Tabel 5. Data pengenceran larutan kerja standar asam askorbat Standar
V
1
mL M
1
mM V
2
mL M
2
mM 2,5
5 1
0,2 2,5
5 0,1
2 0,4
2,5 5
0,2 3
0,6 2,5
5 0,3
4 0,8
2,5 5
0,4 5
0,9 2,5
5 0,5
6 1,0
2,5 5
0,6 7
1,2 2,5
5 0,7
8 1,4
2,5 5
0,8 9
1,8 2,5
5 0,9
10 2,0
2,5 5
1,0
8. Pengukuran Aktivitas Antioksidan
Pengukuran aktivitas antioksidan dilakukan menggunakan teknik linear sweep voltammetry. Seperangkat alat potensiostat terdiri dari sel elektrokimia berukuran
2,5 mL dan tiga buah elektroda yaitu elektroda kerja glassy carbon, elektroda referensi AgAgCl, dan elektroda bantu Platina. Ketiga jenis elektroda tersebut
dilakukan polishing sebelum pengukuran voltammetri dilakukan. Elektroda kerja dihubungkan pada kabel berwarna hijau, elektroda acuan dihubungkan pada kabel
berwarna kuning, dan elektroda bantu dihubungkan pada kabel berwarna merah. Alat diatur dengan beberapa kondisi pengukuran reduksi oksigen dan oksidasi
asam askorbat yang disajikan pada Tabel 6 dan Tabel 7.
Tabel 6. Kondisi pengukuran reduksi oksigen Parameter
Keterangan Mode
Linear Initial E
0 mV Final E
-1000 mV Rate
100 mVdetik Range arus
10 µA
Tabel 7. Kondisi pengukuran oksidasi asam askorbat Parameter
Keterangan Mode
Linear Initial E
0 mV Final E
1000 mV Rate
100 mVdetik Range arus
10 µA
Larutan standar dan larutan sampel yang sudah disiapkan, masing-masing dipipet sebanyak 2 mL dan dimasukkan ke dalam wadah sel elektrokimia berukuran 2,5
mL kemudian ditambahkan 1 mL elektrolit pendukung NaCl 0,1 M. Wadah ditutup rapat kemudian dilakukan pengukuran. Pengukuran larutan blangko tanpa
oksigen akan dihasilkan arus yang dinyatakan sebagai nilai arus residual I
res
. Pengukuran larutan blangko yang mengandung oksigen akan menghasilkan arus
yang dinyatakan sebagai nilai limit arus oksigen I
or
. Pengukuran larutan standar antioksidan dilakukan dari konsentrasi terendah ke konsentrasi tertinggi,
kemudian dilanjutkan dengan pengukuran larutan sampel. Data yang diperoleh berupa arus reduksi oksigen dengan potensial reduksi oksigen sekitar -850 mV.
Hasil output alat potensiostat adalah voltammogram potensial vs arus. Kemudian dibuat kurva konsentrasi antioksidan terhadap perubahan relatif
