Penyiapan membran biologis Pembuatan salep indometasin Pembuatan gel indometasin dengan dasar HPMC Pembuatan gel dengan dasar alginat

26

3.2.2.2 Pembuatan blanko dan penentuan baseline

Pelarut dimasukkan kedalam kedua kuvet sebagai blanko, kemudian diukur absorbansinya sehingga didapat baseline untuk pengukuran sampel.

3.2.2.3 Pembuatan kurva serapan indometasin

Larutan induk baku dipipet 5 ml, dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml kemudian dicukupkan dengan medium pH 7,4 sampai garis tanda, dikocok sampai homogen. Konsentrasi indometasin adalah 10 ppm mcgml. Diukur serapannya dengan spektrofotometer uv pada panjang gelombang 200-360 nm.

3.2.2.4 Pembuatan kurva kalibrasi indometasin

Dari larutan induk baku tersebut dibuat larutan indometasin dengan berbagai konsentrasi yaitu: 0,3; 1; 4; 8; 10; 12; 14; 16 dan 18 ppm denga n memipet larutan induk baku masing-masing 0,15; 0,5; 2; 4; 5; 6; 7; 8 dan 9 ml dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml kemudian dicukupkan dengan medium pH 7,4 sampai garis tanda, dikocok sampai homogen. Diukur serapannya dengan Spektrofotometer UV pada panjang gelombang 266,0 nm.

3.2.3 Penyiapan membran biologis

Pada penelitian ini digunakan kulit dari kelinci jantan dengan berat berkisar antara 1,5-2 kg. Rambut pada daerah abdomen dicukur dengan hati-hati menggunakan pisau cukur Gillette Goal. Pencukuran dilakukan sehari sebelum pengambilan kulit untuk mengkondisikan kulit sesuai lingkungan. Kelinci dimatikan dengan cara dibius dengan dietil eter dan kulit bagian abdomen dipotong dengan gunting bedah. Dibersihkan lemak yang menempel, dicuci dengan akuades, dibungkus dengan aluminium foil, dan disimpan segera pada suhu -50°C lemari pembeku bersuhu sangat rendah, Sanyo, Japan sampai Universitas Sumatera Utara 27 eksperimen dilakukan Akhtar, et al, 2011. Pada waktu kulit mau dipakai, kulit direndam dengan larutan NaCl 0,9 selama 24 jam.

3.2.4 Pembuatan salep indometasin

Indometasin 0,02 g Vaselin album ad 2 g Ditimbang semua bahan. Dimasukkan indometasin ke dalam lumpang dan gerus. Kemudian tambahkan vaselin album, gerus homogen, lalu masukkan dalam pot plastik.

3.2.5 Pembuatan gel indometasin dengan dasar HPMC

Indometasin 0,02 g Basis HPMC ad 2 g Ditimbang semua bahan. Dikembangkan basis HPMC dengan akuades mendidih sebanyak sepuluh kali lipat jumlah HPMC yang ditimbang, dibiarkan selama 15 menit hingga mengembang, gerus hingga homogen. Ditambahkan indometasin yang sudah digerus sebelumnya ke dalam lumpang dan gerus hingga massa homogen. Masukkan ke dalam pot plastik.

3.2.6 Pembuatan gel dengan dasar alginat

Komposisi dasar gel alginat: R Kalsium klorida 0,025 g Natrium alginat 1,5 g Metil paraben 0,01 g Gliserin 22,5 g Akuades ad 50 g Universitas Sumatera Utara 28 Ditimbang natrium alginat sebanyak 1,5 g, dikembangkan diatas akuades secukupnya, dibiarkan selama 1 malam hingga mengembang. Ditambahkan kalsium klorida yang telah dilarutkan dalam akuades, dan ditambahkan dengan metil paraben yang telah dilarutkan dalam air panas, gerus hingga homogen. Kemudian ditambahkan gliserin kedalam campuran diatas, gerus hingga massa homogen. Kemudian masukkan ke dalam pot plastik Bangun, 2001.

3.2.7 Pembuatan gel indometasin