Uji analgetik ekstrak etanol 70% daun kepel [Stelechocarpus burahol [BI] Hook.f.& Th.] pada mencit putih betina swiss dengan metode rangsang kimia - USD Repository

  

UJI ANALGETIK EKSTRAK ETANOL 70% DAUN KEPEL (Stelechocarpus

burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) PADA MENCIT PUTIH BETINA SWISS

  

DENGAN METODE RANGSANG KIMIA

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)

  Program Studi Ilmu Farmasi Oleh:

  Agustin Angela NIM: 048114068

FAKULTAS FARMASI

  Skripsi ini kupersembahkan untuk :

  1. Yesus Kristus : You raise me up.....to more than I can be

  2. Papa, mama, adik-adikku terkasih dan seluruh keluargaku : Engkaulah yang senantiasa membuat hari-hariku lebih berarti dan mempunyai makna

3. Teman-teman angkatanku: “Akhirilah ini semua dengan Indah”

  4. Serta almamaterku

Biarkanlah ketakutan itu memperoleh buah

yang matang, supaya kamu menjadi sempurna

dan utuh dan tak kekurangan sesuatu apapun

(Yakobus 1:4)

  PRAKATA

  Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan karunia-Nya sehingga penyusun dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul: “Uji Analgetik

  Ekstrak Etanol 70% Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) pada Mencit Putih Betina Swiss dengan Metode Rangsang Kimia”.

  Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar kesarjanaan pada Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Penyusunan skripsi ini tidak akan terwujud tanpa adanya bimbingan, pengarahan, dan bantuan dari berbagai pihak. Untuk itu penyusun mengucapkan banyak terima kasih kepada :

  1. Ibu Rita Suhadi, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

  2. Bapak Arief Rahman Hakim, M.Si, Apt., selaku Dosen Pembimbing Utama atas bimbingan, pengarahan, kesabaran dan dukungannya selama penelitian sampai penyusunan skripsi ini.

  3. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan masukan, kritik,dan saran untuk kesempurnaan skripsi ini.

  4. Ibu dr. Fenty, selaku Dosen Penguji yang telah memberikan masukan, kritik,dan saran untuk kesempurnaan skripsi ini.

  5. Segenap dosen yang telah memberikan bimbingan yang sangat bermanfaat dalam penyelesaian skripsi ini.

  7. Teman-teman seperjuanganku di Laboratorium, Indra, Mei, Siska dan Filisia, yang banyak membantu saat penelitian.

  8. Teman-teman angkatan 2004 yang telah banyak membantu selama masa perkuliahan.

  9. Keluarga besarku yang selalu mendukung dan memberi semangat untukku.

  10. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu yang telah membantu penyelesaian skripsi ini.

  Penyusun menyadari atas keterbatasan dan kekurangan, maka skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu penyusun mengharapkan kritik dan saran dari segenap pembaca. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang penelitian.

  Yogyakarta, Juni 2008 Penyusun

  

INTISARI

  Tanaman kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) sering digunakan oleh masyarakat Indonesia untuk menurunkan kadar kolesterol, memperlancar air seni (diuretik), pengobatan asam urat, alat pencegah kehamilan tradisional, dan juga sebagai deodoran alami.

  Penelitian ini termasuk dalam penelitian eksperimental murni dengan rancangan penelitian acak lengkap pola satu arah. Metode yang digunakan adalah metode induksi kimia. Empat puluh dua ekor mencit betina, galur Swiss, berat badan antara 20-30 gram, umur 2-3 bulan, dibagi secara acak yaitu kelompok kontrol negatif yang diberi CMC-Na 0,5%, kelompok kontrol positif yang diberi parasetamol dosis 91 mg/kgBB, dan kelompok yang diberi perlakuan ekstrak etanol daun kepel per oral dalam 4 peringkat dosis berturut-turut sebesar 35 mg/kgBB; 140 mg/kgBB; 560 mg/kgBB; dan 2240 mg/kgBB. Limabelas menit kemudian mencit diinduksi asam asetat dosis 100 mg/kgBB secara intraperitonial. Geliat yang timbul diamati dan dicatat tiap 5 menit selama 60 menit. Jumlah kumulatif geliat diubah ke dalam bentuk persen penghambatan terhadap geliat. Data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan One-way ANOVA dilanjutkan dengan uji LSD dengan taraf kepercayaan 95%.

  Hasil penelitian menunjukkan ekstrak etanol daun kepel mempunyai efek analgetik. Persen penghambatan terhadap geliat untuk parasetamol dosis 91 mg/kgBB sebesar 57,76% dan ekstrak etanol daun kepel dosis 35 mg/kgBB; 140 mg/kgBB; 560 mg/kgBB; dan 2240 mg/kgBB berturut-turut sebesar 27,93%; 49,88%; 72,32%; dan 37,00%.

  Kata kunci: analgetik, ekstrak etanol daun kepel

  

ABSTRACT

  Kepel plants (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) often used by Indonesian people to decrease cholesterol level, diuretic, nerve acid therapy, prevent pregnancy traditionally, and natural deodorant.

  The genre of this research is pure experimental in which the program of this research is random research plan, complete, and one-direction pattern. The method used in this research is chemical induction method. The research uses 42 female mice of Swiss groove, it weights 20-30 grams, and the age is 2-3 months. The 42 mices are divided into 6 groups based on its treatment, are the group of negative control is given CMC-Na 0,5%, the group of positive control is given paracetamol dosage 91 mg/kgBB, and the group of treatment is given extract ethanol of kepel leaves per orally in four different various dosage respectively, i.e.: 35 mg/kgBW; 140 mg/kgBW; 560 mg/kgBW; and 2240 mg/kgBW. Fifteen minutes after the treatment, the mice is induced by acetate acid with dosage 100 mg/kgBB intra peritoneally. The writhes are watched closely and booked every 5 minutes in 60 minutes. The accumulation numbers of the writhes are transferred into the form of resistance percentage toward the writhes. The data which is got from the calculation, later, is analyzed statistically with one-way ANOVA test, then, the step is continued with LSD with interval 95%.

  The result showing that ethanolic extract of kepel’s leaves has analgetic effect. Analgetic effect paracetamol at 91 mg/kgBW respectively, 57.76% and ethanolic extract of kepel’s leaves at 35 mg/kgBW; 140 mg/kgBW; 560 mg/kgBW; and 2240 mg/kgBW, respectively, 27.93%; 49.88%; 72.32%; and 37.00%.

  Key words : analgetic, ethanolic exstract of kepel’s leaves

  

DAFTAR ISI

  Halaman HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................. ii HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ..................................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ......................................................... v PERSETUJUAN PUBLIKASI........................................................................ vi PRAKATA ..................................................................................................... vii

  INTISARI ...................................................................................................... ix

  ABSTRACT ..................................................................................................... x

  DAFTAR ISI .................................................................................................. xi DAFTAR TABEL .......................................................................................... xv DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xviii DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xx BAB I. PENGANTAR ..................................................................................

  1 A. Latar Belakang ..........................................................................................

  1 B. Permasalahan .............................................................................................

  2 C. Keaslian Penelitian ....................................................................................

  3 D. Manfaat Penelitian ....................................................................................

  7 1. Manfaat teoritis ..................................................................................

  7

  BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ..........................................................

  8 A. Tanaman Kepel ........................................................................................

  8 1. Keterangan botani .............................................................................

  8 2. Deskripsi ...........................................................................................

  8 3. Khasiat ..............................................................................................

  9 4. Kandungan kimia ..............................................................................

  9 B. Flavonoid .................................................................................................

  10 1. Sifat kelarutan dan isolasi .................................................................

  11 2. Karakterisasi .....................................................................................

  12 3. Kegunaan ..........................................................................................

  12 C. Perkolasi ...................................................................................................

  13 D. Radikal Bebas dan Antioksidan ...............................................................

  14 1. Radikal bebas ....................................................................................

  14 2. Antioksidan .......................................................................................

  17 E. Nyeri .........................................................................................................

  18 1. Definisi dan tipe ................................................................................

  18 2. Reseptor nyeri ...................................................................................

  18 3. Mekanisme nyeri ..............................................................................

  20 F. Analgetika .................................................................................................

  22 1. Analgetika narkotik ...........................................................................

  23

  H. Metode Pengujian Efek Analgetik ...........................................................

  25 1. Golongan analgetika narkotika .........................................................

  25 2. Golongan analgetika nonnarkotika ...................................................

  28 I. Landasan Teori .........................................................................................

  29 J. Hipotesis ...................................................................................................

  31 BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ...................................................

  32 A. Jenis Rancangan Penelitian ......................................................................

  32 B. Variabel dan Definisi Operasional ...........................................................

  32 1. Variabel utama ..................................................................................

  32 2. Variabel pengacau ............................................................................

  32 3. Definisi operasional .........................................................................

  33 C. Bahan Penelitian ......................................................................................

  34 D. Alat Penelitian .........................................................................................

  35 E. Tata Cara Penelitian .................................................................................

  36 1. Pembuatan sediaan uji ......................................................................

  36 2. Pemilihan hewan uji .........................................................................

  40 3. Penetapan kriteria geliat ...................................................................

  40 4. Uji pendahuluan ...............................................................................

  40 5. Pengujian efek analgetik kelompok perlakuan .................................

  44 6. Analisis data ......................................................................................

  46 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN .....................................................

  48

  C. Uji Pendahuluan .......................................................................................

  50 1. Penetapan dosis asam asetat .............................................................

  51 2. Penetapan kontrol negatif .................................................................

  53 3. Penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ............

  54

  4. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol .......................................................................................

  58

  5. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak etanol daun kepel .................................................................

  61 D. Pengujian Efek Analgetik Kelompok Perlakuan ......................................

  63 E. Perbandingan Daya Analgetik Ekstrak Etanol Daun Kepel Antara Mencit Jantan dan Mencit Betina .............................................................

  71 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................

  74 A. Kesimpulan ..............................................................................................

  74 B. Saran .........................................................................................................

  74 DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................

  75 LAMPIRAN ..................................................................................................

  80 BIOGRAFI PENULIS .................................................................................. 115

  

DAFTAR TABEL

  Halaman Tabel 1. Jumlah kumulatif geliat pada penetapan dosis asam asetat ..........

  52 Tabel 2. Jumlah kumulatif geliat pada penetapan kontrol negatif ..............

  53 Tabel 3. Jumlah kumulatif geliat dan % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ..............................................................................................

  55 Tabel 4. Hasil analisis uji LSD % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ........

  57 Tabel 5. Jumlah kumulatif geliat dan % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol ....................................................................................

  59 Tabel 6. Hasil analisis uji LSD % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol ....................................................................................

  60 Tabel 7. Jumlah kumulatif geliat dan % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak ............................................................................................ 61

  Tabel 8. Hasil analisis uji LSD % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak

  pada seluruh kelompok perlakuan .................................................

  64 Tabel 10. Hasil analisis uji LSD % penghambatan terhadap geliat pada seluruh kelompok perlakuan .........................................................

  66 Tabel 11. Persen penghambatan terhadap geliat seluruh kelompok perlakuan pada mencit jantan dan mencit betina ..........................

  71 Tabel 12. Data jumlah geliat mencit pada penetapan dosis asam asetat .......

  85 Tabel 13. Data jumlah geliat mencit pada penetapan kontrol negatif ...........

  87 Tabel 14. Data jumlah geliat mencit pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel........................................................

  89 Tabel 15. Data % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ..................................

  92 Tabel 16. Data jumlah geliat mencit pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol ...............................

  94 Tabel 17. Data % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol ....................

  97 Tabel 18. Data jumlah geliat mencit pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat ekstrak etanol daun kepel ........................

  99 Tabel 19. Data % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak etanol daun kepel ............................................................................................. 101 Tabel 20. Data jumlah kumulatif geliat mencit pada pengujian efek

  analgetik seluruh kelompok perlakuan ........................................ 109 Tabel 22. Data potensi relatif ekstrak terhadap parasetamol pada pengujian efek analgetik................................................................................ 112 Tabel 23. Data % penghambatan terhadap geliat seluruh kelompok perlakuan pada mencit jantan dan mencit betina ......................... 113

  

DAFTAR GAMBAR

  Halaman Gambar 1. Struktur kimia isolat ekstrak etanol daun kepel ........................

  10 Gambar 2. Kerangka dasar tipe-tipe flavonoid ...........................................

  11 Gambar 3. Perombakan asam arakhidonat .................................................

  21 Gambar 4. Mekanisme Nyeri ......................................................................

  22 Gambar 5. Struktur molekul Parasetamol ...................................................

  24 Gambar 6. Skema kerja penelitian ..............................................................

  47 Gambar 7. Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat pada penetapan dosis asam asetat ......................................................

  52 Gambar 8. Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat pada penetapan kontrol negatif ..........................................................

  54 Gambar 9. (a) Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat, (b) Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ……………........................................................

  56 Gambar 10. (a) Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat, (b) Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol …………………………...................

  59

  Gambar 11. (a) Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat, (b) Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak ..................................................................

  62 Gambar 12. (a) Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat, (b) Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada seluruh kelompok perlakuan ......................................

  65 Gambar 13. Diagram batang perbandingan efek analgetik seluruh kelompok perlakuan antara mencit jantan dan mencit betina ...................

  72 Gambar 14. Tanaman kepel ..........................................................................

  82 Gambar 15. Buah kepel.................................................................................

  82 Gambar 16. Serbuk daun kepel .....................................................................

  83 Gambar 17. Ekstrak etanol daun kepel .........................................................

  83 Gambar 18. Empat peringkat dosis ekstrak etanol daun kepel .....................

  84 Gambar 19. Geliat mencit .............................................................................

  84 Gambar 20. Plot penyebaran vs tingkat geliat terhadap perlakuan ............... 106 Gambar 21. Plot penyebaran vs tingkat geliat terhadap jenis kelamin ......... 106

  

DAFTAR LAMPIRAN

  Halaman Lampiran 1. Surat determinasi tanaman kepel............................................

  80 Lampiran 2. Foto tanaman, buah, serbuk daun kepel, ekstrak etanol daun kepel, empat peringkat dosis ekstrak etanol daun kepel, dan geliat mencit..........................................................

  82 Lampiran 3. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan dosis asam asetat .............................

  85 Lampiran 4. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan kontrol negatif .................................

  87 Lampiran 5. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ...............................................................................

  89 Lampiran 6. Data % penghambatan terhadap geliat dan hasil analisis statistik pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ...............................................................................

  92 Lampiran 7. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol .............................................................................

  94 Lampiran 8. Data % penghambatan terhadap geliat dan hasil analisis

  Lampiran 9. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak etanol daun kepel ........................................................

  99 Lampiran 10. Data % penghambatan terhadap geliat dan hasil analisis statistik pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak etanol daun kepel ........................................ 101

  Lampiran 11. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada pengujian efek analgetik seluruh kelompok perlakuan .. 103 Lampiran 12. Data % penghambatan terhadap geliat dan hasil analisis statistik pada pengujian efek analgetik seluruh kelompok perlakuan ................................................................................. 109

  Lampiran 13. Data potensi relatif ekstrak terhadap parasetamol pada pengujian efek analgetik ......................................................... 112 Lampiran 14. Data % penghambatan terhadap geliat antara mencit jantan dan betina serta hasil analisis statistik pada pengujian efek analgetik seluruh kelompok perlakuan ............................ 113

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Nyeri merupakan respon langsung terhadap kejadian atau peristiwa yang tidak

  menyenangkan yang berhubungan dengan kerusakan jaringan seperti, luka, inflamasi, atau kanker (Rang dkk, 2003). Karena nyeri dirasa sangat mengganggu, maka setiap individu ingin bebas dari rasa nyeri, salah satunya dengan menggunakan obat-obat modern maupun tradisional. Tetapi karena, dewasa ini efek samping dari obat-obat modern yang menggunakan bahan kimia murni mulai menunjukkan hal-hal yang tidak dikehendaki, sehingga ada keinginan dari masyarakat untuk menggunakan obat tradisional guna meminimalkan efek samping dari penggunaan obat modern.

  Departemen Kesehatan Republik Indonesia melalui Undang-Undang No. 23 tahun 1992 tentang kesehatan mendefinisikan obat tradisional sebagai bahan atau ramuan bahan yang berupa bahan-bahan tumbuhan, bahan hewan, bahan mineral, sediaan galenik, atau campuran dari bahan tersebut yang secara turun temurun telah digunakan untuk pengobatan berdasarkan pengalaman.

  Tanaman kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) secara empiris telah digunakan sebagai obat bahan alam oleh masyarakat. Secara ilmiah, sudah banyak penelitian yang berhubungan dengan daun kepel. Pada penelitian terdahulu, Sutomo (2003) dan Supriyatna (2007) berhasil mengidentifikasi adanya senyawa flavonoid dalam tubuh berlebih maka dapat menyebabkan kerusakan jaringan dan menimbulkan rasa nyeri. Adanya flavonoid yang berfungsi menangkap radikal bebas dapat mengurangi terjadinya kerusakan jaringan sehingga rasa nyeri juga dapat dikurangi. Penelitian lain juga melaporkan bahwa infusa daun kepel memiliki aktivitas antiinflamasi (Sriwidodo, 2004). Mekanisme terjadinya inflamasi hampir sama dengan mekanisme terjadinya nyeri, yaitu adanya pelepasan mediator yang memperantarai inflamasi, sehingga apabila suatu zat memiliki efek antiinflamasi maka kemungkinan zat tersebut juga memiliki efek analgetik.

  Seberapa besar persen efek analgetik tanaman kepel sampai sekarang belum diketahui. Oleh karena itu dalam penelitian ini akan dilakukan uji efek analgetik dari ekstrak etanol daun kepel pada mencit putih betina, serta akan dibandingkan pengaruh jenis kelamin mencit terhadap besarnya daya analgetik ekstrak etanol daun kepel.

  Metode pengujian efek analgetik yang digunakan pada penelitian ini adalah metode rangsang kimia. Hal ini dikarenakan metode rangsang kimia dapat digunakan sebagai langkah pengujian awal untuk mengetahui adanya efek analgetik pada suatu senyawa, selain itu metode ini sederhana dan mudah dilakukan. Hewan uji yang digunakan dalam metode uji rangsang kimia adalah mencit sebagaimana tercantum dalam acuan (Turner, 1965).

B. Permasalahan

  Berdasarkan latar belakang tersebut maka permasalahan yang timbul antara

  1. Apakah ekstrak etanol daun kepel memiliki efek analgetik terhadap mencit putih betina melalui metode rangsang kimia?

  2. Berapa besar persen daya analgetik yang dimiliki ekstrak etanol daun kepel terhadap mencit putih betina melalui metode rangsang kimia?

C. Keaslian Penelitian

  Penelitian mengenai Uji Analgetik Ekstrak Etanol 70% Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) pada Mencit Putih Betina Swiss dengan Metode Rangsang Kimia belum pernah dilakukan sebelumnya. Adapun penelitian tentang tanaman kepel yang pernah dilakukan adalah:

  1. Toksisitas Akut Ekstrak Metanol dan Ekstrak Kloroform Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) Terhadap Larva Artemia salina Leach (Widiastuti, 2000). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak metanol menunjukkan efek toksik dengan LC 257

  50 μg/ml, sedangkan ekstrak kloroform tidak toksik

  dengan LC 1053 50 μg/ml.

  2. Pengaruh Infusa Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) Terhadap Kadar Asam Urat Serum Darah Ayam Terinduksi Hati (Hening, 2002).

  Hasil menunjukkan bahwa infusa daun kepel dengan dosis 0,98 g/kgBB; 1,47 g/kgBB; dan 2,205 g/kgBB terbukti mampu menurunkan kadar asam urat dalam serum darah ayam. Makin tinggi dosis maka kemampuan menurunkan kadar asam urat semakin besar. pemisahan KLT menunjukkan bahwa daun kepel mengandung senyawa kimia golongan antrakinon, flavonoid, dan kumarin.

  4. Uji Sitotoksisitas Ekstrak Metanol Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) Terhadap Penghambatan Pertumbuhan Sel HELA (Aryuni, 2002).

  Hasil menunjukkan ekstrak metanol daun kepel bersifat sitotoksik terhadap sel HELA secara in vitro dengan LC setelah inkubasi selama 72 jam sebesar 334,10

  50 μg/ml.

  5. Penurunan Asam Urat Darah Ayam Jantan Braille Hiperurisemia Oleh Fraksi Ekstrak Metanol Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) (Sutomo, 2003). Hasil menunjukkan bahwa fraksi larut petroleum eter dosis 100 mg/kgBB dan fraksi tidak larut petroleum eter dosis 50; 100; dan 150 mg/kgBB mampu menurunkan kadar asam urat darah ayam hiperurisemia.

  6. Pembuatan Ekstrak Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.)

  ® ®

  Secara Kempa Langsung Dengan Kombinasi Avicel pH 102 dan Di-Cafos Sebagai Bahan Pengisi-Pengikat (Restiyaningsih, 2004). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak daun kepel dapat dibuat jadi sediaan tablet dengan sifat fisik yang

  ®

  memenuhi persyaratan tablet dengan menggunakan kombinasi Avicel pH 102 dan

  ® Di-Cafos sebagai bahan pengisi-pengikat.

  7. Toksisitas Akut-Oral Ekstrak Etanolik Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) pada Mencit (Ariningsih, 2004). Hasil menunjukkan bahwa potensi ketoksikan akut-oral ekstrak etanolik daun kepel pada mencit tergolong hampir

  8. Variasi Kadar Amprotab Sebagai Bahan Penghancur Dalam Pembuatan Tablet Ekstrak Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) Secara Granulasi Kering (Ardanie, 2004). Hasil menunjukkan bahwa variasi kadar Amprotab antara 5-15% sebagai bahan penghancur berpengaruh terhadap daya serap dan waktu hancur tablet. Semakin besar kadar Amprotab maka semakin besar daya serap tablet dan semakin cepat waktu hancur tablet.

  9. Uji Aktivitas Antiinflamasi Infusa Daun Kepel Pada Tikus Jantan Wistar Dengan Metode Udema Kaki Belakang (Sriwidodo, 2004). Hasil menunjukkan bahwa sediaan infusa daun kepel yang diberikan per oral mempunyai daya antiinflamasi pada tikus yang diinduksi karagenin 1% secara subplanar. Daya antiinflamasi pada dosis 0,5; 1,0; 2,0; dan 3 g/kgBB masing-masing sebesar 44,33; 67,00; 71,29; dan 50,91%.

  10. Toksisitas Akut Infusa Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) pada Mencit Jantan (Maspa, 2005). Hasil menunjukkan bahwa potensi ketoksikan akut infusa daun kepel pada mencit tergolong dalam kategori toksik ringan dan dengan harga LD semu sebesar > 8190 mg/kgBB.

  50

  11. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Antioksidan Penangkap Radikal Bebas Dari Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) (Sunarni, 2006).

  Hasil menunjukkan bahwa peneliti berhasil mengisolasi dan mengindetifikasi senyawa flavonoid golongan flavon dalam fraksi etanol infusa daun kepel.

  12. Standarisasi Simplisia dan Ekstrak Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) n-heksana daun kepel terdapat senyawa golongan terpenoid, flavonoid dan senyawa yang belum dapat diidentifikasi dengan menggunakan KLT.

  13. Uji Aktivitas Hiperurikemia Ekstrak Etanol Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) Pada Tikus Putih Jantan Sprague Dawley Serta Penentuan Kandungan Senyawa Fenolik dan Flavonoid Totalnya (Supriyatna, 2007). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun kepel mampu menurunkan kadar asam urat serum hingga 77,78% pada hari ke-19 setelah pemberian ekstrak etanol daun kepel dosis 400 mg/kgBB per oral.

  14. Uji Ekstrak Etanol Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) Terhadap Aktivitas Enzim Xantin Oksidase Secara In Vitro (Aryadi, 2007). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun kepel mempunyai potensi dalam menghambat aktivitas xantin oksidase sebesar 17,78 ± 2,69% pada konsentrasi 500 μg/ml.

  15. Uji Fraksi n-heksana Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) Terhadap Aktivitas Enzim Xantin Oksidase Secara In Vitro (Kurniawati, 2007).

  Hasil menunjukkan bahwa fraksi n-heksana daun kepel pada konsentrasi 0,5 dan 5 μg/ml dapat menghambat aktivitas enzim xantin oksidase dengan presentasi penghambatan yang signifikan dibanding blanko, sedang pada konsentrasi 500 μg/ml menyebabkan pengikatan aktivitas enzim xantin oksidase sebesar 15,00 ± 1,41%.

D. Manfaat Penelitian

  Penelitian ini memiliki beberapa manfaat, yaitu sebagai berikut :

  1. Manfaat teoritis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi yang berguna tentang penggunaan tanaman obat tradisional sebagai analgetika.

  2. Manfaat praktis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat tentang kegunaan daun kepel sebagai analgetika.

E. Tujuan Penelitian

  Penelitian ini memiliki beberapa tujuan, yaitu sebagai berikut :

  1. Mengetahui adanya efek analgetik ekstrak etanol daun kepel terhadap mencit putih betina.

  2. Mengetahui besarnya daya analgetik ekstrak etanol daun kepel terhadap mencit putih betina.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Tanaman Kepel

  1. Keterangan Botani

  Tanaman kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th) termasuk dalam familia Annonaceae (Backer dan Bakhuizen, 1963). Tanaman kepel memiliki nama daerah :

  Sunda : burahol, turalak Jawa : kepel, kecindul, simpul, cindul (Hutapea, 1994)

  2. Deskripsi

  Habitat : pohon, tinggi ± 12 m Batang : tegak, bulat, berkayu, percabangan monodial, coklat.

  Daun : tunggal, lonjong, panjang 8-20 cm, lebar 4-6 cm, ujung dan pangkal meruncing, halus, pertulangan bawah menonjol mengkilat, hijau.

  Bunga : majemuk, bentuk tandan, tersebar di batang dan cabang, tangkai silindris, panjang 4 cm, benang sari dan putik halus kuning, mahkota lonjong, kuning. Buah : buni, bulat, kulit kasar, diameter 5 cm, coklat. Biji : bentuk ginjal, halus, hitam, mengkilat Akar : tunggang, putih kotor (Hutapea, 1994)

  3. Khasiat

  Daging buah kepel berkhasiat sebagai obat radang ginjal dan peluruh air seni (Hutapea, 1994), selain itu juga bermanfaat sebagai deodoran alami dan alat pencegah kehamilan tradisional (Siswono, 2002). Penelitian menyatakan bahwa daun kepel dapat digunakan untuk pengobatan asam urat (Sutomo, 2003), menurunkan kadar kolesterol (Siswono, 2002) dan sebagai antiinflamasi (Sriwidodo, 2004).

  4. Kandungan kimia

  Daging buah, biji, dan akar kepel mengandung saponin, flavonoid, dan polifenol, disamping itu bijinya juga mengandung alkaloida dan daunnya juga mengandung flavonoid dan polifenol (Hutapea, 1994). Sutomo (2003) dan Supriyatna (2007) melaporkan adanya senyawa flavonoid pada daun kepel. Sunarni (2006) berhasil mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa flavonoid golongan flavon pada fraksi etanol infusa daun kepel yaitu :

• Isolat A1 : 7,3’,4-trihidroksi-5-O-gula-flavon
• Isolat B2 : 5,4’-dihidroksi-7-O-tersubtitusi-3-0-gula fl
• Isolat B3 : 5,7,4’-trihidroksi-3-O-gula flavon
• Isolat B4a : 3,7,4’-trihidroksi flavon
• Isolat B4b : 3,7,3’,4’-tetrahidroksi-5-metilflavon Dari kelima isolat tersebut, isolat B4b memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi dibanding isolat lain, hal ini mungkin dikarenakan isolat B4b mempunyai gugus

  

o-diOH dan 3-OH bebas. Struktur kimia untuk kelima isolat di atas dapat dilihat pada

  O O OH Gula O OH

  OH O OH OH O OH O Gula

  Isolat A1 Isolat B3 O OH RO O OH

  O Gula O OH O OH OH

  Isolat B2 Isolat B4a O CH ₃ OH O OH OH OH

  Isolat B4b

Gambar 1. Struktur kimia isolat ekstrak etanol daun kepel (Sunarni, 2006)

B. Flavonoid

  Flavonoid merupakan kandungan khas tumbuhan hijau dan sebenarnya terdapat pada semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kayu, kulit, tepungsari, nektar, bunga, buah buni, dan biji (Markham, 1988). Kerangka dasar flavonoid dan sistem penomoran untuk turunan flavonoid terlihat pada gambar 2.

  2' 3'

  1

  8 O 1'

  2

  7 4' B A C C C

  3 6' 5'

  6

  5

  4 1a 1b

  Gambar 2. Kerangka flavonoid (1a) dan sistem penomoran turunan flavonoid (1b) (Robinson, 1995)

1. Sifat kelarutan dan isolasi

  Secara individual, kelarutan senyawa flavonoid sangat bermacam-macam sesuai dengan golongan dan substitusi yang terjadi. Flavonoid terdapat dalam bentuk bebas sebagai aglikon maupun terikat dengan gula sebagai glikosida. Adanya gula yang terikat flavonoid cenderung menyebabkan flavonoid lebih mudah larut dalam air.

  Dengan demikian glikosida flavonoid juga larut dalam pelarut polar seperti etanol, metanol, butanol, aseton, dimetilsulfida, dimetilformamida dan air. Sebaliknya, aglikon yang kurang polar seperti isoflavon, flavanon, flavon, serta flavonol yang termetoksilasi cenderung lebih mudah larut dalam pelarut nonpolar seperti eter, etil asetat, dan kloroform (Markham, 1988).

  Metode yang banyak dikembangkan untuk pemisahan dan karakterisasi flavonoid adalah kromatografi kertas. Sejumlah kecil sampel dapat dipisahkan dengan efisien dengan metode tersebut. Kromatografi lapis tipis (KLT) juga merupakan cara analisis cepat yang memerlukan bahan yang sangat sedikit. Penjerap dan pengembang yang digunakan pada umumnya sama dengan penjerap dan pengembang untuk kromatografi kertas (Markham, 1988).

  2. Karakterisasi

  Pencirian golongan flavonoid dapat dilakukan berdasarkan reaksi warna dan sifat kelarutannya. Jika tidak ada pigmen yang mengganggu, flavonoid dapat dideteksi dengan diberi uap amonia dan akan memberikan warna-warna yang spesifik. Flavon dan flavonol menunjukkan warna kuning, kalkon dan auron menunjukkan warna lembayung sampai merah (Robinson, 1995).

  Flavonoid dengan alumunium klorida (AlCl ) membentuk senyawa kompleks

  3

  berwarna kuning. Reaksi yang terjadi antara AlCl dengan gugus hidroksil dan karbonil

  3

  yang bertetangga membentuk kompleks yang tahan asam, sedangkan reaksi yang terbentuk antara AlCl dengan gugus o-dihidroksil membentuk kompleks yang tak

  3 stabil dalam suasana asam (Markham, 1988).

  Larutan asam borat dan natrium asetat akan membentuk senyawa kompleks dengan gugus o-dihidroksil pada senyawa flavonoid baik pada cincin A atau B dari inti flavonoid. Efek dari pereaksi ini akan memberikan pergeseran panjang gelombang dan berguna pada analisis golongan flavonoid (Mabry dkk,1970).

  3. Kegunaan Flavonoid merupakan produk alamiah dengan beberapa aktivitas farmakologi.

  Flavonoid mempunyai aktivitas sebagai penangkap radikal hidroksil dan superoksida serta dapat melindungi membran lipid dari reaksi-reaksi yang merusak (Robinson, 1995). Flavonoid berkhasiat sebagai antiinflamasi, antialergi, antithrombolik, vasoprotektif sebagai penghambat promotor tumor dan untuk proteksi pada mukosa aktivitas flavonoid sebagai penurun kadar asam urat melalui penghambatan enzim xantin oksidase, flavonoid selain dapat menghambat enzim xantin oksidase juga bersifat sebagai antioksidan penangkap radikal superoksida.

C. Perkolasi

  Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Anonim, 1995).

  Penyarian merupakan peristiwa pemindahan massa. Zat aktif yang semula berada di dalam sel ditarik oleh cairan penyari, sehingga terjadi larutan zat aktif dalam cairan penyari tersebut. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode perkolasi. Cairan penyari yang digunakan dalam penelitian ini adalah etanol 70%.

  Etanol digunakan sebagai penyari karena lebih selektif, kapang atau kuman sulit tumbuh dalam etanol di atas 20%, tidak beracun, bersifat netral, absorpsinya baik, dapat bercampur dengan air, panas yang digunakan untuk pemekatan lebih sedikit, dan mudah didapat (Anonim, 1986).

  Perkolasi adalah cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan cairan penyari melalui serbuk simplisia yang telah dibasahi. Prinsip perkolasi adalah sebagai berikut: serbuk simplisia ditempatkan dalam suatu bejana silinder yang bagian serbuk tersebut, sehingga cairan penyari akan melarutkan zat aktif sel-sel yang dilalui sampai mencapai keadaan jenuh (Anonim, 1986).

  Cara perkolasi lebih baik daripada dengan cara maserasi karena:

  1. Aliran cairan penyari menyebabkan adanya pergantian larutan yang terjadi dengan larutan yang konsentrasinya lebih rendah, sehingga meningkatkan derajat perbedaan konsentrasi,

  2. Ruangan di antara butir-butir serbuk simplisia membentuk saluran tempat mengalir cairan penyari. Karena kecilnya saluran kapiler tersebut maka kecepatan pelarut cukup untuk mengurangi lapisan batas sehingga dapat meningkatkan perbedaan konsentrasi (Anonim,1986).

