E. Hidrolisis Saponin Kecambah Kacang Hijau dan Succus Liquiritiae
Untuk mendapatkan aglikonnya, saponin harus dihidrolisis dengan asam. Asam yang digunakan adalah asam klorida 0,1 M. Hidrolisis dilakukan selama 2
jam menggunakan alat pendingin balik refluks. Pembanding yang digunakan adalah asam glisiretinat. Karena tidak tersedianya asam glisiretinat atau glisirisin
dalam bentuk murni, digunakan Succus Liquiritiae sebagai pembanding karena Succus Liquiritiae
mengandung saponin tipe triterpenoid, yaitu glisirisin. Sedangkan pada uji saponin sebelumnya didapatkan bahwa kecambah kacang
hijau juga mengandung saponin tipe triterpenoid. Glisirisin terhidrolisis dalam suasana asam menghasilkan asam
β-glisiretinat aglikon yang merupakan derivat triterpen pentasiklik dengan tipe
β-amirin dan 2 molekul asam glukuronat glikon. Succus Liquiritiae diperlakukan sama dengan sampel kecambah kacang
hijau. Untuk mengetahui bahwa hidrolisis sudah terjadi dapat diketahui dari perubahan warna yang terjadi, yaitu kecambah kacang hijau yang semula
berwarna kekuningan, setelah dihidrolisis menjadi berwarna coklat.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
O OH
H OH
OH COOH
O H
COOH OH
OH O
COOH
glisirisin
O
H
Kalor HO
COOH H
O
asam glisiretinat +
O OH
H OH
OH COOH
O H
COOH OH
OH O
2 molekul asam glukuronat
O H
Gambar 6. Mekanisme hidrolisis Succus Liquiritiae dalam suasana asam
F. Ekstraksi Aglikon Saponin Kecambah Kacang Hijau dan Succus Liquiritiae
Hidrolisat yang diperoleh didinginkan kemudian diekstraksi. Ekstraksi aglikon saponin dilakukan dengan corong pisah menggunakan penyari kloroform
sebanyak 3x30 ml dimaksudkan agar memperoleh aglikon saponin dalam jumlah yang cukup banyak. Kloroform digunakan karena tidak bercampur dengan air dan
aglikon saponin larut dalam kloroform. Fase kloroform yang diperoleh ditambah natrium sulfat anhidrat untuk menarik sisa air yang kemungkinan masih ada di
dalam ekstrak lalu disaring. Filtrat yang diperoleh diuapkan sampai volumenya kira-kira 5 ml. Hasil yang diperoleh berupa ekstrak kloroform kecambah kacang
hijau dan ekstrak kloroform Succus Liquiritiae.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
G. Pemeriksaan Pendahuluan Aglikon Saponin dengan KLT