UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
suhu dipertahankan selama 1 menit dan selanjutnya dinaikkan menjadi 250 ⁰C
dengan kecepatan 4 ⁰Cmenit. Kondisi pada suhu 250⁰C ini dipertahankan
selama 4,5 menit. Suhu injektor selama analisis berlangsung diprogram konstan pada suhu 225
⁰C, sedangkan suhu detektor Elektron Impact dibuat konstan pada suhu 250
⁰C. Proses analisa ini memakan waktu 68 menit. Spektrum massa masing-masing puncak senyawa hasil kromatogram GC-MS
selanjutnya dibandingkan dengan spektrum massa autentik yang ada pada bank NIST National Institute of Standard Technology library Sulianti, Sri
Budi., 2008.
3.5. Penyiapan Larutan Uji
Minyak atsiri diencerkan dengan DMSO 9,8 steril. Serial konsentrasi minyak atsiri yang dibuat adalah 0,25, 0,5, 0,75, dan 1.
Campuran minyak atsiri dengan DMSO di vortex selama 5 menit untuk mencampurkannya.
3.6. Pembuatan Media
1 Heterotrof Agar HTR Agar
Media Heterotrof Agar dibuat dengan melarutkan 15 g Bacto Agar, Pepton 15 g, Tripton, 3 g, NaCl 5 g, dan K
2
HPO
4
2,5 g dalam 1 L aquadest dengan cara dipanaskan menggunakan microwave dan
dihomogenkan dengan sesekali digoyangkan. Larutan media disterilisasi dengan autoclave pada 121ºC, 15
menit. Media ini digunakan sebagai media peremajaan Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa.
2 Heterotrof Cair HTR Cair
Media Heterotrof cair dibuat dengan melarutkan Pepton 15 g, Tripton, 3 g, NaCl 5 g, K
2
HPO
4
2,5 g, dan Glukosa 2.5 g dalam 1 L aquadest dengan cara dipanaskan menggunakan microwave dan
dihomogenkan dengan sesekali digoyangkan.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Larutan media disterilisasi dengan autoclave pada 121ºC, 15 menit. Media ini digunakan sebagai media untuk menumbuhkan biofilm
bakteri uji.
3 Eosin methyl Blue Agar EMB Agar
Media Eosin methyl Blue Agar EMB Agar dibuat dengan melarutkan media EMB Agar 24 g dalam 1 L aquades dengan cara
dipanaskan menggunakan microwave dan dihomogenkan dengan sesekali digoyangkan.
Larutan media disterilisasi dengan autoclave pada 121ºC, 15 menit. Media ini digunakan sebagai media differensiasi untuk
Escherichia coli.
4 Luria Bertani Agar LB
Media LB dibuat dengan melarutkan melarutkan Bacto Agar 2,25
g, Yeast ekstrak 0,75 g, Tripton, 1,5 g, dan NaCl 0,75 g dalam dalam 150 ml aquadest.
dengan cara dipanaskan menggunakan microwave dan dihomogenkan dengan sesekali digoyangkan.
Larutan disterilisasi dengan autoclave pada 121ºC, 15 menit. Media ini digunakan sebagai peremajaan Staphylococcus aureus.
5 Pseudomonas Isolation Agar PIA
Media Pseudomonas Isolation Agar
PIA dibuat dengan melarutkan media PIA 4,5 g dan Bacto Agar dalam 1 L aquadest dengan
cara dipanaskan menggunakan microwave dan dihomogenkan dengan sesekali digoyangkan.
Larutan disterilisasi dengan autoclave pada 121ºC, 15 menit. Media ini digunakan sebagai selektif untuk Pseudomonas aeruginosa.
3.7. Kultur Escherichia coli