Keamanan Teh Gaharu (Aquilaria Malaccensis Lamk) Melalui Uji Toksisitas Akut Oral

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Gambar Tumbuhan Gaharu, Serbuk Simplisia Daun Gaharu
(Aquilaria malacensis)

Pohon Gaharu

Serbuk simplisia

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Perhitungan Pemberian Dosisi
Dosis pemberian seduhan teh pada mencit yaitu 130 mg/kgbb, di dapat dari 1
gram simplisia dengan konversi 0,0026 pada mencit, maka di dapat dosis 130
mg/kgbb
1 gram simplisia = 1000 mg simplisia
1000 mg x 0,0026 = 2,6 mg
Dengan berat badan mencit 20 gram
2,6 ��
�1000 = 130 ��
20

Dosis yang diberikan pada masing-masing mencit berbeda, sehingga pemberian
dosisnya menggunakan 1 % berat badan mencit.

Lampiran 6. Alat Yang Digunakan Dalam Pemberian Seduhan Teh

Universitas Sumatera Utara

Oral sonde dan squite

Lampiran 7. Hewan percobaan yang digunakan

Universitas Sumatera Utara

Mencit

Mencit yang telah di bedah

Lampiran 8. Gambar Perbandingan Organ Antar Kelompok
Gambar Organ Hati

Universitas Sumatera Utara

Kontrol

Dosis 130 mg/kgbb

Dosis 260mg/kgbb

Dosis 390mg/kgbb

Dosis
520 mg/kgbb

Universitas Sumatera Utara

Gambar Organ ginjal

kontrol

130 mg/kgbb

260 mg/kgbb
390
mg/kgbb

520 mg/kgbb

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. Berat Badan Mencit Betina
Multiple Comparisons
Tukey HSD

Dependent Variable (I) dosis
BBharike0
0

1.000

2.000

3.000

4.000

BBharike7

0

1.000

2.000

3.000

4.000

BBharike14

0

1.000

2.000

(J) dosis
1.000
2.000
3.000
4.000
0
2.000
3.000
4.000
0
1.000
3.000
4.000
0

1.000
2.000
4.000
0
1.000
2.000
3.000
1.000
2.000
3.000
4.000
0
2.000
3.000
4.000
0
1.000
3.000
4.000
0

1.000
2.000
4.000
0
1.000
2.000
3.000
1.000
2.000
3.000
4.000
0
2.000
3.000
4.000
0

Mean
Difference (IJ)
Std. Error

-2.63333
2.29308
.50000
2.29308
-.90000
2.29308
-2.73333
2.29308
2.63333
2.29308
3.13333
2.29308
1.73333
2.29308
-.10000
2.29308
-.50000
2.29308
-3.13333
2.29308

-1.40000
2.29308
-3.23333
2.29308
.90000
2.29308
-1.73333
2.29308
1.40000
2.29308
-1.83333
2.29308
2.73333
2.29308
.10000
2.29308
3.23333
2.29308
1.83333
2.29308

-3.63333
2.14113
-.90000
2.14113
-2.90000
2.14113
-5.20000
2.14113
3.63333
2.14113
2.73333
2.14113
.73333
2.14113
-1.56667
2.14113
.90000
2.14113
-2.73333
2.14113

-2.00000
2.14113
-4.30000
2.14113
2.90000
2.14113
-.73333
2.14113
2.00000
2.14113
-2.30000
2.14113
5.20000
2.14113
1.56667
2.14113
4.30000
2.14113
2.30000
2.14113
*
-8.50000
2.23338
*
-7.60000
2.23338
*
-7.76667
2.23338
*
-9.66667
2.23338
*
8.50000
2.23338
.90000
2.23338
.73333
2.23338
-1.16667
2.23338
*
7.60000
2.23338

95% Confidence Interval
Sig.
Lower Bound Upper Bound
.779
-10.1801
4.9134
.999
-7.0467
8.0467
.994
-8.4467
6.6467
.756
-10.2801
4.8134
.779
-4.9134
10.1801
.660
-4.4134
10.6801
.938
-5.8134
9.2801
1.000
-7.6467
7.4467
.999
-8.0467
7.0467
.660
-10.6801
4.4134
.970
-8.9467
6.1467
.635
-10.7801
4.3134
.994
-6.6467
8.4467
.938
-9.2801
5.8134
.970
-6.1467
8.9467
.925
-9.3801
5.7134
.756
-4.8134
10.2801
1.000
-7.4467
7.6467
.635
-4.3134
10.7801
.925
-5.7134
9.3801
.477
-10.6800
3.4133
.992
-7.9466
6.1466
.667
-9.9466
4.1466
.185
-12.2466
1.8466
.477
-3.4133
10.6800
.710
-4.3133
9.7800
.997
-6.3133
7.7800
.944
-8.6133
5.4800
.992
-6.1466
7.9466
.710
-9.7800
4.3133
.877
-9.0466
5.0466
.328
-11.3466
2.7466
.667
-4.1466
9.9466
.997
-7.7800
6.3133
.877
-5.0466
9.0466
.815
-9.3466
4.7466
.185
-1.8466
12.2466
.944
-5.4800
8.6133
.328
-2.7466
11.3466
.815
-4.7466
9.3466
.023
-15.8502
-1.1498
.042
-14.9502
-.2498
.037
-15.1169
-.4164
.010
-17.0169
-2.3164
.023
1.1498
15.8502
.994
-6.4502
8.2502
.997
-6.6169
8.0836
.983
-8.5169
6.1836
.042
.2498
14.9502

Universitas Sumatera Utara

3.000

4.000

1.000
3.000
4.000
0
1.000
2.000
4.000
0
1.000
2.000
3.000

-.90000
-.16667
-2.06667
*
7.76667
-.73333
.16667
-1.90000
*
9.66667
1.16667
2.06667
1.90000

2.23338
2.23338
2.23338
2.23338
2.23338
2.23338
2.23338
2.23338
2.23338
2.23338
2.23338

.994
1.000
.881
.037
.997
1.000
.908
.010
.983
.881
.908

-8.2502
-7.5169
-9.4169
.4164
-8.0836
-7.1836
-9.2502
2.3164
-6.1836
-5.2836
-5.4502

6.4502
7.1836
5.2836
15.1169
6.6169
7.5169
5.4502
17.0169
8.5169
9.4169
9.2502

ANOVA
Sum of Squares
BBharike0

BBharike14

Mean Square

Between Groups

26.444

4

6.611

Within Groups

78.873

10

7.887

105.317

14

Between Groups

52.623

4

13.156

Within Groups

68.767

10

6.877

Total

121.389

14

Between Groups

176.636

4

44.159

74.820

10

7.482

251.456

14

Total
BBharike7

df

Within Groups
Total

F

Sig.
.838

.531

1.913

.185

5.902

.011

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Berat Badan Mencit Jantan
Descriptives
95% Confidence
Interval for
Mean
N
BBharike0

BBharike7

BBharike14

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

0

3

24.6000

2.42487

1.40000

18.5763

1.000

3

27.2333

3.96274

2.28789

17.3893

2.000

3

24.1000

1.35277

.78102

20.7395

3.000

3

25.5000

2.81603

1.62583

18.5046

4.000

3

27.3333

2.84488

1.64249

20.2663

Total

15

25.7533

2.74275

.70817

24.2345

0

3

23.7667

1.55027

.89505

19.9156

1.000

3

27.4000

4.10731

2.37136

17.1969

2.000

3

24.6667

.85049

.49103

22.5539

3.000

3

26.6667

2.90230

1.67564

19.4570

4.000

3

28.9667

2.44199

1.40989

22.9004

Total

15

26.2933

2.94460

.76029

24.6627

0

3

19.6333

3.26548

1.88532

11.5214

1.000

3

28.1333

3.66106

2.11371

19.0388

2.000

3

27.2333

1.15036

.66416

24.3757

3.000

3

27.4000

2.69629

1.55671

20.7020

4.000

3

29.3000

2.17945

1.25831

23.8859

Total

15

26.3400

4.23806

1.09426

23.9930

ANOVA
Sum of Squares

df

Mean Square

F

Universitas Sumatera Utara

Sig.

BBharike0

BBharike7

BBharike14

Between Groups

183.978

4

45.994

Within Groups

166.768

15

11.118

Total

350.745

19

Between Groups

154.145

4

38.536

Within Groups

207.275

15

13.818

Total

361.420

19

Between Groups

132.548

4

33.137

Within Groups

231.930

15

15.462

Total

364.478

19

4.137

.019

2.789

.065

2.143

.126

Data Awal Berat Badan
Mencit
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3

Dosis
Kontrol
Kontrol
Kontrol
130 mg/kgbb
130 mg/kgbb
130 mg/kgbb
260 mg/kgbb
260 mg/kgbb
260 mg/kgbb
360 mg/kgbb
360 mg/kgbb
360 mg/kgbb
520 mg/kgbb
520 mg/kgbb
520 mg/kgbb

BB hari ke 0
23,20
23,20
27,40
25,20
24,70
31,80
24,20
25,40
22,70
23,40
28,70
24,40
30,60
26,00
25,40

BB hari ke 7
22,00
24,40
24,90
25,60
24,50
32,10
24,70
25,50
23,80
24,70
30,00
25,30
31,70
28,20
27,00

BB hari ke 14
16,20
20,00
22,70
27,10
25,10
32,20
27,20
28,40
26,10
25,60
30,50
26,10
31,80
28,30
27,80

Universitas Sumatera Utara

Lampiran Ginjal Kanan Mencit Betina
Descriptive Statistics
N

Minimum

Maximum

Mean

Std. Deviation

dosis

5

.00

4.00

2.0000

1.58114

ginjalkanan

5

.11

.16

.1340

.01949

Valid N (listwise)

5

ANOVA
ginjalkanan
Sum of Squares

df

Mean Square

F

Between Groups

.002

4

.000

Within Groups

.000

0

.

Total

.002

4

Sig.
.

.

Lampiran Berat Organ Hati Mencit Betina
Descriptive Statistics
N

Minimum

Maximum

Mean

Std. Deviation

berathati

5

1.14

1.52

1.3980

.16619

dosis

5

.00

4.00

2.0000

1.58114

Valid N (listwise)

5

ANOVA
berathati
Sum of Squares

df

Mean Square

F

Between Groups

.110

4

.028

Within Groups

.000

0

.

Total

.110

4

Sig.
.

.

Universitas Sumatera Utara

Lampiran Organ Ginjal Kiri Mencit Betina
Descriptive Statistics
N

Minimum

Maximum

Mean

Std. Deviation

dosis

5

.00

4.00

2.0000

1.58114

ginjalkiri

5

.11

.15

.1320

.01789

Valid N (listwise)

5

ANOVA
ginjalkiri
Sum of Squares

Df

Mean Square

F

Between Groups

.001

4

.000

Within Groups

.000

0

.

Total

.001

4

Sig.
.

.

Berat Awal Organ Mencit Betina
Kelompok
Kontrol
Dosis 130
mg/kgbb
Dosis 260
mg/kgbb
Dosis 390
mg/kg bb
Dosis 520
mg/kgbb

Hati
1,14
1,51

Ginjal kanan
0,12
0,11

Ginjal kiri
0,14
0,12

1,32

0,14

0,15

1,50

0,16

0,15

1,52

0,14

0,13

Universitas Sumatera Utara

Lampiran Organ Hati Mencit Jantan

Descriptive Statistics
N

Minimum

Maximum

Mean

Std. Deviation

dosis

5

.00

4.00

2.0000

1.58114

hati

5

1.12

1.55

1.3680

.18061

Valid N (listwise)

5

ANOVA
hati
Sum of Squares

df

Mean Square

F

Between Groups

.130

4

.033

Within Groups

.000

0

.

Total

.130

4

Sig.
.

.

Lampiran Organ Ginjal Kiri Mencit Jantan
Descriptive Statistics
N

Minimum

Maximum

Mean

Std. Deviation

dosis

5

.00

4.00

2.0000

1.58114

ginjalkiri

5

.12

.16

.1400

.01871

Valid N (listwise)

5

Universitas Sumatera Utara

ANOVA
ginjalkiri
Sum of Squares

df

Mean Square

F

Between Groups

.001

4

.000

Within Groups

.000

0

.

Total

.001

4

N

Minimum

Maximum

Sig.
.

Mean

.

Std. Deviation

dosis

5

.00

4.00

2.0000

1.58114

ginjalkanan

5

.12

.17

.1480

.01924

Valid N (listwise)

5

ANOVA

ginjalkanan
Sum of Squares

Df

Mean Square

F

Between Groups

.001

4

.000

Within Groups

.000

0

.

Total

.001

4

Sig.
.

.

Berat Awal Organ
Kelompok
Kontrol
Dosis 130
mg/kgbb
Dosis 260
mg/kgbb
Dosis 390
mg/kg bb
Dosis 520
mg/kgbb

Hati
1,37
1,53

Ginjal kanan
0,15
0,16

Ginjal kiri
0,16
0,15

1,27

0,12

0,12

1,12

0,14

0,12

1,55

0,17

0,15

Universitas Sumatera Utara

DATAR PUSTAKA
Akbar, B. 2010. Tumbuhan Dengan Kandungan Senyawa Aktif Yang Berpotensi
Sebagai Bahan Antifertilisasi.
Anonim.
2013.
Teh
gaharu
dan
manfaatnya
http://www.bibitgaharu.com [11 Mei 2014].
Aziz,

bagi

kesehatan.

F.,
dkk.,
2008.
Panduan
Pelayanan
Medik:
Model
Interdisiplin Penatalaksanaan Kanker Serviks dan Gangguan Ginjal.
Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta

Batrisyiahherbal. 2012. Cara cepat aman dan alami menurunkan berat badan
dengan teh daun gaharu. http://www.batrisyiaherbal.com. [29 mei 2014].
Cambridge Communication Limited, 1999. Anatomi Fisiologi, Sistem
Perkemihan dan Sistem Pencernaan. Penerbit Buku Kedokteran EGC,
Jakarta.
Cheville, N. F. 2006. Introduction to Veterinary Pathology. 3rd Ed. Blackwell
Publishing. USA.
Departemen Kesehatan RI, Pedoman Pelaksanaan Uji Klinik
Tradisional, Jakarta, Departemen Kesehatan RI, 2002, p.17.

Obat

Ditjen POM. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Cetakan P
ertama. DepartemenKesehatan RI. Jakarta. Hal.9-11.
Ditjen

POM. 2014. Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat Dan
MakananRepublik IndonesiaNomor 7 Tahun 2014TentangPedoman Uji
Toksisitas Nonklinik Secara In Vivo.Jakarta: Badan Pengawasan Obat dan
Makanan RI. Halaman 3-4, 9,11-12,28-32.

Elya, B., Amin, J., dan Emiyanah. 2010. Toksisitas Akut Daun Justicia
gendarussa Burm. Makara Sains. 14(2): 129-134
Gupa,D., dan Bhardwaj, S. 20012. Study of Acute, Subacute and Chronic Toxiciy
Test. Internasionak Journal of Advanced Research in Pharmaceutical and
Bio Sciences (IJARPB). 1(2): 103-110.
Hernani dan Rahardjo, M. 2006. Tanaman Berkhasiat Antioksidan: Berbagai Jenis
Tanaman Penangkal Racun. Penebar Swadaya. Jakarta.
Irianti, A. 2008. Aplikasi Ekstrak Daun Sirih dalam Menghambat Oksidasi Lemak
Jambal Patin. Tesis. Sekolah Pascasarjana Intitut Pertanian Bogor. Bogor.

Universitas Sumatera Utara

Iwuanyanwu K.C.V., Amadi, U., Charles, I.A., dan Ayalogu, E.O. 2012.
Evaluation of Acute and Subcronic Oral Toxicity Suti of Baker Cleancer
Bitters A Polyherbal Drug on Exprimental Rat. EXCLI Journal11(1): 632640.
Junqueira,L.C., dan Corneiro,J.2005. Basic Histology Text and Atlas Edisi XI.
Jakarta: EGC. Halaman 71-75.
Kumalaningsih, S. 2006. Antioksida danAlami, PenangkalRadikalBebas: Sumber,
Manfaat, Cara PenyediaandanPengolahan. TrubusAgrisana. Surabaya.
Hal.4-5, 24, 43.
Lu, F. C., 1995, Toksikologi Dasar. Asas, Organ Sasaran, dan Penilaian Resiko.
Edisi Kedua, UI Press, Jakarta.
MacFarlane PS, Robin R, Robin C. 2000. Pathology Illustrated. 5th ed. United
Kingdom: Churchill Livingstone
Misra, H., D. Mehta, B.K. Mehta, M. soni, D.C dan Jain. 2008. Study Of
Extraction and HPTLC-UVMethod for Estimation Of Caffeine in Marketed
Tea (Camellia sinensis) Granules. International Journal of Green
Pharmacy: 47-51.
OECD. 2001. Acute Oral Toxicity – Acute Toxic Class Method. OECD
Guidelines for Testing Chemicals. 423(1) : 1-6
Prasta, B, P. 2010. Pengaruh Pemberian Dekstrometorfan Dosis Bertingkat Per
Oral Terhadap Gambaran Histopatologi Ginjal Tikus Wistar. Fakultas
Kedokteran Universitas Diponegoro.
Price S.A dan Wilson, Lorraine M.C, 2005. Patofisiologi Clinical Concept Of
Desiace Procces, Edisi 6, Vol 2, Alih Bahasa Brahm U. Jakarta: EGC.
Retnomurti, D. Anggraini. 2008. Gambaran Makroskopik dan Makroskopik Hati
dan Ginjal Mencit Akibat Pemberian Plumbum Asetat. Tesis. Medan:
Pascasarjana Universitas Sumatra Utara.
Santoso, H.B., dan Nurliani, A. 2006. Efek Doksisiklin Selama Masa
Organogenesis Pada Struktur Histology Organ Hati Dan Ginjal Fetus
Mencit. Bioscientiae
Silaban, S. 2014. Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antioksi dan Ekstrak Etanol Daun G
aharu (Aquilaria malaccensis Lamk). Skripsi. USU Press. Medan
Silalahi, J. 2006. Makanan Fungsional. Penerbit Kanisius. Yogyakarta. Hal 40, 47-48.

Universitas Sumatera Utara

Soehartono,T. 2001. Gaharu, Kegunaan dan Pemanfaatan. Proseding
LokakaryaPengembangan Gaharu, Mataram 4-5 September 2001.
Direktorat Bina UsahaPerhutanan Rakyat. Ditjen RLPS. Jakarta.
Sumarna, Y. 2002. BudidayaGaharu. Cet. Ke-1.PenebarSwadaya. Jakarta. Hal. 80.
Sumarna, Y.2007. Budidaya dan Rekayasa Produksi Gaharu. Temu Pakar Pengem
bangan Gaharu. Direktorat Jendral RLPS. Jakarta.
Tarigan, K. 2004. Profil Pengusahaan (Budidaya) Gaharu. Pusat Bina Penyuluhan
Kehutanan. Departemen Kehutanan. Jakarta.
Wicaksono, S. 2002. Efek Toksik dan Cara Menentukan Toksisitas Bahan Kimia.
Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Cermin Dunia Kesehatan No 135.
Halaman 33.
Wirasuta, M.A.G., dan Niruri, R. 2006. Toksikologi Umum. Jurusan Farmasi
Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
Halaman 22, 60. Bali

Lampiran 1. Surat Izin Penelitian Di Fakultas Farmasi Universitas Sumatra Utara

Universitas Sumatera Utara

METODOLOGI PENELITIAN
Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Juli hingga bulan Oktober 2016.
Pengambilan sampel dilakukan di Langkat, Sumatra Utara. Pembuatan teh, dan
pengujian akut oral dilakukan di Laboratorium Farmakologi di Laboratorium
Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatra Utara, Histopatologi Organ
dilakukan di Labolatorium Histopatologi Fakultas Kedokteran, Universitas
Sumatra Utara.
Bahan dan Alat Penelitian
Bahan yang digunakan adalah daun gaharu (A.malaccensis Lamk.) segar
non induksi yang telah dikeringkan selama 1 bulan, mencit (M. Musculus ),Histo
organ hati dan ginjal, akuades, dan air panas. Bahan kimia yang digunakan adalah
adalah etanol 96% dan air suling (akuades), Na2HPO4, NaH2PO4, dan
Formaldehyd, infus NaCl.
Alat yang digunakan adalah kandang mencit, dot, botol vial, oral sonde,
spuit, kaca arloji, batang pengaduk, tisu, kertas saring, kertas perkamen, lemari
pengering, lemari penyimpan, desikator, kamera digital dan lemari pengering,
mikroskop, timbangan, alat tulis, pot, gelas ukur, baker glass, plastikpolietilen.
Prosedur Penelitian
Pengambilan Sampel Tanaman
Pengambilan sample dilakukan secara purposive tanpa membandingkan dengan
tanaman yang sama dari daerah yang lain. Pengambilan sampel ini dilakukan berdasarkan
pohon yang belum diinduksi. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun
gaharu yang belum diinduksi yang diambil dari pohon di Langkat, Sumatra Utara.

Universitas Sumatera Utara

Pembuatan Teh
1. Dibersihkan sampel daun gaharu dari kotoran yang menempel dengan air
mengalir
2. Dilayukan dengan disebarkan di atas kertas perkamen hingga airnya
terserap
3. Dilakukan pengeringan di lemari pengering pada temperatur ± 40°C
sampai kering (ditandai bila diremas rapuh)
4. Diblender daun yang sudah kering
5. Dimasukkan ke dalam plastikpolietilen
6. Diseduh teh daun gaharu menjadi minuman teh dengan ukuran teh
sebanyak 2 g dan air panas 150 ml
Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Gaharu
Pembuatan ekstrak dilakukan secara maserasi dengan pelarut etanol 96%,
sebanyak 100 g serbuk simplisia dimasukkan kedalam wadah kaca, di tuangi
dengan 1000 ml etanol 96%, ditutup, dibiarkan selama 5 hari terlindungi dari
cahaya dan sesekali diaduk, setelah 5 hari campuran tersebut diserkai (saring).
Ampas dicuci dengan etanol 96% secukupnya sehingga diperoleh 1000 ml, lalu
dipindahkan dalam bejana tertutup dan dibiarkan ditempat sejuk terlindung dari
cahaya selama 2 hari, kemudian dituangkan lalu disaring. Maserat dipekatkan
menggunakan alat rotary evaporator pada suhu 40°C sampai diperoleh maserat
pekat kemudian dikeringkan menggunakan freeze dryer sehingga dapat diperoleh
ekstrak kering (Ditjen POM, 1979).
Hewan Uji Toksik Oral

Universitas Sumatera Utara

Hewan uji toksik oral yang digunakan adalah mencit jantan dan betina
galur ddY berumur lebih kurang dua bulan dengan berat badan 20-30 g masingmasing 50 ekor yang diperoleh dari Bagian Nonruminansia Fakultas Farmasi,
Universitas Sumatra Utara.
Persiapan Hewan Uji
Mencit diaklimatisasi selama dua minggu dengan tujuan untuk
mengadaptasikan terhadap lingkungan kandang percobaan. Pada tahap ini
dilakukan pengamatan keadaan umum hewan uji. Penelitian ini menggunakan 25
ekor mencit jantan dan 25 ekor mencit betina yang dibagi menjadi 5 kelompok
perlakuan. Pengelompokan hewan coba dilakukan secara acak lengkap yaitu
masing-masing terdiri dari 5 ekor.
Penetapan Dosis.
Dosis teh gaharu adalah 1 g. Faktor konversi dari manusia ke mencit, yaitu
0,0026, maka dosis sediaan uji untuk mencit adalah = 2,6 g/20 g bb mencit=
0,13g/kg bb mencit. Dosis ini ditetapkan sebagai dosis terendah yang akan
diberikan. Penentuan dosis terbesar dilakukan dengan uji pendahuluan untuk
mengetahui dosis terbesar yang dapat disondekan kepada mencit, diperoleh dosis
0,52g/kg bb mencit. Untuk mendapatkan hasil yang baik digunakan dosis secara
berturut-turut yang akan mengikuti progresi geometris yaitu :
YN = Y1 x RN-1
dengan
Y1 = Dosis pertama,
YN = Dosis ke-N,

Universitas Sumatera Utara

R = Faktor geometris≠ 0 atau 1 kelipatan dosis. Dengan memasukkan dosis
terendah (dosis ke-1) dan dosis tertinggi (dosis ke-4) ke dalam persamaan, maka
diperoleh faktor geometris 0,52 = 0,13 x R4-1, sehingga diperoleh R = 2.
Berdasarkan perhitungan tersebut, untuk mendapatkan 4 dosis digunakan
kelipatan antar dosis sebesar 2, sehingga perhitungan dosis yang akan diberikan
sebagai
berikut:
a. Dosis 1 = 0,13 gram/kg bb
b. Dosis 2 = 0,13 x 2 = 0,26 gram/kg bb
c. Dosis 3 = 0,13 x 3 = 0,39 gram/kg bb
d. Dosis 4 = 0,13 x 4 = 0, 52 gram/ kg bb
Penentuan nilai LD50.
Untuk penentuan nilai LD50, digunakan dosis bertingkat yang terdiri dari
empat variasi dosis. Pemberian ekstrak dilakukan dalam satu kali pemberian
secara oral menggunakan sonde, mencit diamati selama 4 jam untuk melihat
apakah ada gejala toksik yang muncul atau tidak. Pengamatan pada
mencit kembali dilakukan pada 24 jam setelah pemberian larutan uji dengan
menghitung jumlah mencit yang mati dari tiap kelompok. Nilai LD50 dihitung
dengan menggunakan rumus Weil.
Pemberian Sediaan uji
Hewan harus dipuasakan sebelum di berikan perlakuan (mencit
dipuasakan selama 14-18 jam, mencit dipuasakan selama 3-4 jam, air boleh
diberikan), setelah dipuasakan, hewan ditimbang dan di berikan sediaan uji.
Sediaan uji di berikan dalam dosis tunggaldengan menggunakan sonde. Pada

Universitas Sumatera Utara

keadaan yang tidak memungkinkan untuk diberikan dosis dengan satu kali
pemberian, sediaan uji dapat di berikan dalam beberapa kali dalam jangka waktu
pemberiaan zat tidak lebih dari 24 jam, setelah di berikan perlakuan, pakan boleh
di berikan kembali setelah 3-4 jam untuk tikus dan 1-2 jam untuk mencit. Bila
sediaan uji diberikan beberapa kali, maka pakan boleh di berikan setelah
perlakuan tergantung pada lama periode pemberian sediaan uji tersebut.
Pada umumnya sediaan uji diberikan dalam volume yang tetap selama
pengujian (konsentrasi berbeda), akan tetapi jika bahan sediaan uji berupa cairan
atau campuran cairan, sebaiknya digunakan dalam bentuk tidak diencerkan
(konsentrasi tetap).
Pembuatan Preparat Hepar
Hepar

direndam

dalam

larutanfiksatif

yaitu

formalin

10%.

Kemudiandirendam lagi dalam etanol 70%, dilanjutkandengan perendaman dalam
etanol 80% yangmasing-masing perlakuan berlangsungselama 2 jam. Perendaman
kembali dalametanol 90%, lalu etanol 95%, dilanjutkandalam etanol absolut yang
masing-masingperendaman dilakukan selama 20 menit.Selanjutnya, hepar
dicelupkan dalam paraffin cair yang dituang dalam wadah. Setelahbeberapa saat,
parafin akan memadat danhepar berada dalam blok parafin (embeding).Hasil
embeding hepar dipotong denganketebalan irisan 5-10 mikrometer. Irisan tersebut
diambil dengan kuas dan dimasukkan dalam air hangat untuk membuka lipatan
yang mungkin terjadi pada preparat, direntangkan sempurna pada object glass.
Potongan dikeringkan dan diletakkan di atas hot plate (38 – 40ºC). Preparat
disimpan dalam inkubator pada suhu 38 – 40ºC selama 24 jam

Universitas Sumatera Utara

Pengamatan
Pengamatan dilakukan tiap hari selama sekurang-kurangnya 14 hari
terhadap sistem kardiovaskular, pernafasan, somatomotor, kulit, dan bulu,
mukosa, mata dan sebagainya. Perhatian khusus diberikan akan adanya tremor,
kejang, salvias, diare, alergi, lemah, tidur dan koma. Hewan coba yang sekarat
dikorbankan dan dimasukkan dalam perhitungan sebagai hewan yang mati.
Hewan ditimbang sedikitnya 2 kali dalam seminggu.
Analisis Data
Data jumlah hewan uji dianalisa secara statistic menggunakan SPSS
dengan metode One Way Analisis Of Variance (ANOVA) dilanjutkan dengan uji
Post Hoc Tukaey untuk mengetahui perbedaan signifikan berat badan, berat organ
hati dan ginjal.

Universitas Sumatera Utara

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil Ekstraksi Daun Gaharu
Pembuatan ekstrak dilakukan dengan metode maserasi menggunakan
pelarut etanol 90% yang bertujuan untuk menarik senyawa metabolit skunder
yang terdapat dalam serbuk daun gaharu. Hasil masrasi dari 100 gram serbuk
simplisia diperoleh ekstrak kental 11,97 gram
Hasil Pengujian Toksisitas Akut
Hasil uji pendahuluan selama 14 hari tidak di temukan adanya gejala
toksik dan kematian pada kelompok kontrol maupun kelompok perlakuan dosis
130, 260, 390, 520 mg/kgbb.
Penelitian ini dilakukan berdasarkan metode Thomson dan Weil dengan
menggunakan kelipatan dosis. Hasil uji pendahuluan dari seduhan teh 1 gram
maka didapatkan dosis untuk pengujian toksisitas akut yaitu dosis 130, 260, 390
dan 520 mg/kg bb. Pengamatan dilakukan selama 14 hari meliputi gejala klinis,
kematian hewan, berat badan dan makropatologi.
Hasil Pengamatan Gejala Toksik
Hasil pengamatan yang dilakukan setiap hari selama 14 hari terhadap
adanya kejang, diare, salvias, lemas, tidur, dan koma (OECD, 2001) dapat dilihat
pada Tabel 1 dan 2
Tabel 1. Hasil Pengamatan Gejala Toksis Pada Mencit Betina
Kelompok
Kontrol
Dosis 130 mg/kgbb
Dosis 260 mg/kgbb
Dosis 390 mg/kgbb
Dosis 520 mg/kgbb

Kejang
-

Diare
-

Salivasi
-

Lemas
-

Tidur
-

Koma
-

Keterangan : (-) = tidak menunjukkan gejala; (+) = menunjukkan adanya gejala

Universitas Sumatera Utara

Tabel 2. Hasil Pengamatan Gejala Toksis Pada Mencit Jantan
Kelompok

Kejang

Diare

Salivasi

Lemas

Tidur

Koma

Kontrol
Dosis 130 mg/kgbb
Dosis 260 mg/kgbb
Dosis 390 mg/kgbb
Dosis 520 mg/kgbb

-

-

-

-

-

-

Keterangan : (-) = tidak menunjukkan gejala; (+) = menunjukkan adanya gejala

Berdasarkan tabel 1 dan 2 terlihat bahwa pemberian seduhan the tidak
ditemukan adanya gejala toksik yang menyerang sistem saraf pusat dan sistem
pencernaan, ditandai dengan tidak terjadinya tremor dan diare pada kelompok
kontrol dan perlakuan pada dosis 130, 260, 390 dan 520 mg/kgbb. Dari hasil
pengamatan yang dilakukan terlihat bahwa mencit jantan dan mencit betina yang
diberi seduhan teh terlihat lebih aktif dibandingkan dengan mencit yang tidak di
beri seduhan teh.
Evaluasi toksisitas akut tidak hanya mengenai LD50, tetapi juga terhadap
kelainan tingkah laku, stimulasi dan aktivitas motorik hewan uji untuk
mendapatkan gambaran tentang sebab kematian (Retnomurti, 2008).
Hasil Pengamatan Kematian
Hasil pengamatan uji kuantitatif selama 14 hari, berupa jumlah mencit
yang mati ditunjukkan pada Tabel 3 dan 4
Tabel 3.Jumlah Mencit Betina Yang Mati Setelah Diberi Seduhan Teh Selama 14
Hari
Kelompok

