PEMANFAATAN KULIT BUAH KOPI (Coffea robusta) SEBAGAI SUMBER NUTRIEN DALAM KULTUR Spirulina sp.

ABSTRAK

PEMANFAATAN KULIT BUAH KOPI SEBAGAI SUMBER NUTRIEN DALAM KULTUR Spirulina sp.

Oleh

DWINDA PANGENTASARI

Spirulina sp. adalah mikroalga yang dimanfaatkan sebagai pakan alami dalam pembenihan ikan. Kandungan nutrisi Spirulina sp. merupakan sumber protein yang potensial bagi benih ikan dan udang. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pemanfaatan kulit buah kopi sebagai sumber nutrien dalam kultur Spirulina sp. Penelitian dilakukan selama 216 jam dengan rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL). Spirulina sp. dikultur pada botol kaca 250 ml dengan 6 perlakuan dan 3 kali ulangan. Media kultur yang digunakan mengandung akuades dan kulit buah kopi. Konsentrasi media kulit buah kopi yang diberikan yaitu A (0%), B (0,5%), C (1,5%), D (2,5%), E (3,5%) dan F (4,5%). Hasil Analisis Varian (P<0,05) menunjukkan bahwa media kulit buah kopi memberikan pengaruh terhadap peningkatan kepadatan populasi Spirulina sp.. Penambahan media kulit buah kopi sebesar 4,5% menghasilkan kepadatan populasi Spirulina sp. tertinggi yaitu sebesar 3,326.105 unit/ml pada jam ke-120. Suhu, pH dan intensitas cahaya selama kultur berada dalam kisaran optimal.

Kata kunci : kandungan nutrisi, kulit buah kopi, mikroalga, penambahan kulit buah kopi, Spirulina sp.

ABSTRACT

POTENTIAL OF COFFEE’S EXOCARP AS A SOURCE OF NUTRIENT IN Spirulina sp. CULTURE

By

DWINDA PANGENTASARI

Spirulina sp. is microalgae that have been used as the food larvae. Nutrition of Spirulina sp. is a potential source of protein for fish and shrimp. The aim of this research is to determine the potential of coffee’s exocarp as a source of nutrients in the Spirulina sp.’s culture. The research was conducted over 216 hours and used a completely randomized design (CRD) with 6 treatments and 3 replications.

Spirulina sp. cultured in 250 ml glass bottles, culture media were used containing distilled water and coffee’s exocarp. The treatments of media concentration were A(0%), B(0,5%), C(1,5%), D(2,5%), E(3,5%) and F(4,5%). Based on Analysis of Varian (P<0,05) showed that medium of coffee’s exocarp give an effect to the increase in population density of Spirulina sp.. The addition of the concentrate medium of coffee’s exocarp 4,5%, produced the highest population density of

Spirulina sp., that was 3,326.105 units/ml at 120 hours. The water temperature, pH and light intensity of culture in the optimal range.

Keywords : coffee’s exocarp, microalgae, nutrient, Spirulina sp., addition of

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Bandar Lampung pada tanggal 30 Juli 1993, sebagai anak kedua dari empat bersaudara, dari pasangan Bapak Asep Ridwan dan Ibu Mislianah.

Pendidikan formal diawali dari pendidikan dasar di SD 4 Simpang Gadis tahun 1998 – 2004. Pendidikan tingkat pertama di SMP Negeri I Sumberjaya pada tahun 2004-2007. Pendidikan tingkat atas di SMA Negeri I Sumberjaya pada tahun 2007-2010. Pada tahun 2010, penulis terdaftar sebagai mahasiswa program studi Budidaya Perairan, Fakultas Pertanian, Unviersitas Lampung melalui jalur Seleksi Nasional Masuk Perguruan Tinggi Negeri (SNMPTN).

Penulis aktif dalam organisasi HIDRILA (Himpunan Mahasiswa Budidaya Perairan Unila) sebagai Anggota Bidang Kewirausahaan periode 2011-2012 dan sebagai Anggota Bidang Minat dan Bakat periode 2012-2013. Selama menjadi mahasiswa, penulis pernah menjadi asisten praktikum Ikhtiologi, Oceanografi, Fisiologi Hewan Air, Ekologi Perairan dan Produktivitas Kolam.

Penulis melaksanakan Praktik Umum (PU) di Unit Kerja Budidaya Air Tawar Cangkringan, Yogyakarta dengan judul “Pembenihan Ikan Mas Merah (Cyprinus carpio) di Unit Kerja Budidaya Air Tawar Cangkringan, Yogyakarta” pada tahun 2013 dan melaksanakan Kuliah Kerja Nyata (KKN) Tematik di Desa Tanjung Jaya, Kecamatan Palas, Kabupaten Lampung Selatan pada tahun 2014.

Pada tahun 2014, penulis menyelesaikan tugas akhirnya dengan menulis skripsi yang berjudul “Pemanfaatan Kulit Buah Kopi (Coffea robusta) sebagai Sumber Nutrien dalam Kultur Spirulinasp.”.

“Dan seandainya pohon-pohon di bumi menjadi pena dan laut (menjadi tinta). Ditambahkan kepadanya tujuh laut (lagi) sesudah (kering) nya, niscaya tidak akan habis-habisnya (dituliskan) kalimat Allah, sesungguhnya Allah Maha Perkasa lagi Maha Bijaksana” (Q.S. Al Luqman : 27)

Puji syukur, ku panjatkan pada Allah SWT. yang telah

menciptakanku dengan taburan cinta dan kasih sayang. Curahan

rahmat dan hidayah-Mu telah memberikanku kesehatan, kekuatan

dan semangat pantang menyerah, serta rencana-rencana indah-Mu.

Atas kemudahan yang telah Engkau berikan, akhirnya skripsi ini

dapat terselesaikan dengan baik dan tepat pada waktunya. Sholawat

dan salam selalu ku limpahkan pada-Mu,

Allah SWT. Tuhan Semesta Alam

.

Kupersembahkan skripsi ini untuk orang-orang tercinta dan

tersayang, teristimewa untuk

PAPA

dan MAMA

terimakasih

atas segala usaha, jerih payah, do’a, dukungan, bimbingan dan

pengorbanan kalian selama selama ini. Kakak dan adik-adikku atas

do’a dan dukungannya serta sahabat

-sahabat terbaik yang selalu

memberi motivasi, semangat, dukungan dan gurau canda yang

terindah.

Tak lupa ku ucapkan juga terimakasih kepada teman-teman

Budidaya Perairan Angkatan 2010 sebagai teman-teman

seperjuangan yang telah memberikan hari-hari yang indah dan

penuh kenangan selama masa perkuliahan. Serta untuk

Almamater Tercinta Universitas Lampung.

MOTO

“Perjalanan seribu batu di awali dengan satu langkah”.

(Lao Tze).

“Barang siapa yang menghendaki kehidupan dunia, maka

wajib baginya memiliki ilmu, dan barang siapa yang

menghendaki kehidupan akhirat, maka wajib baginya

memiliki ilmu, dan barang siapa yang menghendaki

keduanya, maka wajib baginya memiliki ilmu”.

(HR. Turmudzi)

“Tuntutlah imu dan belajarlah (untuk ilmu)

ketenangan dan kehormatan diri, dan bersikaplah

rendah hati kepada orang yang mengajar kamu”.

“Aku akan berjalan bersama mereka yang berjalan karena aku

tidak akan diam sebagai penonton yang menyaksikan

perarakan berlalu”. (Khalil Gibran)

“Seseorang yang melakukan kesalahan dan tidak

membenarkannya, berarti telah melakukan satu

kesalahan lagi”. (Conficius)

“Sepotong besi tidak akan pernah menjadi pisau

belati, tanpa merasakan panasnya bara api dan

kerasnya palu”. (Ibnu Syahri

-al Basami)

“Hiduplah seperti pohon kayu yang lebat buahnya,

hidup di tepi jalan dan di lempari orang dengan

batu, tetapi di balas dengan buah”.

SANWACANA

Alhamdulillah puji syukur penulis haturkan kehadirat Allah SWT. atas rahmat dan hidayah-Nya penulisan skripsi yang berjudul “Pemanfaatan Kulit Buah Kopi (Coffea robusta) sebagai Sumber Nutrien dalam Kultur Spirulina sp.” yang

merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarana Budidaya Perairan di Universitas Lampung, dapat diselesaikan dengan baik. Shalawat serta salam tak lupa penulis curahkan kepada Nabi Muhammad SAW. yang selalu menjadi suri tauladan bagi kita.

Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Papa dan Mama yang telah memberikan kasih sayang, dukungan, motivasi, perhatian, pengorbanan, bimbingan, semangat, do’a dan segala jerih payahnya selama masa perkuliahan dan penyelesaian skripsi.

2. Bapak Prof. Dr. Ir. Wan Abbas Zakaria, M.S., selaku Dekan Fakultas Pertanian Universitas Lampung.

3. Ibu Ir. Siti Hudaidah, M. Sc., selaku Ketua Program Studi Budidaya Perairan Fakultas Pertanian Universitas Lampung, yang telah memberikan izin dan dukungannya dalam melaksanakan penelitian, dan selaku Pembimbing Akademik atas kesediaannya untuk memberikan bimbingan dan arahannya kepada penulis selama masa perkuliahan, serta selaku Penguji skripsi atas koreksi, masukan dan saran kepada penulis dalam penyelesaian skripsi ini. 4. Ibu Berta Putri S. Pi., M. Si., selaku Pembimbing Utama yang telah

memberikan bimbingan, arahan, dukungan, motivasi, ide, kritik dan saran serta waktu yang telah diluangkan selama proses penyusunan skripsi.

5. Ibu Henni Wijayanti.M, S.Pi., M.Si, selaku Pembimbing Kedua yang telah memberikan arahan, bimbingan, ide, kritik dan saran selama proses penyusunan skripsi.

6. Bapak Frenklin dan staf-staf di PTPN VII, Unit Usaha Bekri, Lampung Tengah yang telah memberikan inokulan sebagai bahan untuk penelitian serta atas pemberian masukan, ilmu dan arahan selama berlangsungnya penelitian. 7. Seluruh dosen serta Staf Administrasi Program Studi Budidaya Perairan atas

ilmu dan bimbingannya selama perkuliahan.

8. Seluruh anggota keluarga Tante, Om, Nenek, Kakek, Kakak dan Adik-adikku yang telah memberikan perhatian, semangat, dukungan dan do’a-do’anya selama masa perkuliahan dan penyusunan skripsi.

9. Yuli Widayati selaku teman seperjuangan, sahabat, serta partner yang luar biasa atas segala bantuan, kerjasama, tangis dan tawa selama masa-masa perkuliahan, penelitian dan penyusunan skripsi.

10.Jelita Noviantina, Yuli Widayati, Dike Fransiska, Sera Hardiyani, Afrima Nur Darajatun, Nyi Ayu Ika Pratiwi, Reinita Orchid Febrisca Emilly selaku teman seperjuangan serta sahabat-sahabat terbaik atas segala bantuan, semangat, kebersamaan, kesabaran, kehangatan, keterbukaan, pengorbanan, perhatian, ketidakcocokan, perselisihan, keegoisan, ketidakdewasaan, kesenangan dan kesedihan serta telah menorehkan kenangan-kenangan indah selama berlangsungnya perkuliahan, penelitian dan masa-masa penyelesaian skripsi. Semoga kita dapat terus menjaga tali silahturahmi dan menjadikan momen-momen berharga menjadi sesuatu yang bisa diingat dan dirindukan ketika kita telah menjalani kehidupan yang baru.

11.Teman-teman Kuliah Kerja Nyata (KKN) Dian Ekawati, Eka Simarmata, Fitri Wahyuningsih, F.Inggrid Krismasari yang telah memberikan kehangatan, kebersamaan, suka dan duka selama menjalani KKN dan masa-masa penyusunan skripsi.

12.Teman-teman kecil Sherly, Shanti, Agung, Jimmy, Wawan, Sulis, Adi, Oky, Febby, Titin, Anggun atas kebersamaan, kesenangan dan kesedihan yang ditorehkan selama ini.

13.Ardiansyah, Ahmad Jumaidi, Ponco Widagdo, Dian Yuni Marita, Tri Agusaputra, Pratica Fajrin, Rosi Dona.S dan Ahmad Fauzi yang telah memberikan bantuan selama persiapan penelitian, proses penelitian hingga penyelesaian penelitian.

14.Teman-teman seperjuangan, mahasiswa Budidaya Perairan Angkatan 2010 atas segala pengorbanan, perhatian, kerja sama, kecekcokan, kelucuan, kepedihan, keributan dan kebersamaan, Assovaria, Winda, Asry, Windi, Vina, Septi, Aulia, Selvi, Ely, Siti, Safrina, Frisca, Duma, Dwi Risca, Nikky, Soma, Aan, Anggi, Anjar, Shoffan, Dio, Median, Adit, Febri, Baihaqi, S.A Mandala, Erwin, Ali, Eko, Yuti, Andi, Ajil, Rudi, Rico, Aris, Hermawan, Imam, Azis dan Robert.

15.Kakak Tingkat dari Angkatan 2004-2009 dan Adik Tingkat dari Angkatan 2011-2014 atas kebersamaan dan kerjasamanya selama ini.

16.Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu. Penulis berharap semoga Allah SWT membalas amal kebaikan yang telah kalian berikan.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, namun sedikit harapan semoga skripsi ini dapat berguna sebagai bahan referensi dalam menunjang kemajuan ilmu pengetahuan khususnya di bidang perikanan.

Bandar Lampung, 17 September 2014 Penulis,

DAFTAR ISI

Halaman

DAFTAR ISI ... xv

DAFTAR TABEL ... xvii

DAFTAR GAMBAR ... xviii

DAFTAR LAMPIRAN ... xix

I. PENDAHULUAN A.Latar Belakang Masalah ... 1

B.Tujuan Penelitian ... 2

C.Manfaat Penelitian ... 3

D.Kerangka Pikir ... 3

E. Hipotesis ... 5

II. TINJAUAN PUSTAKA A.Spirulina sp. ... 6

1.Klasifikasi ... 6

2.Morfologi ... 7

3.Reproduksi ... 7

4.Kandungan Nutrisi ... 9

5.Faktor-faktor Pertumbuhan... 10

6.Fase Pertumbuhan ... 14

B.Kulit Buah Kopi ... 16

III. METODOLOGI PENELITIAN A.Waktu dan Tempat ... 21

B.Alat dan Bahan ... 21

C.Rancangan Penelitian ... 22

D.Prosedur Penelitian ... 23

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN A.Kepadatan Populasi Spirulina sp. ... 27

B.Kecepatan Pertumbuhan Spirulina sp. ... 33

V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan ... 42 B. Saran ... 42

DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

1. Kandungan Nutrisi Kulit Biji dan Kulit Buah Kopi ... 18 2. Hasil Analisis Nitrogen dan Fosfor dari Kulit Buah Kopi ... 18 3. Kandungan Kulit Buah Kopi Berdasarkan Metode Pengolahan ... 19 4. Kepadatan Populasi Pertumbuhan Spirulina sp. selama sembilan hari .

Kultur ... ... 29 5. Kepadatan Populasi Spirulina sp. yang dikultur dengan Berbagai ...

Limbah Media Organik ... 33 6. Kecepatan Pertumbuhan Spirulina sp. dalam Media Kulit Buah Kopi

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1. Bagan Kerangka Pikir ... 4

2. Spirulina sp... ... ... 6

3. Siklus Reproduksi Spirulina sp. ... 8

4. Grafik Fase Pertumbuhan Mikroalga ... 14

5. Tanaman Kopi Robusta ... 16

6. Penempatan Botol Kultur selama Penelitian ... 22

7. Grafik Pertumbuhan Spirulina sp. selama sembilan hari ... 27

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Kandungan Nutrisi Spirulina sp. ... 49

2. Kandungan Nutrisi Kulit Buah Kopi ... 51

3. Hasil Uji SPSS Analisis Varian (ANOVA). ... 53

4. Data Hasil Uji Nitrogen Kulit Buah Kopi ... 54

5. Data Hasil Uji Fosfor Kulit Buah Kopi ... 55

6. Hasil Uji SPSS BNT ... 56

7. Tabel Faktor Lingkungan selama Penelitian ... 58

8. Data Jumlah Kepadatan Spirulina sp. selama Penelitian ... 59

9. Pembuatan Ekstrak Media Kulit Buah Kopi ... 60

10. Tahap-tahap Pelaksanaan Penelitian ... 61

11. Tahap-tahap Pengamatan ... 62

12. Diagram Alir Pembuatan Larutan Buffer... 63

13. Kultur Spirulina sp. pada saat T-0 dan T-akhir ... 64

14. Alat-alat Penelitian ... 65

1

I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Spirulina sp. adalah mikroalga dari golongan Cyanobacteria yang dimanfaatkan sebagai pakan alami dalam budidaya perikanan khususnya pembenihan karena memiliki nutrisi tinggi, antara lain protein 63-68 %, karbohidrat 18-20 %, dan lemak 2-3 % (Hariyati, 2008). Selain itu, Spirulina sp. berperan sebagai produsen primer dalam struktur rantai makanan di perairan.

Spirulina sp. relatif cepat bereproduksi dan mudah dalam sistem pemanenan karena memiliki ukuran yang lebih besar dibandingkan mikroalga lain (Khoirul, 2013). Selain untuk keperluan budidaya, Spirulina sp. juga digunakan dalam bidang industri, farmasi dan bahan pangan manusia sebagai sumber Protein Sel Tunggal (PST) (Liu et al, 2000).

Tingginya permintaan terhadap Spirulina sp., menyebabkan produksi

Spirulina sp. meningkat. Salah satu cara untuk meningkatkan kelimpahan populasinya yaitu menyediakan media pertumbuhan yang dibutuhkan Spirulina

sp., diantaranya nutrien, intensitas cahaya, pH dan suhu (Lavens and Sorgeloos, 1996). Komposisi media kultur sebagai sumber nutrien diperlukan untuk pertumbuhan Spirulina sp. sehingga dibutuhkan media yang mempunyai kandungan nutrien tinggi dan proporsional.

2

Kulit kopi merupakan sumber nutrien yang tersedia melimpah di sentra produksi kopi. Secara kimiawi kulit kopi mengandung bahan organik seperti karbon (C), hidrogen (H) dan oksigen (O) yang terikat dalam bentuk senyawa selulosa (45%), hemi-selulosa (25%), lignin (2 %), resin (45%), dan abu (0,5 %) (Etika, 2007).

Kopi merupakan komoditi perkebunan andalan Indonesia yang banyak dikelola untuk kebutuhan masyarakat mulai dari perkebunan negara, swasta maupun masyarakat umum. Pengolahan kopi menghasilkan limbah yang sering menyebabkan pencemaran lingkungan. Sejauh ini, limbah kulit buah kopi hanya diolah menjadi kompos. Menurut data statistik, luas lahan perkebunan kopi di Kabupaten Lampung Barat mencapai 59.357 ha dengan produksi 29.712 ton. Sementara itu, produksi biji kopi di Indonesia mencapai 611.100 ton dan menghasilkan kulit kopi sebesar 1.000.000 ton. Jika limbah tersebut tidak dimanfaatkan secara optimal akan menimbulkan pencemaraan lingkungan (DJPDP, 2011). Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian yang mampu memanfaatkan kulit buah kopi menjadi suatu produk yang bernilai ekonomis, salah satunya dengan menjadikan kulit buah kopi sebagai sumber nutrien dalam kultur Spirulina sp.

B. Tujuan Penelitian

Penelitian yang dilakukan bertujuan untuk mengetahui pertumbuhan populasi

Spirulina sp. dengan penambahan kulit buah kopi sebagai sumber nutrien dalam media kultur.

3

C. Manfaat Penelitian

Hasil penelitian yang dilakukan diharapkan dapat memberikan informasi mengenai pemanfaatan kulit buah kopi sebagai sumber nutrien dalam kultur

Spirulina sp. serta dapat mengurangi jumlah limbahnya di alam.

D. Kerangka Pikir

Kopi adalah salah satu tanaman perkebunan yang melimpah di Indonesia dan mempunyai peluang untuk dikembangkan lebih maksimal sehingga meningkatkan penghasilan pengusaha dan petani serta pendapatan negara. Produksi kopi di Indonesia yang terus berkembang kurang diikuti dengan penanganan kopi pasca panen yang baik terutama kulit buah kopi yang berkisar antara 40 % sampai 55 % dari total produksinya. Hal tersebut karena pemanfaatan kulit buah kopi belum banyak sehingga petani membuang limbah tersebut ke pekarangan rumah, kebun, sawah ataupun perairan (Etika, 2007). Kulit buah kopi yang tidak dimanfaatkan menyebabkan pencemaran lingkungan sehingga perlu dilakukan suatu usaha untuk memanfaatkan limbah yang ada agar menghasilkan produk yang bernilai ekonomis.

Salah satu usaha pemanfaatan kulit buah kopi dengan dijadikan pupuk organik karena berpotensi sebagai sumber bahan organik. Kulit buah kopi mengandung nutrisi yang dapat mencukupi kebutuhan hidup plankton, salah satunya Spirulina sp. Menurut Trisilawati dan Gusmaini (1999), kadar hara pada limbah kulit buah kopi dalam bentuk tepung yaitu 24,86% carbon, 1,88% nitrogen, 0,12% fosfor, 2,04% kalium,0,53% kalsium, 0,39% magnesium. Kandungan hara yang paling dibutuhkan Spirulina sp. sebagai sumber nutrien adalah nitrogen dan fosfor (Richmond, 1988 dalam Borowitzka, 1994). Hasil

4

Permintaan kopi tinggi

analisis yang dilakukan di Laboratorium Politeknik Negeri Lampung menunjukkan kandungan nitrogen dan fosfor pada ekstrak kulit buah kopi 0,0959% dan 0,114%.

Pemanfaatan Spirulina sp. dalam berbagai industri, meningkatkan permintaan konsumen sehingga produsen berusaha semaksimal mungkin meningkatkan produksinya. Harrison and Berges (2005) menyatakan bahwa salah satu cara untuk meningkatkan pertumbuhan fitoplankton adalah mengontrol kandungan nutrien baik makro maupun mikro pada lingkungan budidaya. Kulit buah kopi merupakan salah satu media yang memiliki kandungan nutrien baik makro maupun mikro yang dibutuhkan untuk pertumbuhan Spirulina sp.. Oleh karena itu, selain digunakan sebagai sumber nutrien dalam kultur Spirulina sp., pemanfaatan kulit buah kopi juga dapat mengurangi limbahnya di alam.

Gambar 1. Bagan Kerangka Pikir Produksi tanaman kopi meningkat

Produk yang dipasarkan Limbah berupa kulit buah kopi yang dihasilkan

melimpah

Pemanfaatan kulit buah kopi sebagai sumber nutrien dalam kultur Spirulina sp.

Penurunan jumlah limbah di alam Peningkatan produksi

5

E. Hipotesis

Hipotesis yang digunakan dalam penelitian ini yaitu :

Ho : τi = 0 : Pada selang kepercayaan 95%, pemanfaatan kulit buah kopi sebagai

sumber nutrien tidak berpengaruh terhadap kepadatan populasi

Spirulina sp.

H1 : τi ≠ 0 : Pada selang kepercayaan 95%, pemanfaatan kulit buah kopi sebagai

sumber nutrien berpengaruh terhadap kepadatan populasi

6

II. TINJAUAN PUSTAKA

A. Spirulina sp. 1. Klasifikasi

Klasifikasi Spirulina sp. menurut Bold & Wyne (1985) adalah sebagai berikut:

Kingdom : Protista

Filum : Cyanobacteria Divisi : Cyanophyta

Kelas : Cyanophyceae Ordo : Nostocales

Famili : Oscilatoriaceae Genus : Spirulina

Spesies : Spirulina sp.

Gambar 2. Spirulina sp. Sumber: Ali and Saleh (2012)

7

2. Morfologi

Spirulina sp. merupakan organisme autotrof berwarna hijau kebiruan, menyerupai spiral dengan sel membentuk filamen terpilin sehingga disebut juga alga biru hijau berfilamen. Spirulina sp. berdiameter 1-12 mikrometer dan memiliki bentuk tubuh menyerupai benang yang merupakan rangkaian sel yang berbentuk silindris dengan dinding sel yang tipis. Selain itu, filamen Spirulina sp. juga dapat hidup soliter (Haryati, 2008).

Menurut Kebede and Ahlgren (1996), Spirulina sp. adalah jenis Cyanobacteria yang mengandung klorofil dan dapat melakukan fotosintesis untuk membuat makanan sendiri. Zat warna alami yang dikandung Spirulina sp. terdiri atas pigmen hijau, merah, kuning dan biru (Richmond, 1988 dalam Borowitzka, 1994). Kandungan fikosianin yang tinggi pada mikroalga ini menyebabkan warnanya cenderung hijau biru. Spirulina sp. memiliki struktur trichoma spiral dengan filamen–filamen bersifat mortal dan tidak memiliki heterosit. Sel

Spirulina sp. berukuran relatif besar yaitu 110 µm, sehingga dalam proses pemanenan dengan menggunakan kertas saring lebih mudah (Richmond, 1988

dalam Borowitzka, 1994).

3. Reproduksi

Siklus reproduksi Spirulina sp. terdiri atas tiga tahap yaitu fragmentasi trikoma, pembesaran sel hormogonia dan perpanjangan trikoma. Kemudian trikoma dewasa dibagi menjadi filamen atau hormogonia, lalu sel-sel hormogonia akan meningkat dengan pembelahan biner dan tumbuh memanjang membentuk spiral (Hongmei Gong et al., 2008).

8

Gambar 3. Siklus Reproduksi Spirulina sp. Sumber: Hongmei Gong et al., (2008)

Spirulina sp. bereproduksi dengan fragmentasi. Fragmentasi adalah pemutusan bagian tubuh yang kemudian membentuk individu baru. Pada filamen yang panjang jika salah satu selnya mati maka sel mati itu membagi filamen menjadi 2 bagian atau lebih. Masing-masing bagian disebut hormogonium. Selain itu, fragmentasi juga terjadi pada pemisahan dinding yang berdekatan pada trikoma. Pada proses fragmentasi, filamen yang panjang akan terputus menjadi dua atau lebih benang pendek. Setiap hormogonium akan tumbuh menjadi filamen baru. Tempat pemutusan filamen adalah sel mati yang terdapat diantara sel penyusun filamen (Khoirul, 2013).

Selain bereproduksi dengan fragmentasi, Spirulina sp. juga bereproduksi dengan pembelahan biner. Pembelahan biner merupakan pembelahan sel secara langsung yang dapat memperbanyak jumlah filamen. Sel-sel membelah menjadi 2 dan tidak saling terpisah sehingga membentuk filamen yang terdiri atas deretan mata rantai sel yang disebut trikoma (Khoirul, 2013).

9

4. Kandungan nutrisi

Kandungan nutrisi yang ada di dalam Spirulina sp. antara lain protein, vitamin, mineral, asam lemak, asam amino dan berbagai jenis pigmen (Christwardana dan Hadiyanto, 2012). Spirulina sp. memiliki dinding sel tipis yang tersusun atas kompleks gula dan protein yang mudah dicerna (Sasson, 1997).

Kandungan nutrisi Spirulina sp. lainnya adalah karbohidrat dan lemak. Komposisi lemak Spirulina sp. 0,8%-1% Gamma Linolenic Acid (GLA) yaitu sejenis asam lemak tak jenuh rantai panjang yang berfungsi menurunkan kadar kolesterol dalam darah. GLA sangat dibutuhkan untuk pertumbuhan, tetapi tidak dapat disintesis dalam tubuh manusia. Jenis asam lemak lainnya yang terdapat dalam Spirulina sp. adalah Eicose Pentanic Acid (EPA) yang juga mampu menurunkan kadar kolesterol dalam darah (Prasetyo dan Kusumaningrum, 2010). Selain itu, Spirulina sp. juga mengandung berbagai vitamin, mineral, pigmen, asam lemak dan asam amino (Lampiran 1).

Fikosianin atau pigmen biru merupakan pigmen dominan pada Spirulina sp. yang digunakan sebagai zat warna alami dalam makanan. Selain itu, fikosianin juga berfungsi sebagai zat pewarna pada berbagai macam produk kosmetik karena pigmen tersebut tidak larut dalam air (Sasson, 1997).

Spirulina sp. memiliki kandungan nutrisi yang tinggi sehingga saat ini terdapat beragam jenis pemanfaatannya mulai dari obat-obatan, kosmetik sampai pangan manusia. Karakteristik serta kandungan nutrisi yang dimiliki Spirulina sp. sesuai untuk dijadikan bahan makanan fungsional. Pada tahun 1976, Spirulina sp.

dipilih sebagai sumber makanan masa depan oleh International Association of Applied Microbiology (Christwardana dan Hadiyanto, 2012). Di negara Thailand,

10

70% produk Spirulina sp. digunakan untuk pembuatan bahan makanan dan sisanya diperuntukkan sebagai bahan dasar pembuatan pakan ikan dan udang (Richmond,1988 dalam Borowitzka,1994).

Menurut Christwardana dan Hadiyanto (2012), Spirulina sp. memiliki kandungan mineral yang rendah sehingga tidak berbau amis dan aman untuk digunakan sebagai makanan manusia. Selain itu, Spirulina sp. juga dapat digunakan sebagai agen penetral arsenik untuk air limbah dan bahan beracun serta logam berat lainnya (Liu, et al., 2000). Pada perairan yang mengalami pencemaran karena polutan, Spirulina sp. dapat dimanfaatkan untuk merestorasi karena mampu menurunkan BOD dalam air limbah. Selain itu, Spirulina sp. juga memiliki kemampuan untuk mengatasi masalah eutrofikasi perairan karena menurunkan kadar P dan N (Prasetyo dan Kusumaningrum, 2010).

Spirulina sp. berfungsi sebagai sumber nutrisi untuk immunostimulan dan

Super Oxyde Dismutase (SOD). Beberapa rumah sakit di negara modern menggunakan Spirulina sp. untuk mendapatkan immunoglobin A (LGA) dan immunoglobin B (lgM) yang lebih tinggi. Sementara itu, kandungan fikosianin dalam Spirulina sp. berpotensi untuk menghambat pertumbuhan sel leukimia pada manusia (Liu, et al., 2000).

5. Faktor-faktor pertumbuhan

Kelangsungan hidup dan pertumbuhan suatu mikroalga sangat erat kaitannya dengan ketersediaan nutrien (unsur hara) serta kondisi lingkungan. Pertumbuhan mikroalga dipengaruhi oleh media kultur/nutrien, intensitas cahaya, pH, aerasi dan suhu (Lavens and Sorgeloos, 1996).

11

5.1 Media kultur/nutrien

Nutrien merupakan faktor yang sangat penting untuk pertumbuhan dan komposisi biokimia mikroalga. Kondisi nutrien yang optimum diperlukan untuk mendapatkan nilai produktivitas kultur mikroalga yang tinggi disertai kualitas biomasa yang baik. Konsentrasi nutrien yang rendah dapat menyebabkan penurunan laju pertumbuhan karena sel-sel alga kekurangan unsur makanan.

Pertumbuhan Spirulina sp. membutuhkan bermacam-macam nutrien yang secara umum dibagi menjadi unsur makro dan unsur mikro. Unsur makro merupakan nutrien yang dibutuhkan dalam jumlah besar yaitu terdiri atas N, P, K, Na, S, C, H, O, Mg. Sementara itu, unsur mikro merupakan nutrien yang dibutuhkan dalam jumlah sedikit yaitu terdiri atas Bo, Mo, Cu, Zn dan Co (Fogg and Thake, 1987). Komponen vitamin yang tersedia dalam media juga dapat mempercepat pertumbuhan terutama kandungan vitamin B12 (Becker,1995;

Andersen, 2005).

Menurut Richmond (1988) dalam Borowitzka (1994), faktor utama dalam media sangat bergantung pada komposisi hara nitrogen dan fosfor. Berkurangnya nitrogen dan fosfor menyebabkan penurunan konsentrasi CO2 dan O2.

Nitrogen merupakan komponen esensial dari struktur dan fungsional protein pada sel mikroalga. Secara umum, mikroalga memiliki kemampuan yang terbatas untuk memproduksi material penyimpan nitrogen ketika tumbuh pada kondisi nitrogen yang mencukupi kecuali sianofisin dan fikosianin (Boussiba and Richmond, 1980). Sementara fosfor adalah makro nutrien yang memegang peranan penting dalam proses metabolisme seluler dengan membentuk berbagai struktur dan fungsi dari komponen-komponen yang dibutuhkan untuk

12

pertumbuhan dan perkembangan mikroalga. Beberapa gejala dari kekurangan fosfor mirip pada kultur dengan nitrogen terbatas. Kandungan klorofil a cenderung mengalami penurunan sedangkan kandungan karbohidrat akan mengalami peningkatan pada kondisi penurunan senyawa fosfor (Belay, 2002).

5.2 Intensitas cahaya

Cahaya merupakan sumber energi dalam proses fotosintesis yang berguna untuk pembentukan senyawa karbon organik. Intensitas cahaya sangat menentukan pertumbuhan fitoplankton yaitu dilihat dari lama penyinaran dan panjang gelombang yang digunakan untuk fotosintesis. Cahaya berperan penting dalam pertumbuhan mikroalga, tetapi kebutuhannya bervariasi yang disesuaikan dengan kedalaman kultur dan kepadatannya. Kedalaman dan kepadatan kultur yang lebih tinggi menyebabkan intensitas cahaya yang dibutuhkan tinggi. Akan tetapi, intensitas cahaya yang terlalu tinggi dapat menyebabkan fotoinhibisi dan pemanasan. Penggunaan lampu dalam kultur mikroalga minimal dinyalakan 18 jam per hari, hal tersebut dilakukan sampai mikroalga dapat tumbuh dengan konstan dan normal (Coutteau, 1996) . Menurut Suryati (2002), intensitas cahaya yang optimal untuk pertumbuhan Spirulina sp.berkisar antara 1500-3000 lux dan tidak melebihi 4000 lux untuk menghindari foto inhibisi.

5.3 pH

Penentuan kisaran pH media kultur penting untuk pertumbuhan Spirulina sp.. Kisaran pH merupakan salah satu faktor penentu bagi pertumbuhan Spirulina sp. yang dapat menentukan kemampuan biologi mikroalga dalam memanfaatkan unsur hara (Fogg and Thake 1987). Kisaran pH berperan untuk menentukan konsentrasi CO2 dan keseimbangan antara bikarbonat dan karbonat. Keberadaan

13

CO2 sebagai hasil perubahan bikarbonat menjadi karbonat berlangsung sampai

absorpsi dari udara mencapai keadaan seimbang dengan penggunaan CO2 oleh Spirulina sp.. Pada saat pH meningkat sampai melewati ambang batas maka kecepatan metabolisme dari Spirulina sp. akan menurun. Selain itu, pH juga berpengaruh terhadap penyediaan nutrien dan keadaan fisiologis Spirulina sp. (Ciferri, 1983).

Derajat keasaman atau pH digambarkan sebagai keberadaan ion hidrogen. Variasi pH dapat mempengaruhi metabolisme dan pertumbuhan kultur mikroalga antara lain mengubah keseimbangan karbon anorganik, mengubah ketersediaan nutrien dan mempengaruhi fisiologi sel. Kisaran pH untuk pertumbuhan Spirulina

sp. antara 8,5 – 10,5 (Cifferi, 1983).

5.5 Suhu

Suhu merupakan salah satu faktor penting yang mempengaruhi pertumbuhan fitoplankton. Perubahan suhu berpengaruh terhadap proses kimia, biologi dan fisika. Peningkatan suhu dapat menurunkan suatu kelarutan bahan dan dapat menyebabkan peningkatan kecepatan metabolisme dan respirasi fitoplankton diperairan. Secara umum suhu optimal dalam kultur mikroalga berkisar antara 20-30oC (Hariyati, 2008). Suhu dalam kultur diatur sedemikian rupa bergantung pada medium yang digunakan. Suhu di bawah 16oC dapat menyebabkan kecepatan pertumbuhan turun, sedangkan suhu diatas 36oC dapat menyebabkan kematian. Beberapa mikroalga tidak tahan terhadap suhu yang tinggi. Pengaturan suhu dalam kultur mikroalga dapat dilakukan dengan menggunakan alat pengatur suhu udara (Taw, 1990).

14

Menurut Lavens and Sorgeloos (1996), Spirulina sp. yang paling umum dibudidayakan mampu mentolerir suhu antara 16 dan 27°C. Suhu lebih rendah dari 16°C akan memperlambat pertumbuhan, sedangkan yang lebih tinggi dari 35°C akan mematikan bagi sejumlah spesies.

6. Fase Pertumbuhan

Terdapat 4 fase dalam pertumbuhan mikroalga yaitu fase lag (fase adaptasi), fase eksponensial, fase stasioner dan fase kematian. Fase-fase pertumbuhan mikroalga tersebut dapat dilihat pada Gambar 4.

Gambar 4. Grafik Fase Pertumbuhan Mikroalga Sumber: Brock and Madigan (1991)

6.1Fase Lag

Fase lag atau fase adaptasi merupakan fase ketika populasi mikroalga tidak mengalami perubahan, tetapi ukuran sel pada fase tersebut meningkat. Fotosintesis masih aktif berlangsung dan organisme mengalami metabolisme tetapi belum terjadi pembelahan sel sehingga kepadatannya belum meningkat. Fase lag diawali dengan terjadinya penyesuaian sel terhadap lingkungan baru. Pada saat adaptasi, sel mengalami defisiensi enzim atau koenzim, sehingga harus

15

disintesis dahulu guna berlangsungnnya aktivitas biokimia sel selanjutnya. Pada fase lag populasi mikroalga tidak mengalami perubahan, tetapi ukuran sel pada fase tersebut meningkat (Brock and Madigan, 1991).

6.2Fase Eksponensial

Fase eksponensial diawali dengan pembelahan sel dengan laju pertumbuhan yang terjadi terus menerus, pertumbuhan pada fase tersebut mencapai maksimal. Menurut Andersen (2005), fase eksponensial ditandai dengan mulai meningkatnya kepadatan sel Spirulina sp.. Waktu penggandaan yang tercepat biasanya tercapai ketika fase eksponensial, yaitu fase pertumbuhan ketika sel-sel membelah dengan cepat dan konstan mengikuti kurva logaritmik. Pada fase tersebut pertumbuhan dan aktivitas sel berada dalam keadaan maksimum, sehingga pada umur tersebut sel berada dalam keadaan aktif dan memiliki waktu adaptasi yang pendek selama proses kultur (Andersen, 2005).

6.3Fase Stasioner

Pada fase stasioner, komposisi mikroalga berubah secara signifikan karena terbatasnya kandungan nitrat pada media kultur yang mengakibatkan kandungan karbohidrat meningkat hingga dua kali lipat dari kandungan protein (Brown et al., 1997). Menurut Chu et al., (1982), kandungan karbohidrat total meningkat sesuai dengan umur dari kultur mikroalga. Pada fase tersebut, laju reproduksi atau pembelahan sel sama dengan laju kematian, artinya penambahan dan pengurangan mikroalga relatif sama sehingga kepadatan mikroalga cenderung tetap.

6.4Fase Kematian

Fase kematian merupakan fase ketika terjadi penurunan jumlah atau kepadatan mikroalga. Pada fase ini laju kematian lebih cepat dibandingkan laju

16

reproduksi. Laju kematian mikroalga dipengaruhi oleh ketersediaan nutrien,cahaya, temperatur dan umur mikroalga itu sendiri. Kematian sel dapat disebabkan oleh mulai berkurangnya nutrisi yang tersedia sehingga tidak mampu mendukung pertumbuhan sel, penurunan kualitas air dan akumulasi metabolit (NO2 dan NH4+) (Brown et al., 1997).

B. Kulit Buah Kopi

Menurut Steenis (1973), klasifikasi kopi robusta adalah: Kingdom : Plantae

Divisi : Magnoliophyta

Sub Divisi : Angiospermae Class : Dycotyledoneae

Ordo : Rubiales

Family : Rubiaceae Genus : Coffea

Spesies : Coffea robusta

Gambar 5. Tanaman Kopi Robusta Sumber: Najiyati dan Danarti (2006)

Kopi robusta pertama kali ditemukan di Kongo pada tahun 1898 dan masuk ke Indonesia pada tahun 1900. Saat ini kopi robusta termasuk jenis kopi yang mendominasi perkebunan kopi di Indonesia (Retnandari dan Tjokrowinoto, 1991).

17

Kopi robusta merupakan tanaman dataran tinggi yang tumbuh pada ketinggian 800 m di atas permukaan laut dan tumbuh baik dengan jumlah curah hujan yang optimal antara 2x103 3x103 mm/tahun. Iklim yang optimal untuk pertumbuhan tanaman kopi adalah tinggi tempat 0,8x103 – 2x103 m dpl, suhu 15º C – 25ºC, curah hujan 1.750 – 3000 mm/tahun, lamanya bulan kering yaitu 3 bulan.

Kopi robusta adalah spesies tanaman berbentuk pohon. Tanaman ini tumbuh tegak, bercabang dan bila dibiarkan akan mencapai tinggi 12 m. Tanaman ini memiliki beberapa jenis cabang yaitu cabang reproduksi, cabang primer, cabang sekunder, cabang kipas, cabang pecut, cabang balik, dan cabang air (Najiyati dan Danarti, 2006). Kopi robusta memiliki daun berbentuk bulat, ujungnya agak meruncing sampai bulat dengan bagian pinggir yang bergelombang. Daun tumbuh pada batang, cabang dan ranting. Pada cabang Orthrotrop letak daun berselang seling, sedangkan pada cabang Plagiotrop terletak pada satu bidang. Daun kopi robusta ukurannya lebih besar dari arabika (Wachjar, 1984).

Pada umumnya tanaman kopi berbunga setelah berumur sekitar dua tahun. Bunga yang sudah dewasa mengalami penyerbukan dengan pembukaan kelopak dan mahkota yang akan berkembang menjadi buah. Kulit buah yang berwarna hijau akan menguning dan menjadi merah tua seiring dengan pertumbuhannya. Waktu yang diperlukan dari bunga menjadi buah matang sekitar 6-11 bulan, bergantung dari jenis dan lingkungan. Kopi robutsa membutuhkan waktu 8-11 bulan untuk tumbuh. Bunga umumnya mekar awal musim kemarau dan buah siap dipetik di akhir musim kemarau. Di awal musim hujan, cabang primer akan memanjang dan membentuk daun-daun baru yang siap mengeluarkan bunga pada awal musim kemarau mendatang (Najiyati dan Danarti 2006).

18

Kulit buah kopi terdiri atas lapisan bagian luar, daging buah dan kulit tanduk atau kulit dalam. Lapisan bagian luar (exocarp) adalah lapisan yang berwarna merah apabila sudah masak, kemudian daging buah (mesocarp) mengandung serabut yang bila sudah masak berlendir dan rasanya manis serta kulit tanduk atau kulit dalam (endocarp) adalah kulit lapisan kulit yang menjadi batas kulit dan biji yang keadaannya agak keras. Kulit buah yang masih muda berwarna hijau tua yang kemudian berangsur-angsur menjadi hijau kuning, kuning kemerahan, merah dan merah kehitam. Daging buah yang sudah masak akan berlendir dan rasanya agak manis. Biji terdiri dari kulit biji dan lembaga (Ciptadi dan Nasution, 1985; Najiyati dan Danarti, 2006). Kulit buah kopi merupakan bagian kulit terluar pada buah kopi bertekstur keras dan berserat, sedangkan kulit biji kopi merupakan bagian kulit pembungkus buah kopi atau disebut juga kulit ari. Menurut Desmayanti dan Muladi (1995), kandungan nutrisi kulit biji dan kulit buah kopi dapat dillihat pada Tabel 1.

Tabel 1. Kandungan Nutrisi Kulit Biji dan Kulit Buah Kopi

Zat nutrisi (%) Kulit biji kopi Kulit buah kopi

Bahan kering

Energi bruto (Mj/kg) Protein Lemak Serat kasar Abu Kalsium Fosfor 95,45 19.90 10,40 2,13 16,42 7,35 0,48 0,04 94,30 18,76 4,61 0,46 65,20 2,20 0,34 0,01 Tabel 2. Hasil Analisis Nitrogen dan Fosfor dari Kulit Buah Kopi

Sumber : Laboratorium Politeknik Negeri Lampung, 2013

No Parameter Tepung Kulit Buah Kopi (%)

Ekstrak Kulit Buah Kopi (%)

1. N-Total 1,5546 0,0959

2. P-Total 0,595 0,114

19

Kulit buah kopi merupakan limbah dari pengolahan buah kopi untuk mendapatkan biji kopi yang selanjutnya digiling menjadi bubuk kopi. Kandungan zat makanan kulit buah kopi dipengaruhi oleh metode pengolahannya secara basah atau kering (Tabel. 3). Kandungan zat makanan kulit buah kopi berdasarkan metode pengolahan. Pada metode pengolahan basah, buah kopi ditempatkan pada tanki mesin pengupas lalu disiram dengan air, mesin pengupas bekerja memisahkan biji dari kulit buah. Sedangkan pada pengolahan kering lebih sederhana, buah kopi dibiarkan mengering pada batangnya sebelum dipanen. Selanjutnya langsung dipisahkan biji dan kulit buah kopi dengan menggunakan mesin (Bromokusumo and Slette, 2010). Berikut kandungan kulit buah kopi berdasarkan metode pengolahan.

Tabel 3. Kandungan Kulit Buah Kopi Berdasarkan Metode Pengolahan

Metode Pengolahan

BK (%) Bahan Kering (%)

PK SK Abu LK BETN

Basah 23 90

12,8 24,1 9,5 2,8 50,8

Kering 9,7 32,6 7,3 1,8 48,6

Sumber : Bromokusumo and Slette (2010)

Kopi merupakan salah satu tanaman yang penting secara ekonomi maupun sosial. Tanaman ini merupakan komoditi ekspor utama di negara-negara penghasil kopi. Indonesia merupakan negara terbesar kedua dalam luas areal perkebunan kopi namun masih urutan keempat dalam produksi dan ekspor kopi dunia. Sampai dengan tahun 2008, luas perkebunan kopi Indonesia mencapai 1,3x106 ha dan produksi perkebunan kopi selama lima tahun terakhir naik sekitar 6%. Pada tahun 2008, diperkirakan mencapai 0,6111x106 ton. Berdasarkan hasil produksi kopi tahunan Indonesia, dapat diestimasikan bahwa dari 0,6111x106 ribu ton yang

20

dihasilkan per tahun juga dihasilkan limbah kulit kopi sebesar 1x106 ton (DJPDP, 2011).

Penghasil kopi robusta terbesar di Indonesia adalah Provinsi Lampung dengan rata-rata produksi sekitar 1,42x105 ton/tahun dengan luas areal sekitar 1,63x105 ha. Setiap tahunnya tidak kurang dari 1,3x105 - 1,4x105 ton biji kopi dihasilkan dari 1,35x105 ha lahan yang tersebar di sentra-sentra produksi kopi. Sementara itu, Provinsi Lampung mengekspor sekurang-kurangnya 1,5x105-2x105 ton biji kopi per tahun yang dikirim ke berbagai negara konsumen seperti Jepang, Amerika Serikat dan Uni Eropa. Produksi kopi di Lampung pada 2012 mengalami peningkatan bila dibandingkan tahun sebelumnya. Produksi kopi di Kabupaten Lampung Barat rata-rata mencapai 1,5 ton per ha atau jauh meningkat bila dibandingkan tahun sebelumnya yang hanya 300-450 kwintal (DJPDP, 2011)

Sementara itu, produksi kopi di Kabupaten Lampung Barat sekitar 29.712 ton per tahun dengan luas areal tanaman kopi mencapai 59.357 ha yang dibudidayakan sekitar 45 kepala keluarga (KK) petani. Tanaman kopi di daerah tersebut sangat dominan dan menjadikan salah satu pendapatan masyarakat setempat (DJPDP, 2011). Dengan produksi kopi yang meningkat setiap tahunnya tidak luput dari peningkatan jumlah limbah yang dihasilkan selama produksi. Jumlah limbah yang tinggi tersebut merupakan suatu potensi yang layak dimanfaatkan untuk perkebunan, peternakan mapun perikanan (Desmayanti dan Muladi, 1995).

21

III. METODELOGI PENELITIAN

A. Waktu dan Tempat

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Budidaya Perikanan, Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung pada bulan Maret - April 2014.

B. Alat dan Bahan 1. Alat Penelitian

Peralatan yang digunakan dalam penelitian antara lain wadah kultur (botol kaca), botol film, pipet tetes, pipet ukur, bunsen, lampu TL 36 watt, instalasi aerasi, mikroskop inokuler, Sedgewick rafter, gelas penutup, tabung erlenmeyer, gelas ukur, kain kasa, termometer ruang, timbangan analitik, alat sentrifugasi, tabung sentrifuse, counter, autoklaf, aluminium foil dankapas.

2. Bahan Penelitian

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain: 1. Spirulina sp.

Spirulina sp. yang digunakan berasal dari PTPN VII Unit Usaha Bekri, Lampung Tengah yang dikultur di Laboratorium Budidaya Perikanan Program Studi Budidaya Perairan Fakultas Pertanian Universitas Lampung.

2. Kulit buah kopi

Kulit kopi yang digunakan berasal dari sentra produksi kopi di Desa Sumberjaya, Kabupaten Lampung Barat. Kulit kopi diambil langsung setelah

22

proses penggilingan kemudian dijemur hingga kering dan dihaluskan sampai berbentuk tepung. Jenis kopi yang digunakan adalah dari jenis Coffea robusta.

3. Akuades

Akuades yang digunakan disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit untuk menghindari kontaminasi.

4. Buffer

Buffer yang digunakan adalah CaCO3 dengan perbandingan Buffer dan

akuades 1:10. 4. Alkohol 70%

Alkohol digunakan untuk mensterilisasi alat dan bahan.

B. Rancangan Penelitian

Rancangan percobaan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri atas 6 perlakuan dan 3 kali ulangan. Rancangan penelitian terdiri dari:

Perlakuan A (0%) : 0 ml media cair kulit buah kopi + 200 ml akuades Perlakuan B (0,5%) : 1 ml media cair kulit buah kopi +199 ml akuades Perlakuan C (1,5%) : 3 ml media cair kulit buah kopi +197 ml akuades Perlakuan D (2,5%) : 5 ml media cair kulit buah kopi +195 ml akuades Perlakuan E (3,5%) : 7 ml media cair kulit buah kopi +193 ml akuades Perlakuan F (4,5%) : 9 ml media cair kulit buah kopi + 191 ml akuades

Selama penelitian dilakukan penempatan dan ulangan secara acak (Gambar 6).

Gambar 6. Penempatan Botol Kultur selama Penelitian

D

3

B

2

E

3

C

1

E

1

C

3

A

2

D

2

C

2

A

1

A

3

E

1

D

1

B

3

F

1

F

3

F

2

E

2

23

Keterangan :

A1 : Kontrol A ulangan 1 C3 : Perlakuan C ulangan 3

A2 : Kontrol A ulangan 2 D1 : Perlakuan D ulangan 1

A3 : Kontrol A ulangan 3 D2 : Perlakuan D ulangan 2

B1 : Perlakuan B ulangan 1 D3 : Perlakuan D ulangan 3

B2 : Perlakuan B ulangan 2 E1 : Perlakuan E ulangan 1

B3 : Perlakuan B ulangan 3 E2 : Perlakuan E ulangan 2

C1 : Perlakuan C ulangan 1 E3 : Perlakuan E ulangan 3

C2 : Perlakuan C ulangan 2

Model Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang digunakan adalah sebagai berikut :

Yij = µ + σi + ∑ ij

Keterangan : Yij = Data pengamatan perlakuan ke-i, Ulangan ke-j µ = Nilai tengah umum

σi = Pengaruh penambahan ekstrak air kulit kopi ke-i ∑ij = Galat percobaan pada perlakuan ke-i dan ulangan ke-j

C. Prosedur Penelitian 1. Persiapan

a. Sterilisasi Alat dan Bahan

Persiapan penelitian meliputi persiapan alat dan bahan serta sterilisasi alat-alat yang akan digunakan untuk mencegah kontaminasi. Seluruh peralat-alatan yang akan digunakan dalam penelitian dicuci, dikeringkan dan disimpan di tempat yang kering. Wadah kultur, akuades dan tabung sentrifuse disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121 oC selama 15 menit dengan tekanan 1 atm. Botol film dan selang aerasi dicuci lalu dikeringkan, kemudian disterilisasi dengan alkohol 70% dan diletakkan ditempat yang kering.

b. Pembuatan Media Kulit Buah Kopi

Media kulit buah kopi yang digunakan sebagai media pertumbuhan

24

kemudian dihaluskan hingga menjadi tepung dengan jenis kopi yang digunakan adalah Coffea robusta.

Pembuatan media dilakukan dengan cara :

- Penggilingan buah kopi untuk memisahkan kulit dan biji

- Kulit buah diambil dan dijemur selama 12 jam

- Kulit buah digiling dengan mesin penggiling hingga berbentuk tepung - Setelah berbentuk tepung, kemudian ditimbang sebanyak 50 gr

- Selanjutnya tepung kulit buah kopi dibungkus dengan kain kasa dan direndam dalam akuades 150 ml.

- Perendaman dilakukan hingga air berwarna kecoklatan selama ± 30 menit, kemudian disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit.

c. Menghitung Kepadatan Awal

Perhitungan dilakukan di bawah mikroskop menggunakan kamar hitung

Sedgewick rafter. Spirulina sp. sebanyak 1 ml (kepadatan ± 105 unit/ml) disentrifugasi selama 15 menit dengan kecepatan 2500 rpm untuk memisahkan biomassa Spirulina sp. dari media. Endapan Spirulina sp. diinokulasikan ke dalam masing-masing 200 ml botol kultur yang telah berisi media perlakuan. Jumlah sel yang digunakan sebagai inokulan ± 105 unit/ml. Penghitungan jumlah bibit

Spirulina sp. untuk kultur menggunakan rumus seperti dibawah ini :

Keterangan:

V1 = Volume bibit untuk penebaran awal (ml)

N1 = Kepadatan bibit/ stock Spirulina sp. (unit/ ml)

V2 = Volume media kultur yang dikehendaki (L)

N2 = Kepadatan bibit Spirulina sp. yang dikehendaki (unit/ml)

25

Wadah kultur secara acak diletakkan ke dalam rak kultur dan diberi pencahayaan lampu TL 2 buah berkekuatan 36 watt. Lampu diletakkan diantara wadah kultur yang berjarak 10 cm dari wadah kultur dengan fotoperiodesitas 12 jam terang dan 12 jam gelap.

2. Pelaksanaan a. Sampling

Sampling dilakukan setiap 24 jam sekali dengan mengambil sampel dari masing-masing wadah kultur sebanyak 1 ml, kemudian diamati di bawah mikoskop.

b. Pengukuran Kualitas Air dan Lingkungan

Data kualitas air dan lingkungan berupa suhu air, suhu ruang, pH air dan intensitas cahaya. Pengukuran suhu air, suhu ruang setiap dan pH dilakukan setiap 24 jam sekali. Sementara itu, pengukuran intensitas cahaya dilakukan pada akhir penelitian.

3. Pengamatan

a. Kepadatan unit Spirulina sp.

Penghitungan unit Spirulina sp. dilakukan dibawah mikroskop menggunakan kamar hitung Sedgewick Rafter. Jumlah sel yang didapat selanjutnya digunakan untuk menghitung kerapatan sel. Perhitungan kerapatan dilakukan dengan

menggunakan rumus sebagai berikut (Sidabutar, 2010).

N

=

n ( ) (

)

Keterangan:

N = Kerapatan Spirulina sp.(unit/ml)

n = Jumlah plankter dalam 10 lapang pandang s = Jumlah lapang pandang Sedgewick rafter

26

lp = Jumlah lapang pandang yang digunakan p = Volume subsampel

v = Volume sampel

b. Kecepatan Pertumbuhan

Menurut Gotelli (1995) dalam Andresen (2005), kecepatan pertumbuhan (k) mikroalga dihitung dengan menggunakan rumus berikut:

K =

Keterangan :

K = Kecepatan pertumbuhan

Nt = Kepadatan populasi pada waktu t

No = Kepadatan populasi sel pada waktu 0

T0 = Waktu awal

Tt = Waktu pengamatan

c. Kualitas Air dan Lingkungan

Data yang diambil yaitu suhu air, suhu ruang, pH dan intensitas cahaya. Suhu air, suhu ruang dan pH di ukur setiap 24 jam sekali bersamaan dengan pengambilan sampel. Sementara itu, intensitas cahaya di ukur pada akhir penelitian dengan menggunakan Lux meter.

4. Analisis Data

Data yang diperoleh dalam penelitian berupa kepadatan populasi dan kecepatan pertumbuhan. Kepadatan populasi selanjutnya dianalisis dengan menggunakan analisis ragam ANOVA dan apabila hasil uji antar perlakuan berbeda nyata maka akan dilakukan uji lanjut beda nyata terkecil (BNT) dengan selang kepercayaan 95% (Kusriningrum, 2008).

V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Pemanfaatan kulit buah kopi sebagai sumber nutrien pada kultur Spirulina sp. memberikan pengaruh yang nyata terhadap pertumbuhan Spirulina sp.. Penambahan nutrien kulit buah kopi sebesar 4,5% dalam media kultur Spirulina

sp. menghasilkan kepadatan tertinggi sebesar 3,326 x 105 unit/ml pada jam ke-120.

B. Saran

1. Perlu dilakukan analisis lebih lengkap kandungan kulit buah kopi secara lebih lengkap agar diketahui faktor penghambat pertumbuhan Spirulina sp.. selama kultur.

2. Penambahan kandungan Nitrogen dan Fosfor sehingga rasio N/P sesuai dengan yang dibutuhkan Spirulina sp..

43

DAFTAR PUSTAKA

Akmal dan Filawati. 2008. Pemanfaatan Kapang Aspergillus niger sebagai Inokulan Fermentasi Kulit Kopi dengan Media Cair dan Pengaruhnya terhadap Performans Ayam Broiler. Jurnal Ilmiah Ilmu-Ilmu Peternakan,Vol. XI. No.3. Fakultas Peternakan Universitas Jambi.

Ali K.S and Saleh M. A. 2012. Spirulina - an Overview. International journal of pharmacy and pharmaceutical sciences. Vol 4, issue 3, 2012

Andersen, R.A. 2005. Algal Culturing Technique. Elsevier academic press. UK. Angka dan Suhartono. 2000. Manfaat dan Kandungan Biota-biota Laut. Kanisius.

Yogyakarta

Aprilianita, S. L. 2009. Pengaruh Penambahan FeCl3 terhadap Pertumbuhan Spirulina platensis yang Dikultur pada Media Asal Blotong Kering.

Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas Airlangga. Surabaya.

Becker, E. W. 1995. Microalgae Biotechnology and Microbiology. Cambrige University Press. New York.

Belay A. 2002. The Potential Application of Spirulina (Arthospira) as Nutritional and Therapeutic Supplement in Health Management. J. of the American Nutraceutical Association. 5: 2.

Bold, H.C, and Wynne, M.J. 1985. Introduction to the Algae Structure and Reproduction. Second Edition. Pretice-Hall Mc. Engelwood Cliffs, New York.

Borowitzka, M.A. 1994. Products from Algae. In S. M. Phang, L. Y. Kun, M. A. Borowitzka, and B. A. Whitton eds. In. Proc. 1st Asia--‐Pacific Conference on Algal Biotechnology. Kuala Lumpur, Malaysia. University of Malaya. Boussiba, S. and Richmond, A. E. 1980. Isolation and Purification of

Phycocyanins from the Blue Green Alga Spirulina platensis. Journal of Archives of Microbiol. 120: 155-159.

Brock, T.D. and Madigan, M.T. 1991. Biology of Microorganisms. Sixth ed. Prentice-HallInternational, Inc.

44

Brown, M. R., Jeffrey, S. W., Volkman, J. K., and Dunstan, G. A. 1997.

Nutritional Properties of Microalgae for Mariculture. Aquaculture. 151: 315-331.

Bromokusumo, A.K and Slette J. 2010. Indonesia Coffee Annual 2010. Global Agricultural Information Network. USDA Foreign Agricultural Service. Christwardana,M. dan Hadiyanto M.M.A.N. 2012. Spirulina platensis: Potensinya

sebagai Bahan Pangan Fungsional. Jurnal Aplikasi Teknologi Pangan. Vol 2. UNDIP : Semarang

Ciferri, O. 1983. Spirulina The Edible Microorganisme. Microbial Review. American Society.

Ciptadi, W dan Nasution, M.Z. 1985. Pengolahan Kopi. Bogor: Jurusan Teknologi Industri Pertanian IPB

Chu, F. E., Dupuy, J. L., and Webb, K. L. 1982.Polysaccharide Composition of Five Algal Species Used as Food Larvae of the American Oyster, Crassostrea Virginica. Aquaculture. 29:241-252.

Cotteau. 1996. Trends in Ecology and Evolution. Doctor disertation. University of Rostock

Desmayanti, Z dan Muladi. 1995. Pemanfaatan Limbah Kopi dalam Ransum Ayam Pedaging. Warta Penelitian dan Pengembangan Pertanian

Diharmi A. 2001. Pengaruh Pencahayaan terhadap Kandungan Pigmen Bioaktif Mikrolaga Spirulina platensis Strain Lokal (INK). [tesis]. Bogor. Program Pasca Sarjana. Institut Pertanian Bogor.

Direktorat Jenderal Perkebunan Departemen Pertanian (DJPDP), 2011. Statistik Perkebunan. Direktorat Jenderal Perkebunan Departemen Pertanian Lampung.

Edhy, W.A., dan Kurniawan. 2003. Plankton di Lingkungan PT. Central Pertiwi Bahari. Suatu Pendekatan Biologi dan Manajemen Plankton dalam Budidaya Udang. Mitra Bahari: Lampung. hal. 3-29.

Ekawati, A. W. 2005. Diktat Kuliah Budidaya Pakan Alami. Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya. Malang. hal. 3-48.

Etika, V.Y. 2007. Pengaruh Pemberian Kompos Kulit Kopi, Kotoran Ayam dan Kombinasinya terhadap Ketersediaan Unsur N, P dan K pada Inceptisol.

Skripsi. Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya Malang. 67 hal.

Fogg, G.E and Thake B. 1987. Algae Culture and Phytoplankton Ecology. Second edition. London: The University of Winconsin Press.Gad 1989.

45

Gotelli. N.J. 1995. A Primery of Ecology. In Andersen, R.A. 2005. Algal Culturing Technique. Elsevier Academic Press. New York. USA

Haryati, R. 2008. Pertumbuhan dan Biomassa Spirulina sp. dalam Skala Laboratoris. Jurnal BIOMA Universitas Diponegoro. Vol. 10, No. 1, Hal. 19-22

Harrison, P. J. and J. A. Berges. 2005. Marine Culture Media. In : R.A. Andersen (Eds). Algal culturing techniques. National Institute Enveronmental Studies.

Academic press. America. p. 21-60.

Hermawan, A. V. 2012. Pemanfaatan Air Kelapa sebagai Pengkaya Media Pertumbuhan Tetraselmis sp. Universitas Lampung. Lampung

Hongmei G., Yunlai T., Jia W., Xiaogang W., Lixin Z. and Congming L. 2008.

Characterization of Photosystem II in Salt-Stressed Cyanobacterial Spirulina platensis Cells. Biochimica et Biophysica acta 1777:2008, pp. 488-495

Kabede, E and Ahlgren, G. 1996. Optimum Growth Conditions and Light Utilization Efficiency of Spirulina platensis (Arthospirafusiformis) from Lake Chitu, Ethiopia. Hydrobiol. 332: 99--‐109.

Khoirul, A. A. 2013. Cyanobacteri (Alga hijau-biru). Universitas Brawijaya. Malang

Kusriningrum, R. 2008. Perancangan Percobaan. Universitas Airlangga. Surabaya. hal. 43-51.

Lavens, P. and Sorgeloos, 1996, Manual on the Production and Use of Live Food for Aquaculture. Fisheries Technical Paper, Food and Agriculture Organization of The United Nation, Rome.

Liu, Y. F., L. Z. Xu, N. Cheng, L. J. Lin, and C. W. Zhang. 2000. Inhibitory Effect of Phycocyanin from Spirulina platensis on the Growth of Human Leukimia K562 Cells. Journal Appl.Phycol.,12:125--‐130.

Maeda, S and Sakaguchi, T. 1990. Accumulation and Detoxification of Toxic Metal Elements by Algae. Introduction to Appl. Phycol., 109--‐136.

Najiyati S, dan Danarti. 2006. Kopi, Budidaya dan Penanganan Pasca Panen. Jakarta: Penebar Swadaya.

Novrina, R. 2003. Teknik Kultur Nannochloropsis sp. di Balai Budidaya Lampung. Universitas Lampung: lampung

46

Pal, D., Goldberg, K.I, Cohen, Z. and Bousiba, S. 2011. The Effect of Light and Nitrogen Availibility on Lipid Production by Nannochhloropsis sp. Appl Microbial Biotechnol. 10:113-126

Pelupessy. W. 2003. Enviromental Issues in the Production of Beverages: Global Coffee Chain. In Mattsson B, Sonesson U, editor. Enviromental Friendly Food Processing. Cambridge England:CRCPress, Woodhead Publishing Limited.hlm 95-115

Pirie, N.W. 1975. In IBP 4: Food Protein Source, (ed. N.W. Pirie). Cambridge university Press: Cambridge.261

Prasetyo, B. dan Kusumaningrum,N.,E. 2010. Penentuan Jenis Spirulina sp. di Situ Babakan, Jagakarsa, Jakarta Selatan. Lembaga Penelitian Universitas Terbuka Jakarta Selatan.

Prihantini, N. B., Putri. B. dan Ratna. Y. 2005. Pertumbuhan Chlorella spp. dalam Medium Ekstrak Tauge (MET) dengan Variasi pH Awal. Departemen Biologi. Fakultas MIPA. Universitas Indonesia. Depok

Retnandari, N.D dan Tjokrowinoto M. 1991. Kopi Kajian Sosial Ekonomi. Yogyakarta: Penerbit Aditya Media

Richmond, A. 1988. Spirulina. In M. A. Borowitzka, eds. Microalgal Biotechnology, pp. 85--‐121. Cambridge, Cambridge University Press. Sari. A. Y. F., Suryajaya. A. M. I, dan Hadiyanto. 2012. Kultivasi Mikroalga

Spirulina platensis dalam Media POME dengan Variasi Konsentrasi POME dan Komposisi Jumlah Nutrien. Jurnal Teknologi Kimia dan Industri, Vol 1, No.1, Tahun 2012, Halaman 487-494.

Sasson, A. 1997. Micro Biotechnologies: Recent Developments and Prospects for Developing Countries. BIOTEC Publication 1/2542. Pp. 11--‐31. Place de Fontenoy, Paris. France. United Nations Educational, Scientific and Cultural Organization (UNESCO).

Sidabutar,T. 2010. Pelayaran Kebangsaan bagi Ilmuwan Muda (Plankton). Jakarta: Direktorat Kelembagaan, Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Kementrian Pendidikan Nasional Bekerja Sama dengan Pusat Penelitian Oceanografi, LIPI.

Steenis, V.M.J. 1973. Flora Malesiana.. Series 1 Vol.8,part 1. Cyclopedia of Collectors.

Surya, A. A. 2010. Pemanfaatan Limbah Kotoran Ayam Kering sebagai Pupuk untuk Pertumbuahan Populasi Spirulina platensis. Skripsi. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas Airlangga. Surabaya. Hal. 35-40

47

Suryati. 2002. Pemanfaatan Limbah Cair Pabrik Gula (LCPG) untuk Pertumbuhan Spirulina sp. Skripsi. Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya. Malang.74 hal.

Switzer, L. 1980. Spirulina, The Whole Food Revolution. Proteus Corporation, USA. 1980; 1-69:

Taw Nyan, DR. 1990 . Petunjuk Pemeliharaan Kultur Murni dan Massal Mikroalga. Proyek Pengembangan Budidaya Udang : United Nations Development Progrramme Food and agriculture organization of the Unite Nations. US. 34 hal (diterjemahkan oleh : Budiono M & Indah W)

Trisilawati, O dan Gusmaini, 1999. Penggunaan Pupuk Organik bagi Pertumbuhan dan Produksi Jahe. Buletin Gakuryo. Hlm. 251-257

Vonshak, A. 1986. Laboratory Techniques for the Cultivation of Mikroalgae. In: Richmond, A. 1986. CRC Handbook of Microalgal Mass Culture. CRCPress, Inc. Florida. p. 117-145.

Wachjar, A. 1984. Pengantar Budidaya Kopi. Fakultas Pertanian. Bogor.

Wijaya. S. A. 2006. Pengaruh Pemberian Konsentrasi Urea yang Berbeda Terhadap pertumbuhan Nannochloropsis oculata. Skiripsi. Program Studi Budidaya Perairan. Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga. Surabaya. 2-3 hal.

V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Pemanfaatan kulit buah kopi sebagai sumber nutrien pada kultur Spirulina sp. memberikan pengaruh yang nyata terhadap pertumbuhan Spirulina sp.. Penambahan nutrien kulit buah kopi sebesar 4,5% dalam media kultur Spirulina sp. menghasilkan kepadatan tertinggi sebesar 3,326 x 105 unit/ml pada jam ke-120.

B. Saran

1. Perlu dilakukan analisis lebih lengkap kandungan kulit buah kopi secara lebih lengkap agar diketahui faktor penghambat pertumbuhan Spirulina sp.. selama kultur.

2. Penambahan kandungan Nitrogen dan Fosfor sehingga rasio N/P sesuai dengan yang dibutuhkan Spirulina sp..

DAFTAR PUSTAKA

Akmal dan Filawati. 2008. Pemanfaatan Kapang Aspergillus niger sebagai Inokulan Fermentasi Kulit Kopi dengan Media Cair dan Pengaruhnya terhadap Performans Ayam Broiler. Jurnal Ilmiah Ilmu-Ilmu Peternakan,Vol. XI. No.3. Fakultas Peternakan Universitas Jambi.

Ali K.S and Saleh M. A. 2012. Spirulina - an Overview. International journal of pharmacy and pharmaceutical sciences. Vol 4, issue 3, 2012

Andersen, R.A. 2005. Algal Culturing Technique. Elsevier academic press. UK. Angka dan Suhartono. 2000. Manfaat dan Kandungan Biota-biota Laut. Kanisius.

Yogyakarta

Aprilianita, S. L. 2009. Pengaruh Penambahan FeCl3 terhadap Pertumbuhan Spirulina platensis yang Dikultur pada Media Asal Blotong Kering. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas Airlangga. Surabaya.

Becker, E. W. 1995. Microalgae Biotechnology and Microbiology. Cambrige University Press. New York.

Belay A. 2002. The Potential Application of Spirulina (Arthospira) as Nutritional and Therapeutic Supplement in Health Management. J. of the American Nutraceutical Association. 5: 2.

Bold, H.C, and Wynne, M.J. 1985. Introduction to the Algae Structure and Reproduction. Second Edition. Pretice-Hall Mc. Engelwood Cliffs, New York.

Borowitzka, M.A. 1994. Products from Algae. In S. M. Phang, L. Y. Kun, M. A. Borowitzka, and B. A. Whitton eds. In. Proc. 1st Asia--‐Pacific Conference on Algal Biotechnology. Kuala Lumpur, Malaysia. University of Malaya. Boussiba, S. and Richmond, A. E. 1980. Isolation and Purification of

Phycocyanins from the Blue Green Alga Spirulina platensis. Journal of Archives of Microbiol. 120: 155-159.

Brock, T.D. and Madigan, M.T. 1991. Biology of Microorganisms. Sixth ed. Prentice-HallInternational, Inc.

Brown, M. R., Jeffrey, S. W., Volkman, J. K., and Dunstan, G. A. 1997. Nutritional Properties of Microalgae for Mariculture. Aquaculture. 151: 315-331.

Bromokusumo, A.K and Slette J. 2010. Indonesia Coffee Annual 2010. Global Agricultural Information Network. USDA Foreign Agricultural Service. Christwardana,M. dan Hadiyanto M.M.A.N. 2012. Spirulina platensis: Potensinya

sebagai Bahan Pangan Fungsional. Jurnal Aplikasi Teknologi Pangan. Vol 2. UNDIP : Semarang

Ciferri, O. 1983. Spirulina The Edible Microorganisme. Microbial Review. American Society.

Ciptadi, W dan Nasution, M.Z. 1985. Pengolahan Kopi. Bogor: Jurusan Teknologi Industri Pertanian IPB

Chu, F. E., Dupuy, J. L., and Webb, K. L. 1982.Polysaccharide Composition of Five Algal Species Used as Food Larvae of the American Oyster, Crassostrea Virginica. Aquaculture. 29:241-252.

Cotteau. 1996. Trends in Ecology and Evolution. Doctor disertation. University of Rostock

Desmayanti, Z dan Muladi. 1995. Pemanfaatan Limbah Kopi dalam Ransum Ayam Pedaging. Warta Penelitian dan Pengembangan Pertanian

Diharmi A. 2001. Pengaruh Pencahayaan terhadap Kandungan Pigmen Bioaktif Mikrolaga Spirulina platensis Strain Lokal (INK). [tesis]. Bogor. Program Pasca Sarjana. Institut Pertanian Bogor.

Direktorat Jenderal Perkebunan Departemen Pertanian (DJPDP), 2011. Statistik Perkebunan. Direktorat Jenderal Perkebunan Departemen Pertanian Lampung.

Edhy, W.A., dan Kurniawan. 2003. Plankton di Lingkungan PT. Central Pertiwi Bahari. Suatu Pendekatan Biologi dan Manajemen Plankton dalam Budidaya Udang. Mitra Bahari: Lampung. hal. 3-29.

Ekawati, A. W. 2005. Diktat Kuliah Budidaya Pakan Alami. Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya. Malang. hal. 3-48.

Etika, V.Y. 2007. Pengaruh Pemberian Kompos Kulit Kopi, Kotoran Ayam dan Kombinasinya terhadap Ketersediaan Unsur N, P dan K pada Inceptisol. Skripsi. Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya Malang. 67 hal.

Fogg, G.E and Thake B. 1987. Algae Culture and Phytoplankton Ecology. Second edition. London: The University of Winconsin Press.Gad 1989.

Gotelli. N.J. 1995. A Primery of Ecology. In Andersen, R.A. 2005. Algal Culturing Technique. Elsevier Academic Press. New York. USA

Haryati, R. 2008. Pertumbuhan dan Biomassa Spirulina sp. dalam Skala Laboratoris. Jurnal BIOMA Universitas Diponegoro. Vol. 10, No. 1, Hal. 19-22

Harrison, P. J. and J. A. Berges. 2005. Marine Culture Media. In : R.A. Andersen (Eds). Algal culturing techniques. National Institute Enveronmental Studies. Academic press. America. p. 21-60.

Hermawan, A. V. 2012. Pemanfaatan Air Kelapa sebagai Pengkaya Media Pertumbuhan Tetraselmis sp. Universitas Lampung. Lampung

Hongmei G., Yunlai T., Jia W., Xiaogang W., Lixin Z. and Congming L. 2008. Characterization of Photosystem II in Salt-Stressed Cyanobacterial Spirulina platensis Cells. Biochimica et Biophysica acta 1777:2008, pp. 488-495

Kabede, E and Ahlgren, G. 1996. Optimum Growth Conditions and Light Utilization Efficiency of Spirulina platensis (Arthospirafusiformis) from Lake Chitu, Ethiopia. Hydrobiol. 332: 99--‐109.

Khoirul, A. A. 2013. Cyanobacteri (Alga hijau-biru). Universitas Brawijaya. Malang

Kusriningrum, R. 2008. Perancangan Percobaan. Universitas Airlangga. Surabaya. hal. 43-51.

Lavens, P. and Sorgeloos, 1996, Manual on the Production and Use of Live Food for Aquaculture. Fisheries Technical Paper, Food and Agriculture Organization of The United Nation, Rome.

Liu, Y. F., L. Z. Xu, N. Cheng, L. J. Lin, and C. W. Zhang. 2000. Inhibitory Effect of Phycocyanin from Spirulina platensis on the Growth of Human Leukimia K562 Cells. Journal Appl.Phycol.,12:125--‐130.

Maeda, S and Sakaguchi, T. 1990. Accumulation and Detoxification of Toxic Metal Elements by Algae. Introduction to Appl. Phycol., 109--‐136.

Najiyati S, dan Danarti. 2006. Kopi, Budidaya dan Penanganan Pasca Panen. Jakarta: Penebar Swadaya.

Novrina, R. 2003. Teknik Kultur Nannochloropsis sp. di Balai Budidaya Lampung. Universitas Lampung: lampung

Pal, D., Goldberg, K.I, Cohen, Z. and Bousiba, S. 2011. The Effect of Light and Nitrogen Availibility on Lipid Production by Nannochhloropsis sp. Appl Microbial Biotechnol. 10:113-126

Pelupessy. W. 2003. Enviromental Issues in the Production of Beverages: Global Coffee Chain. In Mattsson B, Sonesson U, editor. Enviromental Friendly Food Processing. Cambridge England:CRCPress, Woodhead Publishing Limited.hlm 95-115

Pirie, N.W. 1975. In IBP 4: Food Protein Source, (ed. N.W. Pirie). Cambridge university Press: Cambridge.261

Prasetyo, B. dan Kusumaningrum,N.,E. 2010. Penentuan Jenis Spirulina sp. di Situ Babakan, Jagakarsa, Jakarta Selatan. Lembaga Penelitian Universitas Terbuka Jakarta Selatan.

Prihantini, N. B., Putri. B. dan Ratna. Y. 2005. Pertumbuhan Chlorella spp. dalam Medium Ekstrak Tauge (MET) dengan Variasi pH Awal. Departemen Biologi. Fakultas MIPA. Universitas Indonesia. Depok

Retnandari, N.D dan Tjokrowinoto M. 1991. Kopi Kajian Sosial Ekonomi. Yogyakarta: Penerbit Aditya Media

Richmond, A. 1988. Spirulina. In M. A. Borowitzka, eds. Microalgal Biotechnology, pp. 85--‐121. Cambridge, Cambridge University Press. Sari. A. Y. F., Suryajaya. A. M. I, dan Hadiyanto. 2012. Kultivasi Mikroalga

Spirulina platensis dalam Media POME dengan Variasi Konsentrasi POME dan Komposisi Jumlah Nutrien. Jurnal Teknologi Kimia dan Industri, Vol 1, No.1, Tahun 2012, Halaman 487-494.

Sasson, A. 1997. Micro Biotechnologies: Recent Developments and Prospects for Developing Countries. BIOTEC Publication 1/2542. Pp. 11--‐31. Place de Fontenoy, Paris. France. United Nations Educational, Scientific and Cultural Organization (UNESCO).

Sidabutar,T. 2010. Pelayaran Kebangsaan bagi Ilmuwan Muda (Plankton). Jakarta: Direktorat Kelembagaan, Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Kementrian Pendidikan Nasional Bekerja Sama dengan Pusat Penelitian Oceanografi, LIPI.

Steenis, V.M.J. 1973. Flora Malesiana.. Series 1 Vol.8,part 1. Cyclopedia of Collectors.

Surya, A. A. 2010. Pemanfaatan Limbah Kotoran Ayam Kering sebagai Pupuk untuk Pertumbuahan Populasi Spirulina platensis. Skripsi. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas Airlangga. Surabaya. Hal. 35-40

Suryati. 2002. Pemanfaatan Limbah Cair Pabrik Gula (LCPG) untuk Pertumbuhan Spirulina sp. Skripsi. Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya. Malang.74 hal.

Switzer, L. 1980. Spirulina, The Whole Food Revolution. Proteus Corporation, USA. 1980; 1-69:

Taw Nyan, DR. 1990 . Petunjuk Pemeliharaan Kultur Murni dan Massal Mikroalga. Proyek Pengembangan Budidaya Udang : United Nations Development Progrramme Food and agriculture organization of the Unite Nations. US. 34 hal (diterjemahkan oleh : Budiono M & Indah W)

Trisilawati, O dan Gusmaini, 1999. Penggunaan Pupuk Organik bagi Pertumbuhan dan Produksi Jahe. Buletin Gakuryo. Hlm. 251-257

Vonshak, A. 1986. Laboratory Techniques for the Cultivation of Mikroalgae. In: Richmond, A. 1986. CRC Handbook of Microalgal Mass Culture. CRCPress, Inc. Florida. p. 117-145.

Wachjar, A. 1984. Pengantar Budidaya Kopi. Fakultas Pertanian. Bogor.

Wijaya. S. A. 2006. Pengaruh Pemberian Konsentrasi Urea yang Berbeda Terhadap pertumbuhan Nannochloropsis oculata. Skiripsi. Program Studi Budidaya Perairan. Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga. Surabaya. 2-3 hal.