III. BAHAN DAN METODE
A. BAHAN DAN ALAT
1. Bahan
Bahan baku yang digunakan untuk pembuatan lembaran bioplastik adalah poli-
β-hidroksialkanoat terutama poli-β-hidroksibutirat PHB yang merupakan hasil kultivasi aerob bakteri Ralstonia eutropha dengan
substrat hidrolisat pati sagu. Proses kultivasi tersebut menggunakan strain bakteri Ralstonia eutropha IAM 12368 yang diperoleh dari IAM Culture
Collection, Institute of Molecular and Celular Bioscience, The University of Tokyo. Sumber karbon yang digunakan dalam substrat kultivasi adalah
hidrolisat pati sagu Metroxylon sp yang dipersiapkan melalui hidrolisis enzimatis pati sagu dengan enzim
α-amilase dan amiloglukosidase. Bahan-bahan untuk kultivasi bakteri dan isolasi PHA adalah
nutrient broth, hidrolisat pati sagu, NH
4 2
HPO
4
, K
2
HPO4, KH
2
PO
4
, MgSO
4
0,1 M, larutan mikro elemen FeSO
4
.7H
2
O, MnCl
2
.4H
2
O, CoSO
4
.7H
2
0, CaCl
2
.7H
2
O, CuCl
2
.2H
2
O, ZnSO
4
.7H
2
O, NaOH 0,2 M dan 4 M, H
3
PO
4
1,33 M, antifoam, NaOCl dan methanol untuk proses hilir PHA serta kloroform yang berguna dalam pemurnian PHA. Pembuatan
lembaran bioplastik dilakukan dengan menggunakan pelarut kloroform untuk melarutkan PHA dan dietilen glikol sebagai pemlastis.
2. Alat
Alat-alat yang digunakan untuk kultivasi PHA dan pembuatan lembaran bioplastik adalah bioreaktor dengan volume kerja 10 liter,
sentrifuse, clean bench, hot plate, pendingin tegak, penyaring vakum, oven, waterbath shaker, termometer, neraca analitik, rotary shaking
inkubator, autoklaf, pH meter, freezer, desikator, pipet mikro dan alat-alat gelas. Cetakan kaca digunakan pada saat pembuatan lembaran bioplastik.
Peralatan yang digunakan untuk karakterisasi lembaran bioplastik adalah FTIR Fourier Transform Infra-Red Spectrofotometer untuk
mengetahui gugus fungsi PHA dan lembaran bioplastik, DSC Differential Scanning Calorimetry untuk mengetahui T
m
melting point dan derajat kristalinitas PHA maupun lembaran bioplastik, dan Universal Testing
Machine UTM untuk mengetahui kuat tarik dan perpanjangan putus lembaran bioplastik.
B. TAHAPAN PENELITIAN
1. Persiapan Bahan Baku Bioplastik