Jumlah Mencit

Jumlah Kematian

Kontrol

3

0

Dosis 130 mg/kgbb

3

0

Dosis 260 mg/kgbb

3

0

Dosis 390 mg/kgbb

3

0

Dosis 520 mg/kgbb

3

0

Universitas Sumatera Utara

Tabel 4.Jumlah Mencit Jantan Yang Mati Setelah Diberi Seduhan Teh Selama 14
Hari
Kelompok

Jumlah Mencit

Jumlah Kematian

Kontrol
Dosis 130 mg/kgbb
Dosis 260 mg/kgbb
Dosis 390 mg/kgbb
Dosis 520 mg/kgbb

3
3
3
3
3

0
0
0
0
0

Keterangan P = perlakuan; 1,2,3, dan 4 = dosis 130,260,390 dan 520 mg/kgbb; bb = berat
badan

Berdasarkan tabel 3 dan 4 menunjukkan bahwa pemberian seduhan teh
pada kelompok kontrol, dosis 130, 260, 390 dan 520 mg/kgbb tidak terdapat
mencit jantan dan mencit betina yang mati. Bila toksisitas akutnya rendah LD50
tidak perlu ditentukan secara tepat dan suatu angka perkiraan sudah dapat
memberi manfaat (Retnomurti, 2008). Berdasarkan kesepakatan para ahli, bila
pada dosis maksimal tidak ada kematian pada hewan coba, maka jelas senyawa
tersebut termasuk dalam kriteria “praktis tidak toksik” (Jenova, 2009;
Iwuanyanwu, et al., 2012).
Hasil Pengamatan Berat Badan
Hasil rata-rata berat badan tiap kelompok mencit sebelum dan sesudah
diberi seduhan teh di tunjukkan pada Tabel 5 dan 6
Tabel 5. Hasil Rata-Rata Berat Badan Mencit Betina
Hari
Kontrol

0

7

14

24,6b
±
2,42
23,76b
±
1,55
19,63 b
±
3,26

Dosis
130
mg/kgbb
27,23b
±
3,96
27,4b
±
4,10
28,13b
±
3,66

Rata-rata berat badan (g) ± SD
Dosis
P
Dosis
260
390
mg/kgbb
mg/kgbb
0.77
24,1b
0.99
25,5b
±
±
1,35
2,81
0.47
24,66b
0.99
26,66b
±
±
0,85
2,90
0.23
27,23b
0.42
27,4b
±
±
1,15
2,69
P

P

0.99

0.66

0.37

Dosis
520
mg/kgbb
27,33b
±
2,84
28,96b
±
2,44
29,30a
±
2,17

P

0.75

0.18

0.01

Keterangan : bb = berat badan, SD = standart deviasi, p = angka kebermaknaan, a =
signifikan, b= tidak signifikan

Universitas Sumatera Utara

Tabel 6. Hasil Rata-Rata Berat Badan Mencit Jantan
Hari
Kontrol

Dosis
130
mg/kgbb

0

27,4b
±
2,75

26,6b
±
3,31

7

33,8b
±
3,37
34,3b
±
2,49

30,6b
±
2,93
31,8b
±
3,09

14

Rata-rata berat badan (g) ± SD
Dosis
P
Dosis
260
390
mg/kg
mg/kg
bb
bb
0,99
25,62b
0,94
24,8b
±
±
3,32
3,03
P

0,74

0,89

32,5b
±
3,13
30,9b
±
2,82

0,98

0,73

P

0.81

27,4b
±
3,25
28,3b
±
3,21

0,16

0,25

Dosis
520
mg/kg
bb
4,09b
±
4,09
26,6b
±
5,35
27,0b
±
6,56

P

0,18

0.09

0,11

Keterangan : bb = berat badan, SD = standart deviasi, P = angka kebermaknaan, a=
signifikan, b= tidak signifikan

Berdasarkan tabel 5 dan 6 terlihat bahwa hasil uji statistic menunjukkan
tidak ada perbedaan yang signifikan antara kenaikan berat badan mencit jantan
dan betina dengan pemberian seduhan teh (p > 0.05). hal ini dapat dinyatakan
bahwa pemberian seduhan teh tidak berpengaruh terhadap perkembangan berat
badan mencit jantan dan mencit betina. Tetapi pada dosis 520 mg/kgbb pada hari
ke 14 terdapat perbedaan berat badan mencit betina

yang signifikan pada

pemberian seduhan teh (p < 0.05). Hewan uji diamati setiap hari untuk gejala
klinis dan berat badan diukur skala berkala (Gupta dan Bhardwaj, 2012).
Pengamatan Berat Organ Relatif
Hasil berat organ relative hati, ginjal kanan, dan ginjal kiri dapat dilihat
pada Tabel 7 dan 8
Tabel 7. Hasil Rata-Rata Berat Organ Relatif Mencit Betina
Kelompok
Kontrol
Dosis 130 mg/kgbb
Dosis 260 mg/kgbb
Dosis 390 mg/kg bb
Dosis 520 mg/kgbb

Hati
1,14 ± 0,16
1,51 ± 0,16
1,32 ± 0,16
1,50 ± 0,16
1,52 ± 0,16

Ginjal kanan
0,12 ± 0,02
0,11 ± 0,02
0,14 ± 0,02
0,16 ± 0,02
0,14 ± 0,02

Ginjal kiri
0,14 ± 0,02
0,12 ± 0,02
0,15 ± 0,02
0,15 ± 0,02
0,13 ± 0,02

Universitas Sumatera Utara

Berdasarkan tabel 7 terlihat bahwa pemberian seduhan teh berpengaruh
terhadap perubahan berat organ. Pada organ hati mengalami kenaikan pada semua
perlakuan dibandingkan control. Sedangkan pada organ ginjal kanan dan ginjal
kiri pada perlakuan 260 mg/kgbb mengalami penurunan dibandingkan dengan
kontrol.
Tabel 8. Hasil Rata-Rata Berat Organ Relatif Mencit Jantan
Kelompok
Kontrol
Dosis 130 mg/kgbb

Hati
1,37 ± 0,18
1,53 ± 0,18

Ginjal kanan
0,15 ± 0,02
0,16 ± 0,02

Ginjal kiri
0,16 ± 0,02
0,15 ± 0,02

Dosis 260 mg/kgbb
Dosis 390 mg/kg bb
Dosis 520 mg/kgbb

1,27 ± 0,18
1,12 ± 0,18
1,55 ± 0,18

0,12 ± 0,02
0,14 ± 0,02
0,17 ± 0,02

0,12 ± 0,02
0,12 ± 0,02
0,15 ± 0,02

Berdasarkan tabel 8 terlihat bahwa pemberian seduhan teh berpengaruh
terhadap perubahan berat organ. Pada kelompok dosis 130 mg/kgbb dan
kelompok dosis 520 mg/kgbb, organ hati mengalami kenaikan dari hati pada
perlakuan kontrol. Sedangkan perlakuan dosis 260 mg/kgbb dang 390 mg/kgbb,
organ hati mengalami penurunan dari hati pada perlakuan control. Pada kelompok
dosis 130 mg/kgbb dan kelompok dosis 520 mg/kgbb, organ ginjal kanan
mengalami kenaikan dari organ ginjal kanan pada perlakuan kontrol. Sedangkan
perlakuan dosis 260 mg/kgbb dang 390 mg/kgbb, organ ginjal kanan mengalami
penurunan dari organ ginjal kanan pada perlakuan kontrol. Sedangkan pada organ
ginjal kiri pada semua perlakuan mengalami penurunan dibandingkan dengan
kontrol.
Hasil Pengamatan Makropatologi
Hasil pengamatan makropatologi meliputi pengamatan warna dan
permukaan organ dapat dilihat pada tabel 9 dan 10

Universitas Sumatera Utara

Tabel 9. Hasil Pengamatan Warna Organ Mencit Jantan

Merah
Kecoklatan

Dosis 130
mg/kgbb
Merah
Kecoklatan

Warna Organ
Dosis 260
mg/kgbb
Merah
Kecoklatan

Dosis 390
mg/kg bb
Merah
Kecoklatan

Dosis 520
mg/kgbb
Merah
Kecoklatan

Merah
Kecoklatan

Merah
Kecoklatan

Merah
Kecoklatan

Merah
Kecoklatan

Merah
Kecoklatan

Organ

Kontrol

Hati
Ginjal

Tabel 10. Hasil Pengamatan Warna Organ Mencit Betina
Organ
Kontrol
Hati

Merah
Kecoklatan

Dosis 130
mg/kgbb
Merah
Kecoklatan

Ginjal

Merah
Kecoklatan

Merah
Kecoklatan

Warna Organ
Dosis 260
mg/kgbb
Merah
Kecoklatan

Dosis 390
mg/kg bb
Merah
Kecoklatan

Dosis 520
mg/kgbb
Merah
Kecoklatan

Merah
Kecoklatan

Merah
Kecoklatan

Merah
Kecoklatan

Berdasarkan tabel 9 dan 10 menunjukkan bahwa organ hati dan ginjal
setelah diberi seduhan teh pada kelompok kontrol, dosis 130, 260, 390 dan 520
mg/kgbb masih dalam keadaan normal yang bewarna merah kecoklatan. Hasil
dari pengamatan permukaan dan konsistensi organ hati dan ginjal mencit jantan
dan betina tidak terjadi perubahan, struktur permukaan terlihat licin dan
konsistensi kenyal pada semua kelompok.
Warna dan penampilan sering dapat menunjukkan sifat toksisitas seperti
perlemakan hati, atau sirosis. Biasanya berat organ merupakan petunjuk yang
sangat peka dari efek pada hati. Meski suatu efek tidak selalu menunjukkan
toksisitas, dalam kasus tertentu peningkatan berat hati merupakan criteria paling
peka untuk toksisitas (Lu, 1995).
Efek toksik segera terjadi setelah senyawa toksis mencapai organ hati dan
ginjal pada konsentrasi yang tinggi (Wirasuta dan Niruri, 2006). Oleh sebab itu,
hati menjadi organ yang sangat potensial menderita keracunan terlebih dahulu
sebelum organ lain (Santoso dan Nurlaili, 2006). Terjadi kerusakan pada hati

Universitas Sumatera Utara

dapat menjadi petunjuk apakah suatu zat yang diberikan bersifat toksik atau tidak
(Elya, dkk, 2010).

Kontrol

dosis 130 mg/kgbb

Dosis 260 mg/kgbb

dosis 390 mg/kgbb

Dosis 520 mg/kgbb
Gambar 1. Makropatologi Organ Hati

Universitas Sumatera Utara

Kontrol

Dosis 130 Mg/Kgbb

Dosis 260 Mg/Kgbb

Dosis 390 Mg/Kgbb

Dosis 520 mg/kgbb
Gamabar 2. Makropatologi Organ Ginjal

Universitas Sumatera Utara

Histopatologi Hati dan Ginjal Mencit
Pengamatan histopatologi dilakukan pada akhir masa uji, yaitu pada hari
ke-15. Mencit yang masih hidup dibedah untuk diambil organ vitalnya yaitu
hati.Hasil pengamatan ini digunakan untuk menentukan spektrum efek toksik
pada mencit setelah pemberian sediaan uji. Melalui pengamatan histopatologi ini
dapatdilihat kerusakan organ yang tidak terlihat bila hanya diamati secara
makroskopik.
Salah satu organ yang sering menderita karena adanya zat-zat toksik
adalah hati, bahan kimia kebanyakan mengalami metabolisme dalam hati dan oleh
karenanya maka banyak bahan kimia yang berpotensi merusak sel-sel hati. Bahan
kimia yang dapat mempengaruhi hati disebut hipotoksik (Wicaksono, 2002).
Dalam setiap ginjalterdapat sekitar 1 juta nefron yang pada dasarnya
mempunyai struktur dan fungsi yang sama. Dengan demikian, kerja ginjal dapat
dianggap sebagai jumlah total dari fungsi semua nefron tersebut (Price dan
Wilson, 2006). Setiap nefron terdiri atas bagian yang melebaryakni korpuskel
renalis, tubulus kontortus proksimal, segmen tipis, dan tebal ansa henle, tubulus
kontortus distal, dan duktus koligentes (Junquieraand Carneiro, 2005).

Universitas Sumatera Utara

1

1
2

Betina

1
2

Jantan
Gambar 3. Histopatologi Organ Hati Kontrol
Keterangan : 1 = Vena Centralis
2 = Sinosoid

Universitas Sumatera Utara

1

2

Betina

1

Jantan
Gambar 4. Histopatologi histopatologiorgan hati perlakuan dosis 130 mg/kgbb
Keterangan : 1 = Vena Centralis
2 = Vena Porta

Universitas Sumatera Utara

1

2

Betina

1

2

Jantan
Gambar 5. Histopatologi histopatologiorgan hati perlakuan dosis 260 mg/kgbb
Keterangan : 1 = Vena Centralis
2 = Vena Porta

Universitas Sumatera Utara

2

Betina

1

Jantan
Gambar 6. Histopatologi histopatologiorgan hati perlakuan dosis 390 mg/kgbb
Keterangan : 1 = Vena Centralis
2 = Sinosoid

Universitas Sumatera Utara

2

Betina

1
3

Jantan
Gambar 7. Histopatologi histopatologi organ hati perlakuan dosis 520 mg/kgbb
Keterangan : 1 = Vena Centralis
2 = Hepatosit
3 = Limfosit

Universitas Sumatera Utara

1
1

Kanan

Betina

Kiri

1
2
2
3

Kanan

Jantan

Kiri

Gambar 8. Histopatologi ginjal mencit kontrol
Keterangan : 1 = Glumerulus
2 = Pembuluh darah
3 = Tubulus

Universitas Sumatera Utara

1
2

1

Kanan

Betina

Kiri

1

2

1

Kanan

Jantan

Kiri

Gambar 9. Histopatologi ginjal mencit dosis 130 mg/kgbb
Keterangan : 1 = Glumerulus
2 = Pembuluh darah

Universitas Sumatera Utara

1
2
3

2

Kanan

Betina

Kiri

1

1

Kanan

Jantan

Kiri

Gambar 9. Histopatologi ginjal mencit dosis 260 mg/kgbb
Keterangan : 1 = Glumerulus

Universitas Sumatera Utara

1
1

2

Kanan

Betina

Kiri

1
1

Kanan

Jantan

Kiri

Gambar 10. Histopatologi ginjal mencit dosis 390 mg/kgbb
Keterangan : 1 = Glumerulus

Universitas Sumatera Utara

1

1

Kanan

Betina

Kiri

1
1

Kanan

Jantan

Kiri

Gambar 11. Histopatologi Ginjal Dosis 590 mg/kgbb
keterangan : 1 = glumerulus

Universitas Sumatera Utara

Berdasarkan gambar histologi hati mencit betina dan mencit jantan di
dapatkan hasil hepatosit yang normal menunjukkan susunan sel secara radie
terhadap vena sentralis, bentuk sel bulat danoval, dan terdapat lempeng-lempeng
hepatosit.Sel terlihat memiliki satu nukleus, namun adajuga yang memiliki lebih
dari satu nucleus(binukleat) yang terdapat di tengah sel. Hepatosit merupakan
sebagian besar organ yang bertanggung jawab terhadap peran sentral hati dalam
metabolisme.
Vena centralis pada gambar mengalami dilatasi dan hemorhage.
Hemorhage adalah terjadinya bendungan darah pada glomerulus.Hal ini
disebabkan adanya kerusakan pada badan malpghi sehingga sel-sel darah merah
dapat menembus glomerulus. Berdasarkan gambar histologi hati mencit jantan
yang di beri dosis 520 mg/kgbb mengalami limfosit atau peradangan.
Berdasarkan gambar histologi hati mencit jantan yang diberi dosis 390
mg/kgbb sinusoid mengalami pelebaran. Sinusoid hati adalah saluran yang
berliku-liku dan melebar diameternya. Aliran darah sinusoid berasal dari cabang
terminal vena porta dan arteri hepatik, membawa darah kaya nutrisi dari saluran
pencernaan dan juga kaya oksigen dari jantung.
Pengamatan yang dilakukan dari semua perlakuan didapat bahwa
pemberian ekstrak daun gaharu pada histologi ginjal kanan mencit betina pada
pemberian dosis 130 mg/kg bb Glomerulus mengalami atropi yaitu menurunnya
ukuran jaringan yang disebabkan oleh berkurangnya jumlah sel atau berkurangnya
ukuran sel. Salah satu bentuk kerusakan pada ginjal terlihat adanya penyempitan
pada ruang bowman. Penyempitan ruang bowman disebabkan terjadinya
peradangan glomerulus ataupun proliferasi dari epitel kapsul bowman.

Universitas Sumatera Utara

Pembuluh darah vena centralis dan vena porta banyak mengalami
hemorhage dan dilatasi yaitu pembuluh darah mengalami pembesaran dan
peningkatan pembuluh darah pada daerah tertentu. Hal tersebut dikarenakan pada
proses pembedahan dan pembuatan preparat yang merusak pembuluh darah.
Secara keseluruhan pemberian ekstrak daun gaharu pada semua kelompok
perlakuan tidak mengalami toksik baik pada organ ginjal dan organ hati.
Fungsi utama ginjal adalah menyingkirkan buangan metabolism normal
dan mengkekskresi xenobiotik dan metabolitnya. Hal ini dipengaruhi oleh
produksi urin, suatu proses yang juga berperan dalam pemeliharaan status
homeostasis tubuh. Selain itu, ginjal mempunyai beberapa fungsi non-ekskretori
(Lu, 1995). Beberapa obatatau zat kimia yang beredar dalam sirkulasi sistematik
akan dibawa ke ginjal dalam kadar yang cukup tinggi, akan terjadi proses
perubahan struktur ginjal itu sendiri terutama di tubulus ginjal (Wirasuta dan
Niruri, 2006).
Tubulus proksimal merupakan bagian yang paling banyak dan mudah
mengalami kerusakan pada kasus nefrotoksik. Hal ini dapat terjadi karena adanya
akumulasi bahan-bahan toksik dan karakter tubulus proksimal yang memiliki
epitel yang lemah serta mudah bocor. Sama halnya dengan glomerulus, tubulus
paada penelitian ini tidak ada yang mengalami masalah, tubulus masih terlihat
normal dan berfungsi dengan baik. Kerusakan tubulus proksimal merupakan suatu
hasil korelasi yang sangat penting antara transpor segmental tubulus dengan
akumulasi, toksisitas, serta reaksi obat pada sel-sel target tubulus proksimal
(Prasta, 2010).

Universitas Sumatera Utara

KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
Pada pemberian seduhan teh gaharu (A. malaccensis Lamk), tidak
ditemukan gejala toksik pada perilaku, berat badan, berat organ dan pengamatan
makropatologi organ mencit jantan dan mencit betina. Pemberian seduhan teh
pada organ hati mencit jantan yang di beri dosis 520 mg/kgbb mengalami dilatasi
dan hemorhage pada pembuluh darah vena porta dan vena centralis dan
mengalami peradangan.
Saran
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, maka disarankan kepada
penelitian selanjutnya untuk menguji toksisitas subkronik pada organ hati, ginjal,
jantung, darah dan organ lain, menguji toksisitas khusus seperti teratogenetik dan
karsinogenetik.

Universitas Sumatera Utara

TINJAUAN PUSTAKA
Deskripsi Tanaman Gaharu (A. Malaccensis Lamk.)
Daun gaharu (A. malaccensis Lamk.) merupakan pohon dari suku
Thymeleaceae (Tarigan, 2004), sudah mulai populer dimanfaatkan masyarakat
petani gaharu di Langkat sebagai minuman yang diseduh. Hasil wawancara
terhadap petani gaharu menjelaskan bahwa mengkonsumsi daun gaharu dari jenis
ini memiliki banyak manfaat diantaranya memperbaiki pencernaan.
Taksonomi tanaman gaharu (A. malaccensis Lamk.) menurut Tarigan
(2004), yaitu: Kingdom : Plantae, Divisi : Spermatophyta, Sub Divisi :
Angiospermae, Kelas : Dicotyledonae, Sub Kelas

: Dialypetale, Ordo : Myrtales

Famili : Thymeleaceae, Genus : Aquilaria, Spesies :

Aquilaria

malaccensis

Lamk.
Teh Daun Gaharu (Aquilaria malaccensis Lamk)
Daun gaharu yang dijadikan teh ternyata memiliki manfaat bagi orang
yang mengonsumsinya. Manfaat dari mengonsumsi teh gaharu yaitu sebagai
peluruh lemak, tidak membakar lemak yang aktif sehingga tidak menurunkan
berat badan bagi pemilik tubuh ideal, membantu mengobati keputihan, sebagai
deodoran alami sehingga membantu mengurangi bau badan, sebagai antioksidan
yang dapat membantu membuang racun dari tubuh, mencegah insomnia karena
teh daun gaharu menekan sistem syaraf pusat sehingga menimbulkan efek
menenangkan sebagai obat anti mabuk, membantu menurunkan kadar kolestrol
jahat, membantu meredakan ketegangan/hipertensi/stress dan mengurangi kadar
gula dalam darah sehingga dapat membantu mengobati diabetes melitus
(Batrisyiaherbal, 2012).

Universitas Sumatera Utara

Bagian tanaman gaharu yang dapat digunakan untuk tujuan pengobatan
yaitu pada daun yang telah dikeringkan, gubal gaharu, serbuk kayu, akar gaharu
dan kandungan minyak atsirinya. Di Cina dan Jepang gaharu dikenal sebagai obat
reumatik, obat untuk meredakan stress, liver, radang lambung dan kanker. Di
Indonesia, secara tradisional masyarakat Papua telah menggunakan daun, kulit
dan akar gaharu sebagai obat malaria dan perawatan kulit. Kini sudah
dikembangkan daun gaharu dari genusAquilaria dan Gyrinops yang diolah
menjadi bahan baku pembuatan produk minuman herbal (teh dan sirup) karena
kandungan zat antioksidan dalam daun yang cukup tinggi (Sumarna, 2002).
Sejumlah kandungan metabolit sekunder pada daun gaharu yang telah
diketahui dari penelitian sebelumnya adalah flavonoid, glikosida, tanin dan
steroid/triterpenoid (Silaban, 2014). Steroid/triterpenoid merupakan senyawa aktif
dalam tumbuhan obat yang telah digunakan untuk penanganan penyakit termasuk
diabetes mellitus, gangguan menstruasi, kontrasepsi, patukan ular, gangguan kulit,
kerusakan hati dan malaria. Salah satu fungsi penting triterpenoid tipe steroid
pada manusia dan mamalia terutama sebagai peningkatan ataupun pengendalian
hormon seks, misalnya estradiol, progesteron dan testosteron. Tipe sterol dan
triterpen pentasiklik digunakan sebagai obat anti radang dan anti lebam serta
pengobatan ulser lambung.
Hewan Uji
Adapun klasifikasinya adalah sebagai berikut : Phylum : Chordata, Sub
phylum : Vertebrata, Class : Mammalia, Ordo : Rodentia, Family: Muridae,
Genus : Mus, Species : Mus musculus

Universitas Sumatera Utara

Mencit (M. musculus L.) memiliki ciri-ciri berupa bentuk tubuh kecil,
berwarna putih, memiliki siklus estrus teratur yaitu 4-5 hari. Kondisi ruang untuk
pemeliharaan mencit (M. musculus L.) harus senantiasa bersih, kering dan jauh
dari kebisingan. Suhu ruang pemeliharaan juga harus dijaga kisarannya antara 1819ºC serta kelembaban udara antara 30-70%. Mencit betina dewasa dengan umur
35-60 hari memiliki berat badan 18-35 g. Lama hidupnya 1-2 tahun, dapat
mencapai 3 tahun. Masa reproduksi mencit betina berlangsung 1,5 tahun. Mencit
betina ataupun jantan dapat dikawinkan pada umur 8 minggu. Lama kebuntingan
19-20 hari. Jumlah anak mencit rata-rata 6-15 ekor dengan berat lahir antara 0,51,5 g (Akbar, 2010).
Antioksidan Alami
Antioksidan alami merupakan hasil ekstraksi dari bahan alami. Sayursayuran dan buah-buahan kaya akan zat gizi (vitamin, mineral, serat pangan) serta
berbagai kelompok zat bioaktif lain yang disebut zat antioksidan.Antioksidan atau
reduktor berfungsi untuk mencegah terjadinya oksidasi atau menetralkan senyawa
yang telah teroksidasi dengan cara menyumbangkan hidrogen dan atau elektron
(Silalahi, 2006).
Senyawa antioksidan alami tumbuhan umumnya adalah senyawa fenolik
atau polifenolik yang dapat berupa golongan flavonoid, turunan asam sinamat,
kumarin dan tokoferol. Golongan flavonoid yang memiliki aktivitas antioksidan
meliputi flavon, flavonol, isoflavon, katekin, flavanon dan kalkon. Senyawa
antioksidan alami polifenolik dapat bereaksi sebagai pereduksi, penangkap radikal
bebas,

pengkelat

logam

dan

peredam

terbentuknya

singlet

oksigen

(Kumalaningsih, 2006).