D. Radikal Bebas dan Antioksidan

1. Radikal Bebas

  Radikal bebas adalah suatu molekul yang mempunyai jumlah elektron ganjil atau elektron yang tidak berpasangan tunggal pada lingkaran luarnya. Elektron tidak berpasangan tersebut menyebabkan instabilasi dan bersifat reaktif. Radikal bebas akan merusak molekul yang elektronnya ditarik oleh radikal bebas tersebut sehingga menyebabkan kerusakan sel, gangguan fungsi sel, bahkan kematian sel. Molekul utama di dalam tubuh yang dirusak oleh radikal bebas yaitu DNA, lemak, dan protein. Radikal bebas yang merusak DNA dapat mengganggu beberapa bagian DNA dan menyebabkan pertumbuhan sel tidak terkontrol, yang dapat mengakibatkan kanker. Radikal bebas intisel. Secara eksogen, radikal bebas berasal dari asap rokok, polutan radiasi, obat- obatan, dan pestisida (Setiati, 2003).

  Berikut ini adalah jenis-jenis dari radikal bebas :

  ⎯

  a. Radikal superoksida (O )

2 Radikal ini merupakan jenis radikal yang paling banyak dan terbentuk bila 1 molekul O menerima 1 elektron.

  2 ⎯

  O

  2

  2

  → O Superoksidan bersifat reaktif dan dapat bereaksi dengan substansi biologik.

  ⎯

  Reaktivitas O sangat terbatas karena adanya dismutasi spontan yang dapat terjadi

  2

  pada pH fisiologik, membentuk H O dan O . Tetapi dengan terbatasnya reaktivitas

  2

  2

  2 ⎯

  O menyebabkan radikal ini dapat berdifusi dan bereaksi dengan substratnya dalam

  2 jarak yang relatif lebih jauh dari tempat asalnya.

  b. Hidrogen peroksida

  2- ⎯

  Penambahan 1 elektron pada radikal O menghasilkan ion peroksida O yang

  

2

  2

  tidak bersifat radikal, dan pada pH fisiologik akan segera mengalami protonasi membentuk H O . Meskipun bukan radikal bebas, akumulasi H O dapat berbahaya

  2

  2

  2

  2

  bila terdapat bersama-sama dengan logam (Fe, Cu) atau zat-zat kelator karena akan bereaksi membentuk radikal hidroksil yang sangat reaktif.

  c. Radikal hidroksil

  ⎯ Radikal fisi homolitik O-O akan menghasilkan 2 molekul radikal hidroksil, OH .

  Reaksi homolitik ini dapat terjadi karena pengaruh panas atau radiasi ionisasi.

• ), menurut reaksi Fenton, dan dengan adanya kelator melalui reaksi Haber-Weiss:

  Cu

  Radikal bebas yang berlebihan akan menyebabkan kerusakan jaringan sehingga menimbulkan nyeri. Dalam proses peradangan, radikal bebas terbentuk ketika asam arakhidonat dikonversikan menjadi peroksida baik melalui jalur siklooksigenase maupun lipoksigenase. Ketika terjadi kerusakan jaringan organ, jumlah radikal bebas meningkat seiring dengan peningkatan produksi peroksida, padahal tubuh

  3. Tahap terminasi, apabila terjadi reaksi antara radikal bebas dengan radikal bebas lain atau antara radikal bebas dengan suatu senyawa pembasmi radikal (scavenger) (Setiati, 2003).

  2. Tahap propagasi, yaitu tahap dimana radikal bebas cenderung bertambah banyak dengan membuat reaksi rantai dengan molekul lain.

  Reaksi radikal bebas dapat dibagi menjadi tiga tahap, yaitu: 1. Tahap inisiasi, yaitu tahapan yang menyebabkan terbentuknya radikal bebas.

  Radikal hidroksil adalah oksidan yang sangat reaktif dan tidak stabil. Radikal bebas dapat bereaksi dengan hampir semua substrat biologik. Karena sangat reaktif efek radikal ini hanya berlangsung di daerah dengan tempat terbentuknya, dan dalam kondisi fisiologik normal tidak ditemukan radikal hidroksil dalam kadar besar (Gitawati, 1995).

  ¯

  2+

  → Cu

  2

  ¯

  3+

• H

  → Fe

  2

  2+

  Fe

  , Cu

  2+

  logam (Fe

• OH .
• OH

2 O

• H
• OH .
• OH

2 O

  radikal bebas makin banyak, antioksidan endogen tak mampu lagi melumpuhkannya secara efektif sehingga harus ada tambahan antioksidan dari luar (eksogen) yang berasal dari bahan makanan (Sibuea, 2004).