Kesimpulan Saran KESIMPULAN DAN SARAN

58

5. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Mesophilobacter sp. mampu hidup dan tumbuh dengan baik pada suhu 25 o C, 30 o C dan 35 o C, tetapi pembentukan pigmen terbaik adalah suhu 30 o C. Pada suhu 30 o Glukosa merupakan sumber karbon yang terbaik bagi pertumbuhan Mesophilobacter sp. Pigmen yang dihasilkan adalah pigmen ekstraseluler dengan warna hijau tua yang berubah menjadi merah setelah sembilan hari. Pada panjang gelombang 232 nm sumber karbon yang memberikan rata-rata konsentrasi pigmen tertinggi adalah media kompleks. Pada λ 258 nm, sumber karbon yang terbaik dalam pembentukan pigmen adalah maltosa, sedangkan pada λ 312 nm, 368 nm dan 658 nm adalah glukosa. C, pH optimum dalam pembentukan pigmen adalah pH 9. Pigmen yang diperoleh adalah pigmen intraseluler dengan warna oranye. Mesophilobacter sp. juga mampu hidup dan tumbuh dengan baik pada kisaran salinitas dari 0 permil sampai 40 permil, namun pembentukan pigmen terbaik terjadi pada salinitas 10 permil. Pigmen yang diperoleh adalah pigmen ekstraseluler dengan warna merah. Pada percobaan sumber nitrogen, ekstrak khamir merupakan penunjang utama baik dalam pertumbuhan sel maupun dalam pembentukan pigmen. Warna akhir pigmen yang dihasilkan pada akhir pengamatan dari ekstrak khamir adalah hijau tua yang mempunyai absorban maksimum pada panjang gelombang 232 nm, 258 nm, 312 nm, 368 nm dan 658 nm.

5.2 Saran

Berdasarkan hasil yang diperoleh pada penelitian ini, disarankan untuk melakukan penelitian lanjut mengenai pigmen yang dihasilkan antara lain karakter dari pigmen yang bersangkutan, yang meliputi stabilitas pigmen, toksisitas pigmen dan stabilitas kimia pigmen. 60 DAFTAR PUSTAKA Atlas RM. 1984. Microbiology. Fundamentals and applications. New York: Macmillan. 879 hal. Austin B. 1988. Marine microbiology. Cambridge: Cambridge Univ Pr. 222 hal. Bauernfeind JC. 1981. Natural food colors. In: Bauernfeind JC, editor. Carotenoids as Colorants and Vitamin a Precursors. Technological and nutritional applications. New York: Avi Publishing. hlm 1-45. Bergey DH, Holt JG. 1994. Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology. Ed ke-9. Baltimore: Williams Wilkins. hlm 87. Blanch HW, Clark DS. 1994. Biochemical Engineering. Marcel Dekker. 702 hlm. Blanc PJ et al. 1994. Pigment of Monascus. J Food Sci 594:862-865. Chen MH, Johns MR. 1994. Effect of carbon source on ethanol and pigment production by Monascus purpureus. Enzyme Microb Technol 16:584-590. Evans PJ, Wang H. 1984. Pigment production from immobilized Monascus sp. utilising polymeric resin adsorption. Appl Environ Microbiol 47:1323-1326. Fabre CE et al. 1993. Production and food applications of the red pigments of Monascus ruber. J Food Sci 585:1099-1102. Fang TJ, Cheng YS. 1993. Improvement of astaxanthin production by Phaffia rhodozyma through mutation and optimization of culture conditions. J Ferment Bioeng 756:466-469. Fardiaz, S. 1992. Mikrobiologi Pangan 1. Gramedia Pustaka Utama. 307 hal. Fardiaz, S, Rini PS. 1994. Produksi pigmen Rhodotorula glutinis di dalam medium limbah cair tapioka. Bul TIP. Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi, Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor. 52:9-14. Fenical W, Jensen PR. 1993. Marine Microorganisms : a new biomedical resource. In: Attaway DH, Zaborsky OR, editor. Marine Biotechnology. Vol ke-1. Pharmaceutical and Bioactive Natural Products. New York: Plenum Pr. hlm 419-457. Goodwin TW, Land DG, Osman HG. 1955. Studies in carotenogenesis. Carotenoid synthesis in the photosynthetic bacterium Rhodopseudomonas spheroides. Biochem 59:491-496. 61 Grimont PAD, Grimont F. 1984. Genus VIII. Serratia bizio 1823, 288. In: Krieg NR, editor. Bergey’s manual of systematic bacteriology. Vol ke-1. Baltimore: Williams Wilkins. hlm 477-484. Hanagata N et al. 1993. Behavior of cell aggregate of Carthamus tinctorius L. cultured cells and correlation with red pigment formation. J Biotechnol 30:259-269. Hendry GAF. 1992. Natural Pigments in Biology. In: Hendry GAF, Houghton JD, editor. Natural Food Colorants. New York: Avi Published. hlm 1-38. Henry BS. 1992. Natural Food Colours. In: Hendry GAF, Houghton JD, editor. Natural Food Colorants. New York: Avi Published. hlm 39-78. Jenie BSL, Helianti, Fardiaz S. 1994. Pemanfaatan ampas tahu, onggok dan dedak untuk produksi pigmen merah oleh Monascus purpureus. Bul TIP. Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor. 52:22-29. Jenkins RO. 1992. The Estimation of Biomass. In: Cartledge TG, editor. In Vitro Cultivation of Microorganisms. Oxford: Butterworth – Heinemann. hlm 53- 77. Johnson EA, Lewis MJ. 1979. Astaxanthin formation by the yeast Phaffia rhodozyma. J Gen Microbiol 115:173-183. Juzlova P, Martinkova L, Lozinski J, Machek F. 1994. Ethanol as substrate for pigment production by the fungus Monascus purpureus. Enzyme Microb Technol 16:997-1001. Koopmans, LH. 1996. Pengantar ke Statistika Kontemporer. Buku Ke-2. Bambang Sumantri, penerjemah. University of New Mexico. 327 hlm. Lin TF, Demain AL. 1991. Effect of nutrition of Monascus sp. on formation of red pigments. Appl Microbiol and Biotechnol 36:70-75. Lin TF, Demain AL. 1993. Resting cell studies on formation of water-soluble red pigments by Monascus sp. J Ind Microbiol 12:361-367. Lin TF, Demain AL. 1994. Leucine interference in the production of water- soluble red Monascus pigments. Arch Microbiol 162:114-119. Middelbeek EJ, Drijver JS - de Haas. 1992. Environmental Factors Influencing Growth. In: Cartledge TG, editor. In Vitro Cultivation of Microorganisms. Oxford: Butterworth - Heinemann. hlm 145-175. 62 Middelbeek EJ, Jenkins RO, Drijver JS - de Haas. 1992 a . Growth in Batch Culture. In: Cartledge TG, editor. In VitroCcultivation of Microorganisms. Oxford: Butterworth - Heinemann. hlm 79-106. Middelbeek EJ, Jenkins RO, Drijver JS- de Haas. 1992 b . Nutrition and Cultivation of Microorganisms. In: Cartledge TG, editor. In Vitro Cultivation of Microorganisms. Oxford: Butterworth - Heinemann. hlm 21-51. Mitchell C, Iyer S, Skommuski JF, Vary JC. 1986. Red pigment in Bacillus megaterium spores. App Env Microbiol 521:64-67. Nelis HJ, De Leenheer AP. 1991. Microbial sources of carotenoid pigments used in foods and feeds. J Appl Microbiol 70:181-191. Pelczar, Chan. 1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi I. Jakarta: UI Pr. hlm 131-156. Sa’id EG. 1987. Bioindustri. Penerapan Teknologi Fermentasi. Jakarta: Penerbit PT Mediyatama Sarana Perkasa. 317 hlm. Schlegel HG, Schmidt K. 1994. Mikrobiologi Umum. Baskoro T, penerjemah. Yogyakarta: Gadjah Mada Univesity Pr 6:202-245. Sikyta B. 1983. Method of Industrial Microbiology. Ells Harwood. Sokatch, J.R. 1973. Bacterial Physiology and Metabolism. London: Academic Pr. hlm: 3-9. Sutherland IW. 1990. Biotechnology of Microbial Exopolysaccharides. Cambridge Studies in Biotechnology 9. Cambridge: Cambridge University Pr. 163 hlm. Tanabe, Kuriyama M, Nonomura H. 1995. Production of C 2 – symmetrical phenazines by some Actinomycetes. J Ferment Bioeng 794:384-386. Taya M, Yakura K, Kino-oka M, Tone S. 1994. Influence of medium constituens on enhancement of pigment production by batch culture of red beet hairy roots. J Ferment Bioeng 77:215-217. Taya M, Mine K, Kino-oka M, Tone S, Ichi T. 1992. Production and release of pigments by culture of transformed hairy root of red beet. J Ferment Bioeng 31:31-36. Tortora GJ, Funke BR, Case CL. 1989. Microbiology. An Introduction. California: The BenjaminCummings. 810 hlm. 63 Urakami T, Yoshida T. 1993. Production of ubiquinone and bacteriochlorophyll a by Rhodobacter sphaeroides and Rhodobacter sulfidophilus. J Ferment Bioeng 763:191-194. Vining LC. 1986. Secondary Metabolism. In:. Rehm H-J, Reed-Weinheim G, editor. Biotechnology. Volume 4: Microbial Products II. Deerfield Beach, FL. VCH. hlm 19-38. Volk WA, Wheeler MF. 1984. Basic Microbiology. Ed ke-5. Harper and Row. Winarno FG. 1992. Kimia Pangan dan Gizi. Cetakan ke-6. Jakarta: PT Gramedia. hlm 171-200. Yanagimoto M, Matsumoto K, Mori K. 1988. IM2. A New inducer of blue pigment production in Streptomyces sp. MAFF 10 – 06015. J Ferment Technol 661:1-6. Yoshimura M, Yamanaka S, Mitsugi K, Hirose Y. Production of Monascus pigments in submerged shaken culture. Agr Biol Chem 39:1789-1795. Zilinkas RA, Lundin CG. 1993. Marine Biotechnology and Developing Countries. World Bank Discussion Papers. Washington DC: The World Bank. 115 hlm. Lampiran 1. Hasil identifikasi bakteri Hasil identifikasi dari sampel bakteri yang diuji adalah sebagai berikut: bakteri Gram- negatif yang berbentuk kokus, non motil, katalase positif, oksidase negatif, uji Indol positif, tidak membentuk H 2 Percobaan dari pertumbuhan bakteri diperoleh hasil bahwa suhu optimum bakteri adalah 30 S, nitrat direduksi menjadi nitrit, asam tetapi tidak menghasilkan gas dari glukosa dan fruktosa. o C, dapat tumbuh pada kisaran pH 5 sampai pH 9, dapat tumbuh pada kisaran NaCl dari 0 sampai 40 permil. Tabel 14. Karakterisasi bakteri yang diisolasi dari air laut dan karakterisasi dari Mesophilobacter sp. Karakteristik Bakteri sampel Mesophilobacter sp. 1. Pewarnaan Gram 2. Bentuk 3. Motilitas 4. Uji Katalase 5. Uji Oksidase 6. Uji Indol 7. Uji H 2 8. Uji Reduksi Nitrat S 9. Uji Fermentasi Karbohidrat; Pembentukan gas dari: - Glukosa - Laktosa - Fruktosa - Sukrosa 10. Optimum temperature 11. pH medium pertumbuhan 12. NaCl medium pertumbuhan Gram-negatif Kokus Non motil Positif Negatif Positif Negatif Positif Positif Negatif - Negatif - 30 o 9,0 C 0 – 40 permil Gram-negatif Kokus Non motil Positif Negatif Positif Negatif Positif Positif Negatif Positif Negatif Positif 33 – 37 o 6,0 – 8,0 C 7 Hasil karakterisasi yang diperoleh dibandingkaan dengan karakterisasi dari Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology – 9 seperti yang tertera pada Tabel 14. Dari hasil tersebut, dapat dilihat bahwa sampel bakteri memiliki beberapa karakter yang sama dengan karakter dari Mesophilobacter sp. Oleh sebab itu, untuk sementara diduga kuat bahwa sampel bakteri tersebut Mesophilobacter sp. Lampiran 2 Konsentrasi sel dan pigmen pada masing-masing perlakuan faktor fisika dengan OD 540 nm Jam Perlakuan Suhu Perlakuan pH 25 o 30 C, pH 7 o 35 C, pH 7 o 30 C, pH 7 o 30 C, pH 5 o 30 C, pH 7 o

C, pH 9

Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm sel Pigmen sel Pigmen sel Pigmen sel Pigmen sel Pigmen sel Pigmen 540 463 540 463 540 463 540 540 463 540 463 0.060 0.060 0.040 0.050 0.060 0.045 3 0.110 0.016 0.170 0.016 0.180 0.017 0.050 - 0.170 0.016 0.210 0.024 6 0.082 0.016 0.250 0.017 0.240 0.017 0.042 - 0.250 0.017 0.560 0.042 9 0.080 0.016 0.290 0.028 0.260 0.020 0.050 - 0.290 0.028 0.700 0.067 12 0.230 0.028 0.600 0.039 0.340 0.022 0.050 - 0.600 0.039 0.950 0.071 15 - 18 0.470 0.036 1.000 0.078 0.470 0.020 0.050 - 1.000 0.044 1.150 0.094 24 0.750 0.045 1.470 0.100 0.560 0.019 0.050 - 1.470 0.100 1.620 0.110 30 1.050 0.090 1.500 0.108 0.880 0.022 0.050 - 1.500 0.102 1.740 0.125 48 1.860 0.090 1.480 0.120 1.500 0.035 0.050 - 1.350 0.098 1.740 0.130 72 1.860 0.094 1.480 0.122 1.750 0.080 1.500 - 1.170 0.106 1.620 0.129 96 1.770 0.113 1.400 0.127 1.750 0.078 3.000 - 1.140 0.108 1.560 0.130 120 1.560 0.130 1.360 0.124 1.650 0.075 2.550 - 1.050 0.104 1.440 0.138 144 1.560 0.131 1.300 0.125 1.350 0.080 2.580 - 1.080 0.100 1.470 0.142 168 1.020 0.123 1.200 0.120 1.300 0.078 2.250 1.200 0.103 1.300 0.139 Lampiran 2 lanjutan Jam Perlakuan Cahaya Wm -2 4700 -4700 12500 -12500 Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm sel Pigmen sel Pigmen sel Pigmen sel Pigmen 540 232 258 463 540 232 258 463 540 232 258 463 540 232 258 463 0.030 0.030 0.030 0.030 3 0.160 0.563 0.307 0.050 0.160 0.343 0.203 0.005 0.160 0.378 0.198 0.010 0.160 0.322 0.201 0.008 6 0.420 0.537 0.302 0.015 0.420 0.319 0.250 0.011 0.480 0.439 0.230 0.022 0.480 0.354 0.233 0.014 9 0.800 0.295 0.285 0.023 0.800 0.373 0.275 0.021 0.760 0.481 0.322 0.029 0.760 0.396 0.263 0.018 12 1.100 0.355 0.373 0.029 1.100 0.304 0.411 0.023 0.800 0.489 0.346 0.033 0.800 0.497 0.353 0.021 15 1.500 0.366 0.402 0.036 1.420 0.376 0.440 0.025 0.920 0.571 0.434 0.036 0.940 0.501 0.389 0.017 18 1.540 0.633 0.507 0.038 1.580 0.593 0.471 0.026 1.000 0.551 0.407 0.034 1.000 0.497 0.387 0.013 24 1.680 0.568 0.492 0.037 1.740 0.581 0.506 0.028 1.080 0.514 0.384 0.028 1.080 0.504 0.357 0.013 30 1.680 0.587 0.475 0.041 1.680 0.681 0.532 0.029 1.200 0.529 0.392 0.035 1.200 0.558 0.381 0.015 48 1.470 0.663 0.496 0.045 1.620 0.661 0.514 0.028 1.290 0.575 0.385 0.031 1.200 0.591 0.407 0.020 72 1.400 0.638 0.492 0.048 1.420 0.744 0.538 0.031 1.200 0.592 0.376 0.056 1.110 0.528 0.364 0.019 96 1.380 0.631 0.446 0.052 1.330 0.762 0.542 0.034 1.170 0.605 0.380 0.041 1.080 0.539 0.369 0.021 120 1.360 0.650 0.481 0.059 1.230 0.757 0.554 0.034 1.170 0.554 0.363 0.045 0.960 0.541 0.368 0.025 144 1.320 0.571 0.494 0.067 1.200 0.525 0.406 0.032 1.200 0.624 0.396 0.040 0.940 0.540 0.369 0.026 168 1.320 0.580 0.498 0.065 1.200 0.564 0.424 0.036 1.180 0.618 0.386 0.039 0.900 0.539 0.368 0.024 Perlakuan Salinitas permil 10 20 30 40 Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm Konsentrasi OD = nm sel Pigmen sel Pigmen sel Pigmen sel Pigmen sel Pigmen 540 232 258 368 540 232 258 368 540 232 258 368 540 232 258 368 540 232 258 368 0.020 0.012 0.016 0.390 0.020 0.011 0.015 0.392 0.020 0.012 0.015 0.391 0.020 0.011 0.015 0.376 0.020 0.011 0.015 0.363 3 0.024 0.011 0.015 0.375 0.030 0.014 0.020 0.388 0.030 0.013 0.018 0.391 0.025 0.012 0.016 0.370 0.022 0.011 0.015 0.370 6 0.068 0.027 0.017 0.403 0.112 0.060 0.036 0.464 0.111 0.057 0.033 0.470 0.050 0.027 0.037 0.380 0.040 0.011 0.015 0.360 9 0.305 0.012 0.018 0.445 0.480 0.034 0.039 0.529 0.455 0.036 0.046 0.538 0.180 0.013 0.018 0.432 0.080 0.011 0.015 0.369 12 0.660 0.037 0.056 0.580 0.820 0.048 0.053 0.852 0.800 0.046 0.05 0.860 0.600 0.065 0.071 0.680 0.235 0.011 0.015 0.410 15 0.680 0.077 0.084 0.900 0.830 0.063 0.067 1.200 0.860 0.068 0.072 1.360 0.760 0.059 0.066 0.845 0.530 0.017 0.02 0.492 18 0.710 0.089 0.094 1.198 0.960 0.079 0.083 1.498 1.000 0.078 0.084 1.842 0.920 0.054 0.063 0.921 0.780 0.039 0.048 0.600 24 0.850 0.123 0.141 1.485 1.060 0.108 0.126 2.142 1.290 0.090 0.108 2.304 1.280 0.069 0.084 0.930 1.000 0.048 0.051 0.762 30 0.990 0.201 0.209 1.669 1.215 0.161 0.163 2.842 1.350 0.121 0.124 2.604 1.280 0.097 0.098 0.967 0.980 0.038 0.042 0.796 48 1.080 0.147 0.151 2.286 1.335 0.152 0.154 3.333 1.500 0.122 0.126 2.742 1.260 0.031 0.035 1.830 0.900 0.031 0.035 0.868 72 0.740 0.129 0.13 2.326 0.940 0.170 0.175 3.588 1.170 0.123 0.125 3.570 1.200 0.112 0.116 3.150 0.860 0.034 0.037 1.110 96 0.540 0.134 0.141 2.550 0.870 0.134 0.138 3.540 1.110 0.119 0.123 3.600 1.050 0.123 0.129 3.300 0.820 0.032 0.035 1.110 120 0.540 0.127 0.131 2.550 0.720 0.132 0.137 3.570 0.840 0.119 0.123 3.630 0.930 0.109 0.113 3.600 0.660 0.029 0.032 1.080 144 0.480 0.114 0.118 2.550 0.510 0.114 0.117 3.630 0.600 0.107 0.111 3.600 0.720 0.104 0.107 3.560 0.380 0.026 0.03 1.110 168 0.430 0.104 0.111 2.550 0.430 0.107 0.112 3.600 0.530 0.108 0.112 3.750 0.628 0.106 0.11 3.600 0.330 0.029 0.034 1.140 Lampiran 3 Contoh perhitungan laju pertumbuhan spesifik Konsentrasi sel pada media dengan sumber nitrogen yang berbeda pada OD 540 nm ln Jam Pepton Ekstrak Khamir NaNO NH4 3 2 SO 4 Ln OD 540 nm Ln OD 540 nm Ln OD 540 nm Ln OD 540 nm -4.6052 -2.9957 -4.6052 -4.6052 3 -4.6052 -2.1203 -4.6052 -4.6052 6 -2.9957 -1.3863 -4.6052 -4.6052 9 -2.4079 -0.8675 -4.6052 -4.6052 12 -1.7720 -0.5108 -5.5215 -4.2687 15 -1.4697 -0.1985 -5.5215 -4.2687 18 -1.5141 -0.1508 -6.2146 -3.9120 24 -1.4697 0.1133 -6.2146 -3.9120 30 -1.3471 0.2776 -6.2146 -3.9120 48 -1.2730 0.5188 -6.2146 -3.5066 72 -1.1087 0.5878 -6.2146 -3.4420 96 -1.0788 0.6931 -4.6052 -3.2702 120 -1.0788 0.6831 -4.6052 -3.5066 144 -1.1394 0.6729 -4.6052 -3.2189 168 -1.1087 0.6523 -4.4228 -3.4420 192 -0.9163 0.4447 -4.6052 -3.5066 Kultivasi bakteri Mesophilobacter sp. dalam medium pertumbuhan dengan sumber nitrogen ekstrak khamir menunjukkan bahwa fase pertumbuhan eksponensial dimulai pada jam ke-0 sampai jam ke-9. Selama fase pertumbuhan eksponensial tersebut diperoleh data logaritmik normal seperti yang disajikan pada tabel di atas daerah yang diarsir. Plot data tersebut dalam kurva pertumbuhan dapat dilihat pada gambar di bawah ini. Dari hasil perhitungan dengan menggunakan metode regresi linier diperoleh persamaan garis yaitu: Y = 0,24 X – 2,91. Dari persamaan yang terdapat pada halaman 15, yaitu µ = ln Xt – ln Xo t dapat diketahui bahwa nilai laju pertumbuhan spesifik Mesophilobacter sp. pada medium ekstrak khamir merupakan kemiringan garis dari persamaan garis kurva pertumbuhan selama fase eksponensial, yaitu 0,24 per jam. y = 0,24x - 2,91 R² = 0,99 -3,5 -3 -2,5 -2 -1,5 -1 -0,5 3 6 9 12 K o n sen tr asi S el l n O D 540 n m Waktu Kultivasi jam Laju Pertumbuhan Spesifik Bakteri pada Medium Ekstrak Khamir 69 Lampiran 4 Perhitungan analisis statistika dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap

I. Pengaruh faktor fisika terhadap pertumbuhan konsentrasi sel dan pembentukan pigmen

1. Suhu Konsentrasi sel pada fase stasioner Waktu Kultivasi jam 25 o 30 C, pH 7 o 35 C, pH 7 o Total C, pH 7 48 72 96 120 144 168 1,86 1,86 1,77 1,56 1,56 1,02 1,48 1,48 1,40 1,36 1,30 1,20 1,50 1,75 1,75 1,65 1,35 1,30 Total konsentrasi ΣX Rataan konsentrasi ΣX SD 2 9,63 1,61 15,96 0,32 8,22 1,37 11,32 0,11 9,3 1,55 14,61 0,20 27,15 41,89 FK = = 40,95 JKP = - FK = 0,18 JKT = ΣX 2 JKG = JKT - JKP = 0,76 - FK = 0,94 Tabel Analisis Ragam Sumber Keragaman db Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F F hitung tabel 0.05 2,15 Perlakuan Galat 2 15 0,18 0,76 0,09 0,05 1,8 3,68 Total 17 0,94 F hit. F tabel : Perlakuan suhu 25 o C, 30 o C dan 35 o tidak berbeda nyata pada α = 0.05 C mempunyai pengaruh yang sama terhadap pertumbuhan sel bakteri Konsentrasi pigmen pada fase stasioner Jam 25 o 30 C, pH 7 o 35 C, pH 7 o Total C, pH 7 OD 463 nm OD 463 nm OD 463 nm 72 96 120 144 168 0,094 0,113 0,13 0,131 0,123 0,122 0,127 0,124 0,125 0,12 0,08 0,078 0,075 0,08 0,078 Total konsentrasi ΣX Rataan konsentrasi ΣX SD 2 0,59 0,12 0,07 0,56 0,62 0,12 0,08 0,06 0,39 0,08 0,03 0,12 1,60 0,18 FK = = 0.17 JKP = - FK = 0,006 JKT = ΣX 2 JKG = JKT - JKP = 0,0009 - FK = 0,007 Tabel Analisis Ragam Sumber Keragaman db Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F F hitung tabel0.052,12 Perlakuan Galat 2 12 0,006 0,0009 0,003 0,000082 37,47 3,89 Total 14 0,007 70 Lampiran 4 Lanjutan F hitung F tabel : Perlakuan suhu 25 o C, 30 o C dan 35 o C mempunyai pengaruh yang berbeda terhadap pembentukan pigmen berbeda nyata. BNT = = 0,013 Pengujian dilanjutkan dengan menggunakan Uji Beda Nyata Terkecil Uji BNT 35 o C 25 o C 30 o 0,08 0,12 0,12 C 35 o C - 25 o C 35 = 0,04 BNT o C - 30 o C 25 = 0,05 BNT o C - 30 o C = 0,005 BNT Konsentrasi pigmen pada suhu 30 o C lebih tinggi dibanding suhu 35 o C, suhu 25 o C menghasilkan pigmen yang lebih tinggi dibanding suhu 35 o C, tetapi konsentrasi pigmen antara suhu 30 o C dengan 25 o C tidak berbeda nyata.

2. pH Konsentrasi sel pada fase stasioner

Waktu Kultivasi jam 30 o 30 C, pH 5 o 30 C, pH 7 o Total C, pH 9 72 96 120 144 168 1,5 3,0 2,55 2,58 2,25 1,17 1,14 1,05 1,08 1,20 1,62 1,56 1,44 1,47 1,30 Total konsentrasi ΣX Rataan konsentrasi ΣX SD 2 11,88 2,38 29,47 0,56 5,64 1,13 6,38 0,06 7,39 1,48 10,98 0,12 24,91 46,83 FK = = 41,37 JKP = - FK = 4,14 JKT = ΣX 2 JKG = JKT - JKP = 1,32 - FK = 5,46 Tabel Analisis Ragam Sumber Keragaman db Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F F hitung tabel0.052,12 Perlakuan Galat 2 12 4,14 1,32 2,07 0,11 18,84 3,89 Total 14 5,46 F hitung F tabel : Perlakuan pH 5, 7, 9 pada suhu 30 o C mempunyai pengaruh yang berbeda terhadap pertumbuhan sel berbeda nyata pada α = 0,05. Pengujian dilanjutkan dengan menggunakan uji BNT BNT = = 0,46 30,71 30,92 1,13 1,48 2,38 30,53 3 - 1 2 = 1,25 BNT - 1 3 = 0,35 BNT - 2 = 0,90 BNT Konsentrasi sel pada pH 5 lebih tinggi dibanding pH 7 dan 9, sedangkan pertumbuhan pada pH 7 dan 9 tidak berbeda nyata. 71 Lampiran 4 Lanjutan Konsentrasi pigmen pada fase stasioner Waktu Kultivasi jam 30 o 30 C, pH 7 o Total C, pH 9 48 72 96 120 144 168 0,098 0,106 0,108 0,104 0,100 0,103 0,130 0,129 0,130 0,138 0,142 0,139 Total konsentrasi ΣX Rataan konsentrasi ΣX SD 2 0,62 0,10 0,06 0,004 0,81 0,14 0,11 0.006 1,43 0,17 FK = = 0,17 JKP = - FK = 2,67 x 10 JKT = ΣX -3 2 - FK = 3 X 10 JKG = JKT - JKP = 3,3 X 10 -3 -4 Tabel Analisis Ragam Sumber Keragaman db Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F F hitung tabel0.051,10 Perlakuan Galat 1 10 2,67 x 10 3,3 x 10 -3 2,67 x 10 -4 3,3 x 10 -3 80,91 -5 4,96 Total 11 3 x 10 -3 F hit. F tabel : Perlakuan pH 7 dan 9 mempunyai pengaruh yang berbeda nyata terhadap pertumbuhan pigmen. Pengujian dilanjutkan dengan menggunakan Uji Beda Nyata Terkecil Uji BNT. BNT = = 7,39 x 10 -3 pH9 pH7 0,14 0,10 pH9 - pH7 = 0,04 BNT Perlakuan pH 9 menghasilkan pigmen dengan konsentrasi yang lebih tinggi daripada pH 7. 3. Cahaya Tabel Konsentrasi sel pada fase stasioner Jam 4700 Wm 12500 Wm -2 Kondisi lab. 30 -2 o Total C + - + - 48 72 96 120 144 168 1,47 1,40 1,38 1,36 1,32 1,32 1,62 1,42 1,33 1,33 1,20 1,20 1,29 1,20 1,17 1,17 1,20 1,18 1,20 1,11 1,08 0,96 0,94 0,90 1,74 1,62 1,56 1,44 1,47 1,30 Total Konsentrasi ∑X Rataan Konsentrasi ∑X 8,25 2 1,38 11,36 8,00 1,33 10,80 7,21 1,20 8,67 6,19 1,03 6,45 9,13 1,52 14,01 38,78 FK = = 50,13 JKP = - FK = 0,82 JKT = ΣX 2 JKG = JKT - JKP = 0,35 - FK = 1,17 72 Lampiran 4 Lanjutan Tabel Analisis Ragam Sumber Keragaman db Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F F hitung tabel0.054,25 Perlakuan Galat 4 25 0,82 0,35 0,21 0,01 14,71 2,76 Total 29 1,17 F hitung F tabel : Pemberian cahaya berpengaruh nyata terhadap pertumbuhan sel. Pengujian dilanjutkan dengan menggunakan Uji Beda Nyata Terkecil Uji BNT BNT = = 0,14 30 o C +4700 -4700 +12500 -12500 -12500 +12500 0,49 0,34 0,30 0,17 -4700 0,32 0,17 0,13 +4700 0,19 0,04 0,15 Hasil pengujian BNT menunjukkan bahwa : Medium pertumbuhan yang dikultivasi pada suhu 30 o C adalah