26
UIN Syarif Hidayatullah
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil
4.1.1 Optimasi Kondisi SDS PAGE
Optimasi dilakukan dengan menganalisis pemisahan protein gelatin murni yang telah di hidrolisis pada kondisi pH 4,5 dan temperatur 60
o
C selama 1 jam, 2 jam, dan 3 jam dengan konsentrasi gel akrilamid 12.
Hasil optimasi dapat dilihat pada gambar 4.1.
Gambar 4.1 Hasil pemisahan gelatin sapi dan babi. Keterangan : 0
protein marker, 1 pepsin, 2 gelatin sapi sebelum dihidrolisis, 3 gelatin babi sebelum dihidrolisis, 4 gelatin
sapi setelah dihidrolisis selama 1 jam, 5 gelatin babi setelah dihidrolisis 1 jam, 6 gelatin sapi setelah dihidrolisis
selama 2 jam, 7 gelatin babi setelah dihidrolisis 2 jam, 8 gelatin sapi setelah dihidrolisis selama 3 jam, 9 gelatin
babi setelah dihidrolisis 3 jam.
Dari hasil penelitian diperoleh kondisi optimal hidrolisis protein dengan pepsin pada pH 4,5 dan suhu 60
o
C adalah hidrolisis selama 3 jam. Kemudian pada SDS PAGE kondisi optimal diperoleh pada waktu running
60 menit dengan tegangan 200 V. Selanjutnya dilakukan perhitungan bobot molekul terhadap pita pemisahan protein dengan menghitung
pemisahan pada protein marker sebagai seri regresi liniernya.
UIN Syarif Hidayatullah
Table 4.1 Jarak pita dan log bobot molekul marker gel optimasi
No Bm
Log Bm y
Jarak r
Rf x 1
100
2 7
0,165
2 70
1,84 11,5
0,271
3 55
1,74 15
0,354
4 35
1,54 24
0,567
5 25
1,39 29,5
0,697
6 15
1,17 40
0,945
7 10
1 42,3
1
Gambar 4.2 Kurva regresi linier gel optimasi
Regresi linier kurva diatas kemudian digunakan sebagai penentu bobot molekul pita pemisahan protein gelatin seperti pada table 4.2.
y = 2.1569 -1.1049x R² = 0.9903
0.5 1
1.5 2
2.5
0.5 1
1.5
Log B o
b o
t M
o le
ku l
Nilai Rf
UIN Syarif Hidayatullah
Table 4.2 Jarak pita dan bobot molekul gel optimasi
No Gelatin sapi
mm Gelatin babi
mm Bm kDa
1 -
7 94,6
2 9
- 84
3 -
11 74
4 12
- 70
5 -
12,5 67,6
6 15
- 58
7 -
17 51,6
8 18,5
- 47
9 -
20 43
10 -
24,5 33
11 -
30 23,7
12 34
- 18,5
13 -
35 17,3
14 37,5
15 15
40 12,8
4.1.2 Analisis Protein Gelatin Sampel
Analisis dilakukan dengan membandingkan pita pemisahan protein gelatin murni dan kapsul hasil simulasi dari gelatin murni dengan
gelatin sampel pada kondisi optimum gel. Hasil analisis dapat dilihat pada gambar 4.3.
Gambar 4.3 Hasil pemisahan gelatin kapsul. Keterangan : 0 protein
marker,1 gelatin sapi murni, 2 gelatin babi murni, 3 kapsul simulasi gelatin sapi , 4 kapsul simulasi gelatin
babi, 5 kapsul simulasi campuran gelatin sapi dan babi, 6 kapsul sampel A, 7 kapsul sampel B, 8 kapsul sampel C.
UIN Syarif Hidayatullah
Analisa diawali dengan perhitungan regresi linier berdasarkan seri log bobot molekum pita pemisahan protein marker sebagai sumbu y dan
nilai Rf sebagai sumbu x seperti pada tabel 4.3.
Table 4.3 Jarak pita dan log bobot molekul marker gel analisis kapsul
no Bm
Log bm y
Jarak Rf x
1 250
2,39 3,5
0,071 2
130 2,11
6 0,122
3 100
2 8,5
0,173 4
70 1,84
12 0,244
5 55
1,74 15
0,306 6
35 1,54
23 0,469
7 25
1,39 28
0,571 8
15 1,17
40 0,816
9 10
1 49
1
Gambar 4.4 Kurva regresi linier gel analisis kapsul
Hasil regresi linier diatas kemudian digunakan untuk menghitung bobot molekul pita pemisahan protein gelatin seperti pada tabel 4.4.
y = 2.258 -1.3632x R² = 0.9414
0.5 1
1.5 2
2.5 3
0.5 1
1.5
Log B o
b o
t M
o le
ku l
Nilai Rf
UIN Syarif Hidayatullah
Table 4.4 Jarak pita dan bobot molekul gel analisis kapsul
No G.
Sapi mm
G. Babi
mm KSS
mm KSB
mm KSSb
mm Sa1
mm Sa2
mm Sa3
mm Bm
kDa
1 -
- 3,5
- -
3,5 -
3,5 146
2 -
- -
- -
5 5
5 132
3 -
- -
7,5 -
- -
- 112,7
4 -
- -
10 10
- -
- 96
5 12
- 12
- -
12 12
12 84,5
6 13
13 13
13 13
13 13
13 80
7 17,5
- 17,5
- -
17,5 17,5
17,5 59
8 -
18,5 -
18,5 18,5
- -
- 60
9 21
- 21
- -
21 21
21 47
10 22
22 -
22 22
- -
- 37,6
11 -
- 26
- -
26 26
26 34
12 -
- -
29 -
- -
- 28
13 -
- -
31 -
- -
- 24,7
14 -
- -
- -
35 35
35 19
15 -
- -
- 36
- -
- 18
16 39,5
39,5 39,5
39,5 39,5
- -
- 14
17 43
- 43
- -
43 43
43 11,4
18 -
45 -
45 45
- -
- 10
Keterangan : KSS kapsul simulasi gelatin sapi, KSB kapsul simulasi gelatin babi, KSSb kapsul simulasi campuran gelatin babi dan sapi, Sa1
kapsul sampel 1, Sa2 kapsul sampel 2, Sa3 kapsul sampel 3.
4.2 Pembahasan
Kategori