Tersedia online di: http:ejournal-balitbang.kkp.go.idindex.phpjra EFEKTIVITAS KOMBINASI PROBIOTIK MIKROENKAPSULASI MELALUI PAKAN UNTUK PENGENDALIAN PENYAKIT MOTILE AEROMONADS SEPTICEMIA PADA IKAN LELE, Clarias gariepinus Angela Mariana Lusiastuti , Septya
Jurnal Riset Akuakult ur, 12 (2), 2017, 179-186
Tersedia online di: ht t p://ej ournal-balit bang.kkp.go.id/index.php/j ra
EFEKTIVITAS KOM BINASI PROBIOTIK M IKROENKAPSULASI M ELALUI PAKAN
UNTUK PENGENDALIAN PENYAKIT M OTILE AEROM ONADS SEPTICEM IA
PADA IKAN LELE, Clarias gariepinus
#
Angela M ariana Lusiastuti , Septyan Andriyanto, dan Reza Samsudin
*)Balai Rise t Pe rikanan Budidaya Air Tawar d an Penyu luhan Pe rikanan
(Naskah dit erima: 25 Juli 2016; Revisi final: 10 Juli 2017; Diset ujui publikasi: 11 Juli 2017)
ABSTRAKPenelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas kombinasi probiotik mikroenkapsulasi melalui pakan
dalam pengendalian penyakit pada ikan lele, Clarias gariepinus . Penelitian dilakukan mulai dari penyiapan
kombinasi probiotik Bacillus cereus ND2 dan Staphylococcus lent us L1K, mikroenkapsulasi probiotik, uji probiotik
mikroenkapsulasi, serta uji dosis secara in vivo . Proses mikroenkapsulasi menggunakan BUCHI mini spray
d en gan su hu 131°C-133°C dan suhu 65°C-70°C. Pakan yang digun akan ad alah p akan dryer inlet out letbuatan dengan kadar protein 38% yang dicampur dengan probiotik mikroenkapsulasi sesuai dengan dosis
perlaku an d an d iberi pu tih telu r 2% seb agai binder . Perlaku an yang dilakukan adalah memb and ingkan
secara in vivo probiotik mikroenkapsulasi (PM) dan probiotik non-mikroenkapsulasi (PNM), dan dilanjutkan
pengujian dosis melalui pakan untuk memperoleh dosis terbaik dari aplikasi probiotik mikroenkapsulasi.
Parameter pengamatan berupa tingkat sintasan, biomassa, kadar hematokrit, hemoglobin, respirat ory burst
act ivit y , dan t ot al bact erial count . Hasil penelitian menunjukkan bahwa suplementasi kombinasi probiotik
mikroenkapsulasi Bacillus cereus ND2 dan St aphylococcus lent us L1K pada pakan lebih efektif, dan dengan
dosis 2% menunjukkan hasil yang lebih baik dalam meningkatkan sintasan hingga 97,33%, biomassa dan
respons imun (NBT assay , hematocrit, hemoglobin) ikan lele terhadap A. hydrophila .KATA KUNCI: mikroenkapsulasi; probiotik; pakan; in vivo ; ikan lele
ABSTRACT: The effectivity combination of microencapsulated probiotic through diet to control of motile
aeromonads septicemia disease in catfish,Clarias gariepinus. By: Angela M ariana Lusiastuti, Septyan Andriyanto, and Reza Samsudin
This st udy was aimed t o know t he effect ivit y of microencapsulat ed probiot ic combinat ions administ ered t hrough diet
t o cont rol mot ile aeromonads sept icemia disease in cat fish (Clarias gariepinus). The research st ages consist ed of
preparat ion probiot ics, microencapsulat ion of probiot ics and probiot ic microencapsulat ion t est ing in vivo. BUCHI mini
spray dryer was used in t he microencapsulat ion process wit h inlet t emperat ure ranged bet ween 131°C-133°C and
out let t emperat ure ranged bet ween 65°C-70°C. The diet s used in t he research were pellet ed feeds wit h a prot ein
cont ent of 38% and mixed wit h different dosages of microencapsulat ed probiot ics. Egg albumen (2%) was used to bind
t he mixt ure. The effect ivit y of microencapsulat ed and non-microencapsulat ed feeds was compared in order t o find an
opt imum microencapsulation dosage. The observed parameters were survival rat e, biomass, hemat ocrit , hemoglobin,
respirat or y burst act ivity, and t otal bact erial count . The result s showed t hat t he supplement at ion of microencapsulated
probiot ic Bacillus cereus ND2 and Staphylococcus lentus L1K in t he diets was more effect ive at a dose of 2%, showing
bet t er sur vival rat e (97.33%), biomass gain, and immune responses (NBT assay, hemat ocrit , hemoglobin) against A.
hydrophila in cat fish Clarias gariepinus. KEYW ORDS: microencapsulation; probiotic; feed; in vivo; catfish# Ko re sp o n d e n si: Balai Rise t Per ikan an Bu d id aya Air Tawar d an Pe n yu lu h an Pe r ikan an . Jl. Se m p u r No . 1 , Bo g o r 1 6 1 5 4 ,
In d o n e sia. Te l. + (0 2 5 1 ) 8 3 1 3 2 0 0 l usi ast ut i _ 6 1 @ yahoo.co.i d
E-m ail: Co p yright @ 201 7, Jurn al Rise t Akuakult ur, e-ISSN 25 02-6534
179 Co p yright @ 2 017 , Ju rnal Riset Akuaku ltu r, e-ISSN 250 2-65 34 Efektivitas kombinasi probiotik mikroenkapsulasi melalui pakan ..... (Angela M ariana Lusiast ut i) PENDAHULUAN
Pe n gg u n a a n p r o b io t ik m e r u p a ka n s a la h s at u m et o d e p e nge n dali p e n yakit ikan yan g am an d an r am ah lin g k u n ga n . Pe n gg u n a an p r o b io t ik d a p a t m e n g u r a n g i p e n g g u n a a n a n t i-m ik r o b a s e p e r t i ant ibio t ik, di mana pro bio t ik bert indak sebagai agen bio ko nt ro l yan g dap at me ngurangi po p ulasi suat u jenis pat ogen (Cruz
d a n b e r fu n g s i s e b a g a i imuno st imulan, dan St aphylococcus lent us L1K ko leksi dari Faku lt as Pe rikan an dan Ilm u Kelau t an -Inst it ut Pert anian Bo go r yang merupakan ko mbinasi t erbaik melalui pakan.
Vibrio harveyi .
Pe n e lit ia n in i b e r t u ju a n u n t u k m e n g e t a h u i efekt ivit as ko mbinasi pro bio t ik melalui pakan dalam pengendalian penyakit ikan lele
Clarias gariepinus .
BAHAN DAN M ETODE
Penelit ian ini dilaksanakan di Inst alasi Penelit ian dan Pengembangan Pengendalian Penyakit Ikan Depo k, Balai Penelit ian dan Pengembangan Budidaya Air Tawar (BPPBAT) Bo go r pada bulan Agust us-Okt o ber 2015. Ikan lele yang digunakan adalah
st rain
Mutiara dari Balai Penelit ian dan Pemuliaan Ikan Sukamandi. Penelit ian in i d ila k u k a n m u la i d a r i p e n yia p a n p r o b io t ik , m ik r o e n k a p s u la s i p r o b io t ik , d a n u ji p r o b io t ik t ermikro enkapsulasi secara
in vivo .
Penyiapan Bakt eri Probiotik
Bakt eri pro bio tik yang digunakan dalam penelit ian in i ad alah p ro b io t ik d u a-sp e sie s yang t e rd iri at as kombinasi isolat bakt eri
Bacillus cereus
ND2 merupakan ko le ksi BPPBAT Bo go r yan g m am p u m e ngh am b at p a t o g e n
A. h yd r op h i l a
St aphylococcus lent us
Bacillus
L1K mempunyai kemampuan meningkat kan t ingkat kecernaan pakan karena dapat mempro duksi enzim saluran cerna yait u lipase, amilase, dan pro t ease (Sekar
et al ., 2012).
M ikroenkapsulasi Probiot ik
Ba h a n p e n ya lu t ya n g d ig u n a k a n p a d a mikro enkapsulasi pro bio t ik ini adalah pro t ein whey d an m alt o d ekst rin (1:1 ). Pro se s mikro e n kap su lasi dilakukan dengan met o d e
spray drying
. Met o de ini menurut Jackso n & Lee (1991), melibat kan dispersi b ah an in t i ke d alam laru t an p o lim er, m e m b en t u k em ulsi at au d ispersi, d iikut i d engan ho mo genisasi cairan, kemudian at o misasi campuran ke dalam
dry- ing chamber
. Kult ur pro bio t ik dalam bent uk bio massa d ir e s u s p e n s ik a n d e n g a n a k u a d e s s t e r il d a n d im ik r o e n k a p s u la s i d e n g a n b a h a n p e n ya lu t . Perbandingan bio massa probio t ik dan bahan penyalut adalah 1:1 (b/v) (Seveline, 2005). Campuran yang terdiri a t a s k u lt u r b a k t e r i, b a h a n p e n ya lu t
w h ey
d a n m a lt o d e xt r in d ih o m o g e n a s ik a n d e n g a n
m i x e
r kem ud ian d im ikro e n kapsu lasi de ngan BUCHI m in i
spray dryer dengan suhu inlet 131°C-133°C dan suhu out let
sp. NP5 dan o ligo sakarida dengan frekuensi yang berbeda memberikan pengaruh yang nyat a t erhadap laju pert umbuhan dan respo ns imun pada udang vaname yang t erinfeksi
. (2014) menyat akan bahwa pemberian mikro kapsul simbio t ik
et al
spray chilling
., 2012). Penggunaan probio tik mult ispesies diket ahui memiliki efekt ivit as yang lebih t inggi dalam menghambat penyebaran beberapa jenis penyakit bakt erial (Tho mas & Chho rn, 2011). Hasibuan (2013) melapo rkan bahwa ko mbinasi bakt eri probio tik
Bacillus cereus ND2 dan St aphylococcus lent us L1K dalam
pakan dapat meningkat kan respo ns imun dan dapat mengurangi tingkat kematian ikan akibat infeksi
Strep- t ococcus agalact iae.
Me n u r u t Ir ib ar r e n et al . (2 0 1 2 ), p e n g g u n a a n p r o b io t ik m e n ja d i s o lu s i u n t u k m e n g h a s ilk a n pert umbuhan dan efisiensi pakan, mengurangi biaya pro duksi dan pada akhirnya dapat mengurangi beban lin gku n gan kare n a aku m u lasi lim b ah d i p e rairan . Pr o b io t ik d a la m b e n t u k k u lt u r s e l m e m ilik i ket erbat asan dalam masa penyimpanan dan mudah rusak o leh pengaruh lingkungan (Wein breck
et al
., 2010). Pro biot ik harus mampu bertahan selama pro ses met abo lisme o leh asam lambung, enzim, dan garam empedu yang t erdapat dalam usus. Berdasarkan hal t e r s e b u t p e r lu a d a n ya s u a t u t e k n o lo g i ya n g m e n g h a s ilk a n b a r ie r fis ik ya n g m e m b e r ik a n p e r lin d u n ga n p a d a p ro b io t ik u n t u k m e n gh in d a ri p e n g ar u h k o n d is i lin gk u n ga n ya n g m e n g ga n g gu kelan gsu n gan h id up bakt eri pro bio t ik. Salah sat u m e t o d e ya n g d a p a t d it e r a p k a n a d a la h mikro enkapsulasi (Jafari
et al ., 2008).
Teknik mikro enkapsulasi yang banyak digunakan secara ko mersial ant ara lain spray drying , air suspen-
sion coat ing
,
spray cooling
, dan
(
al
ext rusion
),
cent rifugal ext rusion
,
rot at ional suspension separat ion
,
inclusion complexing
(Vict o r & Heldman, 2001). Teknik
spray drying
merupakan t eknik yang sering diterapkan pada b akt e ri. Mikro e nkap su lasi m erup akan t eknik penyalutan suat u bahan sehingga bahan t ersebut dapat d ilin d u n gi d ar i p e n g ar u h lin gk u n ga n ya n g t id ak mengunt ungkan sepert i panas dan bahan kimia (Vic- t o r & He ld m an , 2 0 0 1 ). Mikr o e n kap s u lasi b a n yak d ia p lik a s ik a n p a d a p r o d u k p a n g a n u n t u k memperpanjang wakt u penyimpanan pro bio t ik dan via b ilit a s s e l p r o b io t ik d a la m s e b u a h
b ea d s
m ik r o k a p s u l (Kr a s a e k o o p t
et al
., 2 0 0 3 ), t e t a p i mikro enkapsulasi pro bio t ik dalam akuakult ur masih belum banyak dit elit i (Nimrat et al ., 2012). Munaeni et
6 5°C-70 °C. Pro b io t ik mikro e nkap su lasi yan g dipero leh selanjut nya dimasukkan ke dalam bo to l kaca st e ril d an d isim p an p a d a su h u le m ari p e n d in g in 4°C-8°C. Co p yright @ 201 7, Jurn al Rise t Akuakult ur, e-ISSN 25 02-6534
181
. Tabel 1. Ko mpo sisi pakan uji
st eril. Sedangkan ikan lele pada perlakuan K- diinjeksi dengan PBS (pho sphat e buffer saline) dengan do sis yang sama de ngan di at as. Masing-masing 90 eko r ikan per perlakuan (30 eko r per akuarium at au t iga ulangan pe r pe rlakuan ) dipelihara dan t e t ap dibe ri pakan perlakuan selama 14 hari pasca uji t ant ang.
Paramet er yang diamat i pada uji
in vivo
ini adalah sint asan, sist em imun n o n-spesifik meliput i
respira- t or y burst act ivit y (Nit ro Blue Tet razo lium, NBT assay ),
kad ar h e mat o krit , he m o glo bin , d an
t ot al bact er ial count
Table1. The composit ion of t est diet s Bahan pakan ( Ingr edients ) Kom posi si ( Composition ) (g/100 g)
0,2 m L per eko r me nggun akan t ub erculine
Tep u ng ikan ( Fish meal ) 1 7 .5 Bu n g kil ked elai ( Soybean meal) 2 0 Tep u ng tu lan g d an d ag in g (
M eat and bone meal) 1 5 Tep u ng ud an g ( Shrimp meal) 1 5
Ded ak p ad i ( Rice bran
) 1 0 Ded ak p ollard ( Pollard ) 1 0 Min yak ikan ( Fish oil )
3 Min yak jag u n g ( Corn oil )
3 Vitamin ( Vit amin premix )
2 Min eral ( M ineral premix )
1.5 Tap io ka ( Tapioca )
syringe
dengan kepadat an 10 8 cfu mL
- -1 melalui penyunt ikan intraperit oneal sebanyak
Jurnal Riset Akuakult ur, 12 (2), 2017, 179-186 Pakan
ad sat iat ion selama 40 hari masa pemeliharaan.
Pakan yang digunakan dalam penelit ian ini adalah pakan buat an dari Labo rat orium Nutrisi Balai Penelitian dan Pengembangan Budidaya Air Tawar, Bo go r dengan kadar pro t ein 38% (Tabel 1). Pencampuran pakan dan pro bio t ik menggunakan put ih t elur 2% sebagai
binder
, set elah it u , dikering-angin kan dan disimpan dalam lemari pendingin bersuhu 4°C.
Perlakuan dan Pemeliharaan Hewan Uji
Kegiat an ini ada dua t ahap, t ahap pert ama adalah aplikasi ko mbinasi pro bio t ik mikro enkapsulasi dan t id ak d im ik ro e n ka p s u las i. Ad a p u n ik an u ji yan g digunakan pada penelit ian ini adalah ikan lele
st rain
Mut iara sebanyak 30 eko r/akuarium dengan bo bot 10- 20 g. Akuarium yang digunakan ukuran 60 cm x 70 cm x 40 cm dengan vo lume air 60 L. Sebelum dit erapkan p e rlaku an, ikan u ji diad ap t asikan t e rleb ih d ah u lu selama t ujuh hari. Ikan-ikan t ersebut diberi perlakuan: p e m b e ria n p aka n d e n gan p e n am b ah an p ro b io t ik mikro enkapsulasi 2% (PM), pemberian pakan dengan penambahan pro bio t ik t idak dimikro enkapsulasi 2% (PNM), pelet t anpa pro bio t ik mikro enkapsulasi (K+ ) dan pelet t anpa pro bio t ik dan mikro enkapsulasi (K-). Masing-masing perlakuan diulang t iga kali. Pemberian pakan dilakukan sebanyak t iga kali sehari pada pagi (08.00), siang (12.00), dan so re hari (16.00) secara
Ta h a p ke d u a a d a la h o p t im a s i d o s is a p lika s i pro biot ik melalui pakan unt uk mempero leh dosis yang t ep at . Dalam p e ngujian d o sis pe rlaku an p ro b io t ik dengan K+ dan K- pemberian pakan tanpa penambahan p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u la s i. Se m e n t a r a u n t u k p e r la k u a n la in n ya a d a la h (A) d o s is p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u la s i 0 ,5 %; (B) d o s is p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u la s i 1 %; (C) d o s is p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u las i 2 %, Ma s in g -m as in g p e rla k u a n diulang t iga kali. Lama pemeliharaan ikan lele unt uk uji o pt imasi do sis pro bio t ik mikro enkapsulasi adalah 14 hari.
A. hydrophila
Uji Tantang Bakt eri
Uji t antang dilakukan dengan menginfeksikan ikan lele pada perlakuan K+ , A, B, C, dengan bakt eri
A. hydrophila
10 7 cfu/mL melalui injeksi secara int raperi- t o n eal, sedangkan K- diin jeksi den gan larut an PBS.
Paramet er yang diamat i pada t ahapan penelit ian ini adalah hemat o krit , hemo glo bin, bio massa, dan
t ot al bact erial count . Pengamatan sint asan pasca uji t ant ang
dilaku kan dengan m engamat i ke mat ian set iap hari selama 14 hari.
Ikan lele pada perlakuan PN, PNM, dan K+ hasil pemeliharaan selama 42 hari, selanjutnya diuji t ant ang dengan bakt eri
3 Tot al 100
- Tet 100 µ
, penyimpanan dan di dalam saluran cerna. Mikro enkapsulasi merupakan t eknik pengemasan b a h a n d a la m b e n t u k p a r t ik e l m ik r o d a n n a n o . Mikro enkapsulasi dapat melindungi bahan sensit if dari kelembaban, panas, cahaya at au o ksidasi (Jafari
assay
, kadar hemat o krit , hemo glo bin, dan
t ot al bact e- rial count dianalisis secara deskript if.
HASIL DAN BAHASAN Aplikasi Kom binasi Probiot ik M ikroenkapsulasi dan Tanpa M ikroenkapsulasi Secara In Vivo
Tin gkat sin t asan ikan le le p ad a p e rlaku an PM dengan penyalut gabungan whey dan maltodekst rin dan PNM menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan set elah uji t ant ang dengan
A. hydrophila
(10 7 cfu/mL) d ib an d ingkan ko n t ro l n e gat if d an ko n t ro l p o sit if (P< 0 ,0 5 ; Ta b e l 2 ). Se d a n g ka n a n t a r a p e rla k u a n p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u la s i d a n t id a k d im ikr o e n kap su las i ju ga b e rb e d a n yat a (P< 0 ,0 5 ; Tabel 2). Hal ini mengindikasikan bahwa pemberian pro bio tik mikro enkapsulasi lebih efekt if dibandingkan p r o b io t ik t a n p a d im ik r o e n k a p s u la s i. Pr o s e s mikro enkapsulasi menghasilkan pro bio t ik yang st abil sehingga dapat memperbaiki daya hidupnya selama pro ses
processing
et al
Analisis Data
., 2008). Zubaidah (2014) menyat akan bahwa penent uan bahan penyalut t erbaik t idak hanya didasarkan pada uji viabilit as mikro kapsul saja, t et api juga didasarkan pada t ekst u r m ikro kapsul pada akh ir pen gam at an.
Bah an p e n yalu t m alt o d e kst rin sa ja t id ak m a m p u mempert ahankan t e kst ur mikro kapsul yang berupa serbuk, berbeda den gan bahan pe nyalut gabun gan ant ara
whey
d an m alt o dekst rin. Men urut Zu baid ah (2 0 1 4 ), b a h a n p e n ya lu t g a b u n g a n
w hey
d a n m alt o d e k st r in m a m p u m e m p e r t a h an k an t e ks t u r m ik ro ka p su l p ro b io t ik h in gg a ak h ir p e n g am at an selama 40 hari dan rendemen yang dihasilkan juga lebih t in ggi.
Akt ivit as p ro du ksi o ksigen rad ikal su pe ro ksid a (O - 2 ) pada Akt ivit as fago sit o sis dapat dilihat dengan menggunakan pewarnaan NBT. Nilai NBT yang semakin t inggi menunjukkan bahwa pro duksi radikal o ksigen bebas pada Akt ivit as
respirat ory burst
Da t a s in t a s a n ya n g d ip e r o le h d ia n a lis is m e n gg u n a kan sid ik ra gam (ANOVA) p ad a s e la n g kepercayaan 95%, dan dat a yang berbeda nyat a diuji menggunakan uji lanjut Duncan. Dat a bio massa, NBT
Kadar hemo glo binn diukur menggunakan met o de Sahli dengan Sahlino met er (Wedemeyer & Yasut ake, 1 9 7 7 ) d e n gan cara m e n gisi t ab u n g s ah lin o m e t e r d e n g a n la r u t a n HCl 0 ,1 N s a m p a i an g k a 1 0 la lu menempat kan t abung t ersebut di ant ara dua t abung d en gan warn a st and ar. Darah ikan dim asukkan ke dalam t abung sahli sebanyak 0,02 mL dengan pipet sahli. Lalu didiamkan t iga menit . Akuades kemudian dit ambahkan dengan pipet t et es sedikit demi sedikit sambil diaduk sampai warnanya t epat sama dengan warna st andar. Kadar hemo glo bin dinyat akan dalam persen (%).
Co p yright @ 2 017 , Ju rnal Riset Akuaku ltu r, e-ISSN 250 2-65 34 Efektivitas kombinasi probiotik mikroenkapsulasi melalui pakan ..... (Angela M ariana Lusiast ut i)
metanol 100% (50 µL) 2-3 menit lalu dibilas dengan metanol 30% (50 µL) tiga kali dan dikering-udarakan, kemudian ditambah KOH 60 µL + DMSO 70 µL dan
Akt ivitas Respiratory Burst
Uji akt ivit as
respirat ory burst
menggunakan reagen Nit ro Blu e Te t razo liu m (NBT) b erdasarkan m et o d e Seco m b es (19 9 0). Darah d ari ikan samp el d iam bil
sebanyak 50 µL dimasukkan dalam m i cr op l at e
, d iin ku b asi selam a sat u jam su h u 37 °C, ke m u dian
supernatan dibuang dan dicuci PBS 50 µL diulang sebanyak tiga kali, ditambahkan 50 µL NBT 0,2%
diinkubasi selama sat u jam pada suhu 37°C. Fiksasi
kemudian dicek opt ical density -nya menggunakan ELISA
Kadar Hemoglobin
Reader dengan panjang gelo mbang 540 nm.
Tot al Bacteria Count
Pe r h it u n g a n p o p u la s i s e l b a k t e r i t o t a l d a n pro bio t ik dilakukan pada o rgan t arget usus. Media yang digunakan adalah TSA untuk menghit ung populasi
total bakteri dalam usus, TSA + cef 100 µg mL -1
unt uk menghit ung po pulasi sel pro bio t ik ND2 Cef R dan TSA
g mL -1 unt uk menghit ung p o pulasi sel pro bio t ik L2k Tet R . Perhit ungan po pulasi sel pro bio t ik dihit ung dengan cara
Tot al Plat e Count (TPC).
Kadar Hemat okrit
He m a t o k r it m e r u p a k a n p e r s e n t a s e vo lu m e erit ro sit dalam darah ikan. Kadar hemat o krit diukur me nu rut And erso n & Siwicki (199 5), yait u de ngan menggunakan t abung mikro hemat o krit yang berupa pipa kapiler berlapis heparin. Pengukuran dilakukan dengan membandingkan bagian darah yang mengendap (a) dengan seluruh bagian darah yang ada dalam tabung mikro he mat o krit (b ). Kad ar hem at o krit din yat akan se bagai persen (%) vo lum e p adat an sel darah yang dihit ung dengan cara: He = a/b x 100%.
semakin besar (Tabel 3). Pro duksi radikal bebas ini digunakan unt uk melawan pat o gen. Tubuh ikan mempunyai mekanisme membunuh sel-sel fagosit melalui o ksigen bebas dalam va k u o la lis o s o m ya n g m a m p u m e n in g k a t k a n p e rm e ab ilit as se l b akt e ri p a t o g e n se h in gga b isa menyebabkan masuknya subst ansi dan cairan dalam s e l b a k t e r i p a t o g e n ya n g k e m u n g k in a n b is a menyebabkan plasmo lisis. Co p yright @ 201 7, Jurn al Rise t Akuakult ur, e-ISSN 25 02-6534
183
) (%)
PM 9 5 .5 6 ± 7 .6 9 6 a
9 7 .3 3 ± 3 ,8 5 c
PNM 9 5 .5 6 ± 3 .8 5 1 a
8 9 .3 3 ± 6 ,0 7 a
Perl akuan Treatments
Sint asan ( Survival r ate
Tabel 3. Nilai NBT
9 3 .3 3 ± 3 ,6 7 a
assay
p ada ikan le le
Clar ias gar iepinus
d en gan p e m b e r ia n p r o b io t ik m ik r o e n k a p s u la s i d a n t id a k dimikro enkapsulasi dalam pakan sebelum dan sesudah uji t ant ang dengan
A. hydrophila
Table 3. NBT value of cat fish Clarias gariepinus wit h microencapsulat ed
and non-microencapsulat ed probiot ics before and aft er challenge t est wit h A. hydrophila
K- 0.0 43 0 .0 4 1 0 .04 2 0 .0 4 2
K+ 0.0 45 0 .0 5 1 0 .06 7 0 .0 5 6
PM 0.0 46 0 .0 5 7 0 .06 9 0 .0 5 7
PNM 0.0 44 0 .0 5 3 0 .06 8 0 .0 5 6
Perl akuan Treatments
K+ - 7 4 .6 7 ± 4 ,3 7 b
K- 9 1 .1 1 ± 3 .8 4 5 a
Jurnal Riset Akuakult ur, 12 (2), 2017, 179-186
S. l ent us
Tabel 2. Sint asan ikan lele Clarias gariepinus dengan pemberian pro bio t ik mikro enkapsulasi dan tanpa mikro enkapsulasi dalam pakan sebelum dan sesudah uji tantang dengan
A. hydrophila
Table 2. Survival rat e of cat fish Clarias gariepinus fed wit h microencapsulat ed and non-mi-
croencapsulat ed probiot ic applicat ions before and aft er challenge t est with A. HydrophilaHas il a n alis is NBT t e r h a d ap ika n yan g d ib e r i pro b io t ik me nu njukkan su at u pe ningkat an ju mlah o ksidat if radikal jika dibandingkan dengan ko nt ro l ne gat if m aupu n ko nt ro l po sit if yan g d iuji t ant an g. Semakin tinggi nilai NBT maka kemampuan sel fagosit dalam akt ivit as
respirat ory burst
semakin t inggi. Hal ini juga men unjukkan bahwa kedua jen is pro bio t ik baik PM maupun PNM bersifat imuno st imulan yait u mampu mengakt ivasi neut ro fil dan sel-sel fago sit ik yang lain unt uk mempro duksi o ksigen radikal yang lebih t inggi sehingga dapat memberikan ket ahanan t erhadap penyakit .
Do s is p e m b e rian p ro b io t ik m ik ro e n ka p s u las i
p a d a p a k a n s e b e s a r 0 , 5 %; 1 %; d a n 2 % sebelumnya pernah dilapo rkan oleh Rahmawat i (2015). Pe m b e r ian p r o b io t ik m ik ro e n k a p s u la s i
Sesudah uji t ant ang After challenge test
S. l ent us
t ersebut menunjukkan pengaruh yang nyat a t erhadap laju pert umbuhan dan efisiensi pakan pada ikan nila yan g t e rin fe ksi
S. agalact iae
. Pad a Tab el 4 t e rlihat b a h w a p e n g gu n a an p ro b io t ik m ik r o e n k ap s u la s i berbagai do sis meningkat kan nilai hemat o krit darah sampai hari ke-28. Hemat o krit merupakan persent ase vo lume erit ro sit at au sel darah merah dalam darah ikan. Erit ro sit berperan dalam pro ses pengangkut an o ksigen di dalam t ubuh ikan. Perubahan hemat o krit dalam darah t erjadi karena adanya perubahan pro ses fisio lo gis t ubuh yang bereaksi t erhadap pat o gen yang masuk.
Pr o b io t ik m e m b a n t u m e n in g k a t k a n k a d a r hemat o krit pada ko ndisi ikan t erinfeksi yang biasanya akan mengganggu ko mpo sisi vo lume erit ro sit darah kare n a d ara h d ib u t u h kan u n t u k p e n an ggu la n gan pat o gen yang masuk.
Hemo glo bin merupakan met alo pro t ein yait u pro - t ein yang mengandu ng zat besi di dalam sel darah merah yang berfungsi sebagai pengangkut o ksigen. Mo lekul hemo glo bin t erdiri at as glo bin, apo pro t ein, dan empat gugus heme, suatu molekul o rganik dengan sat u at o m besi.
Sebelum uji t ant ang Before challenge test
NBT assay
Efektivitas kombinasi probiotik mikroenkapsulasi melalui pakan ..... (Angela M ariana Lusiast ut i)
Tabel 4. Nilai hemat o krit ikan lele Clarias gariepinus yang diberikan pakan dengan pro bio t ik mikro enkapsulasi pada do sis yang
A. hydrophila
berbeda set elah uji t ant ang dengan
Table 4. Haemat ocrit value of cat fish Clarias gariepinus microencapsu-
lat ed probiot ic applicat ions at different dosages aft er challenge t est used A. hydrophilaPerlakuan H-0 H-7 H-14 H-21 H-28 Tr eatm ents
A 2 0 .9 2 2 .5 24 31 .23 32 .45 B 2 0 .9 2 3.5 2 3 3.2 7 33 33 .84
C 2 0 .9 2 0 2 2.4 3 3 2 .5 37 .69
K+ 2 0 .9 2 0.5 7 2 0.1 1 20 24 .04 K- 2 0 .9 2 0 20 22 2 6 .8
Clarias gariepinus
Tabel 5. Nilai hemo glo bin ikan lele dengan pemberian pro bio t ik mikro enkapsulasi pada do sis yang berbeda set elah
A. hydrophila
uji t ant ang
Table 5. Hemoglobin value of cat fish Clarias gariepinus wit h microencap-
sulat ed probiot ic applicat ions at different dosages aft er challenge t est used A. hydrophilaPerl akuan H-0 H-7 H-14 H-21 H-28 Treatments
A 5 .7
7 6.2 8 .1 8 .2 B 5 .7 7 7.9 8 .47 1 0.2 C 5 .7 6 7.1 8 .2 1 1.5 K+ 5 .7 6 .2
5.7 6 7 .2 5 K- 5 .7 6 .2 7 7 .2 7 .1
Dari paramet er hemat o lo gi, hemat o crit , dan he- maka laju pert umbuhan semakin meningkat . Adanya m o g lo b in , m a k a p e m b e r ia n p r o b io t ik pro bio t ik membant u mem udahkan penyerapan dan m ikro e n ka p su lasi b e r b ag ai d o sis s e lam a 2 8 h a ri pemanfaat an nut rien menjadi lebih efisien sehingga set elah diuji t ant ang cenderung semakin meningkat berpengaruh t erhadap bio massa ikan. terut ama perlakuan C yait u probiot ik mikro enkapsulasi
Pada Tabel 7 disajikan t o t al bakt eri pada saluran do sis 2% (Tabel 5). Hal ini menunjukkan penggunaan p e n ce r n a a n s e lam a m a sa p e m e lih ar a an 4 0 h a ri. pro bio t ik akan menjaga ho meo st asis t ubuh di dalam
Walaupun t o t al bakt eri di saluran pencernaan pada in fe ksi p at o ge n yan g m asu k, se h in gga ikan t et ap s e lu ru h p e rla ku a n p ro b io t ik d ik e t a h u i m e m ilik i hidup dan sehat walaupun t erjadi kejadian wabah di ju m lah ya n g le b ih t in gg i d ib a n d in g k an k o n t r o l, sekit arnya. Bakt eri pro bio t ik dapat memberikan efek perlakuan C memberikan hasil t ert inggi (Tabel 7). imuno st imulan melalui int eraksi dengan sel-sel limfoid
Gut Pe n in g k a t a n d o s is p e m b e r ia n p r o b io t ik
yang ada di saluran cerna at au disebut sebagai mengakibat kan peningkat an t o t al bakt eri dan t o t al
associat ed Lymphoid Tissue
(GALT) seh in gga m am pu et al p r o b io t ik p a d a s a lu r a n p e n c e r n a a n ik a n u ji. menst imulasi sist em imun ikan (El-Bo uhy ., 2013).
Peningkat an jumlah tot al bakteri di saluran pencernaan Pe n g gu n aa n p ro b io t ik m ikro e n kap su la si ju ga
Bacillus
akibat pemberian pro bio t ik sp. melalui pakan m e n in g ka t k an b io m as sa ik an u ji s e ir in g d e n g an
Or eochromis nilot icus et al
pad a (Ut ami ., 20 15) ju ga peningkat an do sis pemberian pro bio t ik (Tabel 6). Hal pernah dilapo rkan sebelumnya. ini sesuai dengan pernyat aan Zubaidah et al . (2015)
Bacillus
bahwa semakin t inggi do sis sp. yang diberikan
Co p yright @ 2 017 , Ju rnal Riset Akuaku ltu r, e-ISSN 250 2-65 34
Jurnal Riset Akuakult ur, 12 (2), 2017, 179-186
Tabel 6. Berat bio masa ikan lele Clarias gariepinus dengan pemberian pro bio tik mikroenkapsulasi pada do sis yang berbeda setelah 40 hari pemeliharaan
Table 6. Biomass of catfish Clarias gariepinus microencapsulat ed probiotic
applicat ion at different dosages aft er 40 days rearing periodPerl akuan Tot al Rat a-rat a
Treatments M ean (g) (g)
A 83 3 .8 6 2 77 .95 3 3
B 94 6 .5 8 3 15 .52 6 7
C 91 8 .8 8 3 06 .29 3 3
K+ 81 2 .9 0 2 70 .96 6 7
K- 73 3 .8 2 2 44 .60 6 7
Tot al bact erial count t ot al probiot ic count
B. cereus S. lent us
Tabel 7. (TBC) dan (TPC) ND2 dan L1 K pada saluran p ence rnaan ikan lele yang dib eri pro b io t ik mikro e nkap sulasi menggunakan do sis yang berbeda
Table 7. Tot al bact erial count (TBC) and t ot al probiot ic count (TPC) B. cereus ND2 and S. lentus
L1K in t he digest ive t ract of cat fish fed wit h different dosages of probiot ic microencapsu- lat ed feeds- -1
TPC (l og CFU g ) TBC Perl akuan
- -1
Treatments (l og CFU g )
B. cereus S. lentus ND 2 L1K
K 6 .30 ± 0 .1 5 0 0 .0 0 ± 0 .0 0 0 0 .0 0 ± 0.0 00 A 6 .82 ± 0 .5 1 8 3 .1 1 ± 0 .1 7 3 3 .1 ± 0 .0 6 6 B 6 .85 ± 0 .1 8 1 3 .8 6 ± 0 .0 7 5 3 .5 9 ± 0.1 67 C 6 .99 ± 0 .8 3 4 4 .2 6 ± 0 .0 8 6 4 .4 2 ± 0.1 82
KESIM PULAN Cru z, P.M., Ib an e z, A.I., He rm o sillo , A.M., & Saad ,
H.C.R. (2012). Use o f pro bio t ics in aquacult ure.Su p le m e n t asi p ro b io t ik m ikro e n kap su lasi d ari [review art icle]. Int ernat io nal Scho larly research
Bacillus cereus St aphylococcus lent us
ko mbinasi ND2 dan Ne t wo rk Micro b io lo gy 2 0 1 2 :1 3 . Do i:1 0 .5 4 0 2 /
L1K pada pakan dengan do sis 2%, menunjukkan hasil 2012/916845. ya n g le b ih b a ik d e n g a n s in t a s a n 9 7 , 3 3 %; d a n
El-Bo uh y, Z.M., El-No bi, G.A., Hassanin, M.E., & El-
as-
meningkat kan bio massa dan respo ns imun (NBT Hady, M.A. (2013). Effect s o f diet ar y applicat io n
say Cl ar i as
, h e m a t o k r it , h e m o g lo b in ) ik a n le le
Bacillus
o f t wo ant ago nist ic gut -iso lat ed species
gariepinus
A. hydrophila t erhadap .
Oreochromis nilot icus
o n t he immune respo nse o f
Aeromonas hydrophila Zag. Vet . J
t o Infe ct io n . .,
UCAPAN TERIM A KASIH 41(2), 31-39.
Terima kasih kepada Kepala Balai Balai Penelit ian Hasibu an. (201 3). Aplikasi pro bio t ik amilo lit ik d an dan Pengembangan Budidaya Air Tawar,E Bo go r at as p ro t e o lit ik m elalu i p akan u n t uk p e nge n d alian t erselenggaranya penelit ian ini dan t eknisi lit kayasa
Or eochr om i s
St r e p t o co cco s is p a d a ik an n ila , yang membant u secara teknis unt uk pengambilan dat a.
nilot icus . Inst it ut Pert anian Bo go r. 54 hlm.
Irib arre n , D., Daga, P., Mo reirn , M.T., & Fe ijo o , G.
DAFTAR ACUAN
(2 0 1 2 ). Po t e n t ia l e n vir o n m e n t a l e ffe ct s o f Anderso n, D.P. & Siwicki, A.K. (1995). Basic hemat o l-
Aquacult ure Int er- pro bio t ics used in aquacult yure.
o gy and sero lo gy fo r fish healt h pro grams. Paper
nat ional , 20, 779-789. present ed in second symposium on diseases in Asian Jafari, S.M., Assadpo o r, E., He, Y., & Bhandari, B. (2008).
Aquacult ure “Aquat ic Animal Healt h and The Environ- th Encapsulat io n efficiency o f fo o d flavo urs and o ils ment ” . Ph uke t Th ailan d, 25 -2 9 Oct o b er 1 99 3.
du ring spray d r yin g, Dr yin g Te ch no lo gy, 26 (7 ), 17 pp. 816-835.
Co p yright @ 201 7, Jurn al Rise t Akuakult ur, e-ISSN 25 02-6534
185 Co p yright @ 2 017 , Ju rnal Riset Akuaku ltu r, e-ISSN 250 2-65 34 Efektivitas kombinasi probiotik mikroenkapsulasi melalui pakan ..... (Angela M ariana Lusiast ut i)
Jackso n, L.S. & Lee, K. (19 91). Micro en cap sulat io n and t he fo o d indust r y. Lebensmit t el-Wissenschaft Techno lo gie, 143 pp. Krasae ko o p t , W., Bhan dari, B., & Dee t h, H. (2003 ).
J. Fish and W ildlife Ser vice
Journal of Aqua Res. Development
, 31, 2-8. Ut ami, D.A.S., Widanarni, & Suprayudi, M.A. (2015).
Ad m in is t r a t io n o f m ic r o m icr o e n c a p s u la t e d pro b io t ic at different d o ses t o co nt ro l St re pt o - co cco sis in t ilap ia (
Or eochr omis nilot icus ).
Jurnal M ikrobiologi Indonesia
, 9(1), 17-24. Vict o r, R.P. & Heldman, D.R. (2001). Int ro duct io n t o fo o d e n gin e e rin g. 3rd e d. Lo nd o n : Acad e mics
Press. 120 pp. Wed em e ye r, G.A. & Yasut ake , W.T. (19 77 ). Clinical m e t h o d s fo r t h e asse ss m e n t o f t h e e ffe ct o n e nviro n m en t al st ress o n fish h ealt h . Te chn ical papers o f t he US Fish and Wildlife Ser vice. US depart . o f t he Int erio r.
, 89, 1-17. Weinbreck, F., Bo dnar, I., & Marco , M.L. (2010). Can encapsulat io n lengt hen t he shelf-life o f pro bio t ic bact eria in dr y pro duct s?.
isolat klinis bakt eri asam lakt at dengan menggunakan t eknik pengeringan semprot dan pengeringan beku
Int ernat ional Journal of Food M icrobiology
, 136, 364-367. Zubaidah, A. (2014). Pemberian mikrokapsul sinbiot ik
d en g a n d osi s ber b ed a m el a l u i pa k a n u n t u k p enceg ah a n vi b r i osi s p ad a ud a n g va na m e (Litopenaeus vannamei) . Tesis. Inst it ut Pert anian Bo go r. Bo go r, 67 hlm.
Zu b aid ah , A., Yu h an a, M., & W id a n ar n i. (2 0 1 5 ).
Encapsulat ed synbio t ic diet ar y supplement at io n at different do sages t o prevent vibrio sis in whit e s h r im p ,
Li t openaeus vann am ei .
Ju r na l H aya t i Bi osci en ce , 2 2 , 1 6 3 -1 6 8 . Do i:1 0 . 1 0 1 6 /
. Tesis. Inst it ut Pert anian Bo go r. Bo go r, 78 hlm. Tho mas, L.W. & Chho rn, L. (2011). Use o f pro bio t ics in diet s o f t ilapia.
Seveline. (2005). Pengembangan produk probiot ik dari
Eva lu a t io n o f e n c a p s u la t io n t e h n iq u e s o f pro bio t ics fo r yo ghurt .
p r o b io t ics e n h a n ce b act e r ial n u m b e rs, wat e r qualit y and gro wt h during early develo pment o f whit e shrimp (
Int ernat ional Dairy Journal
, 13, 3-13. Munaeni, W., Yuhana, M., & Widanarni. (2014). Effect o f m ic ro -m ic r o e n c a p s u la t e d s yn b io t ic a t different frequencies fo r lumino us vibrio sis co n- t ro l in whit e shrimp (
Lit openaeus vannamei ).
Jurnal M ikrobiologi Indonesia
, 8(2), 73-80. Nim r a t , S., Su k s a w a t , S. , Bo o n t h a i, T., &
Vu t h ip h an d ch a i, V. (2 0 1 2 ). Po t e n t ial
Bacil l us
Lit openaeus vannamei ).
. App. Bio xhem. Bio t ech., 169, 380-392.
Vet . M icrobiol
., 159, 443-450. Rah m a wa t i, F.F. (2 0 1 5 ).
Suplement asi m ikr okapsul probiotik melalui pakan sebagai pencegah infeksi St rep- t ococcosis pada ikan nila (Oreochromis niloticus) .
Tesis. Inst it ut Pert anian Bo go r. Seco mbes, C.J. (1990). Iso latio n o f salmo nid macroph- ages and analysis o f t heir killing act ivit y.
In
St o - len, J.S., Flet cher, T.C., Anderso n, D.F., Ro berso n, B.S., vo n Muisvinkel, W.B. (Eds.). Tehniques in fish immuno lo gy Vo l 1. SOS Publicat io ns. Fair Haven , p. 137-155. Se ka r, S., Su r ian a ra yan a n , M., Pe r in k u la m , R.D., Bhusvanesh, K.S., Phani, K., & Asit , B.M. (2012) .
The m e t ab o lic ad van t age o f ch o line lact at e in gro w t h m e d ia: an e xp e rim e n t al an alysis wit h
St aphylococcus lent us
j.hjb.2015.10.007.