Kadar Bunuh Minimal KBM

plate Mills Misra dapat menentukan angka dari colony forming unit pada suspensi bakteri, lebih praktis dan cepat daripada metode lain dan kontaminasi bakteri pada permukaan kerja lebih sedikit daripada metode lain. Dalam pengujian antibakteri ini tiap konsentrasi bahan coba dilakukan replikasi sebanyak 3 kali untuk mengetahui rata-rata jumlah bakteri yang tumbuh pada ekstrak kulit buah manggis dalam berbagai konsentrasi karena pada konsentrasi yang sama belum tentu jumlah bakteri yang tumbuh juga sama. Penentuan nilai KHM dilihat dari konsentrasi minimal bahan coba yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri setelah diinkubasi 24 jam yang dapat dilihat secara makroskopik dari hasil biakan pada tabung yang mulai tampak keruh dengan menggunakan metode dilusi. Caranya adalah ambil 1 ml suspensi bakteri yang telah dipersiapkan sebelumnya dengan menggunakan mikropipet lalu dimasukkan ke dalam masing-masing tabung bahan coba yang telah diberi label konsentrasi yang berbeda, kemudian divorteks. Lalu tabung-tabung tersebut diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam pada inkubator CO 2 dan diamati kekeruhan yang terjadi dengan membandingkan tabung-tabung tesebut dengan kontrol untuk menentukan nilai KHM dari masing-masing bahan coba. Konsentrasi 100 sangat kental akan secara langsung membunuh bakteri Streptococcus mutans karena tingginya konsentrasi antibakteri yang terkandung di dalamnya. Begitu juga yang terjadi pada konsentrasi 50, 25, 12,5, 6,25, 3,125, 1,56, 0,78, 0,39, 0,195, 0,0975, dan 0,0487 tidak dijumpai pertumbuhan bakteri steril atau 0 CFUml yang artinya pada konsentrasi 100-0,0487 bersifat bakterisid. Kemudian nilai KBM diperoleh dengan metode Drop Plate Mills Mesra dimana bahan coba dengan konsentrasi tersebut masing- masing divorteks dan diambil 50 μl untuk tiap konsentrasi lalu diteteskan ke dalam media padat Mueller Hinton Agar, direplikasi 3 petri, diamkan selama 15-20 menit sampai mengering dan diinkubasi dalam inkubator CO 2 den media padat akan tumbuh menjadi 1 koloni bakteri. Pada penelitian ini didapat nilai KBM yaitu pada konsentrasi 0,0487. Dari data hasil penelitian tidak dapat dilakukan uji statistik dengan ANOVA dan LSD karena nilai perhitungan koloni bakteri pada konsentrasi 100-0,0487 adalah 0 CFUml, yang artinya tidak dijumpai pertumbuhan bakteri dalam media perbenihan atau bakteri yang berkontak dengan bahan coba 100 mengalami kematian.. Hasil penelitian ini juga menunjukkan pada konsentrasi bahan coba 0,02437 terjadi kekeruhan larutan yang menandakan adanya pertumbuhan bakteri, namun nilai bakteri pada konsentrasi ini lebih besar daripada jumlah koloni pada kontrol maka tidak dapat dikatakan sebagai nilai KHM karena tidak mempunyai efek pada bakteri, uji kontrol McFarland juga tidak dapat dilakukan karena kekeruhan pada percobaan ekstrak yang divorteks dengan suspensi bakteri bisa jadi diakibatkan oleh warna keruh dari ekstrak itu sendiri. Pada penelitian Mita Suci Afrilla tahun 2011, ekstrak daun sirih hijau dapat efektif terhadap bakteri S. mutans dengan konsentrasi 20 dan menghambat bakteri tersebut pada konsentrasi 1, dimana daya bunuh minimal ekstrak kulit manggis lebih rendah yakni 0,048, yang juga lebih efektif dalam konsentrasi kecil dibandingkan dengan penelitian Nur Permatasari mengenai efektivitas kulit buah mahkota dewa terhadap bakteri yang sama dengan nilai KBM 9. Ekstrak kulit buah manggis sendiri memiliki angka konsentrasi KBM yang baik dalam efektivitasnya terhadap bakteri S.aureus pada penelitian Dyan Putri yaitu pada angka 3,125, ekstrak kulit buah manggis juga dapat efektif menghambat bakteri S.aureus pada nilai KHM 2 berdasarkan penelitian Poeloengan tahun 2010. Efek antibakteri dari ekstrak kulit buah manggis dikarenakan adanya senyawa aktif yang terkandung di dalamnya yaitu alkaloid, saponin, tanin, dan flavonoid yang berperan dengan mengganggu fungsi membran atau dinding sel bakteri. Ekstrak ini juga memiliki metabolit sekunder yakni xanthone, atau xanthen-9H-ones yang sangat efektif melawan bakteri. 20 Penelitian ini, seperti penelitian sebelumnya, membuktikan bahwa ekstrak kulit buah manggis memiliki efek antibakteri secara in vitro. Hal ini kemungkinan akan berbeda hasilnya dalam saluran akar karena bakteri yang terdapat dalam infeksi saluran akar ialah polimikrobial maka kedepannya perlu dilakukan penelitian lebih lanjut sehingga kulit buah manggis dapat digunakan sebagai bahan medikamen saluran akar secara klinis.

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN

7.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian efek antibakteri ekstrak kulit buah manggis terhadap Streptococcus mutans secara in vitro dapat disimpulkan bahwa ekstrak kulit buah manggis mempunyai efek antibakteri terhadap Streptococcus mutans dengan nilai KBM 0,04875 jumlah koloni 0 CFUml.

7.2 Saran

1. Perlu dilakukan uji fitokimia pada ekstrak kulit buah manggis untuk mengetahui senyawa aktif mana yang memiliki aktivitas antibakteri paling besar. 2. Perlu dilakukan penelitian untuk menguji efek antimikrobial kulit buah manggis terhadap mikroba lain yang patogen dalam saluran akar. 3. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui efek kulit buah manggis secara in vivo sehingga didapat konsentrasi yang dapat digunakan secara klinis dan akhirnya ekstrak kulit buah manggis dapat dikembangkan sebagai bahan alternatif medikamen saluran akar dari bahan alami dalam perawatan endodonti. 4. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan metode cakram untuk mengetahui angka KHM. DAFTAR PUSTAKA 1. Baumgartner J.C, Bakland L.K, Sugita E.I. Chapter 3, Microbiology of Endodontics and Asepsis in Endodontic Practice: Ingle and Backland. Endon 5 th ed, 2002: 63-6, 77-9. 2. El Karim et al. The Antimicrobial Effects of Root Canal Irrigation dan Medication. OOOOE 2007; 103; 560-1, 564-5. 3. Siqueira JF, Rocas IN. Clinical Implications and Microbiology of Bacterial Persistence after Treatment Procedures. JOE 2008, 34. 4. Samaranayake L. Essential Microbiology for Dentistry. Chapter 11, Streptococci, staphylococci and micrococci: Elsevier. 4 th ed, 2012. 5. Batt Carl A, Torotello M.L. Encyclopedia of Food Microbiology second edition. Elsevier 2014 : 536. 6. Hargreaves K M, Cohen S. Cohen’s Pathways of The Pulp Tenth Edition. Mosby Elsevier, 2011: 253-5, 572-9. 7. Aswal D, Beatrice L. Efek Antibakteri Ekstrak Buah Mahkota Dewa Terhadap Enterococcus faecalis Sebagai Bahan Medikamen Saluran Akar Secara In Vitro. J Dent 2010: 15, 32-6. 8. Poeloengan M, Praptiwi. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Manggis Garcinia mangostana Linn. Media Litbang Kesehatan 2010; 20, 65-9. 9. Vishnu P et al. Antimicrobial Activity of Pericarp Extract of Garcinia mangostana Linn. IJPSR 2010; 1, 278-80. 10. Soerono Akbar SM. Endodontologi, kumpulan naskah 1991-2003. Ed ke-1. Jakarta : Hafizh, 2003: 1250-1 11. Siqueria JF. Taxonomic Changes of Bacteria Associated with Endodontic Infections. JOE 2003; 29, 619-22 12. Narayanan L L, Vaishnavi C. Endodontic Microbiology. J Conserv Dent 2010; 14, 233-9. 13. Peciuliene V, Maneliene R, Balcikonyte E, Drukteinis S, Rutkunas V. Microorganisms in Root Canal Infections : a Review. Baltic Dental and Maxillofacial Journal, 10:4, 2008. 14. Shen Y et al. Evaluation of The Effect of Two Chlorhexidine Preparations on Biofilm Bacteria In Vitro: A Three-Dimensional Quantitative Analysis. J Endod 2009; 35, 981. 15. Waltimo T et al. Clinical Efficacy of Treatment Procedures in Endodontic Infection Control and One Year Follow-up of Periapical Healing. JOE 2005; 31; 863. 16. Clinical Update. Endodontic Flare-ups: Incidence, Etiology, Prevention, Diagnosis, and Treatment. Naval Postgraduate Dental School 2009; 31. 17. Pazelli L, Freitas A, Ito I, Souza-Gugelmin M, Medeiros A, Nelson-Filho P. Prevalence of Microorganisms in Root Canals od Human Deciduous Teeth with Necrotic Pulp and Chronic Periapical Lesions. Pediatric Dentistry Journal 2003;174: 367. 18. Harsini, Widjijono. Penggunaan Herbal di Bidang Kedokteran Gigi. Majalah Kedokteran Gigi 2008; 15, 61-4. 19. Kaomongkolgit R, Jamdee K, Chaisomboon N. Antifungal Activity of Alpha- mangostin Against Candida Albicans. J Oral Sci 2009; 51,401-4. 20. Tadtong S, Viriyaroj A, Vorarat S, Nimkulrat S, Suksamrarn S. Antityrosinase and Antibacterial Activities of Mangosteen Pericarp Extract. J Health Res 2009; 99-101. 21. Palakawong C, Sophanodora P, Pisuchpen S, Phongpaichit S. Antioxidant and Antimicrobial Activities of Crude Extracts from Mangosteen Garcinia mangostana L. Parts and Some Essential Oils. International Food Research J 2010; 17, 583-7.