Efek analgesik ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. pada mencit betina Galur Swiss - USD Repository

EFEK ANALGESIK EKSTRAK METANOL-AIR DAUN

Macaranga tanarius L. PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat

memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh:

Aryanti Prima Andini

NIM: 078114080

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2010

EFEK ANA

ALGESIK EKSTRAK METANOL-A

AIR DAUN GALUR SWISS

Macaranga tanar

D M

narius L. PADA MENCIT BETINA GA

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi Oleh:

Aryanti Prima Andini NIM : 078114080

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2010

HALAMAN PERSEMBAHAN “Kan kubayar mahal segala usahaku dengan pengakhiran yang indah” Karya ini kupersembahkan untuk :

Allah SWT sumber kekuatanku, keluargaku tercinta motivatorku, pembimbingku tercinta Phebe Hendra, penyemangatku Dina Wulandari dan Andreas Arry Mahendra, seluruh warga dan rekan Farmasi USD, dan Almamaterku Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL………………………………………………………........... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING……………………………......... ii HALAMAN PENGESAHAN……………………………………………............. iii HALAMAN PERSEMBAHAN…………………………………………….......... iv PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI …………………………......... v PERNYATAAN KEASLIAN KARYA………..………………………………... vi PRAKATA…………………………………………………………………........... vii DAFTAR ISI………………………………………………………………........... x DAFTAR TABEL…………………………………………………………............ xiii DAFTAR GAMBAR............................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………………............ xv

INTISARI…………………………………………………………………............. xvi

ABSTRACT ………………………………………………………………................xvii

BAB I. PENGANTAR……………………………………………......................... 1 A. Latar Belakang…………………………………………..………………............ 1

1. Permasalahan.......…………………………………......……….................... 4

2. Keaslian Penelitian…………………………………………….......………. 4

3. Manfaat Penelitian…………………………………………………………. 5

B. Tujuan Penelitian.................................................................................................. 6

2. Tujuan khusus................................................................................................ 6

BAB II. PENELAHAAN PUSTAKA..................................................................... 7 A. Tanaman M. tanarius ........................................................................................... 7

1. Keterangan botani ......................................................................................... 7

2. Morfologi....................................................................................................... 7

3. Kandungan kimia……………………………………………....................... 7

4. Khasiat dan kegunaan .................................................................................. 9

5. Ekologi penyebaran dan budidaya ............................................................... 9

B. Metode Penyarian................................................................................................. 10

C. Nyeri..................................................................................................................... 11

D. Analgesik.............................................................................................................. 15

E. Metode Pengujian Efek Analgesik....................................................................... 15

F. Asetosal………………………............................................................................. 17

G. Landasan Teori..................................................................................................... 17

H. Hipotesis .............................................................................................................. 19

BAB III. METODE PENELITIAN......................................................................... 20 A. Jenis dan Rancangan Penelitian........................................................................... 20 B. Variabel dan Definisi Operasional....................................................................... 20

1. Variabel………..……………………………………………....................... 20

2. Definisi operasional ..................................................................................... 21

C. Bahan Penelitian.................................................................................................. 23

E. Tata Cara Penelitian ............................................................................................ 25

F. Tata Cara Analisis Hasil .......................................................................................31

BAB IV . HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 32 A. Hasil Determinasi Tanaman................................................................................. 32 B. Hasil Penimbangan Bobot Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius.................... 32 C. Hasil Uji Pendahuluan Analgesik........................................................................ 33 D. Hasil Uji Efek Analgesik Ekstrak Metanol-Air Daun M. tanarius...................... 40 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN................................................................ 55 A. Kesimpulan.......................................................................................................... 55 B. Saran.................................................................................................................... 55 DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................. 56 LAMPIRAN............................................................................................................ 59 BIOGRAFI PENULIS.......................................................................................... 77

DAFTAR TABEL

Tabel I Rata-rata jumlah geliat pada penetapan dosis asam asetat....................... 36 Tabel II Hasil Uji Scheffe jumlah geliat mencit pada penetapan dosis asam asetat........................................................................................................ 37 Tabel III Rata-rata jumlah geliat pada berbagai selang waktu pemberian asam asetat........................................................................................................ 38 Tabel IV Hasil uji Scheffe jumlah geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat............................................................................................... 39 Tabel V Rata-rata jumlah geliat dan persen proteksi pada pengujian efek analgesik pada seluruh kelompok ........................................................ 41 Tabel VI Hasil uji Scheffe persen proteksi pada pengujian efek analgesik pada seluruh kelompok.................................................................................. 44 Tabel VII Hasil perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol positif pada uji efek analgesik....................................................................... 47 Tabel VIII Hasil uji Scheffe perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol positif pada uji efek analgesik............................................................ 49

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur senyawa dalam daun M. tanarius.............................................. 8 Gambar 2. Struktur asetosal…………..................................................................... 17 Gambar 3. Diagram batang rata-rata jumlah geliat pada penetapan dosis asam asetat........................................................................................................ 36 Gambar 4. Grafik rata-rata jumlah geliat pada orientasi selang waktu pemberian asam asetat............................................................................................ 39 Gambar 5. (a). Grafik rata-rata jumlah geliat pada pengujian efek analgesik seluruh kelompok……………………………………………………............ 42

(b). Grafik persen proteksi geliat pada pengujian efek analgesik seluruh kelompok……………………………………………………............ 42 Gambar 6. Diagram batang perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol positif pada ujiefek analgesik............................................................... 48 Gambar 7. Grafik persamaan garis ED50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius.. 50 Gambar 8. Gambar perpindahan elektron ikatan

α-β unsaturated pada

macarangiosida A……………………………………………………...51 Gambar 9. Mekanisme pelepasan mediator nyeri dan inflamasi………………… 53

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Foto daun M. tanarius...........................................................................59 Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air daun M. tanarius......................................... 59 Lampiran 3. Foto larutan ekstrak metanol-air daun M. tanarius.............................. 59 Lampiran 4. Foto geliat mencit yang memenuhi syarat............................................ 59 Lampiran 5. Penetapan dosis asam asetat berserta hasil analisis statistiknya........... 60 Lampiran 6. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat berserta hasil analisis statistiknya........................................................................................... 62 Lampiran 7. Hasil kelompok uji efek analgesik berserta hasil analisis statistiknya..64 Lampiran 8. Hasil persen proteksi geliat pada uji efek analgesik berserta hasil analisis statistiknya..............................................................................67 Lampiran 9. Hasil perubahan persen proteksi geliat terhadap kontrol positif pada uji efek analgesik......................................................................................70 Lampiran 10. Perhitungan penetapan peringkat dosis ekstrak metanol-air daun M.

tanarius ................................................................................................73

Lampiran 11. Hasil rendemen ekstrak metanol-air daun M. tanarius........................74 Lampiran 12. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air daun M. tanarius..................74 Lampiran 13. Surat keterangan determinasi tanaman M. tanarius…........................75 Lampiran 14. Surat keterangan hewan uji………………………….........................76

INTISARI

Peran tanaman obat dalam penanganan nyeri semakin meningkat belakangan ini, terlebih dengan adanya issue back to nature. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek analgesik, persen proteksi, perubahan persen proteksi dan ED .

50 Penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak

lengkap pola satu arah. Metode penelitian yang digunakan adalah metode rangsang kimia dengan penginduksi asam asetat. Mencit betina sehat, galur Swiss secara acak dibagi menjadi 5 kelompok. Setiap kelompok terdiri dari 5 hewan uji. Kelompok I adalah CMC Na 1% dosis 6.400 mg/KgBB. Kelompok II adalah asetosal dosis 91 mg/KgBB. Kelompok III, IV dan V berturut-turut adalah ekstrak metanol-air M.

tanarius pada dosis 711; 2.133 dan 6.400 mg/ KgBB. Data dievaluasi dengan

ANOVA satu arah, dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk membandingkan rata-rata dari setiap kelompok dosis dengan kelompok kontrol.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak metanol-air dari daun M.

tanarius mempunyai efek analgesik. Persen proteksi ekstrak metanol-air dari daun M.

tanarius pada dosis 711; 2.133 dan 6.400 mg/KgBB berturut-turut adalah 31,4; 62,1

dan 82,2 persen. Perubahan persen proteksi ekstrak metanol-air dari daun M. tanarius pada dosis 711; 2.133 dan 6.400 mg/KgBB berturut-turut adalah -48,1; 2,7 dan 35,9 persen. ED 50 dari ekstrak metanol-air daun M. tanarius adalah 1.470 mg/kgBB. efek analgesik, ekstrak metanol-air daun M. tanarius

Kata kunci:

ABSTRACT

Recently the role of medicine plant increasingly important in pain treatment, in fact, it mainly promoted by back to nature issue. This study aimed at knowing whether the methanol-water extract of M. tanarius leaf has analgesic effect, the percent protection, the change in percent protection and ED .

50 This was a experimental study with one way-complete-random design. The

study method used was acetic acid induced. Healthy female mice of Swiss strain were randomly divided into 5 group of 5 animals in each. Group I received CMC Na 1% at dose of 6,400 mg/KgBW. Group II received asetosal at dose of 91 mg/KgBW. Group

III, IV and V received respectively, the methanol-water extract of M. tanarius leaf at dose of 711; 2,133 and 6,400 mg/KgBW. Data were evaluated by one-way ANOVA, followed by Scheffe test to compare the mean of each dose group with the control group.

Result of the study suggesting that the methanol-water extract of M. tanarius leaf has analgesic effect. Percent protection of the methanol-water extract of M.

tanarius leaf at dose of 711; 2,133 and 6,400 mg/KgBW were 31.4; 62.1 and 82.2

percent, respectively. The change in percent protection of the methanol-water extract of M. tanarius leaf at dose of 711; 2,133 and 6,400 mg/KgBW were -48.1; 2.7 and 35.9 percent, respectively. ED of the methanol-water extract of M. tanarius leaf is

50 1,470 mg/kgBW.

analgesic effect, methanol-water extract of M. tanarius leaf

Keywords:

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Nyeri dapat digambarkan sebagai pengalaman sensorik dan emosional

yang tidak menyenangkan berkaitan dengan kerusakan jaringan (Price dan

Wilson, 2005). Nyeri merupakan keluhan utama yang membawa pasien ke dokter

(Dewoto, 2006) dan kondisi yang menimbulkan rasa tidak nyaman pada penderita.

Dilaporkan timbulnya nyeri pada pasien dengan penyakit serius di rumah sakit

sebesar 50% (DiPiro, Tabert, Yee, Matzke, Wells dan Posey, 2008). Munculnya

rasa nyeri menimbulkan dampak yang tidak menguntungkan bagi penderitanya.

Salah satu solusi untuk mengatasi rasa nyeri tersebut dengan mengembangkan

berbagai upaya pengobatan (Soedibyo, 1998).

Tujuan keseluruhan pengobatan nyeri adalah mengurangi nyeri

semaksimal mungkin dengan meminimalkan kemungkinan efek samping (Price

dan Wilson, 2005). Terapi farmakologis yang dapat digunakan dalam mengatasi

nyeri di masyarakat menggunakan obat yang memiliki efek analgesik, seperti

parasetamol dan asetosal. Hanya saja asetosal kini jarang digunakan karena efek

sampingnya yang relatif tinggi. Katzung (2004) melaporkan pada dosis biasa,

asetosal atau asam asetilsalisilat dapat menyebabkan gangguan lambung. Kerja

obat ini adalah menghambat prostaglandin G/H synthase dan meredakan nyeri

ringan sampai sedang yang sebabnya beragam, tetapi tidak efektif untuk nyeri

organ dalam (viceral pain).

2 Asetosal (asam asetilsalisilat atau aspirin) memiliki mekanisme kerja

sebagai antiinflamasi, antipiretik dan analgesik. Sebagai analgesik sangat efektif

mengurangi nyeri intensitas ringan-sedang melalui efeknya pada inflamasi, yang

mungkin menghambat rangsang nyeri pada tingkat subkorteks (Dewoto, 2006)

sehingga diketahui asetosal memiliki efek analgesik.

Selain menggunakan obat sintetik, ada kemungkinan masyarakat

mengatasi nyeri dengan menggunakan tumbuhan sebagai alternatif pengobatan,

dikarenakan semakin mahalnya biaya kesehatan termasuk biaya pengobatan.

Selain itu, muncul kecenderungan masyarakat untuk mengatasi penyakit dengan

memanfaatkan tumbuhan sekitar yang mungkin berkhasiat (back to nature) karena

dianggap relatif lebih aman daripada produk obat sintetik sehingga lebih

menguntungkan bagi masyarakat. Oleh karena itu, banyak dilakukan penelitian

efek analgesik suatu tumbuhan sebagai alternatif pengobatan guna mendapatkan

informasi yang bermanfaat bagi pengembangan dunia pengobatan.

M. tanarius yang dikenal sebagai tumbuhan perintis yang tumbuh lebih

dahulu dibanding tumbuhan lain dan juga diketahui sebagai tumbuhan bersemut

(Phommart, Sutthivaiyakit, Chimnoi, Ruchirawat dan Sutthivaiyakit, 2005)

mungkin jarang dikenal oleh sebagian besar masyarakat Indonesia. M. tanarius

adalah pohon yang berdaun hijau memiliki ketinggian 4-5 meter ditemukan di

daerah bersemak di sepanjang Asia Selatan dan Timur, khususnya bagian Selatan

Cina, Korea dan Jepang (Phommart, dkk, 2005) telah banyak dilaporkan terkait

kandungan senyawanya baik pada bagian daun, batang maupun buahnya.

3 Ekstrak n-heksan dan kloroform dari daun M. tanarius dilaporkan

mengandung nymphaeol dan tanariflavanon sebagai antioksidan terhadap uji

DPPH serta nymphaeol B sebagai agen antiinflamasi pada uji siklooksigenase-2

(Phommart, dkk, 2005). Matsunami, Takamori, Shinzato, Aramoto, Kondo,

Otsuka, dkk (2006) melaporkan 4 kandungan baru dari M. tanarius yaitu

macarangiosida A-D, dan malofenol B, yang diisolasi dari ekstrak metanol M.

tanarius. Matsunami, Otsuka, Kondo, Shinzato, Kawahata, Yamaguchi, dkk

(2009) melaporkan bahwa macarangiosida A-C dan malofenol B menunjukkan

aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH. Kandungan senyawa

macarangiosida A-C dan malofenol B diketahui merupakan golongan senyawa

glikosida.

Robinson (1995) melaporkan bahwa glikosida lebih mudah larut dalam

air. Bila digunakan penyari kombinasi antara metanol dan air sebagai pelarut,

dimungkinkan tidak hanya kandungan senyawa macarangiosida A-C dan

malofenol B yang dapat tersari melainkan adanya kandungan glikosida lain yang

diharapkan memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas dapat tertarik semakin

banyak. Hal ini diakibatkan karena penggunaan penyari metanol dan air memiliki

sifat yang lebih polar bila dibandingkan metanol absolut. Bila penyari yang

digunakan semakin polar diharapkan kandungan glikosida yang larut dan tersari

semakin banyak sehingga efek penangkapan radikal bebas juga semakin besar.

Radikal bebas merupakan substansi yang berperan dalam proses

timbulnya nyeri. Tjay dan Rahardja (2007) melaporkan bahwa ada kaitan antara

dan peradangan (inflamasi) melalui jalur siklooksigenase dan lipooksigenase. Bila

radikal bebas ditangkap maka dimungkinkan proses timbulnya nyeri terhambat.

Oleh karena itu, dalam penelitian ini akan dilakukan uji efek analgesik

ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss. Penelitian

ini menggunakan penyari kombinasi antara metanol-air (metanol 50%) didasarkan

pada sifat glikosida yang larut dalam air dan adanya penelitian Matsunami, dkk

(2006; 2009), dilaporkan menggunakan penyari metanol diperoleh kandungan

macarangiosida A-C dan malofenol B yang diketahui memiliki aktivitas

penangkapan radikal bebas yang dapat menghambat proses timbulnya nyeri.

1. Permasalahan

a. Apakah ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek analgesik pada

mencit betina galur Swiss?

b. Berapa besar persen proteksi geliat ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada

mencit betina galur Swiss?

c. Berapa besar perubahan persen proteksi geliat ekstrak metanol-air daun M.

tanarius pada mencit betina galur Swiss?

d. Berapa besar ED 50 dari ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss?

2. Keaslian penelitian

Penelitian terdahulu terkait konstituen dari daun M. tanarius memiliki

kandungan senyawa diantaranya glukosida yang dinamai macarangiosida A-C dan

malofenol B, yang diisolasi dari ekstrak metanol daun M. tanarius. Senyawa

tersebut menunjukkan aktivitas penangkapan radikal terhadap DPPH (Matsunami,

dkk, 2006; 2009).

Phommart, dkk (2005) melaporkan dari daun M. tanarius ditemukan 3

kandungan senyawa baru yaitu tanarifuranonol, tanariflavanon C, dan

tanariflavanon D bersama dengan 7 kandungan yang telah diketahui yaitu

nymphaeol

A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanon B, blumenol A (vomifoliol), blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol dan annuionon).

Penelitian terkait pengujian daun M. tanarius melaporkan kandungan

ekstrak metanol M. tanarius berupa corilagin mallotinic acid, chebulagic acid dan

novel ellagitannin

(macatannin A) mempunyai aktivitas menghambat α- glukosidase (Puteri dan Kawabata, 2010).

Ekstrak n-heksan dari daun M. tanarius dilaporkan mengandung

nymphaeol dan tanariflavanon sebagai antioksidan terhadap uji DPPH serta

nymphaeol B sebagai agen antiinflamasi pada uji siklooksigenase-2 (Phommart,

dkk, 2005).

Sejauh pengamatan penulis, penelitian tentang efek analgesik ekstrak

metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss belum pernah

dilakukan.

3. Manfaat Penelitian

a. Manfaat teoritis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi yang bermanfaat tentang kegunaan daun M. tanarius yang dapat dimanfaatkan sebagai

6 b. Manfaat praktis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi terkait efek, besar

persen proteksi geliat, besar perubahan persen proteksi geliat dan besar ED

50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss.

B. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum Penelitian ini dapat memberikan informasi tentang kegunaan tumbuhan sebagai analgesik terutama daun M. tanarius.

2. Tujuan khusus

a. Untuk mengetahui efek analgesik ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss.

b. Untuk mengetahui besar persen proteksi geliat dari ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss.

c. Untuk mengetahui besar perubahan persen proteksi geliat ekstrak metanol- air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss.

d. Untuk mengetahui besar ED 50 ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada mencit betina galur Swiss.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. M. tanarius

1. Keterangan Botani

Macaranga tanarius termasuk dalam famili euphorbiaceae. Tanaman ini

dikenal dengan beberapa nama daerah antara lain Tutup Ancur (Jawa), Mapu (Batak), Mara (Sunda) (Anonim, 2010a).

2. Morfologi tumbuhan

M. tanarius

merupakan pohon kecil sampai sedang, dengan dahan agak besar. Daun berseling, agak membundar, dengan stipula besar yang luruh.

Perbungaan malai di ketiak, bunga ditutupi oleh daun gagang. Buah kapsul berkokus 2, ada kelenjar kekuningan di luarnya. Biji membulat dan menggelembur (Anonim, 2010a).

3. Kandungan kimia Dilaporkan 4 kandungan dari daun M. tanarius glukosida, dinamai macarangiosida A-D, bersama dengan malofenol B, lauroside E, methyl brevifolin

carboxylate

, dan hyperin dan isoquercitrin (Matsunami, dkk, 2006), serta lignan glukosida, pinoresinol, dan megastigman glukosida, dinamai macarangiosida E dan F, bersama dengan 15 komponen lain yang telah diketahui dilaporkan terdapat pada daun M. tanarius (Matsunami, dkk, 2009). Uji kimia tanin dalam daun M.

8 Nishioka, 1990). Dari daun M. tanarius dilaporkan dan diidentifikasi bahwa

ditemukan 3 kandungan senyawa baru yaitu tanarifuranonol, tanariflavanon C, dan tanariflavanon D bersama dengan 7 kandungan yang telah diketahui yaitu

nymphaeol

A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanon B, blumenol A (vomifoliol), blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol dan annuionon). Struktur senyawa tanariflavanon C dan D, nymphaeol A, B dan C, malofenol B serta macarangiosida A-C (gambar 1).

Tanariflavanon C Tanariflavanon D A Nymphaeol

Nymphaeol B Nymphaeol C Malofenol B Macarangiosida A Macarangiosida B Macarangiosida C

Gambar 1. Struktur senyawa dalam daun M. tanarius

(Phommart dkk, 2005 dan Matsunami dkk, 2006).

4. K hasiat dan kegunaan Secara tradisional daun M. tanarius digunakan sebagai fermentasi pada tempe dan pakan hewan (Puteri dan Kawabata, 2010). Daun M. tanarius kaya akan tanin dan digunakan sebagai obat di masyarakat seperti obat diare, luka dan juga sebagai antiseptik (Lin, dkk, 1990). Dalam pengobatan tradisional di Malaysia dan Thailand, dekok akar Macaranga digunakan sebagai antipiretik dan antitusif. Akar keringnya digunakan sebagai agen emetik, sementara daun segarnya digunakan sebagai penutup luka guna mencegah terjadinya inflamasi. Di Cina jenis Macaranga ini menjadi tumbuhan yang komersil, yang dijadikan sebagai produk minuman kesehatan (Lim, Lim, Yule, 2009).

5. Ekologi penyebaran dan budidaya Tumbuhan M. tanarius tersebar luas, dari Kepulauan Andaman dan Nicobar,

Indo-Cina, Cina Selatan, Taiwan dan Kepulauan Ryukyu, seluruh Malesia, sampai ke Australia Utara dan Timur dan Melanesia. Jenis ini umum dijumpai di daratan Asia Tenggara (Thailand Selatan, Semenanjung Malaya), dan pada banyak pulau di Malesia (yaitu Sumatra, Borneo, Kepulauan Sunda Kecil, Sulawesi, Nugini, seluruh Kepulauan Filipina) (Anonim, 2010a). Tumbuhan ini dapat ditemukan disepanjang Asia Timur dan Selatan, khususnya Cina Selatan, Korea dan Jepang (Matsunami, dkk, 2006).

10 B. Metode Penyarian

Penyarian merupakan peristiwa pemindahan massa. Zat aktif yang semula berada di dalam sel ditarik oleh cairan penyari, sehingga terjadi larutan zat aktif dalam cairan penyari tersebut. Secara umum penyarian dapat dibedakan menjadi infundasi, maserasi dan perkolasi (Depkes RI, 1986).

Infundasi merupakan proses penyarian yang umumnya digunakan untuk menyari zat kandungan aktif yang larut dalam air dari bahan-bahan nabati. Penyarian dengan cara ini menghasilkan sari yang tidak stabil dan mudah tercemar oleh kuman dan kapang. Oleh karena itu, sari yang diperoleh dengan cara ini tidak boleh disimpan lebih dari 24 jam. Infus adalah sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 90 C selama 15 menit (Depkes RI, 1986).

Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana. Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif, zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif di dalam dan di luar sel, maka larutan yang terpekat didesak keluar. Peristiwa tersebut berulang sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar dan di dalam sel (Depkes RI, 1986).

Perkolasi merupakan cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan cairan penyari melalui serbuk simplisia yang telah dibasahi. Prinsip perkolasi adalah simplisia ditempatkan dalam suatu bejana silinder yang di bagian bawahnya diberi

akan melarutkan zat aktif dari sel-sel yang dilalui sampai mencapai keadaan jenuh (Depkes RI, 1986).

Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari simplisia nabati atau hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian rupa hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Depkes RI, 1995).

C. Nyeri

1. Definisi Nyeri adalah perasaan yang dipicu oleh sistem saraf. Nyeri dapat menyakitkan atau membahayakan penderitanya. Rasa nyeri ini mungkin dapat muncul dan pergi seketika atau mungkin konstan. Penderita mungkin merasa nyeri di satu daerah tubuh, seperti punggung, perut atau dada atau mungkin merasa sakit di seluruh tubuh. Nyeri dapat membantu dalam mendiagnosis suatu masalah kesehatan. Setelah penderita diterapi, rasa nyeri biasanya hilang. Namun, terkadang rasa nyeri itu berlangsung selama mingguan, bulanan atau bahkan tahunan. Kondisi ini disebut nyeri kronis. Nyeri kronis disebabkan oleh penyebab yang berkelanjutan, seperti kanker atau arthritis atau terkadang penyebabnya tidak diketahui. Ada banyak cara untuk mengobati rasa nyeri. Pengobatan bervariasi tergantung pada penyebab rasa nyeri, seperti obat penghilang rasa nyeri, akupunktur dan operasi (Dugdale, 2009).

Nyeri adalah perasaan sensoris dan emosional yang tidak nyaman, berkaitan

pribadi dan ambang toleransi nyeri berbeda-beda bagi setiap orang. Rasa nyeri dalam kebanyakan hal hanya merupakan suatu gejala yang berfungsi sebagai isyarat bahaya tentang adanya gangguan di jaringan, seperti peradangan, infeksi atau kejang otot (Tjay dan Rahardja, 2007).

2. Terjadinya nyeri Nyeri disebabkan oleh rangsangan mekanis, kimiawi dan fisis (kalor, listrik) dapat menimbulkan kerusakan pada jaringan. Rangsangan tersebut memicu pelepasan zat-zat tertentu yang disebut mediator nyeri, antara lain histamin, bradikinin, leukotrien dan prostaglandin. Semua mediator nyeri itu merangsang reseptor nyeri (nociceptor) di ujung-ujung saraf bebas di kulit, mukosa serta jaringan lain dan demikian menimbulkan antara lain reaksi radang dan kejang. Nociceptor juga terdapat di seluruh jaringan dan organ tubuh, terkecuali SSP. Dari tempat ini rangsangan disalurkan ke otak melalui jaringan yang kemudian diteruskan ke pusat nyeri di otak, dimana dirasakan sebagai nyeri (Tjay dan Rahardja, 2007).

Nyeri timbul dari sejumlah kondisi. Cedera adalah penyebab utama, tetapi rasa nyeri mungkin juga hasil dari suatu penyakit. Nyeri dapat menyertai kondisi psikologis seperti depresi, atau mungkin terjadi bahkan tanpa adanya pemicu yang dikenali. (Anonim, 2010b).

3. Klasifikasi Penggolongan nyeri berdasarkan DiPiro dkk (2008) yaitu:

a. Nyeri akut Nyeri akut dapat menjadi proses peringatan fisiologis individu dari adanya penyakit dan situasi berbahaya. Penyebab umum nyeri akut termasuk pembedahan, penyakit akut, trauma, akivitas, dan prosedur medis.

b. Nyeri kronik Dalam kondisi normal, nyeri akut menghilang cepat karena adanya proses penyembuhan dengan mengurangi produksi rangsangan nyeri. Namun, dalam beberapa kasus, nyeri tetap terjadi selama berbulan-bulan sampai bertahun-tahun, yang mengarah ke keadaan nyeri kronis dengan karakteristik yang sangat berbeda dengan nyeri akut.

4. Mekanisme nyeri Proses penghantaran nyeri terdiri dari 4 tahap yaitu stimulasi, transmisi, persepsi nyeri dan modulasi.

a. Stimulasi Sensasi nyeri dimulai dengan pembebasan reseptor nyeri akibat rangsangan mekanis, panas, dan kimia. Adanya rangsangan tersebut (noxius

stimuli ) akan menyebabkan lepasnya bradikinin, K , prostaglandin, histamin,

leukotrien, serotonin dan substansi P. Aktivasi reseptor menimbulkan aksi potensial yang ditransmisikan sepanjang serabut saraf aferen menuju sumsum

b. Transmisi Transmisi rangsang nyeri terjadi di serabut aferen A  dan C. Serabut saraf aferen tersebut merangsang serabut nyeri di berbagai lamina spinal cord’s dorsal horn melepaskan berbagai neurotransmiter termasuk glutamat, substansi P, dan kalsitonin.

c. Persepsi nyeri Persepsi nyeri adalah titik utama transmisi impuls nyeri. Otak akan mengartikan sinyal nyeri dengan batas tertentu, sedangkan fungsi kognitif dan tingkah laku akan memodifikasi nyeri sehingga tidak menjadi lebih parah. Relaksasi, pengalihan, meditasi dan berkhayal dapat mengurangi rasa nyeri. Sebaliknya, perubahan biokimia saraf yang terjadi pada keadaan seperti depresi dan stres dapat memperburuk rasa nyeri.

d. Modulasi Modulasi nyeri melalui sejumlah proses yang kompleks. Diketahui bahwa sistem opiat endogen terdiri dari berbagai neurotransmiter (seperti enkhepalin, dinorfin, dan -endorfin dan reseptor-reseptor ( seperti

μ, , dan ) yang ditemukan dalam sistem saraf pusat. Opioid endogen berikatan dengan reseptor opioid dan mengantarkan transmisi rangsang nyeri (DiPiro dkk, 2008).

15 D. Analgesik

Schmitz, Lepper dan Heidrich (2009) mengatakan bahwa analgesik adalah zat-zat yang pada dosis terapetik meringankan atau menekan rasa nyeri. Analgesik dapat dibedakan menjadi dua golongan berdasarkan kerja farmakologisnya:

1. Analgesik non narkotik (perifer) yang terdiri dari obat-obat yang tidak bersifat narkotik dan tidak bekerja sentral. Analgesik antiradang termasuk kedalam kelompok ini.

2. Analgesik narkotik, khusus digunakan untuk menghalau rasa nyeri hebat seperti, fractura dan kanker.

Atas dasar dasar cara kerjanya, obat-obat ini dibagi dalam 3 kelompok yaitu:

a. Agonis opiat, cara kerja obat ini sama dengan morfin, hanya berlainan mengenai potensi dan lama kerjanya, efek samping, dan resiko akan ketergantungan fisik.

b. Antagonis opiat, bila digunakan sebagai analgesik, obat ini dapat menduduki salah satu reseptor.

c. Campuran, zat ini dengan kerja mengikat pada reseptor opioid, tetapi tidak atau hanya sedikit mengaktivasi daya kerjanya (Tjay dan Rahardja, 2007).

E. Metode Pengujian Efek Analgesik

Metode-metode pengujian aktivitas analgesik dilakukan dengan menilai kemampuan zat uji untuk menekan atau menghilangkan rasa nyeri yang diinduksi

mekanik, termik, elektrik, dan secara kima. Metode pengujian dengan menginduksi nyeri secara mekanik atau termik lebih sesuai untuk mengevaluasi obat-obat analgesik kuat. Pada umumnya daya analgesik dinilai pada hewan dengan mengukur besarnya peningkatan stimulus nyeri atau jangka waktu ketahanan hewan terhadap stimulus nyeri atau juga peranan frekuensi respon nyeri (Pyitomedika, 1991).

Turner (1965) melaporkan bahwa metode rangsang kimia menggunakan zat kimia yang diinjeksikan pada hewan uji secara intraperitoneal, sehingga akan menimbulkan nyeri. Beberapa zat kimia yang biasanya digunakan antara lain asam asetat dan fenil kuinon. Metode ini sederhana, reproducible (dapat diulang-ulang hasilnya), dan cukup peka untuk menguji senyawa analgesik dengan daya analgesik lemah, namun mempunyai kekurangan yaitu masalah kespesifikasinya. Oleh karena itu metode ini sering digunakan untuk penapisan (screening). Efek analgesik dapat dievaluasi menggunakan persen proteksi geliat.

% proteksi geliat = (100 – [(P/K) x 100])% P : jumlah kumulatif geliat mencit yang diberi perlakuan. K: jumlah kumulatif geliat mencit kelompok kontrol.

17 F. Asetosal

Gambar 2. Struktur asetosal (Helmenstine, 2010).

Asetosal (gambar 2) merupakan ester salisilat dari asam, berbentuk kristal putih seperti batang atau jarum dan berbau. Sedikit larut dalam air, sangat larut dalam alkohol. Nilai pKa dari asetosal adalah 3,5. Termasuk dalam golongan analgesik non- narkotik. Indikasi dari asetosal adalah sebagai pereda nyeri, sakit kepala, nyeri ringan lain yang berhubungan dengan adanya inflamasi, nyeri ringan sampai sedang setelah operasi, melahirkan, sakit gigi, dismenore (Anonim, 2010c).

G. Landasan Teori

Matsunami dkk, (2006) melaporkan kandungan dari M. tanarius yaitu macarangiosida A-D, dan malofenol B, yang diisolasi dari ekstrak metanol daun M.

tanarius . Penelitian terbaru dari Matsunami dkk, (2009) melaporkan kandungan

lignan glukosida yang diisolasi dari daun M. tanarius mempunyai aktivitas antioksidan terhadap penangkapan DPPH.

