26
3.2.2.2 Pembuatan blanko dan penentuan baseline
Pelarut dimasukkan kedalam kedua kuvet sebagai blanko, kemudian diukur absorbansinya sehingga didapat baseline untuk pengukuran sampel.
3.2.2.3 Pembuatan kurva serapan indometasin
Larutan induk baku dipipet 5 ml, dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml kemudian dicukupkan dengan medium pH 7,4 sampai garis tanda, dikocok sampai
homogen. Konsentrasi indometasin adalah 10 ppm mcgml. Diukur serapannya dengan spektrofotometer uv pada panjang gelombang 200-360
nm.
3.2.2.4 Pembuatan kurva kalibrasi indometasin
Dari larutan induk baku tersebut dibuat larutan indometasin dengan berbagai konsentrasi yaitu: 0,3; 1; 4; 8; 10; 12; 14; 16 dan 18 ppm denga n
memipet larutan induk baku masing-masing 0,15; 0,5; 2; 4; 5; 6; 7; 8 dan 9 ml dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml kemudian dicukupkan dengan medium pH
7,4 sampai garis tanda, dikocok sampai homogen. Diukur serapannya dengan Spektrofotometer UV pada panjang gelombang 266,0
nm.
3.2.3 Penyiapan membran biologis
Pada penelitian ini digunakan kulit dari kelinci jantan dengan berat berkisar antara 1,5-2 kg. Rambut pada daerah abdomen dicukur dengan hati-hati
menggunakan pisau cukur Gillette Goal. Pencukuran dilakukan sehari sebelum pengambilan kulit untuk mengkondisikan kulit sesuai lingkungan. Kelinci
dimatikan dengan cara dibius dengan dietil eter dan kulit bagian abdomen dipotong dengan gunting bedah. Dibersihkan lemak yang menempel, dicuci
dengan akuades, dibungkus dengan aluminium foil, dan disimpan segera pada suhu -50°C lemari pembeku bersuhu sangat rendah, Sanyo, Japan sampai
Universitas Sumatera Utara
27 eksperimen dilakukan Akhtar, et al, 2011. Pada waktu kulit mau dipakai, kulit
direndam dengan larutan NaCl 0,9 selama 24 jam.
3.2.4 Pembuatan salep indometasin
Indometasin 0,02 g
Vaselin album ad 2 g
Ditimbang semua bahan. Dimasukkan indometasin ke dalam lumpang dan gerus. Kemudian tambahkan vaselin album, gerus homogen, lalu masukkan dalam
pot plastik.
3.2.5 Pembuatan gel indometasin dengan dasar HPMC
Indometasin 0,02 g
Basis HPMC ad 2 g
Ditimbang semua bahan. Dikembangkan basis HPMC dengan akuades mendidih sebanyak
sepuluh kali lipat jumlah HPMC yang ditimbang, dibiarkan
selama 15 menit hingga mengembang, gerus hingga homogen. Ditambahkan indometasin yang sudah digerus sebelumnya ke dalam lumpang dan gerus hingga
massa homogen. Masukkan ke dalam pot plastik.
3.2.6 Pembuatan gel dengan dasar alginat
Komposisi dasar gel alginat: R Kalsium klorida
0,025 g Natrium alginat
1,5 g Metil paraben
0,01 g Gliserin
22,5 g Akuades ad
50 g
Universitas Sumatera Utara
28 Ditimbang natrium alginat sebanyak 1,5 g, dikembangkan diatas akuades
secukupnya, dibiarkan selama 1 malam hingga mengembang. Ditambahkan kalsium klorida yang telah dilarutkan dalam akuades, dan ditambahkan dengan
metil paraben yang telah dilarutkan dalam air panas, gerus hingga homogen. Kemudian ditambahkan gliserin kedalam campuran diatas, gerus hingga massa
homogen. Kemudian masukkan ke dalam pot plastik Bangun, 2001.
3.2.7 Pembuatan gel indometasin