Bahan Sampel Alat, Bahan, dan Sampel .1 Alat

Tgl. Pengujian : 9 Februari 2015 3.3 Pembuatan Media 3.3.1 Media Lactose Broth LB

a. Pembuatan Media Lactose Broth Double

Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 52 gr. Dimasukkan ke dalam beker gelas, dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan di atas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 5 ml dalam 5 tabung. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan atm pada suhu 121 ˚C selama 15 menit, setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.

b. Pembuatan Media Lactose Broth Single

Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 13 gr. Dimasukkan ke dalam beker gelas, dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan di atas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml dalam 10 tabung. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan atm pada suhu 121 ˚C selama 15 menit, setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering. 3.3.2 Media Brilliant Green Lactose Broth BGLB Ditimbang seksama media Brilliant Green Lactose Broth sebanyak 40 gr. Dimasukkan ke dalam beker gelas, dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan di atas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan atm pada suhu 121 ˚C selama 15 menit, setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.

3.4 Prosedur Kerja

3.4.1 Tahap Pendugaan Presumtif Test

- Siapkan 5 tabung reaksi yang masing-masing berisi ± 10 ml lactose broth double strength 1a sd 5a, dan 10 tabung yang masing–masing berisi ± 10 ml lactose broth single strength 5 tabung beri tanda 1b sd 5b, dan 5 tabung lagi beri tanda 1c sd 5c. - Pipet 10 ml sampel dan masukkan kedalam tabung 1a sd 5a, 1 ml ke dalam tabung 1b sd 5b, dan 0,1 ml kedalam tabung 1c sd 5c untuk sampel air yang tidak diencerkan dengan menggunakan pipet steril, lakukan dekat pembakar Bunsen atau lampu spiritus. - Kocok tabung secara perlahan agar sampel air menyebar rata ke seluruh bagian media. - Inkubasi tabung reaksi berisi media dan sampel air pada suhu temperature 35 ± 0.5 C atau 37 ± 0,5 C selama 24 ± 2 jam. - Periksa gas yang tertangkap dalam tabung durham dan hasil asam yang ditandai dengan adanya gasasam menunjukkan tahap pendugaan positif. - Lanjutkan pengujian ke tahap penegasan untuk sampel air yang menghasilkan gasasam, jika tidak dihasilkan, lanjutkan inkubasi 24 jam lagi.