Kelompok P2 perlakuan coba = pemberian ekstrak daun sirsak 40mgkgBBhari selama 4 minggu + pemberian DMBA
2x20mg kgBB semingu selama 4 minggu.
Kadar hemoglobin tikus
Pengamatan dilakukan dengan membandingkan kadar hemoglobin antara kelompok perlakuan dengan kelompok
kontrol DMBA dan kadar hemoglobin normal. Kategorik
D. Bahan dan Cara Kerja
1. Alat dan Bahan Penelitian Alat penelitian yang digunakan adalah sonde, spuit, toples kaca, pipet
hemoglobin, alat pengukur hemoglobin otomatis, pipet pastur, pengaduk, handschoen.
Bahan yang digunakan adalah simplisia daun sirsak, aquabidest, DMBA 7,12 dimethylbenz[α]anthrancene, HCL 0,1 N, alcohol 70.
2. Ekstraksi Daun Sirsak Dalam Etanol 70 Ekstraksi daun sirsak dilakukan dengan etanol. Simplisia kering daun
sirsak di giling dan di ayak dengan ayakan yang sesuai. Sebanyak 500 gram daun sirsak di rendam dalam larutan etanol Setiap hari rendaman
diaduk-aduk dan disaring sampai didapatkan maserat yang jernih. Maserat di kentalkan dengan rotary evaporator sampai diperoleh ekstrak kering.
Larutan terapi diberikan kepada tikus dengan dosis yang telah ditentukan.
3. Aklimatisasi dan Pemeliharaan Hewan Coba Aklimatisasi hewan coba tikus putih betina galur Sprague Dawley yang
berusia 5 minggu dengan berat antara 100-200 gram selama 1 pekan untuk adaptasi di tempat pemeliharaan. Makanan tikus yang diberikan berupa
pelet. Pemberian makanan dan minuman kepada binatang percobaan dilakukan secara ad libitum , suhu kandang dijaga sekitar 25°C dan ada
pertukaran gelap dan terang setiap 12 jam. Masing-masing kelompok tikus diletakkan dalam kandang tersendiri dan dijaga sedemikian rupa sehingga
tidak saling berinteraksi. Setiap kali akan diinduksi dan setiap pecan setelah induksi terakhir berat badan tikus ditimbang sampai tikus
diterminasi.
4. Induksi Kanker Dengan DMBA dan Pengambilan Sampel Mula-mula tikus ditimbang untuk mengetahui volume larutan DMBA
yang akan diberikan. Bahan yang akan digunakan adalah serbuk DMBA yang dilarutkan dalam minyak jagung. Induksi menggunakan sonde oral,
seminggu dua kali dengan dosis 20 mgkgBB yang dilarutkan dalam minyak jagung, diberikan selama 4 minggu. Setiap tikus dengan berat ±
200gr mendapatkan ± 1ml larutan dengan konsentrasi 4 mgmL. Sonde untuk tikus kontrol dibedakan dengan tikus perlakuan untuk mencegah
adanya kontaminasi. Berat badan tikus ditimbang sebelum, selama, dan setelah induksi.
5. Induksi ekstrak daun sirsak Mula mula tikus ditimbang untuk mengetahui volume larutan ekstrak yang
akan diberikan. Bahan yang akan digunakan adalah daun sirsak yang di buat menjadi ekstrak dengan 2 dosis , 20mgkgbb dan 40mg kgbb.
Induksi menggunakan sonde oral dan akan dilakukan setiap hari dalam 4 minggu. Setiap tikus akan mendapatkan 1 ml. pemeberian dosis
20mgkgbb hanya untuk kelompok P1 dan pemberian 40mgkgbb untuk kelompok P2.