yang terbaik dalam pertumbuhan sel. Konsentrasi pigmen pada fase stasioner Jam 4700 Wm 12500 Wm -2 Kondisi lab. 30 -2 o Total C + - + - 48 72 96 120 144 168 0,045 0,048 0,052 0,059 0,067 0,065 0,028 0,031 0,034 0,034 0,032 0,036 0,031 0,056 0,041 0,045 0,040 0,039 0,020 0,019 0,021 0,025 0,026 0,024 0,130 0,129 0,130 0,138 0,142 0,139 Total Konsentrasi ∑X Rataan Konsentrasi ∑X 0,34 2 0,06 0,02 0,20 0,03 0,006 0,25 0,04 0,01 0,14 0,02 0,003 0,81 0,14 0,11 1,73 FK = = 0,10 JKP = - FK = 0.05 JKT = ΣX 2 JKG = JKT - JKP = 0,0004 - FK = 0,05 Tabel Analisis Ragam Sumber Keragaman dB Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F F hitung tabel0.054,25 Perlakuan Galat 4 25 0,05 0,0004 0,012 1,6 X 10 750 -5 2,76 Total 29 0,05 F hit. F tabel : Pemberian cahaya berpengaruh nyata terhadap pertumbuhan pigmen. Pengujian dilanjutkan dengan menggunakan Uji Beda Nyata Terkecil Uji BNT. BNT = = 4,76 x 10 -3 30 o C +4700 +12500 -12500 -4700 -4700 0,112 0,033 0,019 0,01 +12500 0,102 0,023 0,009 0,093 0,014 +4700 0,079 Hasil pengujian BNT menunjukkan bahwa antara semua perlakuan memberikan pengaruh yang berbeda, tetapi kondisi dengan suhu 30 o C memberikan hasil yang lebih baik dibanding perlakuan yang lain. 73 Lampiran 4 Lanjutan 4. Salinitas Konsentrasi sel pada fase stasioner Waktu Kultivasi jam 0 permil 10 permil 20 permil 30 permil 40 permil Total 48 72 96 120 144 168 1,08 0,74 0,54 0,54 0,48 0,43 1,34 0,94 0,87 0,72 0,51 0,43 1,5 1,17 1,11 0,84 0,60 0,53 1,26 1,20 1,05 0,93 0,72 0,63 0,90 0,86 0,82 0,66 0,40 0,33 Total konsentrasi ΣX Rataan konsentrasi ΣX SD 2 3,81 0,64 2,71 0,24 4,81 0,80 4,40 0,33 5,75 0,96 6,20 0,37 5,79 0,97 5,91 0,26 3,97 0,66 2,93 0,25 24,13 FK = = 19,41 JKP = - FK = 0,59 JKT = ΣX 2 JKG = JKT - JKP = 2,15 - FK = 2,74 Tabel Analisis Ragam Sumber Keragaman db Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F F hitung tabel0.054,25 Perlakuan Galat 4 25 0,59 2,15 0,15 0,86 1,72 2,76 Total 29 2,74 F hitung F tabel : Perlakuan salinitas 0, 10, 20, 30, 40 permil mempunyai pengaruh yang sama tidak berbeda nyata terhadap pertumbuhan sel. Konsentrasi pigmen pada fase stasioner Waktu Kultivasi jam 0 permil 10 permil 20 permil 30 permil 40 permil Total 48 72 96 120 144 168 0,149 0,130 0,138 0,129 0,116 0,108 0,153 0,173 0,136 0,135 0,116 0,110 0,124 0,124 0,121 0,121 0,109 0,110 0,033 0,114 0,126 0,111 0,106 0,108 0,033 0,036 0,034 0,031 0,028 0,032 Total konsentrasi ΣX Rataan konsentrasi ΣX 0,77 2 0,13 0,10 0,82 0,14 0,12 0,71 0,12 0,08 0,60 0,10 0,07 0,19 0,03 0,006 3,09 FK = = 0,32 JKP = - FK = 0,04 JKT = ΣX 2 JKG = JKT - JKP = 0,01 - FK = 0,05 Tabel Analisis Ragam Sumber Keragaman db Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F F hitung tabel0.054,25 Perlakuan Galat 4 25 0,04 0,01 0,01 0,0004 27,6 2,76 Total 29 0,05 F hitung F tabel : Perlakuan salinitas 0, 10, 20, 30, dan 40 permil mempunyai pengaruh yang berbeda berbeda nyata terhadap pembentukan pigmen. Pengujian dilanjutkan dengan menggunakan Uji Beda Nyata Terkecil Uji BNT. BNT = = 0,02