Homologi Isolat Bakteri Dengan Program FASTA
Berdasarkan hasil analisis sekuen gen 16S rRNA pada program FASTA diketahui homologi spesies dari empat isolat bakteri yang diuji. Isolat bakteri
koleksi CV. Meori Agro dengan kode P2 memiliki kemiripan sebesar 100 dengan Pseudomonas aeruginosa strain QZX-A
,
isolat bakteri koleksi CV. Meori Agro dengan kode J2 memiliki kemiripan sebesar 99,3 dengan Bacillus subtilis
strain PARZ2, dan isolat bakteri koleksi CV. Meori Agro dengan kode PS4 memiliki kemiripan sebesar 100 dengan Burkholderia sp. strain AH83.
Sedangkan Isolat asal tanah yaitu isolat bakteri T9 memiliki kemiripan sebesar 99 dengan Burkholderia sp. strain A-3. Hasil analisis sekuen gen 16S rRNA
dari tiga isolat BPF pada data GenBank terdapat pada Lampiran 11.
d. Pengujian Kualitatif dan Kuantitatif Isolat Bakteri Koleksi
Sebanyak 3 isolat bakteri koleksi CV. Meori Agro yang sudah diremajakan dilakukan pengujian dalam melarutkan fosfat pada medium Pikovskaya padat dan
cair serta pengukuran indeks pelarutan fosfat IP. Hasil dari pengamatan pada penelitian ini dapat dilihat dalam Tabel 5 berikut ini :
Tabel 5. Kemampuan Bakteri Pelarut Fosfat dalam Melarutkan Fosfat pada Medium Pikovskaya Padat dan Cair
Sama halnya dengan pengujian yang dilakukan pada isolat bakteri asal tanah, isolat bakteri koleksi pun diukur nilai IP dan kemampuannya dalam melarutkan
fosfat. Hasil yang didapat pada pengukuran tersebut seperti yang terlihat pada tabel di atas menunjukkan bahwa Burkholderia sp. PS4
memiliki nilai IP paling besar diantara isolat bakteri koleksi lainnya yaitu sebesar 1,56. Namun untuk
kemampuannya dalam melarutkan fosfat pada media pikovskaya cair
Nama Isolat Rata-rata
Diameter Koloni
mm Rata-rata
Diameter Zona
Bening mm
Indeks Pelarutan
IP Rata-rata
P Terlarut ppm
Warna Koloni
Burkholderia sp. PS4 10,25
16,00 1,56
0,8 Kuning
Bacillus subtilis J2 8,00
9,00 1,12
0,9 Putih
Kekuningan Pseudomonas
aeruginosa P2 7,25
11,25 1,55
1,3
Putih Kekuningan
Burkholderia sp. PS4 memiliki nilai yang paling rendah yaitu sebesar 0,8 ppm. Lain halnya dengan Pseudomonas aeruginosa P2
yang memiliki kemampuan dalam melarutkan fosfat terlarut paling besar tetapi nilai IP tidak berbeda jauh
dengan Burkholderia sp. PS4. Setiap spesies bakteri mempunyai kemampuan secara genetik yang berbeda dalam menghasilkan asam-asam organik baik dalam
jumlah maupun jenisnya selama pertumbuhan. Jumlah dan jenis asam-asam organik inilah yang berperan dalam menentukan tingginya pelarutan P Tatiek,
1991.
d. Pengujian Bakteri Pelarut Fosfat dalam Menghasilkan Enzim Fosfatase
Setelah dilakukan pengujian kemampuan isolat bakteri dalam melarutkan fosfat pada medium Pikovskaya padat dan cair, kemudian dilakukan pengujian
kemampuan kesembilan isolat bakteri 6 isolat asal tanah dan 3 isolat koleksi dalam menghasilkan enzim fosfatase Gambar 15. Hasil dari pengamatan pada
penelitian ini dapat dilihat dalam Gambar 15 berikut ini : Gambar 14. Pelarutan P pada media Pikovskaya Cair kiri dan Pikovskaya padat kanan
Pada Gambar 15 diketahui bahwa nilai aktivitas enzim paling tinggi dari isolat-isolat asal tanah dimiliki oleh Burkholderia sp. T9 yaitu sebesar 0,268 ppm
dan paling kecil dimiliki oleh isolat bakteri T8 yaitu sebesar 0,112 ppm. Sedangkan untuk isolat koleksi, nilai aktivitas enzim paling tinggi dimiliki oleh
Burkholderia sp. PS4 yaitu sebesar 0,127 ppm dan paling rendah dimiliki oleh Bacillus subtilis J2
yaitu sebesar 0,058 ppm. Enzim fosfatase berperan utama dalam melepaskan fosfat dari ikatan P-organik. Enzim ini banyak dihasilkan oleh
mikrob tanah, terutama yang bersifat heterotrof Havlin et al., 1999. Enzim fosfatase merupakan komplek enzim terpenting di dalam tanah yang berfungsi
melarutkan fosfat organik menjadi fosfat tersedia bagi tanaman. Enzim tersebut akan dihasilkan secara dominan pada kondisi ketersediaan fosfor rendah.
Peningkatan aktivitas enzim fosfatase dapat terinduksi ketika jumlah P terbatas dalam media tanam, hal ini juga mencirikan akan tingginya kebutuhan P Salvin et
al., 2000. Berdasarkan hal tersebut Burkholderia sp. T9 asal tanah dan isolat koleksi Burkholderia sp. PS4 dapat dikatakan memiliki kemampuan paling baik
dalam melarutkan P-organik yang terikat sehingga apabila diaplikasikan ke dalam tanah dapat meningkatkan efisiensi penyerapan fosfat oleh tumbuhan.
0,058 0,127
0,126 0,112
0,268 0,166
0,132 0,128 0,136
0,05 0,1
0,15 0,2
0,25 0,3
J2 PS4
P2 T8
T9 T3
T4 T6
T2
K on
se n
tr as
i F os
for p
p m
Isolat Bakteri
Nilai terendah Nilai tertinggi
Gambar 15. Kemampuan Sembilan Isolat Bakteri dalam Menghasilkan Enzim Fosfatase
e. Kurva Standar Bakteri
