METODE PENELITIAN PEMANFAATAN LIMBAH KULIT BUAH COKELAT SEBAGAI BIOETHANOL.

Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim

BAB III METODE PENELITIAN

III.1 BAHAN III.1.1 Bahan untuk penelitian 1. Aquadest 2. Agar – agar 3. Asam sitrat 4. Ekstrak daging 5. Kulit buah cokelat 6. Kecambah 7. KH 2 PO 4 8. Larutan HCl 37 9. NaOH 10. Pepton 11. Saccharomyces cereviseae III.1.2 Bahan untuk analisa 1. Fenol 2. Ethanol 3. NaHCO 3 4. Na 2 Co 3 5. Na 2 SO 4 6. CuSO 4 . 5 H 2 O 7. Na 2 SO 4 8. NH 4 6 MO 2 O 24 .4 H 2 O 9. H 2 SO 4 10. Na 2 H A SO 4 . 7 H 2 O 11. garam Rochells Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber. Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim III.2 ALAT – ALAT 1. Autoclave 2. Beaker glass 3. Erlenmeyer 4. Exicator 5. Kertas pH 6. Kertas saring 7. Neraca analitik 8. Pengaduk 9. Pemanas 10. Piknometer 11. Pipet tetes 12. Perangkat fermentasi 13. Perangkat distilasi III.3 GAMBAR SUSUNAN ALAT III.3.1 Proses Hidrolisis Keterangan gambar : 1.Pengaduk. 2. Tempat hidrolisis Gamabr 1. Alat Hidrolisis 1 2 Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber. Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim III.3.2 Proses Fermentasi Keterangan gambar : 1. Selang. 2. Botol indikator. 3. Botol fermentasi. 4. Tutup sumbat. Gambar 2. Proses Fermentasi III.3.3 Proses distilasi Keterangan gambar : 1. Kompor. 2. Labu distilasi. 3. Kondensor. 4. Termometer. 5. Penampung distilat. Gambar 3. Alat Distilasi III.4 Peubah 1. Proses Hidrolisis Peubah yang ditetapkan a. Bahan baku yang digunakan = limbah kulit cokelat b. Volume H 2 O = 700 ml c. Suhu = 30 o C d. Waktu Hidrolisa = 1 hari Peubah yang dijalankan a. Berat limbah kulit cokelat = 25, 30, 35, 40, 45 gram b. pH larutan = 1, 2, 3, 4, 5 1 2 3 4 1 2 3 4 5 Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber. Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim

2. Fermentasi Peubah yang ditetapka

a. Suhu = 30 o C b. pH hidrolisis = 4,5 c. Starter = 10 dari volume cairan d. Volume fermentasi = 250 ml Peubah yang dijalankan a. Waktu Fermentasi = 2, 3, 4, 5, 6, 7 hari

3. Distilasi

Suhu 80 o C dan volume bottom yang tertinggal kurang lebih 110 bagian dari fermentasi. III.5 Prosedur Penelitian III.5.1 Hidrolisis 1. Menimbang kulit cokelat sesuai dengan peubah yang telah dijalankan 25, 30, 35, 40, 45 gram. 2. Merendam kulit cokelat ke dalam 700 ml H 2 O dengan menambahkan larutan HCl 37 sesuai dengan pH yang dijalankan dan pada suhu 30 o C selama 1 hari. 3. Menyaring larutan tersebut dan mengambil filtratnya. 4. Menganalisa kadar glukosa pada filtrat hasil hidrolisa dan mencari kondisi terbaik untuk dilakukan fermentasi. III.5.2 Fermentasi 1. Hasil glukosa terbaik yang diperoleh dari proses hidrolisis, yaitu glukosa yang diperoleh dari hidrolisis kulit cokelat sebanyak 25 gr dengan pH 4. 2. Menambahkan NaOH 1N ke dalam filtrat hasil hidrolisa yang akan difermentasi hingga mencapai pH fermentasi yang telah ditetapkan 4,5 . Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber. Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim 3. Memasukkan starter ke dalam larutan tersebut dalam kondisi anaerobik. 4. Menutup rapat botol dan mengamati selama 2 – 7 hari. 5. Kemudian dianalisa kadar ethanol . III.5.3 Prosedur Proses Distilasi Hasil dari fermentasi yang didapat dimasukkan kedalam labu distilasi untuk mendapatkan etanol dari glukosa. Proses distilasi ini dijalankan pada suhu 80 o C selama kurang lebih 2 jam. Kemudian dianalisa kadar bioethanol. Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber. Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim III.6 Diagram Alir Proses Pembuatan Bioethanol Limbah kulit cokelat Diblender Pengeringan alami 2 – 3 hari Oven 100 o C 3 jam Limbah kulit cokelat kering 25,30,35,40,45 gram Hidrolisis 1 hari H 2 O 700 ml + HCl 37 Sampai pada pH 1,2,3,4,5 Filtrasi Padatan Filtrat Uji Glukosa, hasil terbaik pada berat limbah kulit cokelat 20, 30, 45 gram dengan pH 4. Dari hasil hidrolisis limbah kulit cokelat. Ditambahkan As.Sitrat hingga mencapai pH fermentasi yang telah ditetapkan 4,5. Saccharomyces cerevisiae 10 dikali volume cairan Filtrasi Filtrat Padatan Distilasi Analisa Bioethanol Fermentasi 2, 3, 4, 5, 6, 7 hari Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber. Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim III.7 Diagram Proses Fermentasi A. Bagan Pembuatan Nutrient Agar

B. Bagan Pembuatan Media Cair Untuk Pembiakan Kultur

Ekstrak daging 0,6 gram Pepton 1 gram Agar-agar 2,8 gram Aquadest 500 ml dipanaskan Sterilisasi 121 o C, 15 menit Didinginkan Pindahkan dalam tabung reaksi Dikerjakan dalam ruang steril Media dalam tabung siap ditanami Ekstrak daging 0,3 gram Pepton 0,5 gram NaCl 0,5 gram Aquadest 100 ml dipanaskan Sterilisasi 121 o C, 30 menit Didinginkan Media siap ditanami Di goyang atau di shaker asam sitrat pH 4,5, saring Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber. Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim

C. Bagan Pembuatan Media Cair Untuk Kurva Pertumbuhan

Kecambah pendek 15 gram ditumbuk kasar Aquadest 500 ml, direbus Ditambahkan gula 25 gram dan KH 2 PO 4 5 gram Didihkan 30 menit, lalu disaring Asam sitrat dibuat pH 4,5 Disterilkan 121 o C, 15 menit Diinkubasi 48 jam Setiap 2 jam diambil sampel Saccharomyces Cereviceae 50 ml Dianalisa sel kering Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber. Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN