Alat-Alat Bahan-Bahan Prosedur Percobaan 1. Pembuatan larutan standard

BAB 3 METODOLOGI PERCOBAAN

3.1. Alat-Alat

 Labu Ukur 25ml Pyrex  Labu Ukur 100ml Pyrex  HPLC Waters 1525  Saringan Millipore 0.45µm  Botol Vial -  Spuit 5ml -  Spuit 10ml -  Centrifuge  Pompa Vakum  Ultrasonic Bath  Neraca Analitis Hwh  Gelas Ukur 50ml Pyrex  Pipet Volume 1.0ml Pyrex

3.2. Bahan-Bahan

 Krim Betason-N  Aquabidest  Acetonitril  Metanol  Asam Asetat Glasial Universitas Sumatera Utara 3.3. Prosedur Percobaan 3.3.1. Pembuatan larutan standard Sebanyak 25 mg betametason valerat standard ditimbang dengan neraca analitis. Kemudian dilarutkan dengan pelarut metanol : asam asetat glacial 1000:1 sebanyak 35ml dalam labu ukur 50ml. Selanjutnya dihomogenkan dengan ultrasonic selama 15 menit. Kemudian ditambahkan pelarut asam asetat glacial hingga garis batas. Selanjutnya dipipet sebanyak 1.0 ml kedalam labuukur 25 ml. Kemudian ditambahkan kembali pelarut metanol: asam asetat glacial 1000:1 hingga garis batas labu ukur. Setelah itu dikocok agar homogen. Kemudian disaring dengan menggunakan saringan Millipore 0,45µm. Lalu dimasukkan kedalam botol vial untuk dianalisa dengan menggunakan HPLC.

3.3.2. Pembuatan larutan uji

Sebanyak 1 gram krim Betason-N ditimbang dengan neraca analtis. Kemudian dilarutkan dengan menggunakan pelarutmetanol:asam asetatglacial1000:1 sebanyak 35ml kedalam labuukur 50 ml. Selanjutnya dihomogenkan dengan ultrasonic selama 15 menit. Kemudianditambahkan kembali pelarut metanol : asam asetat glacial 1000:1 hingga garis batas labu ukur. Kemudian disaring dengan saringan Millipore 0.45µm. Lalu dimasukkan kedalam botol vial untuk dianalisa dengan HPLC. Universitas Sumatera Utara

3.3.3. Pengukuran

Pada sejumlah volume sama ± 20 µl disuntikkan larutan baku dan larutan uji ke dalam injection port pada HPLC. Kemudian diukur respon puncak utama yang tampak pada komputer. Kemudian dihitung kadar sampel betametason krim.Dengan rumus: ���� = � × Bws × × Kws × � × × Ket : As = Luas area larutan standar Au = Luas area larutan uji BWS = Bobot betametason valerate yang ditimbang mg KWS = Kadar betametason valerate Bu = Bobot sampel yang ditimbang mg 1 = Kandungan betametason valerat per gram krim 251x50 = Faktor pengenceran larutan standar 50= Faktor pengenceran larutan uji 100 = Dalam 1 gram massa krim Universitas Sumatera Utara

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN