Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
BAB III METODE PENELITIAN
III.1 BAHAN III.1.1 Bahan untuk penelitian
1. Aquadest
2. Agar – agar
3. Asam sitrat
4. Ekstrak daging
5. Kulit buah cokelat
6. Kecambah
7. KH
2
PO
4
8. Larutan HCl 37
9. NaOH
10. Pepton
11. Saccharomyces cereviseae
III.1.2 Bahan untuk analisa
1. Fenol
2. Ethanol
3. NaHCO
3
4. Na
2
Co
3
5. Na
2
SO
4
6. CuSO
4
.
5
H
2
O 7.
Na
2
SO
4
8. NH
4 6
MO
2
O
24
.4 H
2
O 9.
H
2
SO
4
10. Na
2
H A SO
4
. 7 H
2
O 11.
garam Rochells
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
III.2 ALAT – ALAT
1. Autoclave
2. Beaker glass
3. Erlenmeyer
4. Exicator
5. Kertas pH
6. Kertas saring
7. Neraca analitik
8. Pengaduk
9. Pemanas
10. Piknometer
11. Pipet tetes
12. Perangkat fermentasi
13. Perangkat distilasi
III.3 GAMBAR SUSUNAN ALAT III.3.1 Proses Hidrolisis
Keterangan gambar
: 1.Pengaduk.
2. Tempat hidrolisis
Gamabr 1. Alat Hidrolisis 1
2
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
III.3.2 Proses Fermentasi
Keterangan gambar
: 1.
Selang. 2. Botol indikator.
3. Botol fermentasi. 4. Tutup sumbat.
Gambar 2. Proses Fermentasi
III.3.3 Proses distilasi
Keterangan gambar : 1.
Kompor. 2. Labu distilasi.
3. Kondensor.
4. Termometer.
5. Penampung distilat.
Gambar 3. Alat Distilasi
III.4 Peubah 1.
Proses Hidrolisis Peubah yang ditetapkan
a. Bahan baku yang digunakan
= limbah kulit cokelat b.
Volume H
2
O = 700 ml
c. Suhu
= 30
o
C d.
Waktu Hidrolisa = 1 hari
Peubah yang dijalankan
a. Berat limbah kulit cokelat = 25, 30, 35, 40, 45 gram
b. pH larutan = 1, 2, 3, 4, 5 1
2 3
4
1 2
3 4
5
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
2. Fermentasi Peubah yang ditetapka
a. Suhu
= 30
o
C b.
pH hidrolisis = 4,5
c. Starter
= 10 dari volume cairan d.
Volume fermentasi = 250 ml
Peubah yang dijalankan
a. Waktu Fermentasi = 2, 3, 4, 5, 6, 7 hari
3. Distilasi
Suhu 80
o
C dan volume bottom yang tertinggal kurang lebih 110 bagian dari fermentasi.
III.5 Prosedur Penelitian III.5.1 Hidrolisis
1. Menimbang kulit cokelat sesuai dengan peubah yang telah
dijalankan 25, 30, 35, 40, 45 gram. 2.
Merendam kulit cokelat ke dalam 700 ml H
2
O dengan menambahkan larutan HCl 37 sesuai dengan pH yang dijalankan
dan pada suhu 30
o
C selama 1 hari. 3. Menyaring larutan tersebut dan mengambil filtratnya.
4. Menganalisa kadar glukosa pada filtrat hasil hidrolisa dan mencari kondisi terbaik untuk dilakukan fermentasi.
III.5.2 Fermentasi
1. Hasil glukosa terbaik yang diperoleh dari proses hidrolisis, yaitu glukosa yang diperoleh dari hidrolisis kulit cokelat sebanyak 25 gr
dengan pH 4. 2. Menambahkan NaOH 1N ke dalam filtrat hasil hidrolisa yang
akan difermentasi hingga mencapai pH fermentasi yang telah ditetapkan 4,5 .
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
3. Memasukkan starter ke dalam larutan tersebut dalam kondisi anaerobik.
4. Menutup rapat botol dan mengamati selama 2 – 7 hari. 5. Kemudian dianalisa kadar ethanol
.
III.5.3 Prosedur Proses Distilasi
Hasil dari fermentasi yang didapat dimasukkan kedalam labu distilasi untuk mendapatkan etanol dari glukosa. Proses
distilasi ini dijalankan pada suhu 80
o
C selama kurang lebih 2 jam. Kemudian dianalisa kadar bioethanol.
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
III.6 Diagram Alir Proses Pembuatan Bioethanol
Limbah kulit
cokelat
Diblender Pengeringan alami
2 – 3 hari
Oven 100
o
C 3 jam
Limbah kulit cokelat kering 25,30,35,40,45 gram
Hidrolisis 1 hari H
2
O 700 ml + HCl 37 Sampai pada pH 1,2,3,4,5
Filtrasi Padatan
Filtrat Uji Glukosa, hasil terbaik pada
berat limbah kulit cokelat 20, 30, 45 gram dengan pH 4. Dari hasil
hidrolisis limbah kulit cokelat.
Ditambahkan As.Sitrat hingga mencapai pH fermentasi yang
telah ditetapkan 4,5. Saccharomyces cerevisiae
10 dikali volume cairan
Filtrasi
Filtrat Padatan
Distilasi
Analisa Bioethanol Fermentasi
2, 3, 4, 5, 6, 7 hari
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
III.7 Diagram Proses Fermentasi A.
Bagan Pembuatan Nutrient Agar
B. Bagan Pembuatan Media Cair Untuk Pembiakan Kultur
Ekstrak daging 0,6 gram Pepton 1 gram
Agar-agar 2,8 gram
Aquadest 500 ml dipanaskan
Sterilisasi 121
o
C, 15 menit Didinginkan
Pindahkan dalam tabung reaksi Dikerjakan dalam ruang steril
Media dalam tabung siap ditanami
Ekstrak daging 0,3 gram Pepton 0,5 gram
NaCl 0,5 gram
Aquadest 100 ml dipanaskan
Sterilisasi 121
o
C, 30 menit Didinginkan
Media siap ditanami
Di goyang atau di shaker asam sitrat pH 4,5, saring
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
C. Bagan Pembuatan Media Cair Untuk Kurva Pertumbuhan
Kecambah pendek 15 gram ditumbuk kasar
Aquadest 500 ml, direbus
Ditambahkan gula 25 gram dan KH
2
PO
4
5 gram
Didihkan 30 menit, lalu disaring Asam sitrat dibuat pH 4,5
Disterilkan 121
o
C, 15 menit
Diinkubasi 48 jam Setiap 2 jam diambil sampel
Saccharomyces Cereviceae 50 ml
Dianalisa sel kering
Hak Cipta © milik UPN Veteran Jatim : Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.
Program Studi S - 1 Teknik Kimia Fakultas Teknologi Industri - UPN “Veteran” Jatim
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN