visible adalah penyerapan molekuler elektronik dalam larutan. Sinar ultraviolet mempunyai panjang gelombang antara 200 – 400 nm, sementara sinar tampak
mempunyai panjang gelombang 400 – 750 nm. Jadi, spektrofotometer yang sesuai untuk pengukuran di daerah spektrum ultraviolet dan sinar tampak terdiri atas
suatu sistem optik dengan kemampuan menghasilkan sinar monokromatis dalam jangkauan panjang gelombang 200 – 800 nm Rohman, 2009.
2.8.2 Hukum Lambert-Beer
Konsentrasi dari analit di dalam larutan bisa ditentukan dengan menggunakan hukum Lambert-Beer. Sinar ultraviolet berada pada panjang
gelombang 200-400 nm sedangkan sinar tampak berada pada panjang gelombang 400-800 nm Dachriyanus, 2004.
Hukum Lambert-Beer
Hukum Lambert-Beer Beer’s Law adalah hubungan linearitas antara absorban dengan konsentrasi larutan analit. Biasanya hukum Lambert-Beer ditulis dengan:
A =
ε
. b . C A = absorban serapan
ε
= koefisien ekstingsi molar M
-1
cm
-1
b = tebal kuvet cm C = konsentrasi M
Pada beberapa buku ditulis juga: A = E . b . C
E = koefisien ekstingsi spesifik ml g
-1
cm
-1
b = tebal kuvet cm C = konsentrasi gram100 ml
Hubungan antara E dan ε adalah: E =
Universitas Sumatera Utara
2.8.3 Panjang Gelombang Asam Benzoat dan Turunannya pada Daerah Ultraviolet
Asam benzoat dan turunannya dapat juga ditetapkan secara kuantitatif pada daerah ultraviolet karena asam benzoat dan turunannya mempunyai
kromofor yang mampu menyerap sinar UV. Panjang gelombang maksimal asam benzoat dan turunannya disajikan pada Tabel 2.1.
Tabel 2.1 Panjang Gelombang Maksimal Asam Benzoat dan Turunannya pada Daerah Ultraviolet
No. Senyawa Larutan
λ maks Keterangan
1 Asetosal
Kloroform 278 nm
Larutan dalam air antara 220 sampai 350
nm tidak ada serapan
2 Asam gentisat
Air pH 5-8 320 nm
3 Asam
ρ-amino salisilat
Air pH 7 265 nm
4 Ρ-hidroksi benzoat
Alkohol 255 nm
Semua esternya mempunyai λ maks
yang sama 5
Asam Ρ-hidroksi
benzoat Air, pH
di bawah 7 255 nm
6 Ρ-hidroksi benzoat
Alkohol + NaOH
301 nm Setiap 100 ml alcohol
ditambhakan 2 tetes NaOH 0,2 N
7 Asam salisilat
Air, pH 5-8 296 nm Kloroform
308 nm Air, pH 1-6 298 nm
Sumber : Sudjadi, 2008.
Universitas Sumatera Utara
2.8.4 Instrumentasi Spektrofotometer UV-Vis
Komponen-komponen dari spektrofotometer UV-Vis meliputi sumber- sumber sinar, monokromator, dan sistem optik.
i. Sumber-sumber lampu; lampu deuterium digunakan untuk daerah UV pada panjang gelombang dari 190 – 350 nm, sementara lampu halogen kuarsa atau
lampu tungsten digunakan untuk daerah visibel pada panjang gelombang antara 350 – 900 nm.
ii. Monokromator; digunakan untuk mendispersikan sinar ke dalam komponen- komponen panjang gelombangnya yang selanjutnya akan dipilih oleh celah
slit. Monokromator berputar sedemikian rupa sehingga kisaran panjang gelombang dilewatkan pada sampel sebagai scan instrumen melewati
spektrum. iii. Optik-optik; dapat didesain untuk memecah sumber sinar sehingga sumber
sinar melewati 2 kompartemen, suatu larutan blanko dapat digunakan dalam suatu kompartemen untuk mengkoreksi pembacaan atau spektrum sampel.
Yang paling sering digunakan sebagai blanko dalam spektrofotometri adalah semua pelarut yang digunakan untuk melarutkan sampel atau pereaksi
Rohman, 2009.
Universitas Sumatera Utara
BAB III METODE PERCOBAAN
3.1 Tempat Pengujian
Pengujian penentuan kadar asam benzoat dalam sediaan obat batuk tradisional bentuk tablet secara kromatografi lapis tipis dan spektrofotometri
ultraviolet dilakukan di Laboratorium Obat Tradisional, Balai Besar Pengawas Obat dan Makanan di Medan yang berada di Jalan Willem Iskandar Pasar V Barat
I No. 2 Medan.
3.2 Alat
Alat yang digunakan adalah erlenmeyer, gelas ukur, vial, pipet tetes, corong pisah, corong, chamber, kertas saring, hair drier, batang pengaduk, statif
dan klem, pipet penotol dan spektrofotometer Shimadzu UV Prose-1800.
3.3 Bahan
Bahan yang digunakan adalah Metanol, Natrium Hidroksida 0,1 N, Pentana, Asam Asetat Glasial, Etanol dan Aquadest.
3.4 Sampel
- Nama sediaan : Shi Re Qing
Kode produksi : -
No. Reg : POM TI 014 401 521
No. Bets : 201803
Tgl daluarsa : 25 November 2015
Universitas Sumatera Utara