- Daun zodia - Dimetil Sulfoksida DMSO
- Kertas Cakram p.a Oxoid
- Mueller Hinton Agar MHA p.a Oxoid
- Nutrien Agar NA p.a Oxoid
- Nutrien Broth NB p.a Oxoid
3.3. Prosedur Penelitian
3.3.1. Penyediaan Sampel
Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah daun zodia segar yang diperoleh dari Zipur Kecamatan Helvetia Medan.
3.3.2. Isolasi Minyak Atsiri Daun Zodia dengan Alat Stahl
Sebanyak 150 gram daun zodia segar dipotong kecil-kecil dan dimasukkan kedalam labu alas 1000 mL ditambahkan aquadest secukupnya, dihubungkan dengan alat
penyuling Stahl dan dididihkan selama ± 4-5 jam hingga menghasilkan minyak atsiri menguap sempurna. Destilat minyak bersama air yang diperoleh ditampung pada gelas
Erlenmeyer kemudian ditambahkan NaCl hingga jenuh lalu dimasukkan kedalam corong pisah, ditambahkan eter didiamkan hingga diperoleh dua lapisan. Lapisan atas
ditambahkan Na
2
SO
4
anhidrous, kemudian diuapkan eternya, dimasukkan kedalam botol vial, ditutup rapat dan disimpan ditempat sejuk. Minyak atsiri yang diperoleh
sebagian sebagai cuplikan disuntikkan ke alat GC-MS untuk dianalisis komponen kimianya hingga diperoleh kromatogram dan spektrum dari masing-masing senyawa
penyusun minyak atsiri serta dilakukan uji aktivitas antibakteri terhadap Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa dan Shigella dysentriae.
3.3.3. Analisis Minyak Atsiri Daun Zodia dengan GC-MS
Cuplikan dimasukkan kedalam gerbang suntik pada sebuah alat GC-MS. Selanjutnya kondisi disesuaikan dengan kondisi masing-masing bagian peralatan seperti dibawah
ini kemudian diamati kromatogram yang dihasilkan oleh recorder dan mass recorder serta mass spektra masing-masing senyawa. Kondisi GC-MS yang di gunakan analisa
komponen kimia minyak atsiri daun daun zodia segar tersebut adalah sebagai berikut :
GCMS – QP2010S SHIMADZU Kolom
: AGILENT HP 5MS Panjang
: 30 meter Gas Pembawa
: Helium Pengion
: EI [GC-2010]
Column Oven Temperature : 50.
o
C Injection Temperature
: 300
o
C Injection Mode
: Split Flow Control Mode
: Pressure Pressure
: 13.0 kPa Total Flow
: 83.9 mLmin Column Flow
: 0.55 mLmin Linear Velocity
: 26.8 cmsec Purge Flow
: 3.0 mLmin Split Ratio
: 147.4 Equilibrium Time
: 1.0min [GCMS-QP2010]
Ion Source Temperature : 250.
o
C Interface Temperature
: 300
o
C Solvent Cut Time : 1.60min
Detector Gain Mode : Relative
Detector Gain : +0,00kV
[MS] Start Time
: 1.80min End time
: 80min ACQ Mode
: Scan Event Time
: 0.50sec Scan Speed
: 125 Start mz
: 28 End mz
: 600
3.3.4. Pengujian Sifat antibakteri Minyak Atsiri Daun zodia
