28
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.3 Prosedur Kerja
3.3.1 Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol 50 Kulit Buah Manggis
Garcinia mangsotana L. Sharon Nela, Aman Syariful, Yuliet., 2013
1
Pembuatan larutan DPPH 0,1 mM
Ditimbang seksama lebih kurang 1,98 mg DPPH BM 394,32. Lalu dilarutkan dengan metanol pro analisis hingga 50 mL, kemudian
ditempatkan dalam botol gelap. Cukupkan pelarutnya hingga tanda batas kemudian kocok hingga homogen
2
Pembuatan larutan blanko dan optimasi panjang gelombang DPPH
Dipipet 2 mL larutan DPPH 0,1 mM ke dalam tabung reaksi. Lalu ditambahkan metanol sebanyak 2 ml. Dan homogenkan dengan vortex.
Mulut tabung ditutup dengan alumunium foil. kemudian diinkubasi dalam ruangan gelap selama 30 menit Molyneux, 2004. Tentukan spektrum
serapannya menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 400-800 nm dan tentukan pajang gelombang maksimumnya.
3 Pembuatan larutan vitamin C
Ditimbang vitamin C pro analisis sebanyak 1 mg. Dilarutkan dengan metanol pro analisis, dimasukkan dalam labu ukur lalu ditambahkan
metanol pro analisis hingga 10 ml 100
g mL
. Selanjutnya dibuat seri konsentrasi 2,5; 5; 7,5; 10 dan 12,5
g mL
. Pada masing-masing konsentrasi dimasukkan dalam labu ukur dan
ditambanhkan metanol p.a hingga tanda batas. Masing masing larutan uji di pipet sebanyak 2 mL, dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan
DPPH 0,1mM sebanyak 2 mL, kemudian dikocok degan vortex hingga homogen dan diinkubasi pada suhu kamar selama 30 menit. Selanjutnya
larutan uji diukur serapannya menggunakan alat spektrofotometer UV- Vispada panjang gelombang 515,5 nm.
4 Pembuatan larutan uji ekstrak
Ditimbang lebih kurang 50 mg ekstrak, lalu dilarutkan dalam 50 ml metanol pro analisis konsentrasi 1000
g mL
, larutan ini merupakan larutan induk. Dibuat beberapa konsentrasi yakni 5; 7,5; 10; 12,5 dan
29
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
15
g mL
. Dari beberapa konsentrasi tadi kemudian dipipet sebanyak 2 ml kedalam tabung reaksi, didalam masing-masing tabung reaksi ditambahkan
larutan DPPH 0,1 mM dengan rasio 1:1 kemudian tunggu 30 menit pada suhu
ruang 25
o
C. Selanjurnya
diukur dengan
menggunakan spekrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 515,5 nm.
3.3.2 Formulasi Krim Fatmawaty, at al, 2012