachheti, R.K., Indra, R., dan Archana, J. (2013). Chemical Composition, Mineral and Nutritional Value of Wild Bischofia javanica seed. Intenasional Food Research Journal. 20(4): 1747-1751.

Clinton, C.N.D. (2009). Plant tannins: A novel approach to the treatment of ulcerative colitis. Natural Medicine Journal. 2: 1-3.

Depkes. (1979). Materia Medika Indonesia. Jilid III. Jakarta: Depkes RI. Hal. 155-171.

Depkes. (1995). Materia Medika Indonesia. Edisi Keenam. Jakarta: Depkes RI. Hal. 323-325.

Depkes. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Depkes RI. Hal. 1, 9-12, 17.

Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Depkes RI. Hal. 9, 33, 649, 696.

Ditjen POM. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Depkes RI. Hal. 300-306, 323-326.

Di Carlo, G., Autore, G., Izzo, A.A., Maiolino, P., Mascolo, N., Viola, P., Diurno, M.V., dan Capasso, F. (1993). Inhibition of Intestinal Motility and Secretory by Flavonoids in Mice and Rats: Structure Activity Relationships. Journal of Pharmacy and Pharmacology. 45(12): 1054-1059.

Farnsworth, N.R. (1966). Biologycal and Phytochemical Screening of Plants. Journal of Pharmaceutical Science. 55(3): 262-264.

Fauci, A.S. (2008). Harrison’s principle of internal medicine. Edisi XVII. New York: Mc Graw Hill. Hal. 249-250.

Friedman, S.L., Kenneth, Mc R.Q., Grendell, J.H. (2003). Current Diagnostic & Treatment in Gastroenterology. Edisi II. New York: Mc Graw Hill. Hal. 301-308.

Goodman, S.L., dan Gilman, A. (1996). The Pharmacological Basis of Therapeutics. Edisi kesembilan. New York: Mc Graw-Hill. Hal. 927. Harbone, J.B. (1987). Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisa

Tumbuhan. Penerjemah Kosasih Padmawinata. Edisi Kedua. Bandung: ITB Press. Hal. 147-148, 281.

Harmida, Vivin, F.Y., dan Sarno. (2011). Studi Etnofitomedika di Desa Lawang Agung Kecamatan Mulak Ulu Kabupaten Lahat Sumatera Selatan. Jurnal Penelitian Sains. 14(1): 14110.

Ikawati, Z. (2008). Pengantar Farmakologi Molekuler. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Hal. 50, 78-81.

Jeejeebhoy, K.N. (1977). Symposium on Diarrhea Definition and Mechanisms of diarrhea. Scientific Section. CMA Journal. 116: 737-739.

Katzung, B.G. (2001). Farmakologi: Dasar dan Klinik. Edisi Pertama. Jakarta: Salemba Medika. Hal. 984-985.

Kumar, R. (2001) Chemical and Biochemical Nature of Fodder Tree Tannins. Journal of Agricultural and food chemistry. 31: 1364-1366.

Lutterodt, G.D. (1989). Inhibition of Gastrointestinal Release of Acetylcholine by Quercetin as a Possible Mode of Action of Psidium guajara leaf Extracts in the Treatment of Acute Diarrhoea Disease. Journal Ethnopharmacology. 23: 235-247.

Markham, K.R. (1988). Cara Mengidentifikasi Flavonoida. Bandung: ITB-Press. Hal. 1-8.

McPhee, S.J., dan Papadakis, M.A. (2007). Current Medical Diagnosis & Treatment. Edisi XLVI. USA: Mc Graw Hill. Hal. 559-560.

Nurdjanah, N., dan Christina, W. (2005). Peluang Tanaman Rempah dan Obat Sebagai Sumber Pangan Fungsional. Jurnal Litbang Pertanian. 24(2): 47-55.

Otshudi, L.A., Vercruysse, A., dan Foriers A. (2000). Contribution to the Ethnobotanical, Phytochemical and Pharmacological Studies of Traditionally Used Medicinal Plant in the Treatment of Dysentery and Diarrhoea in Lomela Area, Democratic Republik of Congo (DRC), Journal of Ethnopharmacol. 71(3): 411-23.

Pradhan K.B. dan Badola K.H. (2008). Ethnomedicinal Plant Use by Lepcha Tribe of Dzongu Valley, Bordering Khangchendzonga Biosphere Reserve, in North Sikkim India. Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine.

4(22): 1-18.

Rajbongshi, P.P., Kamaruz, Z., Sangeeta, B., dan Simanti, D. (2014). A Review on Traditional Use and Phytopharmacological Potential of Bischofia javanica Blume. International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research. 24(2): 24-29.

Robert, M.K. dan Nelson, W.E. (2007). Nelson Textbook of Pediatrics. Edisi XVIII. Philadelphia: Sauders. Hal. 1613-1616.

Robinson, T. (1995). Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi Keenam. Bandung: Penerbit ITB. Hal. 191.

Sardjono, Santoso, dan Dewoto. (1995). Analgesik Opioid dan Antagonis. dalam Farmakologi dan Terapi. Edisi 4. Jakarta. FK-UI. Hal. 200.

Sari., L.O.R.K. (2006). Pemanfaatan Obat Tradisional Dengan Pertimbangan Manfaat Dan Keamanan. Majalah Ilmu Kefarmasian. 3(1): 1-7.

Seed Leaflet. (2012). Bischofia javanica Blume. Copenhagen Forest & Landscape Denmark. 157.

Suharyono. (1991). Diare Akut Klinik dan Laboratorik. Jakarta: PT Rineka Cipta. Hal. 1-2.

Sundari, D., Yun, A.N., dan Budi, N. (2005). Uji Khasiat Antidiare Ekstrak Daun Sendok (Plantago major Linn.) Pada Tikus Putih. Media Litbang Kesehatan. 15(3): 19-23.

Sutharson, L., Nath, L.K., Kar, P.K., Shila E.B., dan Rajan J.V. (2009). Free Radical Scavenging Activity of Leaves of Bischofia javanica Blume and Fraxinus Floribunda Wallich. Pharmacologyonline. 19(7): 5150-5156. Teke, G.N., Kuiate, J.R., Ngouateu, O.B, dan Gatsing, D. (2007). Antidiarrhoel

and antimicrobial Activities Of Emilia cocconea (Sims) G Don Extracts., Journal Of Ethno-Pharmacology. 112(1): 278-283.

Tan, H.T., dan Rahardja, K. (2007) Obat-Obat Penting, Khasiat, Penggunaan dan Efek Sampingnya, Edisi Keempat. Cet. 1. Jakarta: PT. Elex Media Computindo. Hal. 288-289, 296-297.

Trease, G.E. dan Evans, W.C. (1983). Pharmacognosy. Edisi Keduabelas. London: Bailliere Tindal. Hal. 376-380.

Vogel, H. (2002). Drug Discovery and Evaluation. Frankfurt: Springer. Hal. 875-878.

Wells, B.G. (2006). Pharmacotherapy Handbook. Edisi Keenam. Singapore: The Mc Graw Hill Companies. Hal. 222-227.

WHO. (1992). Quality Control Methods For Medical Plant Materials. Geneva: World Healt Organization. Hal. 31-33.

Winda, G.E. (2010). Uji Efek Antidiare Ekstrak Etanol Kulit Batang Salam (Syzygium polyanthum (Wight) Walp.) Terhadap Mencit Jantan. Skripsi Medan: Fakultas Farmasi USU.

BAB III

METODE PENELITIAN

Penelitian ini dilakukan secara eksperimental berdasarkan Rancangan Acak Lengkap (RAL), meliputi pengumpulan sampel, identifikasi sampel, pengolahan sampel, karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak, penyiapan hewan percobaan, dan pengujian efek antidiare secara oral pada tikus. Data hasil penelitian dianalisis secara ANAVA (analisis variansi) dan dilanjutkan dengan uji beda rata-rata Duncan menggunakan program SPSS versi 17.

3.1 Alat dan Bahan

3.1.1 Alat

Alat-alat gelas, pisau, lemari pengering, seperangkat alat maserasi, alat destilasi, oven listrik (Fischer scientific), neraca hewan (Presica Geniweigher GW-1500), neraca listrik (Vibra AJ), ayakan, pipet tetes, desikator (Fischer Scientific), mortir dan stamper, krus porselin, kaca objek (object glass), kaca penutup (deck glass), rotary evaporator, freeze dryer (Edward), blender (National), cawan porselen, cawan porselen berdasar rata, alumunium foil, kertas saring, spatula, stopwatch, kandang hewan, oral sonde, pot plastik, wadah pengamatan.

3.1.2 Bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah kulit batang sikkam, minyak jarak, CMC, loperamid HCl (tablet imodium®), toluen, kloroform, asam klorida 2N, besi (III) klorida, natrium hidroksida, timbal (II) asetat, asam asetat

anhidrat, asam sulfat pekat, natrium klorida, kalium iodida, iodium, α-naftol, asam nitrat, bismuth nitrat, etil asetat, isopropanol, natrium sulfat anhidrat, serbuk seng, serbuk magnesium, metanol, eter, etanol 96 %, air suling.

3.2 Pembuatan Pereaksi 3.2.1 Pereaksi Mayer

Dilarutkan 1,36 g raksa (II) klorida P dalam 60 ml air, tambahkan pada larutan 5 g larutan kalium iodida P dalam 10 ml air, encerkan dengan air seluruhnya hingga 100 ml (Ditjen POM, 1995).

3.2.2 Pereaksi Dragendroff

Dilarutkan 8 g bismuth nitrat P dilarutkan dalam asam nitrat 20 ml kemudian dicampur dengan larutan kalium iodida 27,2 g dalam 50 ml air suling. Campuran didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan jernih diambil dan diencerkan dengan air secukupnya hingga 100 ml (Ditjen POM, 1995).

3.2.3 Pereaksi Bouchardat

Dilarutkan 2 g iodium P dan 4 g kalium iodida P dalam air secukupnya hingga diperoleh 100 ml larutan (Ditjen POM, 1995).

3.2.4 Pereaksi Molish

Dilarutkan 3 g α-naftol dalam asam nitrat 0,5 N secukupnya hingga diperoleh 100 ml larutan (Ditjen POM, 1995).

3.2.5 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1%

Dilarutkan 1 g besi (III) klorida dalam air suling hingga diperoleh 100 ml larutan kemudian disaring (Ditjen POM, 1995).

Dilarutkan 15,17 g timbal (II) asetat dengan air suling bebas CO2 hingga

diperoleh 100 ml larutan (Ditjen POM, 1995).

3.2.7 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2 N

Dilarutkan 8,001 g natrium hidroksida dalam air suling hingga diperoleh 100 ml larutan (Ditjen POM, 1995).

3.2.8 Larutan pereaksi asam sulfat 2 N

Sebanyak 10 ml asam sulfat pekat diencerkan dengan air suling hingga diperoleh 100 ml larutan (Ditjen POM, 1979).

3.2.9 Larutan pereaksi asam klorida 2 N

Sebanyak 17 ml asam klorida pekat diencerkan dengan air suling hingga diperoleh 100 ml larutan (Ditjen POM. (1979).

3.3 Pengumpulan dan Pengolahan Sampel 3.3.1 Pengumpulan sampel

Pengumpulan tumbuhan dilakukan secara purposif, yaitu berdasarkan pertimbangan peneliti dengan memilih batang yang telah dewasa dan tanpa membandingkan dengan daerah lain. Tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah kulit batang sikkam (Bischofia javanica Blume), diambil dari kebun warga di Raya, Kabupaten Simalungun, Provinsi Sumatera Utara.

3.3.2 Identifikasi sampel

Determinasi sampel dilakukan di Pusat Penelitian Biologi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor.

3.3.3 Pengolahan tumbuhan

Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah kulit batang sikkam yang masih segar. Sebelum pengulitan, kulit dibersihkan dari lumut atau kotoran

lain dengan cara dikerok atau ditoreh, selanjutnya kulit dicungkil dari lingkaran atas ke bawah. Diperoleh irisan kulit kira-kira dengan lebar 5 - 10 cm dan panjang 10 - 20 cm. Kulit batang dicuci sampai bersih dan ditiriskan, kemudian dikeringkan. Untuk mempercepat pengeringan, kulit batang dipotong kecil-kecil dengan ukuran kurang lebih 2,5 x 3,5 cm. Kulit batang sikkam yang sudah bersih ditimbang berat seluruhnya sebagai berat basah, kemudian dikeringkan di lemari pengering pada temperatur ± 40oC. Setelah kering, simplisia diserbuk hingga halus menggunakan blender dan diayak. Disimpan dalam wadah plastik yang tertutup rapat.

3.4 Pemeriksaan Karakteristik

Dilakukan pemeriksaan karakteristik simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam yang meliputi pemeriksaan makroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari yang larut dalam air, penetapan kadar sari yang larut dalam etanol, penetapan kadar abu total dan penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam (Ditjen POM, 1995; WHO, 1992).

3.4.1 Makroskopik

Pemeriksaan makroskopik dilakukan terhadap simplisia kulit batang sikkam meliputi bentuk, bau, warna dan rasa.

3.4.2 Penetapan kadar air

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluen). Alat terdiri dari alas bulat 500 ml, alat penampung, pendingin, tabung penyambung dan tabung penerima 10 ml.

Sebanyak 200 ml toluena dan 2 ml air suling dimasukkan ke dalam labu alas bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml.

b. Penetapan kadar air

Kemudian kedalam labu tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam yang telah ditimbang seksama, labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes untuk tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO, 1992).

3.4.3 Penetapan kadar sari larut air

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam yang telah dikeringkan, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling 1000 ml) dalam labu bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, dibiarkan selama 18 jam, kemudian disaring. Diuapkan 20 ml filtrat sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes, 1995).

3.4.4 Penetapan kadar sari larut etanol

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam yang telah dikeringkan dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96 % dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Kemudian disaring, 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan berdasar rata yang telah ditara dan sisanya dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar sari larut dalam etanol dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).

3.4.5 Penetapan kadar abu total

Sebanyak 2 g serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam yang telah digerus dan ditimbang seksama dimasukkan dalam krus platina atau krus silikat yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pemijaran dilakukan pada suhu 600oC selama 3 jam. Kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes, 1995).

