Ketepatan accuracy Validasi Metode

LOD = 3 x SD 5 Keterangan : LOD : batas deteksi limit of detection SD : simpangan baku hasil pengukuran Eurachem, 2014.

D. Antioksidan

Antioksidan adalah zat yang diperlukan tubuh untuk menangkap radikal bebas terhadap sel normal, protein, dan lemak. Antioksidan dalam tubuh bermanfaat untuk mencegah reaksi oksidasi yang ditimbulkan oleh radikal bebas baik berasal dari metabolisme tubuh maupun faktor eksternal lainnya Kikuzaki and Nakatani, 1993. Secara umum, antioksidan dikelompokkan menjadi 2, yaitu: 1. antioksidan enzimatis 2. antioksidan non enzimatis yang berupa mikronutrien. Antioksidan enzimatis dapat dibentuk dalam tubuh, seperti super oksida dismutase SOD, glutation peroksida, katalase, dan glutation reduktase. Sedangkan antioksidan non enzimatis yang berupa mikronutrien masih dibagi dalam 2 kelompok lagi, yaitu: 1. Antioksidan larut lemak, seperti: tokoferol, karotenoid, flavonoid, quinon, dan bilirium 2. Antioksidan larut air, seperti: asam askorbat, asam urat, protein pengikat logam, dan protein pengikat heme. Berdasarkan fungsinya, antioksidan dapat dibagi menjadi 4 tipe, yaitu: 1. Tipe pemutus rantai reaksi pembentuk radikal bebas, dengan menyumbangkan atom H, misalnya vitamin E 2. Tipe pereduksi, dengan mentransfer atom H atau oksigen, atau bersifat scavenger, misalnya asam askorbat 3. Tipe pengikat logam, mampu mengikat zat peroksidan, seperti Fe 2+ dan Cu 2+ , misalnya flavonoid 4. Antioksidan sekunder, mampu mendekomposisi hidroperoksida menjadi bentuk stabil, pada manusia dikenal super oksida dismutase SOD, katalase, dan glutation peroksidase Hariyatmi, 2004.

E. Radikal Bebas

Secara teoritis radikal bebas adalah bahan kimia yang memiliki satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada lapisan luarnya, sehingga berusaha melengkapi dengan 2 cara, yaitu: 1. Menambah atau mengurangi elektron untuk mengisi maupun mengosongkan lapisan luarnya 2. Membagi elektron-elektronnya dengan cara bergabung bersama atom yang lain dalam rangka melegkapi lapisan luarnya. Radikal bebas sangat reaktif dan mudah bereaksi dengan berbagai molekul lain, seperti protein, lemak, karbohidrat, dan DNA. Radikal bebas tidak dapat mempertahankan bentuk asli dalam waktu lama dan segera berikatan dengan bahan sekitarnya, dengan cara menyerang molekul stabil yang terdekat dan mengambil elektron, zat yang terambil elektronnya akan menjadi radikal bebas juga sehingga akan memulai suatu reaksi berantai, yang akhirnya dapat merusak sel. Radikal bebas dapat terbentuk secara in-vivo dan in-vitro dengan 3 cara, yaitu: 1. Pemecahan satu molekul normal secara homolitik menjadi dua, ini memerlukan tenaga yang tinggi dari sinar ultraviolet, panas, dan radiasi ion 2. Kehilangan satu elektron dari molekul normal 3. Penambahan elektron pada molekul normal. Radikal bebas terpenting adalah kelompok oksigen reaktif reactive oxygen speciesROS, termasuk didalamnya adalah triplet 3O 2 , tunggal singlet 1 O, anion superoksida O 2 ●- , radikal hidroksil OH ●- , nitrit oksida NO ●- , peroksinitrit ONOO, asam hipoklorus HOCl, hidrogen peroksida H 2 O 2 radikal alkosil LO ●- , dan radikal peroksil LO ●-2 . Radikal bebas yang mengandung karbon CCl 3 ●- yang berasal dari oksidasi radikal molekul organik dan radikal hidrogen hasil dari penyerangan atom H H ●- . Bentuk lain adalah radikal sulfur yang diproduksi pada oksidasi glutation menghasilkan radikal thiyl RS ● , radikal yang mengandung nitrogen, dan radikal fenyldiazin Inoue, 2001; Albina and Reichner, 1998.

F. Asam askorbat

Asam askorbat adalah salah satu zat gizi yang berperan sebagai antioksidan dan efektif mengatasi radikal bebas yang dapat merusak sel atau jaringan, termasuk melindungi lensa dari kerusakan oksidatif yang ditimbulkan oleh radiasi Taylor, 1993. Berdasarkan kelarutannya asam askorbat termasuk antioksidan hidrofilik