18 selama 60 detik kemudian dikeringkan dengan kertas saring terlebih dahulu sebelum
ditumbuhkan pada media PDA. Pada umur tujuh HSI. semua jenis koloni yang tumbuh diamati secara mikroskopis dan diidentifikasi berdasarkan karakter morfologi
cendawan Samson et al. 1988. Isolasi dari tanah dilakukan dengan cara mengambil contoh tanah dari sekitar
lahan pertanaman kedelai dengan kedalaman kurang lebih 10 cm beserta sisa-sisa tanaman kemudian dicampur hingga homogen Asensio et al. 2003. Contoh tanah
ditimbang 1 g dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian ditambah air steril 9 ml. Tabung reaksi dikocok menggunakan vortex selama 60 detik dan suspensi yang
terbentuk diambil 1 ml dengan mikro pipet kemudian dibuat seri pengenceran bertingkat hingga 10
-4
. Dari masing-masing seri pengenceran diambil 1 ml yang sebelumnya dikocok menggunakan vortex selama 30 detik kemudian diinkubasi di
dalam cawan Petri steril yang diisi media PDA 10 ml. Pada umur tujuh HSI, semua jenis koloni yang tumbuh diamati secara mikroskopis dan diidentifikasi berdasarkan
karakter morfologi cendawan Samson et al. 1988.
Uji Virulensi Berbagai Isolat
L. lecanii terhadap Telur R. linearis Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap RAL yang diulang
sebanyak empat kali. Perlakuan adalah 37 isolat L. lecanii yang sudah teridentifikasi Tabel 1.
Perbanyakan Isolat
L. lecanii
Setiap isolat L. lecanii ditumbuhkan pada media PDA di dalam cawan Petri yang berdiameter 9 cm. Pada umur 21 HSI, konidia cendawan yang terbentuk dikerok
dengan kuas halus yang dibasahi dengan air kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi air steril. Suspensi konidia kemudian dikocok menggunakan vortex
selama 30 detik dan dihitung kerapatan konidianya dengan menggunakan
19 haemocytometer merk Griffin George German hingga diperoleh kerapatan
10
7
ml.
Tabel 1 Isolat cendawan L. lecanii yang diperoleh dari empat sentra produksi kedelai di Indonesia
Nomor Isolat
Asal isolat Lokasi
1 Ll-JTM1
Tanah Klabat1, Banyuwangi
2 Ll-JTM2
Tanah Klabat2, Banyuwangi
3 Ll-JTM3
Tanah Klabat3, Banyuwangi
4 Ll-JTM4
Tanah Tisnogambar1, Jember
5 Ll-JTM5
Tanah Tisnogambar2, Jember
6 Ll-JTM6
Tanah Jambirono1, Jember
7 Ll-JTM7
Tanah Jambirono2, Jember
8 Ll-JTM8
Spodoptera litura Jambirono3, Jember
9 Ll-JTM9
Spodoptera litura Jambirono4, Jember
10 Ll-JTM10
Nezara viridula Yosowilangun1, Lumajang
11 Ll-JTM11
Spodoptera litura Yosowilangun2, Lumajang
12 Ll-JTM12
Spodoptera litura Yosowilangun3, Lumajang
13 Ll-JTM13
Tanah Yosowilangun4, Lumajang
14 Ll-JTM14
Tanah Muneng1, Probolinggo
15 Ll-JTM15
Riptortus linearis Muneng2, Probolinggo
16 Ll-JTM16
Spodoptera litura Muneng3, Probolinggo
17 Ll-JTM17
Trialeurodes sp. Karangan, Trenggalek
18 Ll-ME1
Spodoptera litura Muara Enim1, Palembang
19 Ll-ME2
Nezara viridula Muara Enim2, Palembang
20 Ll-ME3
Piezodorus hybneri Muara Enim3, Palembang
21 Ll-OK1
Tanah OKU1, Palembang
22 Ll-OK2
Tanah OKU2, Palembang
23 Ll-LT1
Tanah Kalirejo1, Lampung Tengah
24 Ll-LT2
Tanah Kalirejo2, Lampung Tengah
25 Ll-LT3
Tanah Kalirejo3, Lampung Tengah
26 Ll-TB1
Spodoptera litura Tulang Bawang1, Lampung
27 Ll-TB2
Spodoptera litura Tulang Bawang2, Lampung
28 Ll-TB3
Tanah Tulang Bawang3, Lampung
29 Ll-TB4
Tanah Tulang Bawang4, Lampung
30 Ll-TB5
Tanah Tulang Bawang5, Lampung
31 Ll-TB6
Spodoptera litura Tulang Bawang6, Lampung
32 Ll-NTB1
Tanah Kediri1, Lombok Barat
33 Ll-NTB2
Tanah Kediri2, Lombok Barat
34 Ll-NTB3
Tanah Ampenan1, Mataram
35 Ll-NTB4
Tanah Ampenan2, Mataram
36 Ll-NTB5
Tanah Ampenan3, Mataram
37 Ll-NTB6
Tanah Ampenan4, Mataram
20
Pembiakan Imago R. linearis untuk Mendapatkan Telur
Telur R. linearis diperoleh dengan cara mengembangbiakkan imago di dalam
laboratorium. Imago R. linearis diambil dengan jaring dari lahan pertanaman kedelai
di Probolinggo, Jawa Timur pada tahun 2006 kemudian dipelihara di dalam sangkar kawat yang disungkup dengan kain trikot. Serangga diberi pakan kacang panjang
yang sudah terbentuk bijinya dan setiap dua hari pakan diganti dengan kacang yang segar. Pada bagian dinding di dalam sangkar diselipkan benang-benang halus
berwarna kuning yang berfungsi sebagai tempat peletakkan telur oleh imago betina.
Inokulasi
L. lecanii pada Telur R. linearis