Universitas Sumatera Utara

Tanaman yang berkhasiat sebagai antioksidan menurut (Hernani dan
Rahardjo,2006) dikelompokkan atas 4 golongan yaitu:
1. Kelompok tanaman sayuran
Brokoli, kubis, lobak, wortel, tomat, bayam, cabai, buncis, pare dan
mentimun.
2. Kelompok tanaman buah
Anggur, alpukat, jeruk, semangka, markisa, apel, belimbing, pepaya dan
kelapa.
3. Kelompok tanaman rempah
Jahe, temulawak, kunyit, lengkuas, temu putih, kencur, kapulaga, temu
ireng, lada, cengkeh, pala dan asam jawa.
4. Kelompok tanaman lain
Teh, ubi jalar, kedelai, kentang, labu kuning dan petai cina.
Ekstraksi Daun Gaharu
Ekstraksi adalah proses penarikan kandungan kimia yang dapat larut
sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan menggunakan pelarut
cair. Diketahuinya senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah
pemilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat. Senyawa aktif yang terdapat
dalam berbagai simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri,
alkaloid, flavonoid dan lain-lain (Ditjen POM, 2000).
Beberapa metode ekstraksi yang sering digunakan dalam berbagai
penelitian menurut Departemen Kesehatan Republik Indonesia (Ditjen POM
2000) antara lain yaitu:

Universitas Sumatera Utara

A. Cara dingin
1. Maserasi
Maserasi adalah proses penyarian simplisia dengan cara perendaman
menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada
suhu kamar. Maserasi kinetik dilakukan dengan pengadukan yang kontinu.
Remaserasi dilakukan dengan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan
penyarian maserat pertama dan seterusnya. Prinsip metode ini adalah pencapaian
konsentrasi pada keseimbangan,cairan penyari akan menembus dinding sel dan
masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif.
2. Perkolasi
Perkolasi adalah proses penyarian simplisia dengan pelarut yang selalu
baru sampai sempurna yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses
perkolasi terdiri dari tahap pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap
perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak), terus menerus sampai
diperoleh ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1 - 5 kali bahan (Depkes, 2000).
B. Cara panas
1. Refluksi
Refluks adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut pada temperatur
titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif
konstan dengan adanya pendingin balik.
2. Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada
temperatur lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), yaitu secara umum
dilakukan pada temperatur 40 – 50 0C.

Universitas Sumatera Utara

3. Sokletasi
Sokletasi adalah proses penyarian dengan menggunakan alat soklet dengan
pelarutyang selalu baru sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut
yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik.
Toksisitas
Uji toksisitas adalah suatu uji untuk mendeteksi efek toksik suatu zat pada
sistem biologi dan untuk memperoleh data dosis-respon yang khas dari sediaan
uji. Data yang diperoleh dapat digunakan untuk memberi informasimengenai
derajat bahaya sediaan uji tersebut bila terjadi pemaparan padamanusia, sehingga
dapat ditentukan dosis penggunaannya demi keamananmanusia. Uji toksisitas
menggunakan hewan uji sebagai model berguna untukmelihat adanya reaksi
biokimia, fisiologik dan patologik pada manusiaterhadap suatu sediaan uji. Hasil
uji toksisitas tidak dapat digunakan secaramutlak untuk membuktikan keamanan
suatu bahan/ sediaan pada manusia,namun dapat memberikan petunjuk adanya
toksisitas relatif dan membantu identifikasi efek toksik bila terjadi pemaparan
pada manusia (Ditjen, POM., 2014).
1.Uji toksisitas akut oral
Uji toksisitas akut oral adalah suatu pengujian untuk mendeteksi
efektoksik yang muncul dalam waktu singkat setelah pemberian sediaan uji
yangdiberikan secara oral dalam dosis tunggal atau dosis berulang yang
diberikandalam waktu 24 jam.Prinsip uji toksisitas akut oral yaitu, sediaan uji
dalam beberapa tingkatdosis diberikan pada beberapa kelompok hewan uji dengan
satu dosis perkelompok, kemudian dilakukan pengamatan terhadap adanya
efektoksik dankematian. Hewan yang mati selama percobaan dan yang hidup

Universitas Sumatera Utara

sampai

akhirpercobaan

diotopsi

untuk

dievaluasi

adanya gejala-

gejala toksisitas.Tujuan uji toksisitas akut oral adalah untuk mendeteksi toksisitas
intrinsik suatu zat, menentukan organ sasaran, kepekaan spesies, memperoleh
informasi bahaya setelah pemaparan suatu zat secara akut, memperolehinformasi
awal yang dapat digunakan untuk menetapkan tingkat dosis,merancang uji
toksisitas selanjutnya, memperoleh nilai LD50 suatu bahan/sediaan, serta
penentuan penggolongan bahan/sediaan dan pelabelan (Ditjen, POM., 2014).
2. Uji toksisitas subkronis oral
Uji toksisitas subkronis oral adalah suatu pengujian untuk mendeteksi efek
toksik yang muncul setelah pemberian sediaan uji dengan dosis berulang
yangdiberikan secara oral pada hewan uji selama sebagian umur hewan,
tetapitidak lebih dari 10% seluruh umur hewan.
Prinsip dari uji toksisitas subkronis oral adalah sediaan uji dalam beberapa
tingkat dosis diberikan setiap hari pada beberapa kelompok hewan uji dengansatu
dosis per kelompok selama 28 atau 90 hari, bila diperlukanditambahkan kelompok
satelit untuk melihat adanya efek tertunda atau efekyang bersifat reversibel.
Selama waktu pemberian sediaan uji, hewan harusdiamati setiap hari untuk
menentukan adanya toksisitas. Hewan yang matiselama periode pemberian
sediaan uji, bila belum melewati periode rigor mortis(kaku) segera diotopsi,dan
organ serta jaringan diamati secara makropatologidan histopatologi.
Pada akhir periode pemberian sediaan uji, semua hewanyang masih hidup
diotopsi selanjutnya dilakukan pengamatan secaramakropatologi pada setiap
organ dan jaringan,pemeriksaan hematologi, biokimia klinis dan histopatologi.
Tujuan uji toksisitas subkronis oral adalah untuk memperoleh informasiadanya

Universitas Sumatera Utara

efek

toksik

zat

yang

tidak

terdeteksi

pada

uji

toksisitas

akut,

informasikemungkinan adanya efek toksik setelah pemaparan sediaan uji
secaraberulangdalam

jangka

waktu

tertentu;

informasi

dosis

yang

tidakmenimbulkan efek toksik (No Observed Adverse Effect Level / NOAEL);
danmempelajari adanya efek kumulatif dan efek reversibilitas zat tersebut (Ditjen,
POM., 2014).
Anatomi Ginjal
Ginjal merupakan organ berbentuk seperti kacang yang terletak di kedua
sisi kolumna vertebralis. Ginjal kanan sedikit lebih rendah dibandingkan ginjal
kiri karena tertekan kebawah oleh hati. Kutub atasnya terletak setinggi iga
keduabelas, sedangkan kutub atas ginjal kiri terletak setinggi iga kesebelas.Ginjal
terletak di bagian belakang abdomen atas, di belakang peritoneum, di depan dua
iga terakhir, dan tiga otot besar-transversus abdominis, kuadratus lumborum, dan
psoas mayor. Ginjal dipertahankan dalam posisi tersebut oleh bantalan lemak
yang te