14
BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN
3.1. Desain Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium dengan
teknik disc diffusion. 3.2. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilakukan pada bulan Februari - April 2013 di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah
Jakarta. 3.3. Bahan yang Diuji
Obat kumur dengan berbagai merek yaitu F, LGT, C, TC, O, MDS, PH
dan LV. 3.4. Sampel Bakteri
Bakteri Streptococcus mutans yang diregenerasikan pada media agar darah
dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. 3.5. Identifikasi Variabel
3.5.1. Variabel Bebas
Obat kumur dengan berbagai merek yaitu F, LGT, C, TC, O, MDS, PH
dan LV.
3.5.2. Variabel Terikat
Pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans pada media agar darah, diukur dengan berbagai diameter zona hambat yang terbentuk dalam
satuan millimeter mm.
3.6. Alat dan Bahan Penelitian
3.6.1. Alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu : tabung reaksi, vortex, bunsen, korek api, ose, cawan petri, rak tabung, autoclave, baki,
swab kapas, erlenmeyer, pengukur waktu, inkubator, penggaris, blank disc, label, alat tulis, kamera, laminar air flow, tisu, pinset, alkohol.
3.6.2. Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu : media agar darah, biakan Streptococcus mutans, tioglikolat, aquades steril, obat
kumur, cakram uji kosong, cakram amoksilin.
3.7. Cara Kerja Penelitian 3.7.1.
Tahap Persiapan
3.7.1.1 Sterilisasi Alat dan Bahan
Seluruh alat yang digunakan disterilkan dengan menggunakan autoclave selama 30 menit yang diatur
tekanannya sebesar 15 dynecm3 1 atm dan suhu sebesar 121°C setelah sebelumnya dicuci bersih lalu
dikeringkan dan dibungkus dengan kertas. 3.7.1.2
Persiapan sampel Seluruh obat kumur yang dikumpulkan disimpan pada
suhu ruangan dan tetap ditutup rapat.
3.7.1.3 Pembuatan Stok Bakteri
Pembuatan stok bakteri ini dilakukan untuk meremajakan dan memperbanyak bakteri yang akan digunakan dalam
penelitian, dengan cara menginokulasikan 1 ose biakan murni bakteri Streptococcus mutans ke dalam media agar
darah, kemudian di inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam di dalam inkubator.
3.7.2. Tahap Pengujian
Pembuatan stok bakteri dengan mengambil 1 ose bakteri yang telah di remajakan selama 24 jam ke dalam tabung reaksi
yang telah berisi tioglikolat. Setelah itu dihomogenkan dengan menggunakan vortex dan kekeruhannya distandarisasi dengan
metode Mc Farland 0.5. Kemudian larutan bakteri di inokulasi pada media agar darah. Blank disc yang telah direndam di masing-
masing obat kumur diletakkan di atas permukaan biakan bakteri Streptococcus mutans pada media agar darah secara higienis di
dalam laminar air flow. Lalu media diinkubasi ke dalam inkubator. Pada suhu 37°C selama 24 jam, kemudian diukur diameter zona
terang clear zone yang terbentuk dengan menggunakan penggaris.