Robinson (1995) melaporkan bahwa glikosida lebih mudah larut dalam air. Bila digunakan penyari kombinasi antara metanol dan air sebagai pelarut,

dimungkinkan tidak hanya kandungan senyawa macarangiosida A-C dan malofenol B yang dapat tersari melainkan adanya kandungan glikosida lainnya yang memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas dapat tertarik semakin banyak. Hal ini diakibatkan karena penggunaan penyari metanol dan air memiliki sifat yang lebih polar bila dibandingkan metanol absolut. Bila penyari yang digunakan semakin polar diharapkan kandungan glikosida yang larut dan tersari semakin banyak sehingga efek penangkapan radikal bebas juga semakin besar.

Tjay dan Rahardja (2007) melaporkan bahwa ada kaitan antara penangkapan radikal bebas dengan penghambatan pembentukan mediator nyeri dan peradangan (inflamasi). Bila radikal bebas ditangkap dimungkinkan proses perubahan asam arakidonat menjadi endoperoksida dan asam hidroperoksida melalui jalur siklooksigenase dan lipooksigenase akan terhambat sehingga mediator nyeri dan peradangan tidak akan terbentuk serta tidak akan terjadi nyeri.

Banyak metode yang dapat dilakukan untuk menguji efek analgesik, namun untuk skrining awal untuk penapisan farmakologi cukup menggunakan metode rangsang kimia. Asam asetat digunakan sebagai iritan yang dapat merusak jaringan secara lokal. Setelah pemberian asam asetat secara intraperitoneal terjadi perubahan

pH di dalam rongga perut berakibat terjadinya pelepasan ion H dari asam asetat sehingga menyebabkan luka pada membran sel. Fosfolipid dari membran sel akan melepaskan asam arakhidonat yang pada akhirnya akan membentuk prostaglandin dan menimbulkan nyeri (Wilmana, 1995). Metode ini digunakan karena cakupan

spesifik bagaimana mekanisme efeknya, tetap dapat terlihat efeknya melalui metode ini.

H. Hipotesis

Ekstrak metanol-air daun M. tanarius memiliki efek analgesik pada mencit betina galur Swiss.

BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Jenis penelitian ini adalah eksperimental murni dengan rancangan penelitian acak lengkap pola satu arah. B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional

1. Variabel utama

a. Variabel bebas Variabel bebas penelitian ini adalah dosis ekstrak metanol-air daun M.

tanarius

. Dosis ekstrak metanol-air daun M. tanarius yang digunakan adalah jumlah miligram ekstrak metanol-air daun M. tanarius tiap kilogram berat badan hewan uji.

b. Variabel tergantung Variabel tergantung penelitian ini adalah persen proteksi geliat ekstrak metanol-air daun M. tanarius. Persen proteksi geliat ekstrak metanol-air daun M.

tanarius adalah kemampuan yang dimiliki ekstrak metanol-air daun M. tanarius

untuk mengurangi rasa nyeri dengan ditandai adanya penurunan jumlah geliat pada hewan uji.

2. Variabel pengacau

a. Variabel pengacau terkendali 1) Galur hewan uji adalah mencit dengan galur Swiss.

3) Umur hewan uji antara 2-3 bulan. 4) Berat badan hewan uji antara 20-30 gram. 5) Waktu pengamatan antara 08.00-14.00. 6) Cara pemberian ekstrak metanol-air daun M. tanarius pada hewan uji secara peroral.

7) Kondisi hewan uji: sehat. 8) Tempat pemanenan daun M. tanarius: kebun obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

9) Waktu pemanenan daun M. tanarius: Maret 2010.

b. Variabel pengacau tak terkendali 1) Ketahanan mencit yaitu kemampuan mencit untuk menahan rasa sakit.

2) Variasi biologis yaitu kemampuan absorbsi, distribusi, metabolisme dan ekskresi dari mencit betina terhadap ekstrak metanol-air daun M. tanarius.

3. Definisi operasional

a. Daun M. tanarius adalah daun yang diambil dari tanaman M. tanarius, memiliki daun yang berwarna hijau, tidak berlubang, segar, tidak terlalu tua dan muda (diambil daun yang berada tidak dipangkal dan diujung batang).

b. Ekstrak metanol-air daun M. tanarius berupa ekstrak kental yang diperoleh dengan mengekstraksi serbuk kering daun M. tanarius seberat 10,0 gram yang dilarutkan dalam 100 ml pelarut metanol 50% secara maserasi selama 72 jam, dengan putaran 140 rpm. Kemudian disaring dengan kertas saring dan o

diuapkan di oven selama 24 jam pada suhu 50

C, hingga diperoleh bobot ekstrak tetap dengan susut pengeringan sebesar 0%.

c. Larutan ekstrak metanol-air daun M. tanarius pekat adalah larutan dengan konsentrasi 38,4% yang diperoleh dengan cara melarutkan ekstrak metanol-air daun M. tanarius seberat 1,92 gram dengan CMC Na 1% ke dalam labu ukur 5 ml.

Efek analgesik ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. pada mencit betina Galur Swiss - USD Repository