Pembuatan Larutan Vitamin C Pemberian Vitamin C Pada Marmot Yang Hiperkolesterolemia Pengambilan Darah Penetapan Kadar Kolesterol Serum Darah Marmot Prinsip kerja:

2.4.2 Pembuatan Larutan Vitamin C

Timbang 1000 mg Vitamin C lalu dilarutkan dengan aquadest sampai 100 ml. Kemudian diberikan langsung kepada masing-masing marmot sesuai dengan dosisnya pada hari itu juga. Perhitungan dosis vitamin C dapat dilihat pada Lampiran 8.

2.4.3 Pemberian Vitamin C Pada Marmot Yang Hiperkolesterolemia

Marmot dibagi menjadi 4 kelompok dimana kelompok pertama diberikan aquadest saja sebagai kontrol P . Kelompok kedua diberikan larutan vitamin C dengan dosis 5,425 mgkgBBhari P 1 . Kelompok ketiga diberikan larutan vitamin C dengan dosis 38,75 mgkgBBhari P 2 . Kelompok keempat diberikan larutan vitamin C dengan dosis 77,5 mgkgBBhari P 3

2.4.4 Pengambilan Darah

. Pemberian vitamin C dilakukan selama 24 hari. Kadar kolesterol dan trigliserida darah setelah pemberian vitamin C diukur pada hari ke-12 dan hari ke-24. Marmot dipuasakan terlebih dahulu selama 10-14 jam. Lalu bulu telinganya dicukur dengan silet sampai bersih. Dibilas dengan alkohol, lalu darah diambil dari vena telinga dengan cara disayat menggunakan pisau silet sebanyak ± 2 ml Smith,1988 dan dimasukkan dalam tabung yang bersih. Kemudian telinga marmot dioleskan vaseline. Darah didiamkan membeku selama 30 menit pada suhu kamar, kemudian dimasukkan ke dalam lemari pendingin sebelum diukur Suarsana,2004. Bagan alur pengambilan darah dapat dilihat pada Lampiran 3. Universitas Sumatera Utara

2.4.5 Penetapan Kadar Kolesterol Serum Darah Marmot Prinsip kerja:

Kolesterol esterase Kolesterol Ester + H 2 Kolesterol Oksidase O Kolesterol + asam lemak Kolesterol + O 2 Kolesterol 3-one + H 2 O Peroksidase 2 2 H 2 O 2 + Fenol + 4-aminoantipirin Quinonimine + 4 H 2 Darah yang telah diambil dipusingkan selama 10 menit dengan kecepatan 1000 rpm maka akan dihasilkan dua lapisan, yaitu bagian serum dan padatan. Dipipet bagian serum sebanyak 10 µl, kemudian dimasukkan dalam tabung yang telah berisi larutan reagensia kolesterol sebanyak 1000 µl. Dihomogenkan dan diinkubasi selama 10 menit pada suhu 37 O

2.4.6 Penetapan Kadar Trigliserida Serum Darah Marmot