3.4.6 Penetapan kadar abu tidak larut asam

Abu yang telah diperoleh dalam penetapan abu didinginkan dengan 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, cuci dengan air panas, disaring dengan kertas masir atau kertas saring bebas abu, dipijarkan sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bobot yang dikeringkan di udara (Depkes, 1995).

3.5 Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam meliputi: pemeriksaan senyawa golongan alkaloid, flavonoid, glikosida, tanin, saponin dan steroid/triterpenoid (Depkes, 1995).

3.5.1 Pemeriksaan alkaloida

Serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan diatas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat yang diperoleh dipakai untuk uji alkaloida: diambil 3 tabung reaksi, lalu kedalamnya dimasukkan 0,5 ml filtrat.

Pada masing-masing tabung reaksi; 1. ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer 2. ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat 3. ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff

Alkaloida positif jika terjadi endapan atau kekeruhkan pada paling sedikit dua dari tiga percobaan diatas (Depkes, 1995).

3.5.2 Pemeriksaan flavonoid

Sebanyak 10 g serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam ditambahkan 100 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas. Filtrat yang diperoleh kemudian diambil 5 ml lalu ditambahkan 0,1 g serbuk Mg dan 1 ml HCl pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok, dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah, kuning, jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966).

3.5.3 Pemeriksaan glikosida

Serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam ditimbang sebanyak 3 g, lalu disari dengan 30 ml campuran etanol 95 % dengan air (7:3) dan 10 ml asam klorida 2 N, direfluks selama 2 jam, didinginkan dan disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:3), dilakukan berulang sebanyak 3 kali. Sari air dikumpulkan dan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 50o

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam dimasukkan kedalam tabung reaksi ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudian dikocok selama 10 detik. Jika terbentuk buih yang mantap setinggi

C. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sisa digunakan untuk percobaan berikut: 0,1 ml larutan percobaan dimasukan dalam tabung reaksi dan diuapkan di atas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molish. Kemudian secara perlahan-lahan ditambahkan 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuknya cincin berwarna ungu pada batas kedua cairan menunjukkan ikatan gula (Depkes, 1995).

3.5.4 Pemeriksaan tanin

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam disari dengan 10 ml air suling lalu disaring, filtratnya diencerkan sampai tidak berwarna. Larutan diambil sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1 - 2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi warna biru kehitaman atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Harbone, 1987).

1-10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan satu tetes asam klorida 2 N menunjukkan adanya saponin (Ditjen POM, 1995).

3.5.6 Pemeriksaan steroid/triterpenoid

Sebanyak 1 g serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam dimaserasi dengan 20 ml eter selama 2 jam, disaring, filtrat diuapkan dalam cawan penguap dan pada sisanya ditambahkan 2 tetes pereaksi Lieberman-Bourchard. Apabila terbentuk warna ungu atau merah yang berubah menjadi biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroid/triterpenoid (Ditjen POM, 1995).

3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Batang Sikkam (EKKBS)

Pembuatan ekstrak sikkam dilakukan secara maserasi menggunakan etanol 80% (Depkes, 1979).

Cara kerja:

Sebanyak 1200 g serbuk simplisia sikkam dimasukkan ke dalam wadah kaca berwarna gelap, kemudian dituangi dengan 9000 ml etanol 80%. Ditutup dan dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk, diserkai dan diperas. Ampas dicuci dengan 3000 ml etanol 80%, dipindahkan ke dalam bejana tertutup, dibiarkan di tempat sejuk, terlindung dari cahaya selama 2 hari, selanjutnya disaring. Maserat etanol yang diperoleh diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator pada temperatur ±40oC sampai diperoleh ekstrak kental kemudian dikeringkan menggunakan freeze dryer.

3.7 Percobaan Efek Antidiare

Percobaan efek antidiare meliputi penyiapan hewan percobaan, penyiapan

bahan uji, kontrol, loperamid HCl sebagai obat pembanding, oleum ricini sebagai induktor diare dan pengujian efek antidiare.

3.7.1 Penyiapan hewan percobaan

Hewan percobaan yang digunakan adalah tikus jantan putih dengan berat badan 160-210 g sebanyak 36 ekor, dibagi dalam 6 kelompok dimana setiap kelompok terdiri dari 6 ekor tikus. Dua minggu sebelum pengujian dilakukan hewan percobaan harus dipelihara dan dirawat dengan sebaik-baiknya pada kandang yang mempunyai ventilasi baik dan selalu dijaga kebersihannya. Hewan yang sehat ditandai dengan pertumbuhan dan suhu badan yang normal (Depkes, 1979).

3.7.2 Penyiapan bahan

Bahan yang digunakan meliputi suspensi CMC sebagai kontrol, suspensi loperamid HCl (imodium®) sebagai pembanding, suspensi ekstrak kulit batang sikkam sebagai bahan uji dan oleum ricini sebagai induktor diare. Pembuatan sediaan dalam bentuk suspensi bertujuan untuk mendispersikan zat-zat yang tidak larut dalam air seperti bahan tambahan pada tablet imodium® dan golongan senyawa non polar yang terkandung di dalam ekstrak.

3.7.2.1 Pembuatan suspensi CMC 1% (b/v)

Sebanyak 1 g CMC ditaburkan ke dalam lumpang yang berisi air suling panas sebanyak 20 ml, ditutup dan dibiarkan selama 30 menit hingga diperoleh massa yang transparan, digerus lalu diencerkan dengan air suling hingga 100 ml (Anief, 1999).

3.7.2.2 Pembuatan suspensi loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb

Tablet imodium mengandung 2 mg loperamid HCl, ditimbang sebanyak 20 tablet kemudian digerus dan diambil sebanyak 900 mg dimasukkan ke dalam lumpang. Selanjutnya ditambahkan suspensi CMC 1% sedikit demi sedikit sambil digerus sampai homogen lalu dicukupkan dengan suspensi CMC 1% hingga 50 ml. 3.7.2.3 Pembuatan suspensi EEKBS konsentrasi 2,25; 3; 3,75; 4,5% (b/v)

Sebanyak 2250 mg dimasukkan ke dalam lumpang, lalu ditambahkan sedikit suspensi CMC 1% digerus samapi homogen, selanjutnya dicukupkan dengan CMC 1% sampai 50 ml (4,5%). Pembuatan EEKBS dengan variasi konsentrasi (2,25; 3; 3,75)% dilakukan dengan mengambil (5; 6,7; 8,3) ml larutan suspensi EEKBS 4,5% masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan suspensi CMC 1%.

3.7.3 Pengujian efek antidiare

Dosis EEKBS ditentukan berdasarkan orientasi pada hewan percobaan terhadap parameternya, yaitu 25, 50, 75, 100, 125, 150 mg/kg bb. Hasil orientasi menunjukkan bahwa dosis yang memberikan efek antidiare paling baik adalah dosis 75 mg/kg bb (2,25%), 100 mg/kg bb (3%), 125 mg/kg bb (3,75%) dan 150 mg/kg bb (4,5%) sedangkan dosis 25 dan 50 mg/kg bb tidak memiliki efek yang signifikan. Larutan suspensi dibuat bervariasi agar pemberian dosis ekstrak terhadap setiap tikus pada masing-masing kelompok seragam yaitu sebesar 0,667 ml/tikus, sebagai pembanding suspensi loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb konsentrasi 0,03% dengan pemberian 0,667ml/tikus dan kontrol suspensi CMC 1%.

Tikus diaklitimasi 18 jam sebelum penelitian, dikelompokkan menjadi 6 kelompok dan kemudian diberikan oleum ricini sebanyak 2 ml/kg bb setiap

ekornya. Satu jam setelah pemberian oleum ricini masing-masing kelompok diberi perlakuan yaitu kelompok kontrol diberikan suspensi CMC 1% bb, kelompok pembanding diberikan suspensi loperamid HCl 1 mg/kg bb dan kelompok bahan uji diberikan suspensi EEKBS yang terdiri dari empat dosis yaitu 75, 100, 125 dan 150 mg/kg bb, lalu tikus ditempatkan dalam wadah pengamatan. Pengamatan dimulai 30 menit setelah pemberian oleum ricini dilakukan selama 6 jam. Parameter yang diamati meliputi saat mulai terjadinya diare, konsistensi feses, frekuensi diare dan frekuensi defekasi (Sundari, dkk., 2005).

3.8 Analisis Data

Data hasil pengamatan terhadap saat mulai terjadinya diare, konsistensi feses, frekuensi diare dan lama terjadinya diare dianalisis secara statistik berdasarkan rata-rata masing-masing kelompok dengan metode analisis variansi (ANAVA) pada tingkat kepercayaan 95%, dilanjutkan dengan uji beda rata-rata Duncan untuk melihat perbedaan nyata antar kelompok perlakuan. Analisis statistik ini menggunakan program SPSS (Statistical Product and Service Solution) versi 17.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Sampel

Identifikasi sampel dilakukan di Herbarium Bogoriense, Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor. Hasilnya menunjukkan sampel yang digunakan adalah benar kulit batang sikkam (Bischofia javanica Blume). Terlihat Lampiran 1, halaman 49.

4.2Hasil Karakterisasi

4.2.1 Pemeriksaan makroskopik

Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia kulit batang sikkam merupakan potongan-potongan kulit yang lebar dengan permukaan luar berwarna coklat tua sedang bagian dalam berserat berwarna coklat kemerahan dengan rasa kelat. Gambar simplisia sikkam dapat dilihat pada Lampiran 2, halaman 50.

4.2.2 Pemeriksaan karakteristik

Karakteristik serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam (EEKBS) yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 4.1.

Tabel 4.1 Hasil karakterisasi serbuk simplisia dan EEKBS

No. Characteristic

Hasil

Serbuk simplisia (%) Ekstrak etanol (%) 1.

2. 3. 4. 5.

Kadar air

Kadar sari larut air Kadar sari larut etanol Kadar abu total

Kadar abu tidak larut asam

5,99 17,49 11,84 4,07 6,06

7,32 32,97 23,26 0,48 0,01

Karakteristik serbuk simplisia kulit batang sikkam tidak tercantum di buku Materia Medika Indonesia. Berdasarkan persyaratan umum, kadar air simplisia memenuhi syarat di mana tidak lebih dari 10%, karena jika melebihi persyaratan, memungkinkan terjadinya pertumbuhan jamur.

Penetapan kadar sari larut air dilakukan untuk mengetahui banyaknya senyawa yang ikut tersari dengan air seperti glikosida, gula, protein, enzim, zat warna, dan asam organik. Penetapan kadar sari larut etanol digunakan untuk mengetahui banyaknya senyawa kimia yang terlarut dalam pelarut etanol seperti glikosida, steroida, flavonoida, klorofil, dan dalam jumlah sedikit yang larut yaitu lemak. Tujuan penetapan kadar abu adalah untuk memberikan gambaran kandungan mineral internal dan eksternal yang berasal dari proses awal sampai terbentuknya ekstrak (Depkes, 2000).

4.3Hasil Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia dilakukan terhadap serbuk simplisia dan EEKBS di mana hasilnya menunjukkan bahwa kulit batang sikkam mengandung senyawa kimia golongan flavanoida, glikosida, tanin dan triterpenoid.

Flavanoida diskrining dengan penambahan sebuk Mg, asam klorida pekat akan memberikan warna merah. Skrining glikosida ditunjukkan dengan terbentuknya cincin ungu dengan penambahan Molish dan asam sulfat pekat. Penambahan FeCl3 1% memberikan warna biru kehitaman yang menunjukkan

adanya tanin yaitu 3 buah gugus hidroksil. Warna merah muda atau ungu pada penambahan beberapa tetes pereaksi Liebermann-Burchard menunjukkan adanya triterpenoida. Senyawa kimia yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 4.2.

Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang

sikkam

Keterangan:

(+) positif : mengandung golongan senyawa (-) negatif : tidak mengandung golongan senyawa

4.4 Pengujian Efek Antidiare

Pengujian efek antidiare dari suspensi EEKBS diawali dengan melakukan orientasi dengan menggunakan dosis 25, 50, 75, 100, 125 dan 150 mg/kg bb. Hasil orientasi menunjukkan bahwa dosis 75, 100, 125, 150 mg/kg bb memberikan efek terhadap penurunan diare sedangkan dosis 25 dan 50 mg/kg bb tidak memberikan efek yang signifikan terhadap penurunan diare.

Tikus yang telah diaklitimasi 18 jam sebelum penelitian, dikelompokkan menjadi 6 kelompok dan kemudian diberikan oleum ricini sebanyak 2 ml setiap ekornya. Satu jam kemudian masing-masing kelompok diberi perlakuan yaitu kelompok kontrol diberikan suspensi CMC 1% bb, kelompok pembanding diberikan suspensi loperamid HCl 1 mg/kg bb dan kelompok bahan uji diberikan suspensi EEKBS yang terdiri dari empat dosis yaitu 75, 100, 125 dan 150 mg/kg bb. Penentuan efek antidiare dari ekstrak etanol kulit batang sikkam dilakukan

No Pemeriksaan Hasil

Serbuk simplisia Ekstrak etanol

1 Alkaloida - -

2 Flavanoida + +

3 Glikosida + +

4 Saponin - -

5 Tanin + +

dengan cara mengamati saat mulai terjadinya diare, konsistensi feses, frekuensi diare dan lama terjadinya diare.

4.4.1 Penentuan saat mulai terjadinya diare

Hasil penentuan saat mulai terjadinya diare dapat dilihat pada Tabel 4.3.

Tabel 4.3 Hasil analisis data saat mulai terjadinya diare

Keterangan:

OR : oleum ricini

EEKBS : ekstrak etanol kulit batang sikkam

Pada Tabel 4.3 dapat dilihat adanya perubahan yang nyata (p < 0,05) antara dosis dan rata-rata waktu mulai terjadinya diare pada hewan uji setelah pemberian EEKBS sebagai antidiare. Pada pemberian CMC diperoleh waktu saat mulai diare pada menit 56,83 ± 2,04 yang menggambarkan ada tidaknya pengaruh pembawa terhadap penginduksi, namun setelah pemberian EEKBS dengan dosis yang bervariasi terlihat adanya perubahan waktu mulai terjadinya diare. Hal ini memperlihatkan bahwa EEKBS dosis 150 mg/kg bb (118,67 ± 1,50) memiliki waktu mulai terjadi diare paling lama dibandingkan dengan EEKBS dosis 100 mg/kg bb (76,83 ± 13,49), dosis 75 mg/kg bb (68,18 ± 14,27) dan dosis 125 mg/kg bb (98,50 ± 14,03).

Kel Perlakuan Saat mulai terjadinya diare (menit

ke-) ± SD

1 OR + CMC 1% bb 56,83 ± 2,04

2 OR + loperamid HCl 1 mg/kg bb 100,67 ± 13,26

3 OR + EEKBS 75 mg/kg bb 68,16 ± 14,27

4 OR + EEKBS 100 mg/kg bb 76,83 ± 13,49

5 OR + EEKBS 125 mg/kg bb 98,50 ± 14,03

Gambar 4.1 Grafik saat mulai terjadi diare

Pada Gambar 4.1 dapat dilihat perbedaan grafik dari masing-masing kelompok perlakuan. Pemberian loperamid HCl 1 mg/kg bb menyebabkan perubahan waktu yang sangat berarti yaitu pada menit 100,67 ± 13,26, dimana waktu mulai terjadinya diare lebih lama dibanding dengan EEKBS dosis 75 dan 100 mg/kg bb. Berdasarkan uji statistik, EEKBS dosis 125 mg/kg bb tidak berbeda signifikan dengan loperamid HCl 1 mg/kg bb, tetapi berbeda signifikan terhadap kelompok dosis 150 mg/kg bb. Sampel uji dinyatakan memiliki efek antidiare, jika waktu mulai terjadi diare yang diperoleh lebih lama daripada kontrol dan semakin cepat terjadinya diare, maka efek antidiare akan semakin lemah. Hasil penentuan saat mulai terjadinya diare dapat dilihat pada analisis Duncan Lampiran 21, halaman 79.

Pengujian efek antidiare pada penelitian ini menggunakan metode yang sama dengan penelitian yang telah dilakukan Winda (2010), yaitu metode defekasi dengan menggunakan oleum ricini sebagai penginduksi. Perbedaanya terletak pada banyaknya oleum ricini yang diberikan pada hewan uji.

56,8 100,7 58,3 61,7 68,2 76,8 0,0 20,0 40,0 60,0 80,0 100,0 120,0

CMC 1% bb Lop. HCl 1 mg/kg bb EEKBS 25 mg/kg bb EEKBS 50 mg/kg bb EEKBS 75 mg/kg bb EEKBS 100 mg/kg bb saat mul ai de fe ka si (me n it ke -)

Waktu mulai terjadinya diare pada penelitian Winda yang diberi oleum ricini 0,5 ml/ekor adalah menit ke-129,2. Hasil tersebut berbeda dengan penelitian ini, yaitu pada menit ke-100,7 dengan pemberian oleum ricini 2 ml/ekor. Perbedaan waktu mulai terjadinya diare tersebut disebabkan pengaruh jumlah oleum ricini yang diberikan pada hewan uji. Semakin banyak penginduksi yang diberikan, maka semakin cepat diare yang ditimbulkan (Tan dan Rahardja, 2002).

4.4.2 Penentuan konsistensi feses

Penentuan konsistensi feses dapat dilakukan dengan cara melihat bentuk feses yang terjadi. Hasil penentuan konsiatensi feses dapat dilihat pada Tabel 4.4 berikut ini:

Tabel 4.4 Hasil analisis data diameter serapan air

Keterangan:

OR : oleum ricini

EEKBS : ekstrak etanol kulit batang sikkam

Konsistensi feses dapat dikategorikan ke dalam tiga kelompok yaitu berlendir (BL) dengan diameter serapan air lebih besar dari 2 cm, lembek (L) dengan diameter serapan air antara 1-2 cm dan normal (N) dengan diameter serapan air lebih kecil dari 1 cm.

Kel Perlakuan

Diameter serapan air berlendir

(cm) ± SD

lembek (cm) ± SD

Normal (cm) ± SD

1 OR + CMC 1% bb 2,97 ± 0,24 1,42 ± 0,12 0,23 ± 0,51

2 OR + lop. HCl 1 mg/kg bb 2,18 ± 0,18 1,03 ± 0,04 0,11 ± 0,04

3 OR + EEKBS 75 mg/kg bb 2,95 ± 0,18 1,18 ± 0,04 0,20 ± 0,08

4 OR + EEKBS 100 mg/kg bb 2,60 ± 0,14 1,11 ± 0,03 0,13 ± 0,05

5 OR + EEKBS 125 mg/kg bb 2,25 ± 0,17 1,08 ± 0,02 0,11 ± 0,04

Tabel 4.5 Hasil analisis data berat feses

Keterangan:

OR : oleum ricini

EEKBS : ekstrak kulit batang sikkam

Gambar 4.2 Grafik konsistensi feses

Pada Tabel 4.4; 4.5 dan Gambar 4.2 di atas dapat dilihat hubungan antara dosis, diameter serapan air dan berat feses hewan uji setelah pemberian EEKBS seperti yang terlihat pada Lampiran 16, halaman 69.

Berdasarkan hasil analisis statistik ANAVA (p < 0,05) dilanjutkan uji beda rata-rata Duncan konsistensi feses berlendir, menunjukkan bahwa diameter serapan air yang dihasilkan kelompok dosis 100 mg/kg bb berbeda signifikan

0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 2,50 3,00

CMC 1 %

bb Lop. HCl 1

mg/kg bb EEKBS 75

mg/kg bb EEKBS 100

mg/kg bb EEKBS 125

mg/kg bb EEKBS 150

mg/kg bb 0.21 0.14 _0,20 0.17 0.15 0.14 1.52 _0.87 1.13 _1.06 0.95 0.89 3.17 _2.30 3.07 _2.72 2.37 2.07 di ame te r s er apa n air (cm ) normal lembek berlendir 1.03 1.42 2 3 1.18 1.11 1.08 _1.03 0.23 1 0.11 0.20 0.13 0.11 0.10 2.93 2.18 2.95 2.60 2.25 2.08

Kel Perlakuan

Berat feses berlendir

(g) ± SD

lembek (g) ± SD

normal (g) ± SD

1 OR + CMC 1% bb 3,17 ± 0,26 1,52 ± 0,12 0,21 ± 0,01

2 OR + lop. HCl 1 mg/kg bb 2,30 ± 0,17 0,87 ± 0,07 0,14 ± 0,03

3 OR + EEKBS 75 mg/kg bb 3,07 ± 0,23 1,13 ± 0,03 0,20 ± 0,03

4 OR + EEKBS 100 mg/kg bb 2,72 ± 0,14 1,06 ± 0,12 0,17 ± 0,02

5 OR + EEKBS 125 mg/kg bb 2,37 ± 0,18 0,95 ± 0,08 0,15 ± 0,04

dengan masing-masing kelompok. Perbedaan yang tidak signifikan dihasilkan oleh kelompok pembanding, dosis 125 dan 150 mg/kg bb, begitu juga antara kelompok dosis 75 mg/kg bb dengan kelompok kontrol. Apabila dilihat dari berat feses yang dihasilkan, maka dosis 100 dan 150 mg/kg bb memiliki efek yang berbeda secara signifikan terhadap kelompok lainnya sedangkan antara kelompok dosis 125 mg/kg bb dengan pembanding dan antara kelompok dosis 75 mg/kg bb dengan kelompok kontrol tidak berbeda secara signifikan.

Pada uji beda rata-rata Duncan feses lembek, menunjukkan bahwa diameter serapan air dan berat feses yang dihasilkan kelompok kontrol, berbeda secara signifikan terhadap masing-masing kelompok. Efek yang tidak berbeda secara signifikan dihasilkan oleh kelompok dosis 125, 150 mg/kg bb dan kelompok pembanding, demikian juga antara kelompok dosis 75 mg/kg bb dengan dosis 100 mg/kg bb.

Hasil uji Duncan feses normal, menunjukkan bahwa diameter serapan air yang dihasilkan kelompok kontrol dan dosis 75 mg/kg bb berbeda secara signifikan terhadap kelompok pembanding, dosis 100, 125 dan 150 mg/kg bb. Dilihat dari berat feses yang dihasilkan, antara kelompok pembanding, dosis 125 dan 150 mg/kg bb tidak berbeda signifikan, demikian juga antara kelompok dosis 75 dengan 100 mg/kg bb sedangkan kelompok kontrol, efek yang dihasilkan berbeda signifikan terhadap masing-masing kelompok.

Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa semakin besar diameter serapan air maka feses yang terbentuk semakin berat. Pada Tabel 4.6 berikut ini dapat dilihat hubungan antara dosis, waktu defekasi dan konsistensi feses hewan uji setelah pemberian EEKBS.

Tabel 4.6 Waktu defekasi setiap 30 menit selama 6 jam pengamatan setelah

diberi oleum ricini

Keterangan:

Pada kelompok kontrol, konsistensi feses berlendir terjadi pada menit 54 -177, lembek 184 - 321 dan feses normal terbentuk pada menit 326 - 359. Kelompok pembanding, feses berlendir terjadi pada menit 87 - 117, lembek 143 - 235 dan normal terbentuk pada menit 234 - 250. Pada kelompok dosis 75 mg/kg

Kel

hewan Menit ke-

I II III IV V VI VII VIII IX X XI XII

CMC 1% bb

1 56 65 167 201 254 289 321 359

2 54 69 112 171 198 236 288 353

3 60 75 134 163 184 223 279 326

4 58 73 99 177 228 262 281 342

5 56 61 140 157 238 286 311 358

6 57 106 125 191 213 265 293 352

Lop.HCl 1 mg/kg

bb

1 114 143 176 234

2 114 148 192 238

3 87 117 144 209 236

4 89 115 163 235 250

5 90 149 218 243

6 110 167 236

EEKBS 75 mg/kg

bb

1 60 76 170 207 255 321

2 59 101 125 176 183 256 291 325

3 60 89 162 185 261 329

4 88 106 168 217 254 330

5 57 85 148 193 231 281 331

6 85 116 203 226 263 326

EEKBS 100 mg/kg

bb

1 86 98 160 197 225 271

2 83 138 164 224 251

3 60 102 189 230 268

4 87 111 172 201 259

5 59 99 161 205 248

6 86 107 156 234 274

EEKBS 125 mg/kg

bb

1 89 118 122 238

2 90 107 233 253

3 119 141 168 235

4 114 131 199 235

5 89 117 177 228 241

6 90 159 218 237

EEKBS 150 mg/kg

bb

1 113 174 208

2 89 144 168 199

3 118 177 190 221

4 116 148 204

5 107 166 210

6 119 170 198 230

: Feses berlendir : Feses lembek : Feses normal

I : 0-30 II : 30-60 III : 60-90 IV : 90-120 _{V : 120-150 VI : 150-180}

XII : 330-360

bb, feses berlendir mulai terbentuk pada menit ke-57 - 125, lembek 148 - 291dan terbentuknya feses normal dimulai pada menit 321 - 331. Konsistensi feses yang terjadi pada pemberian EEKBS 100 mg/kg bb, berlendir pada menit 59 - 138, lembek 156 - 234 dan normal terjadi pada menit 248 - 274. Pada kelompok dosis 125, feses berlendir mulai terbentuk di menit 89 - 119, lembek 122 - 233, dan feses normal menit 235 - 253 sedangkan pada kelompok dosis 150 mg/kg bb, terbentuknya feses berlendir terjadi pada menit 89 - 119, lembek 144 - 198 dan normal 204 - 230.

EEKBS dosis 125 mg/kg bb dapat membentuk konsistensi feses normal yang tidak berbeda signifikan (p < 0,05) dengan kelompok pembanding. Dari hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa semakin cepat terbentuk konsistensi feses normal, maka semakin kuat efek anti diare yang dimilikinya.

4.4.3 Penentuan frekuensi diare

Pada Tabel 4.7 dan Gambar 4.3, terlihat hubungan antara dosis dengan frekuensi diare pada hewan uji setelah pemberian EEKBS seperti yang terlihat pada Lampiran 17, halaman 70.

Tabel 4.7 Hasil analisis data frekuensi diare

Keterangan:

OR : oleum ricini

EEKBS : ekstrak etanol kulit batang sikkam

Kel Perlakuan frekuensi ± SD

1 OR + CMC 1% bb 7,00 ± 0,00

2 OR + lop. HCl 1 mg/kg bb 3,16 ± 0,75 3 OR + EEKBS 75 mg/kg bb 5,50 ± 0,83 4 OR + EEKBS 100 mg/kg bb 4,16 ± 0,40 5 OR + EEKBS 125 mg/kg bb 3,16 ± 0,40 6 OR + EEKBS 150 mg/kg bb 2,50 ± 0,54

Hasil pengujian EEKBS terhadap antidiare terlihat adanya perubahan yang nyata (p<0,05) terhadap frekuensi diare bila dibandingkan dengan frekuensi yang dihasilkan oleh kelompok kontrol (7,0 ± 0,00 kali). Pemberian dosis 125 mg/kg bb menyebabkan penurunan frekuensi diare (3,16 ± 0,40 kali) yang sebanding dengan kelompok pembanding (3,16 ± 0,75 kali) lebih kecil daripada kelompok dosis 75 mg/kg bb (5,5 ± 0,83 kali) dan 100 mg/kg bb (4,16 ± 0,40 kali), tetapi dengan pemberian dosis 150 mg/kg bb frekuensi diare yang ditimbulkan lebih sedikit daripada kelompok pembanding yaitu 2,50 ± 0,54.

Gambar 4.3 Grafik frekuensi diare

Berdasarkan hasil analisis statistik ANAVA (p<0,05) dilanjutkan uji beda rata-rata Duncan frekuensi diare menunjukkan bahwa kelompok kontrol, dosis 75 dan 100 mg/kg bb berbeda signifikan terhadap masing-masing kelompok saedangkan antara kelompok pembanding, dosis 125 dan 150 mg/kg bb tidak berbeda secara signifikan.

Dari hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa semakin tinggi frekuensi terjadinya diare, maka efek antidiare akan semakin lemah. Hasil penentuan saat mulai terjadinya diare dapat dilihat pada analisis Duncan Lampiran 21, halaman 79. 7,0 3,2 5,5 4,2 3,2 2,5 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 8,0

CMC 1% bb Lop. HCl 1

mg/kg bb EEKBS 75 mg/kg bb EEKBS 100 mg/kg bb EEKBS 125 mg/kg bb EEKBS 150 mg/kg bb fr ekue n si di a re

4.4.4 Penentuan lama terjadinya diare

Pada Tabel 4.8 dan Gambar 4.4, terlihat hubungan antara dosis dengan lama terjadinya diare pada hewan uji setelah pemberian EEKBS seperti yang terlihat pada Lampiran 18, halaman 71.

Tabel 4.8 Hasil analisis lama terjadinya diare

Keterangan:

OR : oleum ricini

EEKBS : ekstrak etanol kulit batang sikkam

Pemberian oleum ricini dan CMC menghasilkan lama terjadi diare 291 ± 14,26 menit, namun setelah pemberian EEKBS dengan dosis yang bervariasi mengakibatkan waktu lama terjadinya diare menjadi berkurang. EEKBS dosis 150 mg/kg bb (97 ± 9,94 menit) memiliki waktu lama terjadi diare tersingkat jika dibandingkan kelompok dosis 75 mg/kg bb (263 ± 19,92 menit), dosis 100 mg/kg bb (185 ± 14,22 menit), dosis 125 mg/kg bb (141 ± 18,59 menit) dan kelompok pembanding (138 ±17,52 menit).

Gambar 4.4 Grafik lama terjadi diare

308,2 138,8 263,3 184,2 141,3 97,2 0,0 100,0 200,0 300,0 400,0

CMC 1 % bb Lop. HCl 1 mg/kg bb EEKBS 75 mg/kg bb EEKBS 100 mg/kg bb EEKBS 125 mg/kg bb EEKBS 150 mg/kg bb w ak tu (m e n it)

Kel Perlakuan Lama terjadi diare (menit) ± SD

1 OR + CMC 1% bb 291 ± 14,26

2 OR + loperamid HCl 1 mg/kg bb 138 ± 17,52 3 OR + EEKBS 75 mg/kg bb 263 ± 19,92 4 OR + EEKBS 100 mg/kg bb 185 ± 14,22 5 OR + EEKBS 125 mg/kg bb 141 ± 18,59 6 OR + EEKBS 150 mg/kg bb 97 ± 9,94

Dari hasil analisis statistik ANAVA (p<0,05) dilanjutkan uji beda rata-rata Duncan lama terjadinya diare menunjukkan bahwa kelompok kontrol, dosis 75, 100 dan 150 mg/kg bb berbeda secara signifikan terhadap masing-masing kelompok sedangkan efek yang tidak berbeda secara signifikan (P<0,05) dihasilkan oleh kelompok dosis 125 mg/kg bb dengan pembanding. Hasil penentuan saat mulai terjadinya diare dapat dilihat pada analisis Duncan Lampiran 21, halaman 79.

Dari parameter yang telah diamati, efek antidiare dapat dikategorikan berdasarkan tingkat efektivitasnya dalam menekan diare sebagai berikut:

1. lemah, bila efek antidiare diatas efek kelompok kontrol dan dibawah efek kelompok pembanding.

2. sebanding/ sama, bila efek antidiare sama dengan efek kelompok pembanding.

3. kuat, bila efek antidiare diatas efek kelompok pembanding.

Berdasarkan kategori diatas, efek antidiare dari masing-masing kelompok bahan uji dapat dikategorikan sebagai berikut: dosis 75 dan 100 mg/kg bb mempunyai efektivitas yang lemah; dosis 125 mg/kg bb mempunyai efektivitas yang sebanding atau sama dan dosis 150 mg/kg bb mempunyai efektivitas yang kuat.

Hasil penelitian terdahulu melaporkan bahwa kandungan senyawa aktif dari beberapa tanaman obat seperti golongan tanin, flavonoid, alkaloid, saponin dan steroid/triterpenoid memiliki khasiat antidiare. Beberapa senyawa turunan tanin dan flavonoid memiliki aktivitas sebagai antimotilitas, antisekretori dan antibakteri (Otshudi, et.al., 2000). Berdasarkan skrining fitokimia yang dilakukan

menunjukkan bahwa kulit batang sikkam mengandung tanin. Diduga tanin di dalam sampel inilah yang memberikan aktivitas antidiare. Tanin dapat mengurangi intensitas diare dengan cara menciutkan selaput lendir usus dan mengecilkan pori sehingga akan menghambat sekresi cairan dan elektrolit (Tan dan Rahardja, 2002). Selain itu, sifat adstringen tanin akan membuat usus halus lebih tahan (resisten) terhadap rangsangan senyawa kimia (toksin bakteri dan castor oil ) yang mengakibatkan diare (Kumar, 2001).

Beberapa penelitian juga telah melaporkan mengenai flavonoid sebagai antidiare. Mekanisme flavonoid dalam menghentikan diare yang diinduksi oleh castor oil adalah dengan menghambat motilitas usus sehingga mengurangi sekresi cairan dan elektrolit (Di Carlo, et al., 1993). Aktivitas flavonoid yang lain adalah dengan menghambat pelepasan asetilkolin di saluran cerna (Lutterodt, 1989). Penghambatan pelepasan asetilkolin akan menyebabkan berkurangnya aktivasi reseptor asetilkolin nikotinik yang memperantarai terjadinya kontraksi otot polos dan teraktivasinya reseptor asetilkolin muskarinik (khususnya Ach-M3) yang mengatur motilitas gastrointestinal dan kontraksi otot polos (Ikawati, 2008). Efek antisekretori EEKBS kemungkinan juga disebabkan oleh peranan senyawa aktif golongan steroid/triterpenoid yang ada dalam kulit batang sikkam. Senyawa ini dapat meningkatkan absorpsi air dan elektrolit dalam usus, sehingga mengakibatkan absorbsi air dan elektolit dalam usus normal kembali (Goodman dan Gilman, 1996).

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:

1. Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia kulit batang sikkam meliput i kadar air 5,99%, kadar sari larut air 17,49%, kadar sari larut etanol 11,84%, kadar abu total 4,07% dan kadar abu tidak larut asam 6,06% sedangkan hasil pemeriksaan karakterisasi ekstrak etanol kulit batang sikkam adalah kadar air 7,32%, kadar sari larut air 32,97%, kadar sari larut etanol 23,26%, kadar abu total 0,48%, kadar abu tidak larut asam 0,01%.

2. Hasil skrining fitokimia menunjukkan serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam mengandung senyawa kimia golongan flavanoida, glikosida, tanin, steroida/triterpenoida.

3. Ekstrak etanol kulit batang sikkam dosis 75, 100, 125 dan 150 mg/kg bb mempunyai efek sebagai antidiare yang diberikan pada tikus yang diinduksi dengan oleum ricini menggunakan metode defekasi. Pemberian dosis 125 mg/kg bb menunjukkan efek yang tidak berbeda secara signifikan (p < 0,05) dengan obat pembanding loperamid HCl 1 mg/kg bb.

5.2 Saran

Disarankan pada peneliti selanjutnya untuk mengisolasi senyawa aktif kulit batang sikkam yang berkhasiat sebagai antidiare.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan

Sikka m termasuk jenis daerah: singkam, cingkam (Jawa), di negara-negara lain disebut sebagai jitang (Malasia), tuai Kayunya dalam perdagangan dikenal dengan Bishop wood atau Java cedar (Rajbongshi, et al., 2014).

Tumbuhan ini tumbuh di dataran rendah sampai ketinggian ± 1500 m dari permukaan laut, berasal dari Asia selatan, Asia tenggara, Australia dan China. Pohon ini menyebar luas mulai dari barat

2.1.1 Sistematika tumbuhan

Sistematika tumbuhan sikkam adalah sebagai berikut (Seed Leaflet, 2012):

Kingdom

Divisi : Spermatophyta Kelas : Dicotyledoneae Ordo : Euphorbiales Famili : Euphorbiaceae Genus : Bischofia

2.1.2 Morfologi tumbuhan

Pohon sikkam (Bischofia javanica Blume) merupakan pohon besar yang tingginya dapat mencapai 40 m, diameter batang 95 - 150 cm, bercabang-cabang, arah tumbuh tegak lurus, berkayu, biasanya keras dan kuat, bentuk batang bulat, tanpa mata kayu, termasuk dalam tumbuhan menahun (Seed Leaflet, 2012).

Kulit batang luar memecah dan bersisik berwarna coklat kemerahan hingga keunguan, di sebelah dalam berwarna merah jambu, menyerat dan mengeluarkan getah merah bening, encer atau agak kental seperti jeli (Rajbongshi, et al., 2014). Daun berwarna hijau dengan panjang 4 - 8 inci dengan ketebalan 7 - 22 mm, bentuk daun lonjong berlekuk tiga serta meruncing ke ujung daun. Letak daun spiral/melingkar, mempunyai tangkai daun panjang (3 - 8 inci), tepinya beringgit hingga bergerigi halus, bertulang daun menyirip, sisi atas mengkilap. kebiruan jika masak, dengan 1 - 2 biji di setiap ruang, lonjong, panjang 5 mm (Bachheti, et al., 2013).

2.1.3 Kandungan kimia tumbuhan

Kandungan sikkam adalah protein (18,69%), karbohidrat (18,91%), tanin (16%) (Ajaib dan Khan, 2012), flavonoid, kuersetin, sitosterol, asam stearat (3,89%), asam linolenat (56,76%), asam palmitat (12,28%), serat (5,32%), kalsium, kalium, natrium, magnesium (Bachheti, et al., 2013), vitamin C, asam elagit (8 - 10% ) (Rajbongshi, et al., 2014).

2.1.4 Kegunaan tumbuhan

Sikkam merupakan salah satu pewarna alami yang telah dikenal dan digunakan secara turun-temurun jauh sebelum mengenal zat pewarna sintetis

3.2.6 Larutan pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ... 19

3.2.7 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2 N ... 20

3.2.8 Larutan pereaksi asam sulfat 2N ... 20

3.2.9 Larutan pereaksi asam klorida 2N ... 20

3.3 Pengumpulan dan Pengolahan Sampel ... 20

3.3.1 Pengumpulan sampel ... 20

3.3.2 Identifikasi sampel ... 20

3.3.3 Pengolahan tumbuhan ... 20

3.4 Pemeriksaan Karakteristik ... 21

3.4.1 Makroskopik ... 21

3.4.2 Penetapan kadar air ... 21

3.4.3 Penetapan kadar sari larut air ... 22

3.4.4 Penetapan kadar sari larut etanol ... 23

3.4.5 Penetapan kadar abu total ... 23

3.4.6 Penetapan kadar abu tidak larut asam ... 23

3.5 Skrining Fitokimia ... 24

3.5.1 Pemeriksaan alkaloida ... 24

3.5.2 Pemeriksaan flavonoida ... 24

3.5.3 Pemeriksaan glikosida ... 25

3.5.4 Pemeriksaan tanin ... 25

3.5.5 Pemeriksaan saponin ... 25

3.5.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida ... 26

3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Batang Sikkam (EEKBS) ... 26

3.7.1 Penyiapan hewan percobaan ... 27

3.7.2 Penyiapan bahan ... 27

3.7.2.1 Pembuatan suspensi CMC 1% (b/v) ... 27

3.7.2.2 Pembutan suspensi loperamid HCl dosis 1 mg/kg bb ... 27

3.7.2.3 Pembuatan suspensi EEKBS konsentrasi 2,25; 3; 3,75; 4,5 % (b/v) ... 28

3.7.3 Pengujian efek antidiare ... 28

3.8 Analisis Data ... 29

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 30

4.1 Hasil Identifikasi Sampel ... 30

4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia ... 30

4.2.1 Pemeriksaan makroskopik ... 30

4.2.2 Pemeriksaan karakteristik ... 30

4.3 Hasil Skrining Fitokimia ... 31

4.4 Pengujian Efek Antidiare ... 32

4.4.1 Penentuan saat mulai terjadinya diare ... 33

4.4.2 Penentuan konsistensi feses ... 35

4.4.3 Penentuan frekuensi diare ... 39

4.4.4 Penentuan lama terjadinya diare ... 41

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 44

5.1 Kesimpulan ... 44

5.2 Saran ... 44

DAFTAR PUSTAKA ... 45

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

4.1 Hasil karakterisasi serbuk simplisia dan EEKBS ... 30 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan

ekstrak etanol kulit batang sikkam ... 32

4.3 Hasil analisis data saat mulai terjadinya diare ... 33 4.4 Hasil analisis data diameter serapan air ... 35 4.5 Hasil analisis data berat feses ... 36 4.6 Waktu defekasi setiap 30 menit selama 6 jam pengamatan

setelah diberi oleum ricini ... 38 4.7 Hasil analisis data frekuensi diare ... 39 4.8 Hasil analisis data lama terjadinya diare ... 41

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1.1 Kerangka pikir penelitian ... 4

4.1 Grafik saat mulai terjadinya diare ... 34

4.2 Grafik konsistensi feses ... 36

4.3 Grafik frekuensi diare ... 40

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Hasil identifikasi sampel ... 49

2 Gambar tumbuhan sikkam (Bischofia javanica Blume) ... 50

3 Gambar simplisia dan serbuk kulit batang sikkam (Bischofia javanica Blume) ... 51

4 Bagan kerja penelitian ... 52

5 Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol kulit batang sikkam ... 54

6 Gambar konsistensi feses tikus ... 59

7 Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada hewan uji ... 60

8 Konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia ... 60

9 Gambar tikus saat pengamatan ... 61

10 Gambar alat yang digunakan ... 62

11 Perhitungan konversi dosis ... 63

12 Perhitungan pembuatan suspensi loperamid HCl (tablet imodium®) ... 64

13 Perhitungan dosis pemberian ekstrak etanol kulit batang sikkam dan loperamid HCl (tablet imodium®) ... 65

14 Hasil orientasi dosis bahan uji terhadap saat mulai terjadinya diare setelah pemberian oleum ricini ... 67

15 Hasil pengamatan saat mulai terjadinya diare setelah pemberian oleum ricini ... 68

16 Hasil pengamatan konsistensi feses setelah pemberian oleum ricini ... 69

17 Hasil pengamatan frekuensi diare setelah pemberian

oleum ricini ... 70 18 Hasil pengamatan lama terjadinya diare setelah

pemberian oleum ricini... 71 19 Hasil deskriptif data ... 72

20 Hasil analisis statistik anava ... 77