© 2003 Digit ized by USU digit al libr ar y
3
Dengan bany ak ny a k asus m alar ia, m ak a k ebut uhan ak an suat u m et oda unt uk m enegak k an diagnosis peny ak it m alar ia y ang sifat ny a sensit if dan m enduk ung
gej ala - gej ala k linis sangat lah per lu.
4
Di Thailand pada t ahun 1971 m endiagnosis m alar ia secar a sim t om at ik seh in gga t er j adi diagn osis y an g m en in gk at .
1 1
Oleh karena it u diagn osis dini diper luk an unt uk m enur unk an angk a k esak it an dan k em at ian.
3
Biasany a diagnosis m alar ia dit egak k an dengan m et oda k onv ensional m em ak ai per w ar n aan Giem sa pada apu san dar ah dan pem er ik saan di baw ah sin ar m ik r osk op,
pem er ik saan ini sam pai saat ini m asih m er u pak an gold st andar d . Nam u n pem er ik saan ini m asih t er dapat beber apa k endala dan k et er bat asan. Sebagai
k onsek w ensiny a diper luk an pengem bangan ber bagai m et oda alt er nat if.
4
1 .2 . PERU M U SAN M ASALAH
Ber dasar k an lat ar belak an g t er sebu t diat as, dim an a Madin a m er u pakan daer ah m alar ia dengan pr ev alensi t er t inggi di Sum at er a Ut ar a, m ak a k ebut uhan
ak an suat u m et oda unt uk diagnosis m alar ia y ang sifat ny a m udah, cepat dan sensit iv e sangat lah diper luk an. Sam pai saat ini Met oda Giem sa m er upak an gold
st andar d. Kelebih an dar i met oda Giem sa ini adalah biay a r elat if m ur ah. Mesk ipun dem ik ian m asih t er dapat k endala y ait u m em er luk an t enaga labor at or ium y ang
t er lat ih dan hasil diper oleh dalam w ak t u y ang lebih lam a t im e con su m in g .
4
Unt uk m engat asi k elem ahan ini Par r a dan k aw an- k aw an
1991 m em per k enalk an I m m u n och r om at ogr aph ic t est I CT unt uk m endet ek si P. falcipar um t r ophozoit e
hist idine r ich pr ot ein - I I Pf HRP- I I . Uj i ini lebih cepat dilak uk an dan t idak m em but uhk an per alat an labor at or ium dan pr ak t is dipak ai di lapangan.
1 2
I CT ini h argan y a Rp. 2 0 . 0 0 0
1 .3 . H I POTESI S
Tidak ada per bedaan sensit ifit as dan spesifisit as ant ar a pem er ik saan I CT dengan pew ar naan Giem sa.
1 .4 . TU JU AN PEN ELI TI AN
Unt uk m enget ahui sensit ifit as dan spesifisit as uj i t er sebut t er hadap infek si P.falcipar um
1 .5 . M AN FAAT PEN ELI TI AN
Pen elit ian in i dih ar apk an ber m an f aat sebagai alat diagn ost ik alt er n at if dalam m enegak k an diagnosis peny ak it m alar ia falcipar um secar a cepat dengan m et oda
seder hana.
BAB I I TI N JAU AN PU STAKA
Diagnosis m alar ia dapat dilak uk an secar a m ik r osk opis dan non mik r osk opis. Uj i m ik r osk opis dapat dilihat secar a langsung di baw ah m ik r osk op, seper t i
pem er ik saan dar ah t epi, Quant it at iv e Buffy Coat QBS , Acr idine or ange AO . Sedangk an uj i non m ik r osk opis ber guna unt uk m engident ifik asi pada ant igen par asit
at au ant ib odi ant iplasm odial at au pr oduk si m et abolik par asit , seper t i uj i Poly m er ase Chain React ion, Det ect ion of ant ibodies by Radio I m m uno Assay , I ndir ect
Hem aglut inat ion, Deox y r ibonucleic acid dan Rapid Manual Test .
13
I m m unochr om at ogr aphic t est I CT m er upak an salah sat u car a pem er ik saan r apid m anual t est . Uj i I CT ini ber dasar k an k epada det ek si ant igen y ang dik eluar k an
oleh par asit m alar ia, y an g spesifik t er h adap Plasm odium falcipar um Hist idine Rich
© 2003 Digit ized by USU digit al libr ar y
4
Pr ot ein I I PfHRP I I dapat m elisisk an dar ah dengan m enggunak an m et oda im m u n och r om at ogr aph ic.
11
Pada P. falcipar um sem ua um ur sel dar ah m er ah t er infek si. Sel dar ah m er ah m er upak an bagian ut am a dalam infek si m alar ia, sem ua
m anifest asi k linik m ulany a m elibat k an per ubahan- per ubahan dar i sel dar ah m er ah. Par asit y an g sedan g ber k em ban g m em ak an dan m en gh an cu r k an pr ot ein in t r asel,
t er ut am a hem oglobin, sehingga fungsi t r anspor t dar i sel m er ah t er ganggu, m uncul ant igen per m uk aan y ang ber bent uk k r ipt a, sehingga sel dar ah m er ah m enj adi
lonj ong dan t idak elast ik lagi. Pada infek si P.falcipar um penonj olan m em br an m uncul pada per m uk aan er it r osit dalam 24 j am k edua dar i sik lus asek sual. Pada sel
dar ah m er ah t er bent uk k nob y ang halus pada per m uk aan m em br an y ang disebabk an oleh Pf Er y t hr ocy t e Mem br ane Pr ot ein I . Dengan m eningk at ny a densit as elek t r on,
pr ot ein par asit y an g k ay a hist idine dij um pai di baw ah k nob ini. Knob m er upak an suat u r angk aian spesifik , j enis pr ot ein y ang adhesif dengan ber at m olek ul y ang
t inggi dim ana k nob m enghubungk an sel dar ah m er ah dengan r esept or- r esept or pada lapisan endot helium v ena dan k apiler , y ang m eny ebabk an Cy t oadh er en ce. P.
falcipar um m enginfek si sel dar ah m er ah j uga m enar ik sel dar ah y ang t idak t er infek si m enj adi bent uk r osset e r ose . Cy t oadh er en ce dan bent uk r osset e ini m er upak an
pat ogenesis ut am a dar i infek si m alar ia P. falcipar u m , m enghasilk an bent uk agr egasi dar i sel dar ah m er ah dan penum puk an sel dar ah m er ah int r av ask uler dalam or gan-
or gan v it al seper t i dalam ot ak dan hat i.
1 3
Er it r osit y ang t er infek si P. falcipar um m en sin t esa beber apa h ist idin e r ich pr ot ein dan m enim bulk an hist idine y ang t inggi,
t et api k adar asam am ino y ang r endah seper t i H3 isoleucin at au S3 5 m et ionin. Sint esa PfHRP I I dim ulai dengan par asit - par asit y ang ber bent uk cincin dan ber lanj ut
hingga st adium t r ofozoit .
1 4
Adapaun sik lus hidup Plasm odia adalah sebagai ber ik u t : Dalam daur hidupny a Plasm odium m em puny ai dua hospes, y ait u v er t ebr at a
dan ny am uk . Sik lus sek sual di dalam hospes v et ebr at a dik enal sebagai sk izogoni, dan sik lus sek sual y ang m em bent uk spor ozoit di dalam ny am uk sebagai spor ogon i.
Spor ozoit infek t if dar i k elenj ar ludah ny am uk anopheles, m asuk k e dalam alir an dar ah hospes v er t ebr at a m elalui t usuk an ny am uk it u, j asad y ang langsing dan lincah
ini dalam k ur un w ak t u 30 m enit m em asuk i sel par enk im hat i, m elalui st adium ek soer it r osit ik dar i pada daur hidupny a. Didalam sel hat i par asit t um buh m enj adi
sk izon. Sebagain par asit t et ap t idak t um buh dan m engalam i m asa t idur dor m ant di dalam sel hat i y ang disebut hipnozoit . Sew ak t u- w ak t u hipnozoit ini m enj adi ak t if dan
ber k em ban g m en j adi sk izon dan m em bent uk m er ezoit . Pem belahan ini dar i sk izon, m enghasilk an 15. 000 sam pai 40. 000 m er ezoit di dalam sel, dalam w ak t u 6 sam pai 9
har i, t er gant ung pada spesies m alar ia. Sel hat i y ang m engandung par asit pecah, m er ezoit k eluar dengan bebas, sebagian besar difagosit osis. Oleh k ar ena pr oses ini
t er j adi sebelum sel dar ah m er ah diinfek si, m ak a lebih t epat disebut st adium pr aer it r osit ik dar i pada ek soer it r osit ik .
1,15
Pada P. falcipar um h an y a ber lan gsu n g sat u sik lu s ek soer it r osit ik , sedan gk an spesies la in n y a y an g m em pu n y ai h ipn ozoit dapat m elan j u t k an sik lu s in i sam pai
ber t ahun- t ahun lam any a, sehingga r elaps dapat t er j adi set elah beber apa bulan sam pai beber apa t ahun. Sik lus er it r osit ik dim ulai pada w ak t u m er ozoit hat i
m em asuk i sel dar ah m er ah. Par asit m ulai t am pak sebagai k r om at in k ecil, dik elilingi oleh sedik it sit oplasm a y ang m em puny ai bent uk cincin, y ait u t r ofozoit . Pada t r ofozoit
y ang sedang t um buh sit oplasm a m em besar , bent uk ny a m enj adi t idak t er at ur dan m ulai m em bent uk pigm en. Tr ofozoit t um buh m enj adi sk izon m uda, k em udian
m enj adi sk izon m at ang dan m em belah m enj adi bany ak m er ozoit . Dengan selesainy a pem belahan t er sebut sel dar ah m er ah m em ecah dan m er ozoit , pigm en dan sisa sel
k eluar ser t a m asuk k e dalam plasm a dar ah.
1,15
Ada t iga HRP y an g dibu at oleh P. falcipar um pada st asium dar ah, disini dinot asik an sebagai PfHRP I , I I dan I I I ber dasar k an ur ut an penem uanny a.
1 4 , 1 6
PfHRP
© 2003 Digit ized by USU digit al libr ar y
5
I secar a fenot ip t er k ait dengan ek spr esi t onj olan y ang m ir ip k nob pada m em br an per m uk aan er it r osit y ang t er infek si. PfHRP I t am pak ny a t er k ait dengan m em br an sel
dar ah m er ah, k hususny a sit osk let on dan hany a m em puny ai k nob posit if. PfHRP I I diek spr esik an secar a k nob posit if m aupun k nob negat if pada sel dar ah m er ah.
Rangk aian DNA t elah m em buk t ik an bahw a PfHRP I I m engandung 35 hist idin dan j uga k andungan alanin dan aspar t at y ang r elat if t inggi m asing- m asing 40 dan 12
PfHRP I I I dengan r angk aian k lon DNA m engandung 30 hist idin dan 29 alanin.14
Penem uan How ar d ant ibodi m onok lonal 8 7 ber eak si secar a spesifik dengan PfHRP I I dan ini sangat ber beda dengan HRP I dan HRP I I I .
14
Uj i I CT ini um um ny a digunak an dalam bent uk uj i st r ip y ang m engandung ant ibodi m onok lonal y ang ber langsung pada ant igen par asit . Pem er ik saan ser ologi
r apid im unok r om at ologr afi pr insipny a adalah det ek si ant igen ber dasar k an r eak si k om plek s ant igen- ant ibodi pada bahan n it r oselu lose acet at dim ana kom pleks
t er sebut diber i m ar k a m onok lonal ant ibodi Mab y ang ber label zat w ar na colloidal gold sebagai penanda, sedangk an ant igen non spesifik lainny a dipisahk an, sehingga
m u n cul suat u t anda y ang m eny at ak an hasil posit if negat if.
17
Uj i I CT dapat m endet ek si P. falcipar um dan non falcipar um , t et api t idak dapat m em bedak an ant ar a P. v iv ax , P. ov ale dan P. Malar iae, m au pu n m em bedak an in fek si
falcipar um m ur ni dar i infek si cam pur an y ang ter m asuk P. Falcipar um .
1 1
Uj i I CT m er upak an uj i y ang lebih cepat , m udah dilak uk an dan t idak m em er luk an labor at or ium k husus, seper t i sent r ifus, dan m ik r osk op. Uj i ini lebih
pr ak t is digunak an di lapangan. Diagnosis y ang cepat dan ak ur at adalah k unci penanganan y ang efek t if unt uk m engat asi peny ak it m alar ia.
1 2
Selain I CT ada beber apa car a lain y ang ber dasar k an hist idine r ich pr ot ein I I y ait u : Par aSight - F, Par ach eck . Selain it u sudah dik em bangk an pula uj i Plasm odium
Lact at e Dehy dr ogenase pLDH . Test ini ber da sar k an det ek si enzim gly colit ic solu ble y ang dik eluar k an oleh par asit dengan k adar y ang t inggi dalam dar ah.
1 3
Hingga saat ini diagnosis m alar ia dilak uk an dengan car a k onv ensional y ait u den gan m em bu at sediaan dar ah t ebal dan t ipis y an g dipu las den gan pew arn aan
Giem sa dan diper ik sa di baw ah m ik r osk op cahay a. Hasil pem er ik saan negat if t idak selalu ber ar t i t idak m engidap peny ak it m alar ia, k hususny a pada or ang- or ang y ang
m endapat pengobat an ant i m alar ia at aupun m er ek a y ang t inggal di daer ah hipoendem is. Sediaan dar ah t ebal ber guna unt uk m engk onsent r asik an par asit di
dalam bidang sediaan, j adi unt uk m enegak k an diagnosis m alar ia har us m enggunak an sediaan dar ah t ebal. Sediaan dar ah t ipis ber guna unt uk m elihat
m or fologi par asit sek aligus m enent uk an spesies par asit .
1 8
Kelebihan dar i pew ar naan Giem sa ini adalah biay a r elat if m ur ah. Mesk ipun dem ik ian m asih t er dapat beber apa k endala dan k et er bat asan, dengan t enaga
labor at or ium y ang ber pengalam an sek alipun, m em ak an w ak t u dan m em but uhk an upay a y ang int ensif, t er ut am a bila par asit sedik it at au t idak dij um pai di dalam dar ah
pada saat pem er ik saan.
4 , 1 8
Dalam kasus- k asus dengan infek si cam pur an P.v iv ax dan P.falcipar um , sulit m em buat diagnosis y ang benar bila P.v iv ax hany a m uncul st adium cincin at au bila
per sent ase sel dar ah m er ah t er infek si P.falcipar um san gat sedik it .
1 9
© 2003 Digit ized by USU digit al libr ar y
6
BAB I I I M ETOD OLOGI PEN ELI TI AN
