Penerapan Metode Spektrofotometri Ultraviolet Pada Penetapan Amlodipin Besilat dalam Sediaan Tablet

(1)

Lampiran 1. Perhitungan Persamaan Regresi Amlodipin Besilat BPFI a=

∑ ∑

− − 2 2 ( X)

X n Y X XY n = 2 ) 160 ( ) 5760 ( 6 746 , 1 160 656 , 62 6 − × − × = 0,010778 b= YaX

= 0,291- (0,010778) (26,67) = -0,003764

Maka persamaan regresinya adalahY= 0,010778 x-0,003764 r =

( )

[

∑ ∑

]

[

( )

]

n Y Y n X X n Y X XY / / / . 2 2 2 2 =

( )

          −     × − 6 7461 , 1 687 , 0 6 160 5760 6 746 , 1 160 656 , 62 2 2 = 108 , 16 096 , 16 = 0,9992

No X Y XY X2 Y2

1 0 0 0 0 0

2 16 0,187 2,992 256 0,035 3 24 0,261 6,264 576 0,068 4 33 0,347 11,104 1024 0,119 5 40 0,437 17,48 1600 0,196 6 48 0,517 24,816 2304 0,269 Σ 160 1,749 62,656 5760 0,687 Rata-rata 26,67


(2)

Lampiran 2. Data Kadar Amlodipin Besilat Sediaan Tablet Nama Sediaan Penimbang an (mg) Setara (mg) Absorban si Konsentrasi Teoritis (mcg/ml) Konsentrasi Perolehan (mcg/ml) Kadar% Amlodipin besilat Generik (PT. Hexpharm Jaya)

584 19,98 0,3723 35,96 34,19 94,71

585 20,02 0,3755 36,04 34,49 95,70 583 19,94 0,3755 35,90 34,49 95,73

585 20,01 0,3683 36,03 33,82 93,56

584 19,98 0,3783 35,95 34,75 96,26

584 19,98 0,3765 35,97 34,58 95,79

Tensivask (Dexa Medika)

203 20,29 0,3875 36,52 35,60 97,11

204 20,38 0,3817 36,68 35,06 95,22

205 20,40 0,3779 36,72 34.71 94,16

203 20,28 0,3676 36,50 33,75 92,11

204 20,29 0,3804 36,68 34,94 95,31

203 20,29 0,3774 36,52 34,66 94,54

Normoten (Soho)

357 20,01 0,3763 36,01 34,56 95,60

358 20,04 0,3783 36,07 34,07 95,97

359 20,10 0,3710 36,18 35,42 93,81

358 20,04 0,3856 36,07 34,28 97,82

359 20,10 0,3733 36,18 34,28 94,38

357 19,98 0,3733 35,96 34,32 94,96

Lopiten (Guardian Pharmata ma

256 20,06 0,3838 36,10 35,26 97,28

258 20,22 0,3838 36,26 35,26 96,52

255 19,98 0,3783 35,96 34,75 96,26

256 20,06 0,3718 36,10 34,14 94,19

257 20,14 0,3810 36,25 35,00 96,18


(3)

Lampiran 3. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Pada Generik Hexpharm Jaya

No Kadar

[ ]

X (%) XX

(

XX

)

2

1 94,71 -0,581 0,337561

2 95,70 0,409 0,167201

3 95,73 0,439 0,192721

4 93,56 -0,731 2,996361

5 96,26 0,969 0,938961

6 95,79 0,499 0,249001

291 , 95 =

X

=4,881886

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α =0,01;=6, dk =5, dari daftar tabel distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,0321

Data ditolak jika thitung≥ttabel atau thitung≤-ttabel

t =

n SD

X

X

t hitung 1 : 1,4402

4034 , 0 581 ,

0 =

t hitung 2 : 1,0138

4034 , 0 409 , 0 =

t hitung 3 : 1,0882

4034 , 0 439 , 0 =

t hitung 4 : 4,2910

4034 , 0 731 ,

1 =

(data ditolak) t hitung 5 : 2,4020

4034 , 0 969 , 0 =

t hitung 6 : 1,2369

4034 , 0 499 , 0 = 9881 , 0 1 6 881886 , 4 1 ) ( 2 = − = − − =

n Xi X SD


(4)

Lampiran 3. (Lanjutan)

Karena thitung 4≤ ttabel maka data ditolak, selanjutnya dilakukan pengujian

terhadap data yang dianggap tidak menyimpang.

No Kadar

[ ]

X (%) XX

(

XX

)

2

1 94,71 -0,928 0,861184

2 95,70 0,062 0,003849

3 95,73 0,092 0,008464

4 96,26 0,622 0,386884

5 95,79 0,152 0,023104

638 , 95 =

X

=1,28348

SD =

5 28348 , 1

= = 0,5664

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 5; dk = 4, dari daftar tabel distribusi t di peroleh ttabel = 4,6040

t =

n SD

X

X

t hitung 1 : 3,6636

2533 , 0 928 ,

0 =

t hitung 2 : 0,2447

2533 , 0 062 , 0 =

t hitung 3 : 0,3632

2533 , 0 092 , 0 =

t hitung 4 : 2,45555

2533 , 0 622 , 0 =

t hitung 5 : 0,6000

2533 , 0 152 , 0 = 1 ) ( 2 − −

n X X


(5)

Lampiran 3. (Lanjutan)

Karena thitung≤ ttabel maka data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara :

µ = ± t(1-1/2α)dk x = 95,638 ± ( 4,6040 x

5 5564 , 0

) = 95,638% ± 1,1454%

X

n SD


(6)

Lampiran 4. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Dalam Tablet Tensivask PT. Dexa Medika

No Kadar

[ ]

X (%) XX

(

XX

)

2

1 97,11 2,37 5,6169

2 95,22 0,48 0,2304

3 93,81 -0,58 0,3364

4 97,82 -2,63 6,9169

5 94,96 0,57 0,3249

6 94,96 -0,2 0,04

X=95,42

=13,4655

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α =0,01;=6, dk = 5, dari daftar tabel distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,0321

Data ditolak jika thitung≥ttabel atau thitung≤-ttabel

t =

n SD

X

X

t hitung 1 : 3,5378

6699 , 0 37 , 2 =

t hitung 2 : 0,7165

6699 , 0 48 , 0 =

t hitung 3 : 0,8658

6699 , 0 58 ,

0 =

t hitung 4 : 3,9259

6699 , 0 63 ,

2 =

t hitung 5 : 0,8508

6699 , 0 57 , 0 =

t hitung 6 : 0,2985

6699 , 0 2 ,

0 =

− 6410 , 1 5 4655 , 13 1 ) ( 2 = = − − =

n Xi X SD


(7)

Lampiran 4. (Lanjutan)

Karena semua data thitung≤ ttabel, maka data diterima

Maka kadar sebenarnya terletak antara:

μ=

X

±

t

dk

) 2 / 1 1

(− α x SD / n

= 94,74 % 

  

 

× ±

6 6410 , 1 0321 ,

4 %


(8)

Lampiran 5. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Dalam Tablet Normoten (Soho)

No Kadar

[ ]

X (%) XX

(

XX

)

2

1 95,60 0,18 0,0324

2 95,97 0,55 0,3025

3 93,81 -1,61 2,5921

4 97,82 2,4 5,76

5 94,38 -1,04 1,0816

6 95,96 -0,46 0,2116

X =95,42

=9,9802

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α =0,01;=6, dk=5, dari daftar tabel distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,0321

Data ditolak jika thitung≥ttabel atau thitung≤-ttabel

t =

n SD

X

X

t hitung 1 : 0,3121

5767 , 0 18 , 0 =

t hitung 2 : 0,9537

5767 , 0 55 , 0 =

t hitung 3 : 2,7917

5767 , 0 61 ,

1 =

t hitung 4 : 4,1616

5767 , 0 4 ,

2 = (data ditolak)

t hitung 5 : 1,8033

5767 , 0 04 ,

1 =

t hitung 6 : 0,7976

5767 , 0 46 ,

0 =

− 4128 , 1 5 9802 , 9 1 ) ( 2 = = − − =

n Xi X SD


(9)

Lampiran 5. (Lanjutan)

Karena thitung ≤ ttabel maka data ditolak, selanjutnya dilakukan pengujian terhadap

data yang dianggap tidak menyimpang.

No Kadar

[ ]

X (%) XX

(

XX

)

2

1 95,60 0,66 0,4356

2 95,97 -1,03 1,0609

3 93,81 -1,13 1,2769

4 94,38 -0,56 0,3136

5 95,96 -0,02 0,0004

X=94,94

=3,0874

SD =

4 0874 , 3

= = 0,8785

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 5; dk = 4, dari daftar tabel

distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,6040

Data ditolak jika thitung ≥ ttabel atau thitung≤ -ttabel

t hitung =

t hitung 1 : 2,6695

4233 , 0 66 , 0 =

t hitung 2 : 2,6221

4233 , 0 03 , 1 =

t hitung 3 : 1,4256

4233 , 0 56 ,

0 =

1 ) ( 2 − −

n X X n SD X X / −


(10)

t hitung 4 : 1,4256

4233 , 0 56 ,

0 =

t hitung 5 : 0,0509

4233 , 0 22 ,

0 =

Lampiran 5. (Lanjutan)

Karena semua data thitung≤ ttabel maka data ditolak, selanjutnya dilakukan

pengujian terhadap data yang dianggap tidak menyimpang. Maka kadar sebenarnya terletak antara:

μ=

X

±

t

(11/2α)dk x SD / n

= 94,94 % 

  

 

× ±

5 8785 , 0 6040 ,

4 %


(11)

Lampiran 6. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Dalam Tablet Lopiten (Guardian Pharmatama)

No Kadar

[ ]

X (%) XX

(

XX

)

2

1 97,28 1,13 1,2769

2 96,52 0,37 0,1369

3 96,26 0,11 0,0121

4 94,19 -1,96 3,8416

5 96,18 0,03 0,0009

6 96,48 0,33 0,1089

X=96,15

=5,3773

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α =0,01;=6, dk=5, dari daftar tabel distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,0321

Data ditolak jika thitung ≥ttabel atau thitung≤-ttabel

t =

n SD

X

X

t hitung 1 : 2,6695

4233 , 0 13 , 1 =

t hitung 2 : 0,8740

4233 , 0 37 , 0 =

t hitung 3 : 0,2598

4233 , 0 11 , 0 =

t hitung 4 : 4,6302

4233 , 0 96 ,

1 =

(data ditolak) t hitung 5 : 0,0708

4233 , 0 03 , 0 = 0370 , 1 5 3773 , 5 1 ) ( 2 = = − − =

n Xi X SD


(12)

t hitung 6 : 0,7795 4233 , 0 33 , 0 =

Lampiran 6. (Lanjutan)

Karena thitung ≤ ttabel maka data ditolak, selanjutnya dilakukan pengujian terhadap

data yang dianggap tidak menyimpang.

No Kadar

[ ]

X (%) XX

(

XX

)

2

1 97,28 0,736 0,5416

2 96,52 -0,024 0,0005

3 96,26 -0,284 0,0806

4 96,18 -0,364 0,1324

5 96,48 -0,064 0,0040

X=96,544

=0,75952 SD =

4 75952 , 0

= = 0,4357

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 5; dk = 4, dari daftar tabel

distribusi t diperoleh nilai ttabel = 4,6040

Data ditolak jika thitung ≥ ttabel atau thitung≤ -ttabel

t hitung =

t hitung 1 : 3,7782

1942 , 0 73 , 0 =

t hitung 2 : 0,1232

1942 , 0 02 ,

0 =

t hitung 3 : 1.4579

1942 , 0 28 ,

0 =

t hitung 4 : 1,8685

1942 , 0 36 ,

0 =

t hitung 5 : 0,3285

1942 , 0 05 ,

0 =

1 ) ( 2 − −

n X X n SD X X / −


(13)

Lampiran 6. (Lanjutan)

Karena semua data ttabel≤ thitung atau≤ ttabel maka data diterima.

Maka kadar sebenarnya terletak antara:

μ=

X

±

t

dk

) 2 / 1 1

(− α x SD / n

= 96,54 % 

  

 

× ±

5 4357 , 0 6040 ,

4 %


(14)

Lampiran 7. Perhitungan Konsentrasi Pengukuran Diketahui : Nilai Absorptivitas spesifik (A11= 119a) Tebal sel (b) = 1cm

c =

xb A

A

1 1

c = 0,036495

1 . 119

4343 , 0

= g/ml

c = 3649 μg/ml c = 36,49 μg/ml


(15)

Lampiran 8.Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel

Berat 20 tablet = 3539,2 g Kandungan Amlodipin Besilat pada etiket = 10 mg Dibuat larutan uji dengan kadar lebih kurang 36 μg/ml.

Ditimbang serbuk setara dengan 20 mg amlodipin besilat, maka berat sampel yang ditimbang adalah = mg 3539,2mg

87 , 13 20

20 ×

× = 255,16 mg

Sampel yang telah ditimbang dimasukkan dalam labu ukur 50 ml, lalu dilarutkan dalam metanol dan cukupkan dengan akudes sampai garis tanda, dikocok homogen.

Kadar larutan uji = g ml

ml mg

/ 2 , 402 1000 50

06 ,

20 × = µ

Kemudian dipipet 4,5 ml dari larutan uji, lalu dimasukkan kedalam labu ukur 50 ml, dilarutkan dengan pelarut Metanol, dicukupkan dengan akuades sampai garis tanda dan dikocok sampai homogen.


(16)

Slope xSB 3 Slope xSB 10

Lampiran 9. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Persamaan garis regresi: Y =0,010778 X – 0,003764

No Konsentrasi (µg/ml) X Luas Puncak Y

Yi Y - Yi (Y – Yi)2

1. 0 0 0 0 0

2. 16 0,187 0,1769 0,0101 0,00010201 3. 24 0,261 0,2624 -0,0014 0,00000196 4. 32 0,347 0,3485 -0,0015 0,00000225 5. 40 0,437 0,4348 0,0022 0,00000484 6. 48 0,517 0,5211 -0,0041 0,00001681

Ʃ 160 1,749 0,00012787

Rata-rata

S =

(

)

2 2 − −

n Yi Y = 2 6 00012786 , 0 − = 0,0056

LOD = LOQ =

= 010778 , 0 0056 , 0 3x = 010778 , 0 0056 , 0 10x = 1,5587 µg/ml = 5,1957 µg/m


(17)

(18)

(19)

(20)

Lampiran . Gambar Timbangan analitik


(21)

DAFTAR PUSTAKA

Anonim. (2010). Epidemilogi Hipertensi di Indonesia. Tanggal 28 Agustus 2010. http://www.hiperensiindonesia.or.id

Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Hal. 1133

Day, R.A., dan Underwood, A.L. (1999). Analisis Kimia Kuantitatif. Penerjemah: Pujaatmaka Edisi ke V. Jakarta: Erlangga. Hal. 393.

Dachriyanus. (2004). Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektroskopi. Padang: Andalas University Press. Hal. 1.

Gandjar, I.G., dan Rohman, A. (2009). Kimia Farmasi Analisis. Cetakan IV. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal. 13.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Review Artikel. Majalah Ilmu Kefarmasian.1 (3):117-133.

Holme, D.J., dan Peck, H. (1983). Analytical Niochemistry. London: Longman. Hal. 40.

ISFI. (2008). ISO Farmakoterapi. Jakarta: Penerbit PT. ISFI. Hal. 119.

Katzung, B.G. (2001). Farmakologi Dasar dan Klinik. Penerjemah dan Editor Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga. Edisi I. Jakarta: Penerbit Salemba Medika. Hal. 158.

Moffat, A.C. (2005). Clark`s Isolation and Identification of Drugs and Poisons.

Edisi 3. London: The Pharmaceutical Press. Hal. 1157-1158.

Mycek, M.J., Harvey, R.A., dan Champe, C.C. (2001). Farmakologi Ulasan

Bergambar. Lippincott`s Illustrated Reviews: Pharmacology. Penerjemah

Azwar Agoes. Edisi II. Jakarta: Penerbit Widya Medka. Hal. 411-412. Roth, J.H., dan Blaschke, G. (1998). Analisis Farmasi. Penerjemah: Kisman.

Yogyakarta: UGM Press. Hal. 355-357.

Shargel, L. (1985). Biofarmasetika Dan Farmakokinetika Terapan. Edisi II Penerjemah Fasich. Surabaya: Penerbit Universitas Airlangga. Hal. 16. Satiadarma, K. (2004). Azas Pengembangan Prosedur Analisis. Surabaya:


(22)

Tan, T.H., dan Rahardja. K (2002). Obat-obat Penting. Jakarta: Penerbit PT. Elek Media Komputindo. Hal. 308-313.

The United States Pharmacopeia. (2009).The National Formulary. Edisi 31. The

United States Pharmacopoeia Convention. Hal 1400-1401.

WHO. (1992). The Validation of Analytical Procedures Used in Examination of

Pharmaceitical Materials. Germany: WHO Technical Report Series. Hal.


(23)

BAB III

METODE PENELITIAN

Metode penelitian yang dilakukan adalah metode deskriptif. Penelitian ini dilaksanakan diLaboratorium Kimia Farmasi Kuantitatif Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

3.1 Alat-alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah satu unit Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu mini 1240), neraca analitik (AND GF- 200), dan alat-alat gelas seperti labu takar, gelas ukur, beaker glass.

3.2 Bahan-bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Amlodipin Besilat BPFI, akuades (E-Merck), Metanol (E-Merck). Sampel yang digunakan adalah tablet generik Amlodipin (Hexparm), Normoten® (Soho), Tensivask® (Dexa Medika), Lopiten® (Guardian Pharmatama).

3.3 Pengambilan Sampel

Pengambilan sampel dilakukan secara purposif yaitu tanpa membandingkan antara satu sampel dengan sampel yang lain, karena sampel dianggap homogen. Sampel yang digunakan adalah tablet amlodipin generik dan nama dagang dengan jumlah zat aktif 10 ���������

3.4 Prosedur Penelitian

3.4.1 Pembuatan Larutan Induk BPFI

Sebanyak 50 mg amlodipin BPFI ditimbang seksama, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml, ditambah dengan 5 ml metanol dikocok hingga larut


(24)

dan dicukupkan dengan akuades sampai garis tanda, diperoleh larutan induk dengan konsentrasi 1000 µg/ml, larutan ini disebut Larutan Induk Baku I (LIB I).

Dari larutan ini dipipet 10 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml, diencerkan dengan akuades sampai garis tanda, lalu dikocok homogen sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 200 µg/ml (LIB II).

3.4.2 Penetapan Panjang Gelombang Serapan Maksimum

Dipipet sebanyak 4,5 ml Larutan induk Baku (LIB II) 200 µg/ml, dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml (36 µg/ml), kemudian dicukupkan dengan akuades sampai garis tanda, serapan diukur pada panjang gelombang 200 -400 nm.

3.4.3Penetapan dan Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi

Dipipet Larutan Induk Baku II (LIB II) BPFI (200 µg/ml) sebanyak 2 ml,3 ml,4 ml,5 ml,6 ml, masing-masing dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml, ditambahkan akuades sampai garis tanda. Lalu dikocok homogen. Diperoleh larutan dengan dengan konsentrasi 16µg/ml, 24 µg/ml,32µg/ml, 40 µg/ml, 48 µg/ml. Kemudian diukur serapannya pada panjang gelombang maksimum yang diperoleh. Hasil dapat dilihat pada Tabel 2 (Halaman 22).

3.4.4 Uji Validasi Dengan Parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi, Dan batas kuantitasi

3.4.4.1 Uji Akurasi dengan persen perolehan kembali (% Recovery)

Uji akurasi dilakukan dengan metode penambahan baku (Standard

Addition Method) yaitu bahan baku yang ditambahkan pada sampel yaitu

9,00 µg/ml, uji recovery dilakukan 6 kali replikasi, kemudian dianalisi dengan perlakuan yang sama seperti pada penetapan kadar sampel. pada


(25)

1 )

( 2

− − =

n Xi X SD

penetapan kadar sampel. Persen perolehan kembali (% recovery) dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:

% Recovery = x

C B A

100% Keterangan:

A= Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan bahan baku B= Konsentrasi sampel sebelum penambahan bahan baku.

C= Konsentrasi bahan baku yang ditambahkan

3.4.4.2 Uji Presisi

Menurut Rohman (2007), Uji presisi (keseksamaan) merupakan ukuran ketepatan relatif ditentukan dengan parameter RSD (Relative Standard Deviation) dan umumnya dinyatakan dalam persen. RSD dirumuskan dengan persaman :

RSD = x100% X

SD

Keterangan:

RSD = Relatif Standar Deviasi SD = Standar Deviasi

X = Kadar rata-rata Amlodipin dalam sampel

Menurut Jones, (2002), untuk menghitung standar Deviasi (SD) digunakan rumus :

Keterangan :

SD = Standar deviasi tidak diketahui

X= kadar rata-rata sampel


(26)

Slope X sy LOD= 3×

3.4.4.3 Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)

Untuk menentukan batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ) dapat digunakan rumus :

Keterangan:

� �� = Simpangan baku LOD = Batas Deteksi LOQ = Batas Kuantitasi

3.4.5 Penentuan Kadar Amlodipin Dalam Sediaan Tablet

Ditimbang 20 tablet dan diserbukkan dari 20 tablet. Ditimbang seksama sejumlah serbuk setara dengan 20 mg amlodipin (Penimbangan serbuk sebanyak 6 kali pengulangan), dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml. Kemudian ditambah 5 ml metanol kemudian encerkan dengan akuades sampai garis tanda. Kemudian disaring, 5 ml filtrat pertama dibuang. Dipipet filtrat dipipet sebanyak 4,5 ml larutan, dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml. Lalu dicukupkan dengan akuades sampai garis tanda, kocok homogen dan diukur serapannya pada panjang gelombang maksimum yang diperoleh. Penetapan kadar ditentukan dengan menggunakan persamaan regresi yaitu: Y=aX + b.

2 )

( 2

− − =

n Yi Y X

Sy

Slope x sy


(27)

3.4.6 Analisis Data Secara Statistik

Kadar amlodipin besilat dapat dihitung dengan persamaan garis regresi dan untuk menentukan apakah data diterima atau ditolak digunakan rumus seperti di bawah ini:

t =

n SD

X

X

Dasar penolakan data jika -thitung≤ dan bila thitung≤-ttabel.

Untuk mencari kadar sebenarnya dengan taraf kepercayaan 99%, dengan derajat kebebasan dk = n -1, digunakan rumus:

μ =

X

± t

(

1−1/2

α

)

dk x SD /

n

Keterangan:

μ = interval kepercayaan

X = kadar rata-rata sampel X = kadar sampel

t = harga t tabel sesuai dengan dk = n -1a α = tingkat kepercayaan

dk = derajat kebebasan

SD = standar deviasi tidak diketahui n = jumlah perlakuan


(28)

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum Amlodipin Besilat BPFI.

Penetuan panjang gelombang ini dilakukan pada konsentrasi yang memberikan serapan dengan kesalahan fotometrik terkecil yaitu ±0,4343. Untuk mendapatkan konsentrasi tersebut dapat dihitung menggunakan nilai absorptivitas spesifik Amlodipin besilat (A11= 119) dari literatur. Contoh perhitungan dapat dilihat pada Lampiran 8.

Dari perhitungan didapatkan konsentrasi pengukuran adalah 36 µg/ml dan dari hasil pengukuran diperoleh panjang gelombang maksimum, pada 364 nm. seperti terlihat pada Gambar 1 dan Tabel 1.

Gambar 1. Kurva serapan Amlodipin Besilat Baku Pembanding Farmakope Indonesia (Konsentrasi 36 µg/ml)


(29)

Tabel 1. Data Absorbansi Dari Kurva Serapan Maksimum

Panjang Gelombang maksimum

Absorbansi

364.0 0.4368 239.0 1.1356

Panjang gelombang metode analisis menurut PPOM yaitu 364,0 nm. Panjang gelombang yang diperoleh ini seterusnya digunakan untuk penentuan kadar amlodipin besilat dalam tablet.

4.2 Pembuatan dan Penetuan Linieritas Kurva Kalibrasi

Linieritas merupakan ukuran seberapa baik kurva kalibrasi yang menghubungkan antara respon (Y) dengan konsentrasi (X).Penentuan linieritas kurva kalibrasi Amlodipin besilat BPFI dalam pelarut metanol dengan konsentrasi 16,0 µg/ml, 24,0 µg/ml, 32,0µg/ml, 40,0µg/ml, 48,0 µg/ml pada panjang gelombang 364 nm. Data dan kurva kalibrasi dapat pada dilihat pada Tabel 2 dan Gambar 2 dibawah ini.

Tabel 2. Data Kurva kalibrasi dari Amlodipin Besilat BPFI

No. Conc. ABS

1. 0.0000 0.000

2. 16.000 0.187

3. 24.000 0.261

4. 32.000 0.347

5. 40.000 0.437


(30)

Gambar 2. Kurva Kalibrasi amlodipin besilat BPFI

Dari hasil pembuatan kurva kalibrasi amlodipin besilat BPFI diperoleh hubungan yang linier antara konsentrasi dan serapan dengan koefisien korelasi (r) = 0,9992 dan persamaan garis regresi Y = 0,010788x - 0,003764. Koefisien korelasi yang diperoleh memenuhi kriteria penerimaan untuk korelasi adalah r ≥ 0,995 (Moffat, 2004).

