BAB 4 METODE PENELITIAN
4.1 Rancangan Penelitian :
Posttest Only Control Group Design
Jenis Penelitian :
Eksperimental Laboratorium
4.2 Populasi, sampel dan besar sampel 4.2.1 Populasi
: Bakteri Porphyromonas gingivalis
4.2.2 Sampel :
Koloni Porphyromonas gingivalis ATCC 33277 yang telah diisolasi dan dibiakkan dengan media Mueller Hinton Agar MHA.
4.2.3 Besar sampel
Penentuan besar sampel sesuai dengan SOP Standard Operational Prosedure yang ada di Laboratorium Pusat Penyakit Tropis, Universitas Airlangga,
yaitu dengan menggunakan rumus Federer 1995:
t = jumlah perlakuan yang diberikan r = besar sampel
6-1 r-1 ≥ 15
5 r-1 ≥ 15
r-1 ≥ 3
r ≥ 4
t-1 r-1 ≥ 15
Universitas Sumatera Utara
Adapun penentuan besar sampel dilakukan sebagai berikut: a.
Penentuan nilai Kadar Hambat Minimum KHM Bahan coba dibagi ke dalam 6 kelompok dengan 2 kontrol, yaitu:
• Kelompok 1 : ekstrak etanol pegagan 100 → 4 sampel • Kelompok 2 : ekstrak etanol pegagan 50 → 4 sampel
• Kelompok 3 : ekstrak etanol pegagan 25 → 4 sampel • Kelompok 4 : ekstrak etanol pegagan 12,5 → 4 sampel
• Kelompok 5 : ekstrak etanol pegagan 6,25 → 4 sampel • Kelompok 6 : ekstrak etanol pegagan 3,125 → 4 sampel
• Kelompok 7 : kontrol Mc Farland → 1 sampel • Kelompok 8 : kontrol negatif ekstrak pegagan tanpa diberi suspensi
Porphyromonas gingivalis → 1 sampel
Dari masing-masing konsentrasi dilakukan dilusi pengenceran untuk memastikan konsentrasi minimal yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri. Pada
penentuan nilai KHM, jumlah keseluruhan sampel adalah 26 sampel. b. Penentuan nilai Kadar Bunuh Minimum KBM
Kelompok yang dilanjutkan perhitungan jumlah koloni bakteri dengan metode Drop Plate Miles Misra, adalah:
• Kelompok 1 : ekstrak etanol pegagan 100 → 4 sampel • Kelompok 2 : ekstrak etanol pegagan 50 → 4 sampel
• Kelompok 3 : ekstrak etanol pegagan 25 → 4 sampel
Universitas Sumatera Utara
• Kelompok 4 : ekstrak etanol pegagan 12,5 → 4 sampel • Kelompok 5 : ekstrak etanol pegagan 6,25 → 4 sampel
• Kelompok 6 : ekstrak etanol pegagan 3,125 → 4 sampel • Kelompok 7 : kontrol Mc Farland → 1 sampel
• Kelompok 8 : kontrol negatif ekstrak pegagan tanpa diberi suspensi Porphyromonas gingivalis
→ 1 sampel Pada penentuan nilai KBM, jumlah keseluruhan sampel adalah 26 sampel.
Universitas Sumatera Utara
4.3 Variabel Penelitian Variabel tergantung