4.3 Uji Validasi Metode Spektrofotometri Ultraviolet

Pada penelitian ini dilakukan uji validasi dengan metode penambahan bahan baku (Standard Addition Method) terhadap sampel tablet lopiten (PT. Guardian Pratama) yang meliputi uji akurasi dengan parameter persen perolehan kembali (% recovery), uji presisi dengan parameter RSD (Relative Standard

Deviation), batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ) (WHO, 1992;

Indriyanto dan Yuwono, 2003). Uji akurasi dengan parameter persen perolehan kembali dilakukan dengan membuat 6 kali replikasi, kemudian dianalisis dengan perlakuan yang sama seperti pada tabel dibawah ini.


(31)

Tabel 3. Data Hasil Pengujian Perolehan Kembali Lopiten dengan Metode Penambahan Bahan Baku (Standard Addition Method).

Jumlah tablet 20 berat 20 tablet = 3539,2 mg

Tiap tablet lopiten 10 mg mengandung amlodipin besilat 13,87 mg setara dengan amlodipin 10 mg

Berat serbuk setara 10 mg =

mg mg 87 , 13 10

x 3539,2 mg = 255,16 mg

Dari data di atas didapatkan persen perolehan kembali (% recovery) 99,81% dengan standar deviasi (SD) sebesar 3,8228. Persen perolehan kembali ini dapat diterima karena memenuhi syarat akurasi dimana rentang rata-rata hasil perolehan kembali adalah 98-102%. Sedangkan dari hasil uji presisi dengan parameter relatif standar deviasi (RSD) adalah 3,8300%. Nilai Relatif Standar Deviasi (RSD) yang diperoleh dari pengukuran sediaan tablet yang dianalisis telah memenuhi syarat RSD yaitu ≤5% untuk senyawa -senyawa dengan kadar sekelumit (Rohman, 2007). Dapat disimpulkan bahwa metode yang digunakan memenuhi persyaratan uji validasi metode sehingga dapat digunakan No Berat

sampel/serbuk mg

Serapan (A)

Konsentrasi Bahan baku

yang ditambahkan (C) µg/ml Persen Perolehan       − % 100 x C B A Setelah penambahan bahan baku (A) Sebelum penambahan bahan baku (B)

1 256,1 0,4792 44,11 34,87 9,00 102,6

2 254,9 0,4759 43,80 34,87 9,00 99,22

3 255,6 0,4765 43,86 34,87 9,00 99,88

4 256,2 0,4762 43,83 34,87 9,00 99,55

5 255,8 0,4701 43,26 34,87 9,00 93,22

6 256,4 0,4810 44,27 34,87 9,00 104,44

Kadar rata-rata (% recovery) 99,81

Standar Deviasi (SD) 3,8228 Relatif Standar Deviasi (%) 3,8300


(32)

untukpenetapan kadar amlodipin dalam tablet. Batas deteksi (LOD) sebesar 1,5587 µg/ml dan batas kuantitasi (LOQ) sebesar 3,1957 µg/ml.

4.4 Penentuan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sediaan Tablet

Hasil penentuan kadar amlodipin besilat dalam sediaan tablet dapat dilihat pada Tabel4 dibawah ini. Data lengkap dapat dilihat pada Lampiran 2 halaman 30.

Tabel 4. Persentase Kadar Rata-rata dan Kadar Sebenarnya Amlodipin besilat dalam sediaan tablet.

Dari data di atas menunjukkan, kadar amlodipin besilat dalam sediaan tablet generik maupun nama dagang, memenuhi persyaratan kadar tablet pada umumnya yaitu tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0 % dari jumlah yang tertera pada etiket.

No Nama Sediaan Kadar Rata-rata

(%)s

Kadar Sebenarnya (%)

1 Amlodipin besilat generik

(PT. Hexpharm Jaya) 95,63 95,63 ± 1,14

2 Tensivask

(Dexa Medika) 94,74 94,74 ± 2,70

3 Normoten

(Soho) 94,94 94,94 ± 1,81

4 Lopiten


(33)

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1Kesimpulan

1. Metode Spektrofotometri Ultraviolet dapat digunakan untuk penetapan kadar Amlodipin besilat dalam sediaan tablet karena pada hasil uji validasi, metode ini menunjukkan akurasi dan presisi yang baik dengan batas deteksi (LOD) 1,5587 µg/ml dan batas kuantitasi (LOQ) 5,1957 µg/ml.

2. Hasil penetapan kadar dari tablet generik dan nama dagang diperoleh, untuk tablet Amlodipin Generik (PT. Hexpharm Jaya) sebesar 95,63 %± 1,14%, tablet Tensivask® (Dexa Medica) 94,74%±2,70%, Normoten® (Soho) 94,94% ± 1,81%, Lopiten® (Guardian Pharmatama) 96,54% ± 0,90%.

3. Dari hasil penelitian menunjukkan bahwa semua tablet yang diperiksa baik yang generik maupun nama dagang memenuhi persyaratan kadar tablet pada umumnya yaitu tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.

5.2Saran

1. Disarankan kepada peneliti lainnya agar dapat menentukan kadar Amlodipin besilat dengan metode lainnya seperti KCKT dan Kromatografi Gas.

2. Disarankan kepada peneliti lainnya agar dapat menentukan kadar obat turunan arilasetat lainnnya yang beredar dipasaran secara Spektrofotometri Ultraviolet


(34)

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Sifat

2.1.1 Sifat Fisikokimia

Rumus Struktur

Cl H N

O H3CO

H3C

O NH2 O CH3

O S OH

O O

Rumus molekul : C20H25ClN2O5, C6H6SO3

Nama Kimia : 3,5-pyridinedicarboxylic acid, 2-[(2Aminoethoxy)methyl]-4-(o –chlorophenyl)

1,4–dihydro–6–methyl–3–ethyl 5–methyl ester, monobenzensulfonate. Berat Molekul : 567,05

Pemerian : Serbuk hablur, putih atau hampir putih, tidak atau hampirtidak berbau.

Kelarutan : Mudah larut dalam etanol, dalam kloroform, dan dalam eter, praktis tidak larut dalam air.

Penetapan kadar bahan baku : Dilakukan secara acidimetri

Penetapan kadar tablet : Dilakukan dengan metode kromatografi cair kinerja tinggi, kromatografi gas dan spektrofotometri ultra violet.


(35)

Hipertensi merupahkan penyakit heterogen yang dapat disebabkan oleh penyakit spesifik (hipertensi sekunder) atau mekanisme patofisiologi yang tidak diketahui penyebabnya (hipertensi primer atau ensensial). Pada umumnya kasus hipertensi sekunder disebabkan oleh penyakit gagal ginjal kronik. Penyebab utama kematian pada hipertensi adalahkardiovascular, dan gagal ginjal.Kemudian kematian prematur ada korelasinya dengan meningkatkan tekanan darah (ISFI, 2008).

Berdasarkan struktur kimianya Amlodipin merupakan antagonis kalsium golongan dihidropiridin (antagonis ion kalsium) yang menghambat influks (masuknya) ion kalsium melalui membran kedalam otot polos vascular dan otot.Amlodipin absorpsinya lambat, efeknya lebih lama, waktu paruh plasma 35 sampai 50 jam, serta efek dan kadar dalam plasma meningkat selama 7-10 hari terapi. Amlodipin menghasilkan vasodilatasi arteri perifer dan dilatasi koroner yang profil hemodinamiknya.Namum amlodipin menyebabkan takikardia reflex mungkin karena waktu paruhnya yang lama menyebabkan puncak minimumdalam konsentrasi plasma (Goodman dan Gilman, 2008).

Efek antihipertensi amlodipin adalah dengan bekerja langsung sebagai vasodilator arteriperifer yang dapat menyebabkan penurunan resisten vaskular serta penurunan tekanan darah.Dosis satu kali sehari akan menghasilkan penurunan tekanan darah yang berlangsung selama 24 jam. Onset kerja amlodipin adalah perlahan-lahan, sehingga tidak menyebabkan terjadinya hipotensi akut.Efek antiangina amlodipin adalah melalui dilatasi arteriol perifer sehingga dapat menurunkan resistensi perifer total (afterload).Karena amlodipin tidak mempengaruhi frekuensi denyut jantung, pengurangan beban jantung akan menyebabkan penurunan kebutuhan oksigen miokardial serta kebutuhan energi.


(36)

Amlodipin menyebabkan dilatasi arteri baik pada keadaan oksigenisasi normal maupun keadaan iskemia. Pada pasien angina, dosis amlodipin satu kali sehari dapat meningkatkan waktu latihan, waktu timbulnya angina, waktutimbulnya depresi segmen ST dan menurunkan frekuensi seranganangina serta penggunaan tablet nitrogliserin. Amlodipin tidak menimbulkan perubahan kadar lemak plasma dan dapat digunakan pada pasien asma, diabetes serta gout (Anonim, 2010).

Amlodipin (derivate dihidropiridin) efektif dalam menurunkan tekanan darah. Perbedaan hemidinamik diantara penghambatan kanal kalsium bisa mempengaruhi obat tertentu. Aktivitas reflex simpatis dengan takikardia ringan akan mempertahankan atau meningkatkan curah jantung (Katzung, 1994).

2.1.3 Efek Samping

Efek samping umum yang dapat ditimbulkan oleh amlodipin diantaranya pusing, nyeri kepala, rasa panas di muka dan terutama pada derivat-piridin dan udema pergelangan kaki (akibat vasodilatasi perifer). Umumnya, efek ini bersifat sementara (Tan dan Raharja, 2002).

2.1.4 Dosis

Hipertensi dan angina variant/stabil 1 dd 5 mg (besilat=benzosulfonat), maksimum 10 mg (Tan dan Raharja, 2002).


(37)

Spektrofotometri serapan merupakan pengukuran suatu interaksi antara radiasi elektromagnetik dan molekul atau atom dari suatu zat kimia. Teknik yang sering digunakan dalam analisis farmasi meliputi spektrofotometri ultraviolet, cahaya tampak, infra merah dan serapan atom.Jangkauan panjang gelombanguntuk daerah ultraviolet adalah 190-380 nm(Ditjen POM, 1995).

Gugus fungsi yang menyerap radiasi di daerah ultraviolet dekat dan daerah tampak disebut kromofor dan hampir semua kromofor mempunyai ikatan tak jenuh. Pada kromofor jenis initransisi terjadi dari π → π*, yang menyerap pada λ max kecil dari 200nm (tidak terkonyugasi), misalnya pada >C=< dan –C ≡ C -.Kromofor ini merupakan tipe transisi dari sistem yang mengandung elektron πpada orbital molekulnya.Untuk senyawa yang mempunyai system konyugasi, perbedaan energi antara keadaan dasar dan keadaan tereksitasi menjadi lebih kecil sehingga penyerapan terjadi pada panjang gelombang yang lebih besar (Dachriyanus, 2004).

Gugus fungsi seperti –OH, -NH2, dan –Cl yang memberikan transisi n→ π* disebut gugus auksokrom. Gugus ini adalah gugus yang tidak dapat menyerap radiasi ultraviolet-sinar tampak, tetapi apabila gugus ini terikat pada gugus kromofor mengakibatkan pergeseran panjang gelombang ke arah yang lebih besar (efekbatokromik).

Hal-hal yang harus diperhatikan dalam analisis spektrofotometri ultraviolet:

a. Pemilihan panjang gelombang maksimum

Panjang gelombang yang digunakan untuk analisis kuantitatif adalah panjang gelombang dimana terjadi serapan maksimum. Untuk memperolehpanjang gelombang maksimum, dilakukan dengan membuat kurva hubungan antara


(38)

absorbansi dengan panjang gelombang dari suatu larutan baku pada konsentrasi tertentu.Ada beberapa alasan mengapa harus menggunakan panjang gelombang maksimum, yaitu:

• Pada panjang gelombang maksimum, kepekaannya juga maksimum karena pada panjang gelombang maksimum tersebut, perubahan absorbansi untuk setiap satuan konsentrasi adalah yang paling besar.

• Disekitar panjang gelombang maksimal, bentuk kurva absorbansi datar dan pada kondisi tersebut hukum Lambert-Beer akan terpenuhi.

• Jika dilakukan pengukuran ulang maka kesalahan yang terjadi pada pengulangan akan kecil sekali, karena digunakan panjang gelombang maksimum.

b. Pembuatan kurva kalibrasi

Dibuat seri larutan baku dari zat yang akan dianalisis dengan berbagai konsentrasi. Masing-masing absorbansi larutan dengan berbagai konsentrasi diukur, kemudian dibuat kurva yang merupakan hubungan antara absorbansi dengan konsentrasi. Bila hukum Lamber-Beer terpenuhi maka kurva kalibrasi merupakan garis lurus.

c. Pembacaan absorbansi sampel atau cuplikan

Absorbansi yang terbaca pada spektrofotometer hendaknya antara 0,2-0,6. Anjuran ini berdasarkan anggapan bahwa pada kisaran nilai absorbansi tersebut, kesalahan fotometrik yang terjadi adalah paling minimal (Gandjar dan Rohman, 2007)


(39)

Menurut Hukum Lambert, serapan berbanding lurus terhadap ketebalan sel yang disinari. Menurut Hukum Beer, yang hanya berlaku untuk cahaya monokromatik dan larutan yang sangat encer, serapan berbanding lurus dengan konsentrasi (banyak molekul zat). Kedua pernyataan ini dapat dijadikan satu dalam Hukum Lambert-Beer, sehingga diperoleh bahwa serapan berbanding lurus

terhadap konsentrasi dan ketebalan sel, yang dapat ditulis dengan persamaan : A= a.b.c g/liter atau A= ε. b. c mol/liter

Dimana: A = serapan a = absorptivitas b = ketebalan sel c = konsentrasi

ε = absorptivitas molar

Jadi dengan Hukum Lambert-Beer konsentrasi dapat dihitung dari ketebalan sel dan serapan. Absorptivitas merupakan suatu tetapan dan spesifik untuk setiap molekul pada panjang gelombang dan pelarut tertentu.

Menurut Roth dan Blaschke (1981), absorptivitas spesifik juga sering digunakan sebagai ganti absorptivitas. Harga ini, memberikan serapan larutan 1 % (b/v) dengan ketebalan sel 1 cm, sehingga dapat diperoleh persamaan:

A = A11. b. c

Dimana : A11= absorptivitas spesifik (ml g -1cm-1) b = ketebalan sel (cm)

c = konsentrasi senyawa terlarut (g/100ml larutan)


(40)

Spektrofotometri ultraviolet digunakan dalam analisis senyawa organik yaitu:

1. Analisis kualitatif

Secara eksperimental, sangat mudah untuk mengukur banyaknya radiasi yang diserap oleh suatu molekul sebagai fungsi frekuensi radiasi. Suatu grafik yang menghubungkan antara banyaknya sinar yang diserap dengan frekuensi (panjang gelombang) sinar merupakan spektrum absorpsi. Transisi yang terjadi untuk suatu molekul dengan struktur kimia yang berbeda tidaklah sama sehingga spektrum absorpsinya juga berbeda. Dengan demikian, spektrum dapat digunakan sebagai bahan informasi yang bermanfaat untuk analisis kualitatif (Rohman dan Gandjar, 2007).

2. Analisis kuantitatif

Penggunaan utama spektrofotometri ultraviolet adalah dalam analisis kuantitatif. Apabila dalam alur spektrofotometer terdapat senyawa yang mengabsorpsi radiasi, akan terjadi pengurangan kekuatan radiasi yang mencapai detektor. Parameter kekuatan energi radiasi khas yang diabsorpsi oleh molekul adalah absorban (A) yang dalam batas konsentrasi tertentu nilainya sebanding dengan banyaknya molekul yang mengabsorpsi radiasi dan merupakan dasaranalisis kuantitatif. Konsentrasi larutan analit umumnya 10 sampai 20 µg/ml, tetapi untuk senyawa yang nilai absorptivitasnya besar dapat diukur pada konsentrasi yang lebih rendah. Senyawa yang tidak mengabsorpsi radiasi ultraviolet-sinar tampak dapat juga ditentukan dengan spektrofotometri ultraviolet-sinar tampak, apabila ada reaksi kimia yang dapat mengubahnya


(41)

menjadi kromofor atau dapat disambungkan dengan suatu pereaksi kromofor (Satiadarma, 2004).

Analisis kuantitatif secara spektrofotometri ultraviolet dapat dilakukan dengan metode regresi dan pendekatan

1. Metode Regresi

Analsis kuantitatif dengan metode regresi yaitu dengan menggunakan persamaan regresi yang didasarkan pada harga serapan dan konsentrasi standar yang dibuat dalam beberapa konsentrasi, paling sedikit menggunakan 5 rentang konsentrasi yang meningkat yang dapat memberikan serapan yang linier,kemudian diplot menghasilkan suatu kurva yang disebut dengan kurva kalibrasi. Konsentrasi suatu sampel dapat dihitung berdasarkan kurva tersebut. 2. Metode Penekatan

Analisis kuantitatif dengan cara ini dilakukan dengan membandingkan serapan standar yang konsentrasinya diketahui dengan serapan sampel. Konsentrasi sampel dapat dihitung melalui rumus perbandingan

C= Ab AsxCb

dimana As = serapan sampel, Ab = serapan standar, Cb = konsentrasi standar, dan C = konsentrasi sampel (Holme dan Peck, 1983).

2.2.3 Peralatan Spektrofotometri Ultraviolet

Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur transmitans atau serapan suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang. Spektrofotometer merupakan penggabungan dari dua fungsi alat yang terdiri dari spektrometer yang menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan


(42)

fotometer sebagai alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang diabsorpsi (Day dan Underwood, 1999).

Unsur-unsur terpenting suatu spektrofotometer adalah sebagai berikut(Khopkar, 1990):

1. Sumber-sumber lampu; lampu deuterium digunakan untuk daerah UV pada panjang gelombang dari 190-350 nm, sementara lampu halogen kuarsa atau lampu tungsten digunakan untuk daerah visibel pada panjang gelombang antara 350- 900 nm.

2. Monokromotor: digunakan untuk memperoleh sumber sinar yang monokromatis. Alatnya dapat berupa prisma maupun grating. Untuk mengarahkan sinar monokromatis yang diinginkan dari hasil penguraian.

3. Kuvet: Pada pengukuran di daerah tampak, kuvet kaca atau kuvet kaca corex dapat digunakan, tetapi untuk pengukuran pada daerah UV kita harus menggunakan sel kuarsa karena gelas tidak tembus cahaya pada daerah ini. Umumnya tebal kuvet adalah 10 mm, tetapi yang lebih kecil ataupun yang lebih besar dapat digunakan. Sel yang biasa digunakan berbentuk persegi, tetapi bentuk silinder dapat juga digunakan. Kuvet yang tertutup digunakan untuk pelarut organik. Sel yang baik adalah kuarsa atau gelas hasil leburan yang homogen.

4. Detektor: Peranan detector penerima adalah memberikan respon terhadap cahaya pada berbagai panjang gelombang.

5. Suatu amplifier (penguat) dan rangkaian yang berkaitan yang membuat isyarat listrik dapat diamati.


(43)

2.3 Validasi

Validasi adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter tertentu pada prosedur penetapan yang dipakai untuk membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya (Harmita, 2004).Parameter analisis yang ditentukan pada validasi adalah akurasi, presisi, kespesifikan, limit deteksi, limit kuantitasi, kelinieran dan rentang.

Akurasi (kecermatan) adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan hasil analisis dengan kadar analit sebenarnya. Akurasi dinyatakan sebagai persen perolehan kembali (recovery) analit yang ditambahkan dan dapat ditentukan melalui dua cara yaitu metode simulasi (spiked placebo recovery) dan metode penambahan bahan baku (standard addition method). Dalam metode simulasi, sejumlah analit bahan murni (senyawa pembanding kimia) ditambahkan kedalam campuran bahan sediaan farmasi (plasebo), lalu campuran tersebut dianalisis dan hasilnya dibandingkan dengan kadar standar yang ditambahkan (kadar sebenarnya). Dalam metode adisi (penambahan bahan baku), sampel dianalisis lalu sejumlah tertentu analit yang diperiksa ditambahkan kedalam sampel, dicampur dan dianalisis kembali. Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya (hasil yang diharapkan). Dalam kedua metode tersebut, persen perolehan kembali dinyatakan sebagai rasio antara hasil yang diperoleh dengan hasil yang sebenarnya.

% PerolehanKembali = x100% C

B A

Keterangan : A = Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahanbaku B = Konsentrasi sampel sebelum penambahan baku


(44)

Presisi (keseksamaan) adalah derajat kesesuain diantara masing-masing hasil uji, jika prosedur analisis diterapkan berulang kali pada sejumlah cuplikan yang diambil dari satu sampel homogen. Presisi dinyatakan sebagai deviasi standar atau deviasi standar relative (koefisien variasi). Presisi dapat diartikan pula sebagai derajat reprodusibilitas (ketertiruan) atau repeatabilitas (keterulangan).

Batas deteksi adalah nilai parameter, yaitu konsentrasi analit terendah yang dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan dibandingkan dengan blanko. Batas deteksi dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:

Batas deteksi =

Slope xSB

3

Batas kuantitasi adalah jumlah analit terkecil dalam sampel yang masih dapat diukur dalam kondisi percobaan yang sama dan memenuhi kriteria cermat dan seksama.

Batas Kuantitasi =

Slope xSB

10

Kelinieran suatu metode analisis adalah kemampuan untuk menunjukkan bahwa nilai hasil uji langsung atau setelah diolah secara secara matematika, proporsional dengan konsentrasi analit dalam sampel dalam batas rentang konsentrasi tertentu.

Rentang suatu metode analisis adalah interval antara batas konsentrasi tertinggi dan konsentrasi terendah analit yang dapat ditentukan dengan presisi, akurasi dan kelinieran (Satiadarma, 2004; WHO, 1992)


(45)

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Darah tinggi (Hipertensi) kini menjadi masalah global karena prevalensi yang terus meningkat sejalan dengan perubahan gaya hidup seperti merokok, obesitas, inaktivitas fisik, dan stress.Hampir di setiap Negara hipertensi menduduki peringkat pertama sebagai penyakit paling sering dijumpai (Anonim, 2010).

Amlodipin tablet diindikasikan untuk pengobatan hipertensi, dapat digunakan untuk mengontrol tekanan darah pada sebagian besar penderita hipertensi.Penderita hipertensi yang tidak cukup terkontrol jika hanya menggunakan anti hipertensi tunggal akan sangat menguntungkan dengan

pemberian amlodipin yang dikombinasikan dengan diuretik thiazida, inhibitor β -adrenoreseptor, atau inhibitor angiotensin converting enzyme.Amlodipin juga diindikasikan untuk pengobatan iskemia myokardial, baik karena obstruksi fixed

(angina stabil), maupun karena vasokonstriksi (angina varian) dari pembuluh darah koroner. Dalam perdagangan amlodipin tablet terdapat dalam bentuk generik dan nama dagang (Anonim, 2001).

Monorgafi amlodipin dalam sedian tablet tidak terdapat dalam FI edisi IV sedangkan monografi amlodipin dalam bahan baku terdapat dalam United State Pharmacopoeia XXXI, 2009 (USP) dengan penetapan kadar secara KCKT. Menurut metode analisis BPOM no 01/08/02 amlodipin tablet dapatditentukan


(46)

secara spektrofotometri ultraviolet dalam pelarut metanol air dimana serapan maksimum pada panjang gelombang ± 365 nm.

Menurut Moffat, (2004) amlodipin besilat memiliki serapan maksimum panjang gelombang 236nm dalam basa dan dalam larutan asam NH2SO4 239 nm.

Dalam sertifikat pengujian Badan POM RI, amlodipin besilat memiliki panjang gelombang 360nm (

A

11= 119) dalam pelarut metanol.

Berdasarkan hal tersebut diatas peneliti mencoba menggunakan metode spektrofotometri ultraviolet pada penentuan kadar amlodipin dalam tablet metode ini relatif lebih murah dan sederhana dibandingkan dengan metode KCKT.

Untuk menguji validitas dari metode ini dilakukan pengujian antara lain uji akurasi dengan parameter % recovery, uji presisi dengan parameter Standar Deviasi Relatif (RSD), uji sensitifitas dengan parameter limit deteksi (LOD) dan limit kuantitasi (LOQ) (WHO, 1989).

1.2 Perumusan Masalah

a. Apakah amlodipin dalam sediaan tablet dapat ditentukan kadarnya secara spektofotometri ultraviolet dan memenuhi persyaratan uji validasi?

b. Apakah kadar amlodipin besilat dalam tablet generik dan nama dagang memenuhi persyaratan kadar umumnya suatu tablet.

1.3 Hipotesis

Hipotesis dalam penelitian ini adalah:

a. Amlodipin besilat dalam sediaan tablet dapat ditentukan kadarnya secara spektrofotometri ultraviolet dan memenuhi uji validasi metode.

b. Kadar amlodipin besilat dalam sedian tablet generik dan nama dagang memenuhi persyaratan kadar umumnya suatu tablet.


(47)

1.4 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah:

a. Untuk Menentukan tingkat validasi metode spektrofotometri ultravioletpada penetapan kadar amlodipin besilat dalam sediaan tablet. b. Untuk Mengetahui kesesuaian kadar tablet generik dan nama dagang

dengan persyaratan kadar umumya suatu tablet.

1.5 Manfaat Penelitian

Sebagai metode sederhana dalam Industri Farmasi pada penetapan kadar amlodipin besilat dalam tablet.


(48)

Penerapan Metode Spektrofotometri Ultraviolet

Pada Penetapan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sediaan Tablet

Abstrak

Amlodipintermasukantagoniskalsiumgolongandihidropiridin yang berkerja menghambatmasuknya ion kalsiummelaluimembrankedalamotot polos vaskular danototjantung. Tujuan penelitian ini adalah untuk mendapatkan metode alternatif pada penetapan kadar tablet amlodipin yang relatif lebih murah dan mudah dalam pelaksanaannya, namun memberikan hasil dengan akurasi dan presisi yang baik dan sekaligus menentukan kadar tablet amlodipin generik dan nama dagang yang beredar di pasaran.

Metode yang digunakanpadapenelitianiniyaitusecaraspektrofotometri ultraviolet dalam pelarut metanol pada panjang gelombang 364 nm. Metode ini memenuhi persyaratan uji validasi dengan persen perolehan kembali 100,51% danrelatifstandardeviasi (RSD) 3,7975%, batasdeteksi (LOD) 1,5587 µg/ml danbataskuantitasi (LOQ) 5,1957 µg/ml.

Dari hasilpenelitiandiperolehkadartablet amlodipin generik (Hexpharm) sebesar 95,63% ± 1,145% dan tablet namadagang Tensivask® (DexaMedika) sebesar 94,74% ± 2,70%, Normoten® (Soho) sebesar 94,94% ± 1,81%, Lopiten® (Guardian Pharmatama) sebesar 96,54% ± 0,90%.

Hasilpenelitianmenunjukkankadaramlodipindalamsediaan tablet generikdannama dagangmemenuhipersyaratan tablet padaumumnyayaitutidakkurang dari 90,0% dantidaklebih dari 110,0% darijumlah

yang terterapadaetiket.

Kata kunci : Amlodipin, penetapan kadar, spektrofotometri ultraviolet, validasi


(49)

Application of Ultraviolet Spectrophotometry Method on Determination of Amlodipine Besilat in Tablet Preparations

Abstract

Amolodipine is one of antagonis calcium the group of dihidropiridin which inhibit the entry of calcium ions through the membrane into the vascular smooth muscle and cardiac muscle. The purpose of this study to find an alternative method to determination of amlodipine tablets which are relatively cheap and easy in implementation, but it gives results with good accuracy and precision and olso to determine the levels of amlodipine tablet generic and trade names on the market.

The name as the method which is used to the study is ultraviolet of spectrophotometry with solvent of methanol at a wavelength of 364 nm. This method meets the requirements validation test with the recovery percent is 100,51% and deviation standard of relative (RSD) is 3,7975%, detection of limit (LOD) is, 1.5587 g/ml and quantitation of limit (LOQ) is, 5.1957 g/ml.

From the study were obtained the generic rate of amlodipine tablets (Hespharm) equal to 95.63% ± 1.145% and the trade names Tensivask® tablets (Dexa Medika) equal to 94.74% ± 2.70%, Normoten® (Soho) equal to 94.94% ± 1.81%, Lopiten® (Guardian Pharmatama) amounted to 96.54% ± 0.90%.

The study showed that levels of amlodipine in tablet dosage generic and trade name meets the requirements of tablets in the general are not less than 90.0% and not more than 110.0% of the listed amount on the label.

Key words:amlodipine, determination, spectrophotometry ulraviolet, validation methods.


(50)

PENERAPAN METODE SPEKTROFOTOMETRI

ULTRAVIOLET PADA PENETAPAN KADAR

AMLODIPIN BESILAT DALAM SEDIAAN TABLET

SKRIPSI

OLEH:

SURYANI NURJAMAL

NIM 071524074

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN


(51)

PENERAPAN METODE SPEKTROFOTOMETRI

ULTRAVIOLET PADA PENETAPAN KADAR

AMLODIPIN BESILAT DALAM SEDIAN TABLET

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

OLEH:

SURYANI NURJAMAL

NIM 071524074

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN


(52)

PENGESAHAN SKRIPSI

PENERAPAN METODE SPEKTROFOTOMETRI

ULTRAVIOLET PADA PENETAPAN KADAR

AMLODIPIN BESILAT DALAM SEDIAN TABLET

OLEH:

SURYANI NURJAML

NIM 071524074

Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara Pada tanggal :8Agustus 2013

Pembimbing Panitia Penguji,

Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. Prof. Dr. rer. nat E. De Lux Putra, S.U., Apt.

NIP 19521041980031002 NIP 19530619183031001

Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.

Pembimbing II, NIP 195201041980031002

Drs. Syafruddin, MS., Apt. Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt.

NIP 194811111976031003 NIP 195409101983032001

Dra. Nurmadjuzita, M.Si., Apt. NIP 194809041974122001

Medan, Agustus 2015 Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara Dekan,

Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002


(53)

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan nikmat, rahmat, karunia dan ridhoNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul "Penerapan Metode Spektrofotometri Ultraviolet Pada Penetapan Amlodipin Besilat Dalam Sediaan Tablet". Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, Bapak Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Syafruddin, M.S., Apt., yang telah banyak memberikan bimbingan dan bantuan selama penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung, juga kepada Bapak Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., Ibu Dra. Nurmadjuzita, M.Si., Apt., Bapak Drs. Nahitma Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan dalam penyusunan skripsi ini.

Penulis juga tidak lupa mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tulus kepada kedua orang tua, Ayahanda Djamalluddin dan Ibunda Nurasiah Sirait tercinta, adik-adikku tersayang Fajar dan Wale atas doa, dorongan dan pengorbanan baik moril maupun materil dalam penyelesaian skripsi ini. Juga kepada sahabat-sahabatku tersayang David Monandar, Astri, Andre, Agnes, Nasril, Desi, Faula, Ratna, Suci, Iyum dkk yang selalu ada memberi semangat dan pikiran selama penelitian dan penyusunan skripsi ini. Tidak lupa penulis ingin


(54)

mengucapkan terima kasih kepada teman-teman stambuk 2007 yang tidak dapat disebutkan namanya satu persatu, atas segala dorongan, motivasi dan bantuannya kepada penulis sehingga skripsi ini dapat selesai.

Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan terima kasih.

Medan, Agustus2015 Penulis,

Suryani Nurjamal NIM 071524074


(55)

Penerapan Metode Spektrofotometri Ultraviolet

Pada Penetapan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sediaan Tablet

Abstrak

Amlodipintermasukantagoniskalsiumgolongandihidropiridin yang berkerja menghambatmasuknya ion kalsiummelaluimembrankedalamotot polos vaskular danototjantung. Tujuan penelitian ini adalah untuk mendapatkan metode alternatif pada penetapan kadar tablet amlodipin yang relatif lebih murah dan mudah dalam pelaksanaannya, namun memberikan hasil dengan akurasi dan presisi yang baik dan sekaligus menentukan kadar tablet amlodipin generik dan nama dagang yang beredar di pasaran.

Metode yang digunakanpadapenelitianiniyaitusecaraspektrofotometri ultraviolet dalam pelarut metanol pada panjang gelombang 364 nm. Metode ini memenuhi persyaratan uji validasi dengan persen perolehan kembali 100,51% danrelatifstandardeviasi (RSD) 3,7975%, batasdeteksi (LOD) 1,5587 µg/ml danbataskuantitasi (LOQ) 5,1957 µg/ml.

Dari hasilpenelitiandiperolehkadartablet amlodipin generik (Hexpharm) sebesar 95,63% ± 1,145% dan tablet namadagang Tensivask® (DexaMedika) sebesar 94,74% ± 2,70%, Normoten® (Soho) sebesar 94,94% ± 1,81%, Lopiten® (Guardian Pharmatama) sebesar 96,54% ± 0,90%.

Hasilpenelitianmenunjukkankadaramlodipindalamsediaan tablet generikdannama dagangmemenuhipersyaratan tablet padaumumnyayaitutidakkurang dari 90,0% dantidaklebih dari 110,0% darijumlah

yang terterapadaetiket.

Kata kunci : Amlodipin, penetapan kadar, spektrofotometri ultraviolet, validasi


(56)

Application of Ultraviolet Spectrophotometry Method on Determination of Amlodipine Besilat in Tablet Preparations

Abstract

Amolodipine is one of antagonis calcium the group of dihidropiridin which inhibit the entry of calcium ions through the membrane into the vascular smooth muscle and cardiac muscle. The purpose of this study to find an alternative method to determination of amlodipine tablets which are relatively cheap and easy in implementation, but it gives results with good accuracy and precision and olso to determine the levels of amlodipine tablet generic and trade names on the market.

The name as the method which is used to the study is ultraviolet of spectrophotometry with solvent of methanol at a wavelength of 364 nm. This method meets the requirements validation test with the recovery percent is 100,51% and deviation standard of relative (RSD) is 3,7975%, detection of limit (LOD) is, 1.5587 g/ml and quantitation of limit (LOQ) is, 5.1957 g/ml.

From the study were obtained the generic rate of amlodipine tablets (Hespharm) equal to 95.63% ± 1.145% and the trade names Tensivask® tablets (Dexa Medika) equal to 94.74% ± 2.70%, Normoten® (Soho) equal to 94.94% ± 1.81%, Lopiten® (Guardian Pharmatama) amounted to 96.54% ± 0.90%.

The study showed that levels of amlodipine in tablet dosage generic and trade name meets the requirements of tablets in the general are not less than 90.0% and not more than 110.0% of the listed amount on the label.

Key words:amlodipine, determination, spectrophotometry ulraviolet, validation methods.


(57)

DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ... i

PENGESAHAN SKRIPSI ... iii

KATA PENGANTAR ... iv

ABSTRAK ... vi

ABSTRACT ... vii

DAFTAR ISI ... viii

DAFTAR TABEL ... xii

DAFTAR GAMBAR ... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiv

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Perumusan Masalah ... 2

1.3 Hipotesis ... 2

1.4 Tujuan Penelitian ... 3

BAB IITINJAUAN PUSTAKA 2.1 Uraian Sifat ... 4

2.1.1 Sifat Fisika Kimia ... 4

2.1.2 Farmakologi ... 5

2.1.3 Efek Samping ... 6

2.1.4 Dosis ... 6

2.2 Spektrofotometri Ultraviolet ... 7


(58)

2.2.2 Penggunanan Spektrofotometri Ultraviolet ... 10

2.2.3 Peralatan Untuk Spektrofotometri Ultraviolet ... 12

2.3 Validasi ... 13

BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Alat–Alat ... 16

3.2 Bahan-Bahan ... 16

3.3 Pengambilan Sampel ... 16

3.4 Prosedur Penelitian ... 17

3.4.1 Pembuatan Larutan Induk Amlodipin Besilat BPFI .. 17

3.4.2 Penetapan Panjang Gelombang Serapan Maksimum 17

3.4.4 Uji Validasi Dengan Parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ... 18

3.4.4.1 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali (%Recovery) ... 18

3.4.4.2 Uji Presisi ... ... 18

3.4.4.3 Penentuaan Batas Deteksi (LOD)dan Batas Kuantitasi (LOQ) ... 19

3.4.5 Penetuan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sedian Tablet ... 19

3.4.5 Analisis Data Secara Stastistik ... 20

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum Amlodipin Besilat BPFI ... 21

4.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi ... 22

4.3 Uji Validasi Metode Spektrofotometri Ultraviolet ... 23

4.4 Penentuaan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sediaan Tablet ... 25


(59)

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 26 5.1 Kesimpulan ... 26 5.2 Saran ... 26

DAFTAR PUSTAKA


(60)

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1.Data Absorbansi dari Kurva Serapan Maksimum ... 22

Tabel 2. Data Kurva Kalibrasi dari Amlodipin Besilat BPFI ... 22

Tabel 3. Data Hasil Pengujian Perolehan Kembali Dari Tablet

Amlodipin Besilat Dengan Metode Penambahan Baku ... 24

Tabel 4. Persentase Kadar rata-rata dan Kadar Sebenarnya Amlodipin


(61)

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Kurva Serapan Amlodipin Besilat BPFI ... 21


(62)

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Perhitungan Persamaan Regresi Amlodipin Besilat ... 30

Lampiran 2. Data Kadar Amlodipin Besilat Dalam Sediaan Tablet .. 31

Lampiran 3. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Pada Tablet Generik (Hexpharm Jaya) ... 32

Lampiran 4. Perhitungan Stasistik Kadar Amlodipin Besilat Pada Tablet Tensivask® (Dexa Medika) ... 35

Lampiran 5. Perhitungan Stasistik Kadar Amlodipin Besilat Pada Tablet Normoten® (Soho) ... 37

Lampiran 6. Perhitungan Stasistik Kadar Amlodipin Besilat Pada

Tablet Lopiten® (Guardian Pharmatama) ... 40

Lampiran 7. Perhitungan Konsentrasi Pengukuran Sampel ... 43

Lampiran 8. Perhitungan Penimbangan Sampel dari tablet Lopiten® (Guardian Pharmatama) ... 44

Lampiran 9. Contoh Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan batas

Kuantitasi (LOQ) ... 45

Lampiran 10. Nilai Distribusi t ... 46

Lampiran 11. Sertifikat Bahan Baku POM ... 47

Lampiran 12. Sertikitat Bahan Baku Amlodipin Besilat dari

PT.Indofarma ... 48


(1)

DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ... i

PENGESAHAN SKRIPSI ... iii

KATA PENGANTAR ... iv

ABSTRAK ... vi

ABSTRACT ... vii

DAFTAR ISI ... viii

DAFTAR TABEL ... xii

DAFTAR GAMBAR ... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiv

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Perumusan Masalah ... 2

1.3 Hipotesis ... 2

1.4 Tujuan Penelitian ... 3

BAB IITINJAUAN PUSTAKA 2.1 Uraian Sifat ... 4

2.1.1 Sifat Fisika Kimia ... 4

2.1.2 Farmakologi ... 5

2.1.3 Efek Samping ... 6

2.1.4 Dosis ... 6

2.2 Spektrofotometri Ultraviolet ... 7


(2)

2.2.2 Penggunanan Spektrofotometri Ultraviolet ... 10

2.2.3 Peralatan Untuk Spektrofotometri Ultraviolet ... 12

2.3 Validasi ... 13

BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Alat–Alat ... 16

3.2 Bahan-Bahan ... 16

3.3 Pengambilan Sampel ... 16

3.4 Prosedur Penelitian ... 17

3.4.1 Pembuatan Larutan Induk Amlodipin Besilat BPFI .. 17

3.4.2 Penetapan Panjang Gelombang Serapan Maksimum 17

3.4.4 Uji Validasi Dengan Parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ... 18

3.4.4.1 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali (%Recovery) ... 18

3.4.4.2 Uji Presisi ... ... 18

3.4.4.3 Penentuaan Batas Deteksi (LOD)dan Batas Kuantitasi (LOQ) ... 19

3.4.5 Penetuan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sedian Tablet ... 19

3.4.5 Analisis Data Secara Stastistik ... 20

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum Amlodipin Besilat BPFI ... 21

4.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi ... 22

4.3 Uji Validasi Metode Spektrofotometri Ultraviolet ... 23

4.4 Penentuaan Kadar Amlodipin Besilat dalam Sediaan Tablet ... 25


(3)

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 26 5.1 Kesimpulan ... 26 5.2 Saran ... 26

DAFTAR PUSTAKA


(4)

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1.Data Absorbansi dari Kurva Serapan Maksimum ... 22

Tabel 2. Data Kurva Kalibrasi dari Amlodipin Besilat BPFI ... 22

Tabel 3. Data Hasil Pengujian Perolehan Kembali Dari Tablet

Amlodipin Besilat Dengan Metode Penambahan Baku ... 24

Tabel 4. Persentase Kadar rata-rata dan Kadar Sebenarnya Amlodipin


(5)

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Kurva Serapan Amlodipin Besilat BPFI ... 21


(6)

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Perhitungan Persamaan Regresi Amlodipin Besilat ... 30

Lampiran 2. Data Kadar Amlodipin Besilat Dalam Sediaan Tablet .. 31

Lampiran 3. Perhitungan Statistik Kadar Amlodipin Besilat Pada Tablet Generik (Hexpharm Jaya) ... 32

Lampiran 4. Perhitungan Stasistik Kadar Amlodipin Besilat Pada Tablet Tensivask® (Dexa Medika) ... 35

Lampiran 5. Perhitungan Stasistik Kadar Amlodipin Besilat Pada Tablet Normoten® (Soho) ... 37

Lampiran 6. Perhitungan Stasistik Kadar Amlodipin Besilat Pada

Tablet Lopiten® (Guardian Pharmatama) ... 40

Lampiran 7. Perhitungan Konsentrasi Pengukuran Sampel ... 43

Lampiran 8. Perhitungan Penimbangan Sampel dari tablet Lopiten® (Guardian Pharmatama) ... 44

Lampiran 9. Contoh Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan batas

Kuantitasi (LOQ) ... 45

Lampiran 10. Nilai Distribusi t ... 46

Lampiran 11. Sertifikat Bahan Baku POM ... 47

Lampiran 12. Sertikitat Bahan Baku Amlodipin Besilat dari

PT.Indofarma ... 48